检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2007年第6期23卷 495-497页

作者：刘佳梅陈东孟晓婷吉林大学基础医学院组织学与胚胎学教研室吉林长春130021 广东医学院组织学与胚胎学教研室广东东莞523808

目的:构建大鼠Islet-1基因逆转录病毒表达载体,利用此载体将Islet-1基因转导入神经干细胞(NSC)内。方法:利用RT-PCR技术钓取大鼠Islet-1基因,将其插入到逆转录病毒载体plEGFP-C1中,利用包装细胞PA317将Islet-1基因转导入NSC内,观察Isle... 详细信息

目的:构建大鼠Islet-1基因逆转录病毒表达载体,利用此载体将Islet-1基因转导入神经干细胞(NSC)内。方法:利用RT-PCR技术钓取大鼠Islet-1基因,将其插入到逆转录病毒载体plEGFP-C1中,利用包装细胞PA317将Islet-1基因转导入NSC内,观察Islet-1基因在NSC内的表达。结果:经PCR、酶切及荧光检测等证实,成功构建了plEGFP-C1-Islet-1表达载体,并应用免疫组化技术证明Islet-1在NSC内有表达。在实验中首次发现了Islet-1基因的变异体。结论:重组Islet-1基因逆转录病毒载体的构建为进一步探讨Islet-1基因是否参与NSC向运动神经元分化及其可能的作用机制奠定了坚实的实验基础。

关键词： Islet-1基因克隆重组逆转录病毒载体变异体

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人早期胚中CD20阳性细胞的免疫组织化学定位

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解剖学报 2007年第2期38卷 238-240页

作者：刘影唐军民唐岩常昕莹李枫北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室北京100083

目的探索CD20阳性细胞在人早期胚中的分布及意义。方法用免疫组织化学SP法对10例6—7周人早期胚内CD20阳性细胞进行定位观察。结果 ***20阳性细胞局限于人早期胚肝内；2．在人胚肝内，CD20阳性颗粒主要局限于B细胞的细胞核内，呈不均... 详细信息

目的探索CD20阳性细胞在人早期胚中的分布及意义。方法用免疫组织化学SP法对10例6—7周人早期胚内CD20阳性细胞进行定位观察。结果 ***20阳性细胞局限于人早期胚肝内；2．在人胚肝内，CD20阳性颗粒主要局限于B细胞的细胞核内，呈不均质的颗粒状分布，细胞质和细胞膜呈阴性反应。结论在人早期胚内，CD20定位于肝内的B细胞，并分布在细胞核内；该研究结果为深入探讨CD20阳性细胞的功能和作用机制提供了重要线索。

关键词： CD20 B细胞免疫组织化学人早期胚

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人肝癌细胞RNA电转染至未成熟树突状细胞的扫描电镜观察

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解剖学报 2007年第3期38卷 334-338页

作者：战军唐军民唐岩北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室北京100083

目的观察电转染人肝癌细胞RNA前后未成熟树突状细胞(imDCs)的表面形态学变化。方法取人外周血,纯化获取单核细胞后诱导其成为imDCs,然后通过电转染方法将人肝癌细胞RNA导入其内;用7种特异性抗体的免疫细胞化学技术对电转染前后的树突状... 详细信息

目的观察电转染人肝癌细胞RNA前后未成熟树突状细胞(imDCs)的表面形态学变化。方法取人外周血,纯化获取单核细胞后诱导其成为imDCs,然后通过电转染方法将人肝癌细胞RNA导入其内;用7种特异性抗体的免疫细胞化学技术对电转染前后的树突状细胞鉴定后,进行扫描电镜观察。结果电转染人肝癌细胞RNA后imDCs内TERT表达显著增加,其他分子表达无显著改变。电转染前,imDCs多呈圆形、椭圆形或不规则形,体积较单核细胞大,但大小不均,在细胞表面可见长短不一的微绒毛,或/和许多泡状、面纱状或云朵状细胞突起;电转染后,可在imDCs表面见到由于电转染所造成的孔,并有一定数量的细胞融合和细胞死亡,但绝大多数细胞可恢复至正常结构状态。结论电转染打孔可为外源物质(如肝癌细胞RNA或其他肿瘤细胞RNA)导入细胞内提供可行性,并为进一步利用imDCs制作肿瘤疫苗,开展肿瘤的生物治疗提供一种可行方案。

关键词：电转染肝癌细胞RNA 未成熟树突状细胞扫描电镜人

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小鼠长髓襻肾单位在髓质的分布

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解剖学报 2012年第2期43卷 250-252页

作者：张萍温昱刘宁宇梁非任昊翟效月辽宁医学院组织学胚胎学教研室辽宁锦州121001 中国医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室沈阳110001

目的肾髓质渗透梯度的形成与髓襻走行及转运功能关系密切,本研究拟建立长髓袢肾单位在髓质的走行规律。方法 C57BL6/J小鼠3只,灌流固定后取肾组织块,树脂812包埋,垂直肾长轴连续半薄切片,从肾被膜到内髓,共得到2 000张2.5μm厚的连续切... 详细信息

目的肾髓质渗透梯度的形成与髓襻走行及转运功能关系密切,本研究拟建立长髓袢肾单位在髓质的走行规律。方法 C57BL6/J小鼠3只,灌流固定后取肾组织块,树脂812包埋,垂直肾长轴连续半薄切片,从肾被膜到内髓,共得到2 000张2.5μm厚的连续切片,显微镜下获取数字图像,计算机配准,C语言编程,进而追踪26条长髓襻肾单位。结果长髓襻肾单位来自中层和近髓质区的皮质,其髓襻襻曲分布在内髓不同水平,最深的可达肾乳头。通过数字追踪发现,在外髓内带外侧区,髓襻降支细段起始部高度盘曲走行,其盘曲部分的长度是其直线距离的2倍。在盘曲走行中,与同源的髓襻升支粗段间隔排列。最长的长髓襻升支粗段走行在外髓内带的血管丛。在外髓内带的内侧区,髓襻降支细段与髓襻升支粗段紧密相邻,直行进入内髓。结论降支细段在外髓内带高度盘曲走行,在增加了这一节段长度的同时,也增加了这一节段的转运功能,提示此结构特征对该区域的渗透梯度形成可能产生重要影响。

关键词：髓襻三维重建小鼠

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SARS患者脾树突状细胞和巨噬细胞的免疫组织化学观察

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解剖学报 2007年第2期38卷 200-204页

作者：战军唐军民唐岩李枫梅芳王国涛顾江北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室北京100083

目的对严重急性呼吸综合征(SARS)患者脾树突状细胞、巨噬细胞数量和巨噬细胞大小进行定量分析,为SARS的病理变化和发病机制的探讨提供证据。方法通过免疫组织化学技术对6例SARS死亡患者脾和6例意外死亡者正常脾S-100+、CD68+、HLA-DR+、... 详细信息

目的对严重急性呼吸综合征(SARS)患者脾树突状细胞、巨噬细胞数量和巨噬细胞大小进行定量分析,为SARS的病理变化和发病机制的探讨提供证据。方法通过免疫组织化学技术对6例SARS死亡患者脾和6例意外死亡者正常脾S-100+、CD68+、HLA-DR+、CD83+细胞的分布进行观察,并采用图像分析系统对阳性细胞数量或体积进行分析。结果SARS死亡患者脾内白髓中S-100+树突状细胞数较正常平均减少80.49%,有的甚至完全消失;脾红髓中CD68+巨噬细胞数量较正常平均减少39.48%,体积是正常平均值的2.21倍。脾白髓中HLA-DR+抗原呈递细胞明显减少。SARS死亡患者脾与正常脾中均无CD83+成熟树突状细胞。结论SARS患者免疫系统中抗原呈递系统遭到严重破坏,支持SARS是一种病毒性免疫缺陷病。SARS病毒不能引发树突状细胞成熟。巨噬细胞的体积增大处于激活状态,提示巨噬细胞在SARS发病机制中起一定作用。

关键词：严重急性呼吸综合征(SARS) 树突状细胞巨噬细胞免疫组织化学脾人

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巨噬细胞条件培养液对原代培养小鼠成肌细胞生长的影响

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解剖学报 2007年第3期38卷 320-324页

作者：舒丹毅唐军民唐岩李枫北京大学基础医学院组织学胚胎学教研室北京100083

目的观察小鼠巨噬细胞条件培养液对小鼠成肌细胞生长的影响。方法小鼠腹腔内连续3d注射肌匀浆和淀粉混合物,然后分离小鼠腹腔巨噬细胞,在无血清培养液中培养48h后收集上清。取生后5d小鼠的成肌细胞,在含10%血清的DMEM/F12培养液中培养36... 详细信息

目的观察小鼠巨噬细胞条件培养液对小鼠成肌细胞生长的影响。方法小鼠腹腔内连续3d注射肌匀浆和淀粉混合物,然后分离小鼠腹腔巨噬细胞,在无血清培养液中培养48h后收集上清。取生后5d小鼠的成肌细胞,在含10%血清的DMEM/F12培养液中培养36-48h后,将血清浓度降低至0.5%。将巨噬细胞培养上清加入低浓度血清培养的成肌细胞中,作用72h后收集细胞,通过Wright染色、LDH细胞化学和免疫细胞化学方法观察成肌细胞的生长情况。结果巨噬细胞条件培养液能够在低浓度血清的条件下维持成肌细胞的正常形态和活性,并促进成肌细胞增殖。实验组LDH阳性细胞与对照组相比,其平均吸光度与积分吸光度均存在极显著性差异(分别为P<0.001和P<0.000 1)。免疫细胞化学显示,实验组desmin阳性细胞数明显多于对照组。结论巨噬细胞条件培养液中含有促进小鼠成肌细胞生长的因子。

关键词：巨噬细胞成肌细胞体外培养免疫细胞化学小鼠

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大鼠肌卫星细胞成肌分化的体外实验研究

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解剖学报 2006年第4期37卷 455-457页

作者：张志谢富康冯英中山大学基础医学院组织学胚胎学教研室广州510080

目的探讨肌卫星细胞体外分化和烟碱型乙酰胆碱受体表达。方法采用胰蛋白酶消化SD乳鼠的骨骼肌卫星细胞,差速贴壁法纯化,进行体外培养,观察卫星细胞的分化过程,利用免疫组织化学方法进行鉴定。用银环蛇毒素鉴定细胞表面的烟碱型乙酰胆碱... 详细信息

目的探讨肌卫星细胞体外分化和烟碱型乙酰胆碱受体表达。方法采用胰蛋白酶消化SD乳鼠的骨骼肌卫星细胞,差速贴壁法纯化,进行体外培养,观察卫星细胞的分化过程,利用免疫组织化学方法进行鉴定。用银环蛇毒素鉴定细胞表面的烟碱型乙酰胆碱受体,并用乙酰胆碱刺激细胞观察其收缩功能。结果体外培养的肌卫星细胞分化为成肌细胞,融合成肌管。α-sarcomeric actin、skeletal myosin和desmin抗体鉴定为阳性。ACh可刺激卫星细胞形成的肌管收缩。卫星细胞无明显的N-ACh受体表达;而卫星细胞形成的肌管经分化培养后N-ACh受体呈局部块状聚集。结论肌卫星细胞分化后形成的肌管具有收缩功能,并且在分化过程中逐渐合成烟碱型乙酰胆碱受体。

关键词：骨骼肌卫星细胞成肌细胞乙酰胆碱受体差速贴壁法

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严重急性呼吸综合征患者肾内免疫细胞的免疫组织化学观察

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解剖学报 2008年第2期39卷 227-230页

作者：任彩霞唐军民唐岩李枫毕振伍战军北京大学基础医学院组织学与胚胎学教研室北京100083

目的探讨严重急性呼吸综合征(SARS)患者肾内免疫细胞的免疫组织化学变化并对其作用进行分析。方法应用免疫组织化学方法显示6例SARS死亡患者和3例意外死亡者肾内免疫细胞,进行其形态观察,并采用图像分析系统进行定量分析。结果6例SARS... 详细信息

目的探讨严重急性呼吸综合征(SARS)患者肾内免疫细胞的免疫组织化学变化并对其作用进行分析。方法应用免疫组织化学方法显示6例SARS死亡患者和3例意外死亡者肾内免疫细胞,进行其形态观察,并采用图像分析系统进行定量分析。结果6例SARS患者肾内CD68+单核/巨噬细胞显著增多(P<0.05),CD3+T细胞、CD20+B细胞和S-100+树突状细胞与对照组无差别(P>0.05)。结论SARS患者肾内单核/巨噬细胞为主要免疫应答细胞,提示单核/巨噬细胞在SARS肾病变中起着重要作用。而T细胞、B细胞以及树突状细胞可能受到SARS冠状病毒的攻击,其功能可能遭到破坏。

关键词：严重急性呼吸综合征(SARS) 肾免疫细胞免疫组织化学人

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三氯化镧对体外培养人肝癌细胞的抑制作用

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吉林大学学报（医学版） 2006年第6期32卷 1029-1033页

作者：刘玉荣陈东姜文华陈爱军吉林大学基础医学院组织学与胚胎学教研室吉林长春130021 广东医学院组织学与胚胎学教研室广东湛江524023

目的:研究三氯化镧(LaCl3)对人肝癌细胞株SMMC-7721生长的影响及其作用机理。方法:体外培养的人肝癌细胞SMMC-7721,给予LaCl3(0.05、0.10、0.50及1.00 mmol.L-1)培养不同时间(1、3、5和7 d),观察癌细胞生长曲线、集落抑制率、培养上清... 详细信息

目的:研究三氯化镧(LaCl3)对人肝癌细胞株SMMC-7721生长的影响及其作用机理。方法:体外培养的人肝癌细胞SMMC-7721,给予LaCl3(0.05、0.10、0.50及1.00 mmol.L-1)培养不同时间(1、3、5和7 d),观察癌细胞生长曲线、集落抑制率、培养上清中甲胎蛋白(AFP)的变化。采用流式细胞术检测SMMC-7721细胞周期变化。免疫组织化学检测培养细胞CyclinD1、PCNA、CDK4及P16的表达情况。结果:MTT法显示0.50及1.00 mmol.L-1LaCl3对SMMC-7721生长具有明显的抑制作用,且具有剂量和时间的依赖性;0.10和0.50 mmol.L-1的LaCl3对肝癌细胞集落的形成抑制率分别为51%和67%(P<0.05),1.00 mmol.L-1LaCl3的集落形成抑制率达97%(P<0.01);不同剂量LaCl3作用SMMC-7721细胞3 d后,细胞周期发生明显变化,表现为G0/G1期细胞百分数增加,与对照组比较差异有显著性(P<0.01)。0.10、0.50及1.00 mmol.L-1LaCl3均可抑制AFP的分泌,其中以1.00 mmol.L-1LaCl3组作用最显著(P<0.01)。免疫细胞化学结果显示,LaCl3促进P16蛋白的表达,使Cyclin D1、PCNA和CDK4蛋白的表达下降。结论:LaCl3对SMMC-7721细胞生长具有明显的抑制作用,其机制可能与阻断细胞周期进程、降低细胞的恶性程度有关。

关键词：稀土元素癌肝细胞细胞周期

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胚胎干细胞源性表皮干细胞对小鼠全层皮肤缺损的修复

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解剖学报 2007年第3期38卷 296-299页

作者：刘爱军黄锦桃李海标中山大学基础医学院组织学胚胎学教研室广州510080

目的研究129小鼠胚胎干细胞(ES cell)源性表皮干细胞在同种小鼠全层皮肤缺损的生长和分化,探讨ES细胞源性表皮干细胞对全层皮肤缺损的修复作用。方法以生物膜为载体,将羊膜诱导后带有核荧光标记的ES细胞源性表皮干细胞直接覆盖小鼠全层... 详细信息

目的研究129小鼠胚胎干细胞(ES cell)源性表皮干细胞在同种小鼠全层皮肤缺损的生长和分化,探讨ES细胞源性表皮干细胞对全层皮肤缺损的修复作用。方法以生物膜为载体,将羊膜诱导后带有核荧光标记的ES细胞源性表皮干细胞直接覆盖小鼠全层皮肤缺损创面。术后1-8周连续取材,HE染色,β1整合素、CK15、CK19、CK10、CEA免疫组织化学和荧光双标显色。结果术后2周,创面完全长合,较厚的新生皮覆盖创面,基底层细胞增生,形成许多大小不一的细胞柱伸向真皮层,真皮层中可见管腔样结构,免疫荧光双标显示,1-3周新生表皮中可见核标记的细胞呈β1整合素、CK15阳性,真皮层中带有核标记的管状或泡状结构呈β1整合素、CK15阳性;4周后新生表皮开始变薄,基底层细胞呈CK19、CK10阳性,汗腺样结构呈CEA阳性,6-8周新生表皮下可见毛囊样、汗腺样、皮脂腺样等结构。结论ES细胞源性表皮干细胞植入小鼠全层皮肤缺损创面,可修复缺损的表皮,并在其下真皮层内具有分化为汗腺样、毛囊样和皮脂腺样结构的潜能。

关键词：胚胎干细胞表皮干细胞定向分化皮肤附属结构免疫组织化学人羊膜小鼠

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