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第十五届中国科协年会

作者：万晓莉曾奎张丹陈舒刘杰陆远富遵义医学院药理学教研室/贵州省基础药理重点实验室贵州遵义 563000 黔南民族医学高等专科学校贵州都匀 558000 遵义医学院药理学教研室/贵州省基础药理重点实验室贵州遵义 563000

目的：观察齐墩果酸(oleanolic acid,OA)所致小鼠胆汁淤积性肝损伤,并探讨其肝毒性的可能机制.方法：雄性昆明小鼠,随机分为溶媒对照组,OA225mg/kg组,450mg/kg组,900mg/kg组,1350mg/kg组,给药组采用灌胃给药,溶媒对照组采用玉米油等体... 详细信息

目的：观察齐墩果酸(oleanolic acid,OA)所致小鼠胆汁淤积性肝损伤,并探讨其肝毒性的可能机制.方法：雄性昆明小鼠,随机分为溶媒对照组,OA225mg/kg组,450mg/kg组,900mg/kg组,1350mg/kg组,给药组采用灌胃给药,溶媒对照组采用玉米油等体积灌胃,1次/d,连续10天,末次给药24h后收集小鼠血和肝脏组织,计算小鼠肝脏系数,分别检测血清ALT(谷丙转氨酶),AST(谷草转氨酶),TBIL(总胆红素)和DBIL(直接胆红素);观察肝脏病理组织学变化;并应用实时定量RT-PCR检测胆汁淤积性肝损伤相关基因的表达水平.结果：OA450,900,1350mg/kg组小鼠体重下降趋势明显;并使小鼠肝脏指数上升;高剂量组(OA 900、1350 mg/kg)ALT,AST,TBIL,DBIL升高(成剂量依耐性);病理检查发现,高剂量组小鼠肝细胞出现明显水肿,凋亡,坏死和羽毛样变性(胆汁淤积性肝损伤);此外高剂量组小鼠肝脏Cyp7a1,Ntcp,Oatp1b2,Bsep mRNA表达均减少.结论：大剂量口服OA可致胆汁淤积性肝损伤,可能与影响胆汁酸的生成与转运有关.

关键词：齐墩果酸肝毒性胆汁淤积动物实验

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吴茱萸生物碱类抑制大鼠心肌细胞肥大作用的比较

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华西药学杂志 2017年第1期32卷 31-33页

作者：林淑娴李利生张婧怡侯化化吴芹孙安盛遵义医学院药理学教研室贵州省基础药理重点实验室贵州遵义563099 贵州省肿瘤医院药剂科贵州贵阳550001

目的比较吴茱萸碱(Evo)、吴茱萸次碱(Rut)和吴茱萸总碱(Eta)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠心肌细胞肥大的抑制作用。方法将培养3 d后的新生SD大鼠原代心肌细胞随机均分为对照组、模型组、Evo组、Rut组和Eta组;采用Image-Pro Plus 6.0... 详细信息

目的比较吴茱萸碱(Evo)、吴茱萸次碱(Rut)和吴茱萸总碱(Eta)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠心肌细胞肥大的抑制作用。方法将培养3 d后的新生SD大鼠原代心肌细胞随机均分为对照组、模型组、Evo组、Rut组和Eta组;采用Image-Pro Plus 6.0图像分析系统测量单个心肌细胞的表面积,BCA法测定细胞的蛋白含量,实时荧光定量PCR检测心肌细胞肥大的标志性基因心房利钠因子(ANF)的表达。结果 AngⅡ能明显增加心肌细胞的表面积、细胞蛋白的含量和ANF的表达;Evo、Rut和Eta能明显抑制AngⅡ诱导的心肌细胞表面积的增加、细胞蛋白质含量的增多和ANF mRNA的表达,且抑制作用呈量效关系;但相同浓度的抑制效应无明显差别。结论 Evo、Rut和Eta可明显抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大,但抑制效应无明显差异。

关键词：吴茱萸碱吴茱萸次碱吴茱萸总碱心肌细胞肥大血管紧张素Ⅱ 心房利钠因子

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金钗石斛总生物碱提取及含量测定方法的改进

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遵义医学院学报 2015年第5期38卷 532-535页

作者：赵福坤吴芹陆远富杨文进姚晓东张茂生石京山遵义医学院药理学教研室暨基础药理省部共建教育部重点实验室贵州遵义563099 遵义医学院药学院药物化学教研室贵州遵义563099

目的提取较高纯度的金钗石斛总生物碱,并简单、准确地测定总生物碱含量。方法金钗石斛药材以90%乙醇10倍量浸泡12 h,然后加热煮沸2 h,连续3次。醇提液减压浓缩至无醇味后以5%盐酸溶解,抽滤,酸水溶液经石油醚萃取3次,脱脂,浓氨水碱化至p ... 详细信息

目的提取较高纯度的金钗石斛总生物碱,并简单、准确地测定总生物碱含量。方法金钗石斛药材以90%乙醇10倍量浸泡12 h,然后加热煮沸2 h,连续3次。醇提液减压浓缩至无醇味后以5%盐酸溶解,抽滤,酸水溶液经石油醚萃取3次,脱脂,浓氨水碱化至p H=10,碱水液经三氯甲烷萃取2次,回收溶剂,即得生物碱粗提物。然后用氯仿-甲醇溶液(1∶1,v/v)溶解,过LH-20凝胶柱,回收溶剂,冷冻干燥,得石斛生物碱提取物。分别采用气相色谱法和酸性染料比色法测定提取物中石斛碱以及总生物碱的含量,以石斛碱(C16H25NO2)为基准物计算金钗石斛中总生物碱的含量。结果提取5kg药材,得提取物干膏22.5 g,气相色谱法测得石斛碱含量为61.6%,酸性染料比色法测得总生物碱含量为73.2%。结论LH-20凝胶柱可去除总生物碱粗提物中大量杂质,且改进后的酸性染料比色法较传统的方法更简单、准确性更高,此研究为后期的药效研究奠定了基础。

关键词：金钗石斛石斛碱生物碱酸性染料比色法气相色谱法

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牡丹皮饮片水提取浸膏对大鼠高脂性脂肪肝的干预作用

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中华中医药学刊 2011年第4期29卷 896-898页

作者：李向阳龚其海吴芹张环英李志毅商丘医学高等专科学校药理学教研室河南商丘476005 遵义医学院药理学教研室贵州省基础药理学重点实验室贵州遵义563003

目的:观察牡丹皮饮片水提取浸膏(CMPAE)对大鼠高脂性脂肪肝的药效学影响。方法:建立大鼠高脂性脂肪肝模型,同时采用灌胃给药,观察CMPAE对其血清脂质、肝功能、肝脏脂质以及氧化、抗氧化损伤指标的变化,并对肝脏组织进行病理学检查。结果... 详细信息

目的:观察牡丹皮饮片水提取浸膏(CMPAE)对大鼠高脂性脂肪肝的药效学影响。方法:建立大鼠高脂性脂肪肝模型,同时采用灌胃给药,观察CMPAE对其血清脂质、肝功能、肝脏脂质以及氧化、抗氧化损伤指标的变化,并对肝脏组织进行病理学检查。结果:含生药量***-1、***-1和***-1的CMPAE可明显降低高脂性脂肪肝大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;同时观察到高脂性脂肪肝大鼠肝脏组织中TC、TG水平和丙二醛(MDA)含量明显下降,而超氧化物歧化酶(SOD)活性显著增高;肝脏组织病理学改变也在一定程度上得到了减轻。结论:CMPAE可明显抑制大鼠高脂性脂肪肝的形成,其作用机制可能与调节脂质代谢,抗氧化损伤有关。

关键词：牡丹皮高脂性脂肪肝大鼠

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小柴胡汤对肝纤维化大鼠肝脏CYP2E1表达的影响

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遵义医学院学报 2014年第4期37卷 393-396页

作者：李晋徐尚福张晓洁白国辉罗果遵义医学院医学与生物学研究中心贵州遵义563099 遵义医学院基础药理省部共建教育部重点实验室暨药理学教研室贵州遵义563099

目的观察小柴胡汤对肝纤维化大鼠肝组织细胞色素P450 2E1(cytochrome P450 2E1,CYP2E1)表达的影响。方法皮下注射10%CCl45 mL/kg,2次/周,连续14周,制备肝纤维化模型。实验分为空白对照组,模型组,小柴胡汤低剂量组(1g/kg)、中剂量组(2g/... 详细信息

目的观察小柴胡汤对肝纤维化大鼠肝组织细胞色素P450 2E1(cytochrome P450 2E1,CYP2E1)表达的影响。方法皮下注射10%CCl45 mL/kg,2次/周,连续14周,制备肝纤维化模型。实验分为空白对照组,模型组,小柴胡汤低剂量组(1g/kg)、中剂量组(2g/kg)、高剂量组(4g/kg),小柴胡汤从制模第9周开始灌胃给药。第14周末,形态学行HE染色观察小柴胡汤对肝纤维化程度的影响;免疫组化观察CYP2E1蛋白表达水平;Real-time RT-PCR检测肝纤维化大鼠肝脏CYP2E1 mRNA的表达。结果与模型组相比,小柴胡汤各剂量组肝纤维化病理改变均有不同程度的恢复;与空白对照组比较,模型组肝组织CYP2E1蛋白及mRNA表达明显升高(P<0.05);小柴胡汤各剂量组较模型组在一定程度下调CYP2E1蛋白及mRNA的表达。结论小柴胡汤可治疗CCl4引起的大鼠肝纤维化并下调肝组织CYP2E1的表达。

关键词：肝纤维化小柴胡汤 CYP2E1

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硫化氢对侧脑室注射脂多糖所致大鼠大脑tau蛋白磷酸化的影响

硫化氢对侧脑室注射脂多糖所致大鼠大脑tau蛋白磷酸化的影响

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2015全国老年痴呆与认知障碍相关疾病学术大会

作者：李菲刘慧宇邓媛媛刘波石京山龚其海药理学教研室暨基础药理省部共建教育部重点实验室遵义医学院遵义贵州563000

目的：观察硫氢化钠(一种外源性硫化氢供体)对大鼠大脑皮层及海马组织tau蛋白高度磷酸化的影响。方法：雄性SD大鼠250-300 9,随机分为假手术组(Sham)、假手术给药组(NaHS+Sham)、模型组(LPS)及模型给药组(NaHS+LPS)。给药组大鼠腹腔注射...

目的：观察硫氢化钠(一种外源性硫化氢供体)对大鼠大脑皮层及海马组织tau蛋白高度磷酸化的影响。方法：雄性SD大鼠250-300 9,随机分为假手术组(Sham)、假手术给药组(NaHS+Sham)、模型组(LPS)及模型给药组(NaHS+LPS)。给药组大鼠腹腔注射NaHS(5 mg/kg)连续3天,末次给药后,模型组大鼠右侧侧脑室注射脂多糖(LPS) 50 μg,假手术注射无菌生理盐水。侧脑室注射2h后,各组大鼠麻醉,取脑,行HE、免疫组化及Western blot等检测,观察大脑皮层及海马组织神经元变性和tau蛋白磷酸化水平。

关键词：

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淫羊藿苷对大鼠肝药物代谢Ⅱ相酶和药物转运体的影响

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遵义医学院学报 2012年第1期35卷 13-16页

作者：李利生刘娟王安斌陈澜陆远富刘杰石京山贵州省基础药理重点实验室暨遵义医学院药理教研室贵州遵义563000 遵义医学院附属医院临床医学研究所贵州遵义563000

目的揭示淫羊藿苷(icariin,ICA)对大鼠药物代谢Ⅱ相酶和药物转运体的影响,并比较月龄差异。方法6月龄和18月龄SD雄性大鼠随机分为6月龄大鼠生理盐水组(6NS)和ICA组(6ICA),18月龄大鼠生理盐水组(18NS)和ICA组(18ICA),每组8只,灌胃ICA(60 ... 详细信息

目的揭示淫羊藿苷(icariin,ICA)对大鼠药物代谢Ⅱ相酶和药物转运体的影响,并比较月龄差异。方法6月龄和18月龄SD雄性大鼠随机分为6月龄大鼠生理盐水组(6NS)和ICA组(6ICA),18月龄大鼠生理盐水组(18NS)和ICA组(18ICA),每组8只,灌胃ICA(60 ***-1)4 w后取肝脏,钙沉淀法提取肝微粒体,BCA法测定微粒体蛋白浓度。比色法测定谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferase,GSTs)活性;紫外分光光度法测定尿苷-5'-二磷酸葡醛酰转移酶(uridine 5'-diphosphate glucuronosyl transferase,UGTs)活性;ELISA法测定有机阴离子转运多肽2(organic anion transporting polypeptide 2,Oatp2)和有机阴离子转运体2(organic anion transporter2,OAT2)含量;Real-Time RT-PCR检测UGT1A6、UGT2B7、GST-π、OAT2和Oatp2 mRNA表达。结果 ICA(***-1)明显增加Oatp2和OAT2含量,上调OAT2和Oatp2 mRNA的表达,但未见明显月龄差异;对GSTs和UGTs活性以及UGT1A6、UGT2B7、GST-πmRNA的表达未见明显影响。结论 ICA对大鼠肝组织OAT2和Oatp2具有诱导作用,该作用未见明显月龄差异,对GSTs和UGTs无明显影响。

关键词：淫羊藿苷谷胱甘肽-S-转移酶尿苷-5'-二磷酸葡醛酰转移酶机阴离子转运多肽有机阴离子转运体

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重组人PPARα基因载体phPPARα-IRES2-EGFP高效体外转染表达体系的建立

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中国现代医学杂志 2007年第17期17卷 2073-2077页

作者：章涛万敬员刘颖菊杨俊卿周元国周岐新重庆医科大学药理学教研室遵义医学院贵州省细胞工程重点实验室贵州遵义563003 第三军医大学创伤烧伤与复合伤国家重点实验室

目的建立体外phPPARα-IRES2-EGFP质粒高效转染并获得重组基因hPPARα高效表达的体系。方法采用阳离子脂质体Lipofectamine 2000将phPPARα-IRES2-EGFP转染入293细胞,荧光显微镜观察质粒转染的293细胞绿色荧光蛋白(GFP)报告基因表达强... 详细信息

目的建立体外phPPARα-IRES2-EGFP质粒高效转染并获得重组基因hPPARα高效表达的体系。方法采用阳离子脂质体Lipofectamine 2000将phPPARα-IRES2-EGFP转染入293细胞,荧光显微镜观察质粒转染的293细胞绿色荧光蛋白(GFP)报告基因表达强度及转染效率,并对转染细胞hPPARα的表达进行荧光定量PCR和Western Blot检测。结果荧光显微镜下可见转染phPPARα-IRES2-EGFP的293细胞GFP报告基因高表达,转染效率高达(83±9)%;并且,其hPPARαmRNA表达水平高于空载体转染对照组3个数量级,hPPARα蛋白表达也远高于对照组(P<0.01),说明导入的重组质粒能够高效表达hPPARα。结论成功建立重组质粒phPPARα-IRES2-EGFP高效体外转染表达体系,为hPPARα受体功能的研究及基于hPPARα为靶标的药物筛选平台的建立奠定了基础。

关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体转染真核表达 293细胞

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小鼠肝药酶Cyp1a基因表达的昼夜节律变化

小鼠肝药酶Cyp1a基因表达的昼夜节律变化

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第十五届中国科协年会第21分会场：中药与天然药物现代研究学术研讨会

作者：金涛张丹徐懿乔徐尚福刘杰陆远富遵义医学院药理学教研室及贵州省基础药理重点实验室 University of Kansas Medical Center

目的探究昆明种小鼠肝药酶Cyp1a的昼夜节律、性别差异以及对肝毒物毒性变化的影响。方法昆明小鼠在环境控制的SPF饲养室内适应性饲养两周后,于06:00、10:00、14:00、18:00、22:00、02:00处死取肝脏,用real-timeRT-PCR方法检测24h内时钟... 详细信息

目的探究昆明种小鼠肝药酶Cyp1a的昼夜节律、性别差异以及对肝毒物毒性变化的影响。方法昆明小鼠在环境控制的SPF饲养室内适应性饲养两周后,于06:00、10:00、14:00、18:00、22:00、02:00处死取肝脏,用real-timeRT-PCR方法检测24h内时钟基因Rev-erb、Per1、Per2和两种肝药酶基因Cyp1a1、Cyp1a2及其调控核受体基因AhR的表达及其意义。结果肝药酶基因Cyp1a1、Cyp1a2及其调节基因AhR在18:00左右表达最高,且雌鼠的表达高于雄鼠,在6:00左右表达最低,表达峰谷差为4-7倍,其节律变化的差异与Rev-erb、Per1、Per2的节律差异大致相符。与此节律相对应,扑热息痛引起的肝毒性在18:00给药高于6:00给药。结论昆明种小鼠肝药酶Cyp1a基因表达存在昼夜节律及性别差异,该差异可影响肝毒物如扑热息痛的代谢和毒性。

关键词：昆明小鼠 Cyp1a 时辰变化性别差异扑热息痛肝毒性

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昆明种小鼠细胞色素氧化酶CYP1A基因表达的昼夜节律变化

昆明种小鼠细胞色素氧化酶CYP1A基因表达的昼夜节律变化

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作者：金涛张丹徐懿乔徐尚福刘杰陆远富 University of Kansas Medical Center 遵义医学院药理学教研室及贵州省基础药理重点实验室

目的探究昆明种小鼠细胞色素氧化酶1A1(CYP1A1)的昼夜节律、性别差异以及对肝毒物毒性变化的影响。方法昆明小鼠在环境控制的SPF饲养室内适应性饲养2周后,于06:00,10:00,14:00,18:00,22:00和次日02:00处死取肝,用逆转录PCR方法检测24 h... 详细信息

目的探究昆明种小鼠细胞色素氧化酶1A1(CYP1A1)的昼夜节律、性别差异以及对肝毒物毒性变化的影响。方法昆明小鼠在环境控制的SPF饲养室内适应性饲养2周后,于06:00,10:00,14:00,18:00,22:00和次日02:00处死取肝,用逆转录PCR方法检测24 h内核激素孤儿受体α(Rev-erbα),时钟基因(Per)1,Per2和CYP1A1,CYP1A2及其调控核受体基因AhR的表达。另取小鼠于6:00和18:00 ip给予对乙酰氨基酚500 mg·kg~(-1),12 h后检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)活性。结果细胞色素氧化酶基因CYP1A1,CYP1A2及其调节基因AhR在18:00左右表达最高,且雌鼠的表达高于雄鼠,在6:00左右表达最低,表达峰谷差为4～7倍,其节律变化的差异与Rev-erbα,Per1,Per2的节律差异大致相符。与此节律相对应,对乙酰氨基酚引起的肝毒性在18:00给药高于6:00给药。结论昆明种小鼠细胞色素氧化酶CYP1A1基因表达存在昼夜节律及性别差异,该差异可影响肝毒物如对乙酰氨基酚的代谢和毒性。

关键词：细胞色素P450 CYP1A1 昼夜节律性别特性基因表达

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