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加味香砂六君子汤调控高脂血症小鼠apoA-Ⅰ改善内质网应激的作用机制研究

北京中医药大学学报 2024年第9期47卷 1236-1246页

作者：张琦隋国媛宋囡王杰刘玉蔡浩冉贾连群辽宁中医药大学中医药创新工程技术中心脏象理论及应用教育部重点实验室沈阳110847 辽宁中医药大学中西医结合学院

目的探讨加味香砂六君子汤调控小鼠载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ)改善内质网应激调节糖脂代谢防治血脂异常的机制。方法将野生型C57BL/6J小鼠根据随机数字表法分为野生组、野生高脂组、野生中药干预组,将apoA-Ⅰ基因敲除小鼠根据随机数字表法... 详细信息

目的探讨加味香砂六君子汤调控小鼠载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ)改善内质网应激调节糖脂代谢防治血脂异常的机制。方法将野生型C57BL/6J小鼠根据随机数字表法分为野生组、野生高脂组、野生中药干预组,将apoA-Ⅰ基因敲除小鼠根据随机数字表法分为敲除组、敲除高脂组、敲除中药干预组,每组10只。除野生组和敲除组正常饮食喂养外,各组小鼠采用D12492高脂饲料进行高脂饮食喂饲,建立高脂血症小鼠模型。于第9周开始野生中药干预组和敲除中药干预组小鼠每天给予加味香砂六君子汤(23.66 g/kg)灌胃给药,4周后,收集小鼠血清及肝脏组织用于后续检测。全自动生化分析仪检测血脂水平;ELISA法检测血清空腹血糖(FBG)及胰岛素(INS)水平,计算胰岛素抵抗(HOMA-IR)指数;HE染色观察肝脏病理变化;油红O染色观察肝脏脂质沉积情况;微板法检测肝脏组织甘油三酯(TG)水平;实时荧光PCR法检测肝脏组织apoA-Ⅰ、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)、乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、脂肪酸合酶(FASN)mRNA表达,WES全自动蛋白表达分析系统检测肝脏组织apoA-Ⅰ、GRP78、肌醇需求酶1(IRE1)、磷酸化IREI(p-IRE1)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)、胰岛素受体底物1(IRS1)、磷酸化IRS1(p-IRS1)、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、SREBP-1c、ACC1、FASN蛋白表达。结果野生高脂组相较于野生组血清中血脂、FBG、INS水平及HOMA-IR指数升高(P<0.05);肝脏组织中橘红色脂滴增多,脂肪空泡明显,TG水平增加,apoA-ⅠmRNA及蛋白表达降低,GRP78、SREBP-1c、ACC1、FASN mRNA表达升高,GRP78、SREBP-1c、ACC1、FASN蛋白水平及IRE1、JNK、IRS1、Akt磷酸化程度升高(P<0.05)。野生中药干预组与野生高脂组比较,血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C、FBG、INS水平及HOMA-IR指数降低(P<0.05);肝脏组织中橘红色脂滴明显减少,脂肪空泡化减轻,TG水平降低,apoA-ⅠmRNA及蛋白表达升高,GRP78、SREBP-1c、ACC1、FASN mRNA表达水平降低,GRP78、SREBP-1c、ACC1、FASN蛋白水平及IRE1、JNK、IRS1、Akt磷酸化程度降低(P<0.05)。敲除高脂组相较于野生高脂组,血清中TG、LDL-C、FBG水平及HOMA-IR指数升高,HDL-C水平降低(P<0.05);肝脏组织弥漫性橘红色脂滴,脂肪空泡明显增多,TG水平升高,GRP78、SREBP-1c、ACC1、FASN mRNA表达水平升高,SREBP-1c、ACC1蛋白水平及IRE1、JNK、IRS1、Akt磷酸化程度升高(P<0.05)。敲除中药干预组相较于野生中药干预组,血清中TG、LDL-C、FBG、INS水平及HOMA-IR指数升高,HDL-C水平降低(P<0.05);肝脏组织橘红色脂滴沉积情况改善,TG水平降低,GRP78、SREBP-1c、ACC1、FASN mRNA表达水平升高,GRP78、SREBP-1c、ACC1、FASN蛋白水平及IRE1、JNK、IRS1、Akt磷酸化程度升高(P<0.05)。结论加味香砂六君子汤通过调控apoA-Ⅰ缓解内质网应激,进而改善肝脏糖脂代谢紊乱。

关键词：高脂血症载脂蛋白A-Ⅰ 内质网应激糖脂代谢加味香砂六君子汤小鼠

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丹蒌片通过PTP1B/PP2A/SP1途径影响甘油三酯合成改善ApoE^(-/-)AS小鼠肝脏脂质沉积的机制研究

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时珍国医国药 2024年第3期35卷 571-575页

作者：张美菱朱敬轩王杰宋囡隋国媛贾连群辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁沈阳110847

目的探讨丹蒌片对Apo E^(-/-)AS小鼠肝脏脂质沉积及甘油三酯合成的影响及可能机制。方法将16只ApoE^(-/-)小鼠随机分为模型组、给药组各8只,8只C57BL/6J小鼠作为空白对照组。空白对照组给予基础饲料喂饲,其余小鼠给予高脂饲料喂饲,8... 详细信息

目的探讨丹蒌片对Apo E^(-/-)AS小鼠肝脏脂质沉积及甘油三酯合成的影响及可能机制。方法将16只ApoE^(-/-)小鼠随机分为模型组、给药组各8只,8只C57BL/6J小鼠作为空白对照组。空白对照组给予基础饲料喂饲,其余小鼠给予高脂饲料喂饲,8周后给药组予丹蒌片连续灌胃4周,空白对照组和模型组给予等体积生理盐水灌胃。利用全自动生化分析仪检测各组小鼠血清血脂水平;比色法试剂盒测定各组小鼠肝脏中甘油三酯(TG)水平,HE染色、油红O染色观察小鼠肝脏病理及脂质沉积情况;RT-qPCR法检测肝脏组织蛋白酪氨酸磷酸酶-1B(PTP1B)、固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(FASN)、硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)、甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAT)的mRNA表达水平,WB法检测PTP1B、蛋白磷酸酶2A(PP2A)、P-PP2A、特异性蛋白1(SP1)、P-SP1、SREBP-1c、FASN、SCD1、GPAT蛋白表达情况。结果与空白对照组相比,模型组小鼠血清中的HDL-C水平显著降低(P<0.05),血清TC、TG、LDL-C及肝组织TG含量显著升高(P<0.01),病理结果显示肝脏组织存在脂肪变性,以及明显的脂质沉积;小鼠肝脏PTP1B、SREBP-1c、FASN、SCD1、GPAT mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01);P-PP2A/PP2A、P-SP1/SP1比值显著降低(P<0.01)。经丹蒌片治疗后,小鼠血清的TC、TG、LDL-c及肝脏TG水平显著降低(P<0.05,P<0.01);肝脏脂肪变性及脂质沉积程度改善,小鼠肝脏PTP1B、SREBP-1c、FASN、SCD1、GPAT mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01);P-PP2A/PP2A、P-SP1/SP1比值显著升高(P<0.01)。结论丹蒌片可能通过PTP1B/PP2A/SP1途径影响肝脏甘油三酯合成而缓解Apo E^(-/-)AS小鼠肝脏脂质沉积进而达到防治动脉粥样硬化的目的。

关键词：丹蒌片 ApoE^(-/-)小鼠肝脏脂质沉积甘油三酯合成

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绞股蓝总苷介导METTL3调控m6A甲基化对卵巢癌细胞糖酵解的影响

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中国临床药理学杂志 2024年第22期40卷 3264-3269页

作者：高浩赵佼陈威言季天民王群曹媛辽宁中医药大学研究生学院中国医科大学肿瘤医院/辽宁省肿瘤医院妇科辽宁中医药大学中医学院辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室

目的探讨绞股蓝总苷（Gyp）对卵巢癌细胞增殖、凋亡和糖酵解的影响，并探讨其对卵巢癌中甲基转移酶样蛋白3（METTL3）介导的N6-甲基腺苷（m6A）甲基化的影响及作用机制。方法将SKOV3细胞分为对照组（0.9%NaCl）和低、中、高剂量实验组... 详细信息

目的探讨绞股蓝总苷（Gyp）对卵巢癌细胞增殖、凋亡和糖酵解的影响，并探讨其对卵巢癌中甲基转移酶样蛋白3（METTL3）介导的N6-甲基腺苷（m6A）甲基化的影响及作用机制。方法将SKOV3细胞分为对照组（0.9%NaCl）和低、中、高剂量实验组(100、200和300μg·mL-1Gyp)。用试剂盒测定细胞中葡萄糖消耗量，用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）法检测细胞中METTL3 mRNA的表达水平，用流式细胞术检测细胞的凋亡情况。裸鼠皮下注射卵巢癌SKOV3细胞构建卵巢癌模型，待造模成功后，随机分为对照组（0.9%NaCl）和低、中、高剂量实验组(50、100和150 mg·kg-1Gyp),每组10只。用RT-qPCR法检测移植瘤葡萄糖转运蛋白体1（GLUT1）和己糖激酶2（HK2）mRNA的表达水平。结果在SKOV3细胞中，中、高剂量实验组和对照组的葡萄糖消耗量分别为（7.29±0.67）、（6.15±0.22）和（15.69±0.70）μmol/1×10～5 cells,METTL3 mRNA相对表达水平分别为0.47±0.01、0.30±0.01和1.02±0.01,凋亡率分别为（13.52±0.50）%、（14.26±1.30）%和（3.50±0.78）%,中、高剂量实验组的上述指标与对照组比较，在统计学上差异均有统计学意义（均P<0.01）。在卵巢癌移植瘤裸鼠中，中、高剂量实验组和对照组的GLUT1 mRNA相对表达水平分别为0.52±0.03、0.29±0.01和1.02±0.02,HK2 mRNA相对表达水平分别为0.54±0.04、0.32±0.01和1.01±0.02,中、高剂量实验组的上述指标与对照组比较，在统计学上差异均有统计学意义（均P<0.01）。结论绞股蓝总苷通过抑制糖酵解在卵巢癌中发挥抗癌作用，其机制与抑制METTL3介导的m6A甲基化有关。

关键词：绞股蓝总苷卵巢癌糖酵解甲基转移酶样蛋白3 N6-甲基腺苷甲基化

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基于ApoA-Ⅰ/Akt1/β-catenin/TGF-β通路探讨化瘀祛痰方改善ApoE~(-/-)AS小鼠主动脉内皮细胞间质转化的作用机制

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辽宁中医杂志 2025年第1期52卷 159-164,I0003页

作者：吕美君贾连群闵冬雨宋囡王杰张琦辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学教务处辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学附属医院辽宁沈阳110032

目的基于ApoA-Ⅰ/Akt1/β-catenin/TGF-β通路探讨化瘀祛痰方对ApoE~(-/-)AS小鼠主动脉EndMT的作用机制。方法24只ApoE~(-/-)小鼠随机分为模型组、化瘀祛痰方组、辛伐他汀组,每组8只;C57BL/6J小鼠8只作为空白常对照组。ApoE~(-/-)小鼠... 详细信息

目的基于ApoA-Ⅰ/Akt1/β-catenin/TGF-β通路探讨化瘀祛痰方对ApoE~(-/-)AS小鼠主动脉EndMT的作用机制。方法24只ApoE~(-/-)小鼠随机分为模型组、化瘀祛痰方组、辛伐他汀组,每组8只;C57BL/6J小鼠8只作为空白常对照组。ApoE~(-/-)小鼠给予高脂饲料喂养制备AS模型,C57BL/6J小鼠给予普通饲料喂养。12周后,开始灌胃,空白对照组和模型组灌胃等容积生理盐水,化瘀祛痰方组灌胃化瘀祛痰方20 g/(kg·d),辛伐他汀组灌胃辛伐他汀混悬液2.275 mg/(kg·d),每日1次,给药4周。采用全自动生化分析仪检测血清血脂水平;苏木精-伊红染色法(HE)观察主动脉病理组织形态表现;免疫荧光法检测主动脉EndMT程度;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测主动脉转录因子E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)、TWIST mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测肝脏ApoA-Ⅰ、主动脉α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、血管内皮钙粘蛋白(VE-Cadherin)、ZEB1、TWIST、Akt1、p-Akt1、β-catenin、p-β-catenin、TGF-β1、Smad2及p-Smad2蛋白表达水平。结果与空白对照组相比,模型组小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著下降(P<0.05);主动脉内壁不平整光滑,可见多量的泡沫细胞聚集,形成粥样斑块,斑块附着处血管内膜明显增厚且结构紊乱,管腔中可见脱落的斑块碎;主动脉α-SMA、VE-Cadherin双染色阳性细胞明显增多,α-SMA蛋白表达水平明显升高,VE-Cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.05);主动脉转录因子ZEB1、TWIST mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05);主动脉TGF-β1、p-Smad2蛋白表达水平明显升高(P<0.05),肝脏ApoA-Ⅰ、主动脉p-Akt1及p-β-catenin蛋白表达水平明显降低(P<0.05);化瘀祛痰方干预后,小鼠血清TC、TG、LDL-C水平显著下降,HDL-C水平显著升高(P<0.05);主动脉内壁欠光滑,可见少量内皮细胞脱落,管壁厚度明显减轻;主动脉α-SMA、VE-Cadherin双染色阳性细胞明显减少,α-SMA蛋白表达水平明显降低,VE-Cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.05);主动脉转录因子ZEB1、TWIST mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05);主动脉TGF-β1、p-Smad2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),肝脏ApoA-Ⅰ、主动脉p-Akt1及p-β-catenin蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论化瘀祛痰方能够显著改善ApoE~(-/-)AS小鼠EndMT,其作用机制可能与调控ApoA-Ⅰ/Akt1/β-catenin/TGF-β通路,调节EndMT相关转录因子,进而调节EndMT基因表达有关。

关键词：化瘀祛痰方动脉粥样硬化内皮细胞间质转化 ApoA-Ⅰ/Akt1/β-catenin/TGF-β通路

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巴戟天AP2/ERF基因家族的全基因组鉴定及生物信息学分析

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中草药 2024年第20期55卷 7062-7071页

作者：陈纪佟刘楚弦韩逸飞潘芸燕段礼新季爱加广州中医药大学中药学院国际中医药转化医学研究所教育部中医药防治肿瘤转化医学研究国际合作联合实验室广东省中医药防治肿瘤转化药学研究重点实验室广东广州510000

目的研究鉴定巴戟天Morinda officinalis AP2/ERF转录因子家族,为巴戟天次生代谢调控网络提供理论基础。方法通过对巴戟天AP2/ERF转录因子家族的探索,利用TBtools、MEGA等生物信息分析软件对巴戟天基因组基因结构注释信息等文件进行... 详细信息

目的研究鉴定巴戟天Morinda officinalis AP2/ERF转录因子家族,为巴戟天次生代谢调控网络提供理论基础。方法通过对巴戟天AP2/ERF转录因子家族的探索,利用TBtools、MEGA等生物信息分析软件对巴戟天基因组基因结构注释信息等文件进行基本分析、进化分析,得出巴戟天中AP2/ERF家族的基因,以及这些基因中内含子排列情况、共线性分析的结果,并且通过进化树的构建可视化AP2/ERF基因家族的分类。结果初步筛选出可能调节巴戟天生长发育和代谢的转录因子。在巴戟天基因组中,鉴定到有131条基因属于AP2/ERF基因家族成员,通过基因结构注释文件,得到MoAP2/ERF在染色体定位分析、系统发育进化树、内含子外显子模式、motif、保守结构域分析和共线性分析等,最终根据MoAP2/ERF的表达量确认13条在巴戟天根部高表达的转录因子。结论通过生物信息分析筛选出在根部特异性表达的基因13条巴戟天AP2/ERF转录因子,为增加巴戟天主要有效成分产率奠定理论基础,为后续研究提供信息。

关键词：巴戟天 AP2/ERF基因家族基因家族鉴定生物信息学表达分析

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基于miRNA-29c-3p/LIF轴探讨针刺调节脾虚大鼠肠道炎症机制研究

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中华中医药学刊 2023年

作者：张家豪王建波薛亚楠曲怡董佳梓王天朗金璐刘继东辽宁中医药大学辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室

目的：观察针刺调节miRNA-29c-3p/白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor， LIF）轴改善脾虚大鼠结肠炎症机制，探讨“健脾益气”针刺疗法改善脾虚便溏症状现代作用机理。方法：将60只SD雄性大鼠以随机数字表法分为正常组、模型... 详细信息

目的：观察针刺调节miRNA-29c-3p/白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor， LIF）轴改善脾虚大鼠结肠炎症机制，探讨“健脾益气”针刺疗法改善脾虚便溏症状现代作用机理。方法：将60只SD雄性大鼠以随机数字表法分为正常组、模型组、非经非穴组、针刺组，每组15只。除正常组外，其余3组采用劳倦过度和不规律饮食复合方法建立脾虚证大鼠模型。造模成功后，针刺组电针“足三里”穴及“脾俞”穴干预治疗，非经非穴组给予电针尾尖作为对照干预，每日1次/20min，共治疗14d。治疗结束后，取大鼠结肠组织及全血。qPCR法检测大鼠结肠组织miRNA-29c-3p/LIF轴相关基因的表达；Western blot法检测大鼠白介素-6（Interleukin6，IL-6），肿瘤坏死因子α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）的表达；ELISA法检测结肠组织中白介素-1β（Interleukin1β，IL-1β）、白介素-18（Interleukin18，IL-18）的含量；HE染色法观察大鼠结肠组织病理形态变化；TUNEL染色法观察各组结肠组织凋亡情况；流式细胞术观察外周血单个核细胞（PBMC细胞）凋亡状况。结果：与正常组相比，模型组大鼠结肠组织LIF的表达水平明显下降(P＜0.05)，miRNA-29c-3p，IL-1β，IL-6，白介素-8（Interleukin8，IL-8），TNF-αmRNA 表达以及IL-6，TNF-α蛋白表达水平有所升高(P＜0.05)；与模型组相比，针刺组大鼠结肠组织LIF表达水平明显升高(P＜0.05)，miRNA-29c-3p，IL-1β，IL-6，IL-8，TNF-αmRNA 表达以及IL-6，TNF-α蛋白表达水平有所降低(P＜0.05)，非经非穴组未见显著性差异(P＞0.05)；与正常组相比，模型组大鼠结肠组织中促炎因子IL-1β、IL-18表达水平明显升高(P＜0.05)，与模型组相比，针刺组大鼠结肠组织中促炎因子IL-1β、IL-18的表达水平有所降低(P＜0.05)。另外HE染色结果显示，针刺治疗可有效减轻结肠黏膜组织中炎症细胞浸润和杯状细胞的损失；TUNEL染色结果显示，针刺可以抑制miRNA-29c-3p/LIF轴，改善脾虚大鼠结肠炎症，抑制结肠黏膜细胞凋亡；流式细胞术结果显示与正常组相比，模型组、非经非穴组大鼠PBMC凋亡率明显升高（P＜0.05），与模型组相比，针刺组大鼠PBMC细胞凋亡率有所降低（P＜0.05）。结论：电针“足三里”“脾俞”穴可以调节miRNA-29c-3p/LIF轴，抑制肠道炎症和促炎症介质的表达，进而抑制血液、结肠黏膜细胞凋亡，提高机体免疫力，从而改善脾虚便溏症状。

关键词：足三里脾俞脾虚肠道炎症 miRNA-29c-3p/LIF

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化瘀祛痰方调控MAPK通路对AS小鼠主动脉巨噬细胞的影响及机制研究

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时珍国医国药 2024年第6期35卷 1357-1360页

作者：刘继东樊程程王天朗李阳王建波薛亚楠曲怡辽宁中医药大学辽宁沈阳110032 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁沈阳110847

目的通过观察MAPK炎性信号通路的改变,探讨化瘀祛痰方抗AS的具体作用机制。方法将60只SPF级雄性ApoE^(-/-)小鼠随机分为空白组、模型组、西药组、中药低、中、高剂量组,除空白组外,其余小鼠高脂饲料喂养90d制备动脉粥样硬化模型,90d后... 详细信息

目的通过观察MAPK炎性信号通路的改变,探讨化瘀祛痰方抗AS的具体作用机制。方法将60只SPF级雄性ApoE^(-/-)小鼠随机分为空白组、模型组、西药组、中药低、中、高剂量组,除空白组外,其余小鼠高脂饲料喂养90d制备动脉粥样硬化模型,90d后西药组每日予辛伐他汀灌胃,中药低、中、高剂量予化瘀祛痰方灌胃,其余两组给予同体积生理盐水。采用HE染色观察小鼠主动脉组织形态;采用生化法检测小鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测各组小鼠主动脉JNK、p-JNK、P38、p-P38蛋白的磷酸化表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)测定各组小鼠血清中VCAM-1和ICAM-1含量;采用流式细胞术检测小鼠血液中巨噬细胞百分比;采用免疫组化法检测主动脉血小板-内皮细胞粘附分子(CD31)的蛋白表达。结果与空白组比较,模型组小鼠主动脉内膜细胞增生,有大量泡沫细胞沉积,血清TG、TC、LDL-C、VCAM-1、ICAM-1含量升高(P<0.05),HDL-C含量降低(P<0.05),血液中巨噬细胞百分比上升(P<0.05),主动脉组织p38,JNK磷酸化程度、CD31阳性表达升高;与模型组比较,化瘀祛痰方组和辛伐他汀组小鼠主动脉斑块面积减少,血清TG、TC、LDL-C、VCAM-1、ICAM-1含量降低(P<0.05),HDL-C含量升高(P<0.05),血液中巨噬细胞百分比下降(P<0.05),主动脉组织p38,JNK磷酸化程度、CD31阳性表达降低(P<0.05)。结论化瘀祛痰方可以降低血液巨噬细胞百分比,减轻巨噬细胞泡沫化程度,减少斑块新生血管数量,从而稳定斑块,其机制与调控MAPK炎性信号通路有关。

关键词：化瘀祛痰方动脉粥样硬化 MAPK通路巨噬细胞血管新生

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基于TMT标记定量蛋白质组学技术研究中药复方益糖康治疗糖尿病肾脏疾病的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2025年

作者：李凌谊于嘉祥张瀚文石岩王一霖吴怡程玥凤郑广新张文顺辽宁中医药大学辽宁省中医药研究院/辽宁中医药大学附属第二医院

目的：观察中药复方益糖康（YTK）对糖尿病肾脏疾病（DKD）的治疗效果，并进一步研究其作用机制。方法：选取16周龄雄性SPF级db/db小鼠45只，随机分为模型组、YTK高剂量组、YTK中剂量组、YTK低剂量组、非奈利酮组；另取db/m小鼠9只作为... 详细信息

目的：观察中药复方益糖康（YTK）对糖尿病肾脏疾病（DKD）的治疗效果，并进一步研究其作用机制。方法：选取16周龄雄性SPF级db/db小鼠45只，随机分为模型组、YTK高剂量组、YTK中剂量组、YTK低剂量组、非奈利酮组；另取db/m小鼠9只作为空白组。各治疗组按照相应剂量灌胃，持续给药8周后进行取材。通过各组小鼠尿液、血清相应指标，脾、胰腺、肾脏组织病理变化的结果作为DKD模型评价及YTK的疗效评价，运用TMT标记定量蛋白质组学技术筛选其可能的作用机制，选取LAMP2A、LC3-II和NLRP3蛋白进行免疫荧光检测以验证TMT组学结果。结果：与空白组相比，模型组尿液UACR、NGAL，血清NGAL，血清Cre-s、UA和UREA含量均显著升高，肾组织出现明显的病理变化，与DKD相似，是良好的DKD模型。经YTK干预后，上述指标及病理变化均有明显改善。通过TMT标记定量蛋白质组学技术筛选提示：YTK是通过调控自噬、氨基酰-tRNA生物合成、半胱氨酸和甲硫氨酸代谢等通路发挥作用的。免疫荧光检测自噬相关蛋白结果提示：与空白组相比，模型组LAMP2A、LC3-II蛋白表达量显著下降，NLRP3蛋白表达量显著升高，经YTK干预后，LAMP2A、LC3-II蛋白表达量显著升高，NLRP3蛋白表达量显著下降。结论：YTK能有效改善血糖指标、降低蛋白尿、延缓DKD进程，其作用与调控自噬有关，但调控自噬的具体机制有待于进一步深入探讨。

关键词：益糖康糖尿病肾脏疾病 TMT标记定量蛋白质组学自噬

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基于综合生物信息学和单细胞测序方法揭示红花-丹参治疗冠心病的生物学和免疫学机制

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Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences 2023年第10期32卷 796-812页

作者：魏东升刘孝生李路珍齐佳杰王雨轩张哲辽宁中医药大学辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学中医药创新工程技术中心辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学附属医院辽宁沈阳110033

本文基于生物信息学、网络药理学与单细胞测序探讨红花-丹参治疗冠心病(CAD)的机制。采用Comparative Toxicogenomics Database、Swiss target prediction、Binding Database Home、TargetNet四个数据库筛选出羟基红花黄色素、丹参酮、... 详细信息

本文基于生物信息学、网络药理学与单细胞测序探讨红花-丹参治疗冠心病(CAD)的机制。采用Comparative Toxicogenomics Database、Swiss target prediction、Binding Database Home、TargetNet四个数据库筛选出羟基红花黄色素、丹参酮、丹酚酸、丹参素的靶向基因。基于GEO数据库所筛选的3个CAD数据集,通过差异分析及加权基因共表达网络(WGCNA)筛选与CAD相关的基因。融合药物与疾病基因,通过cytoscape中mcode插件筛选出药物-疾病调控网络核心亚群。使用ssGSEA算法分析38种免疫细胞与mcode核心亚群基因的浸润情况。使用单细胞RNA测序明确mcode核心亚群所分布的细胞亚群。最后,分别对药物靶点基因、疾病基因以及mcode核心亚群基因进行GO、KEGG富集分析。结果发现,四个数据库共得到485个药物靶点基因。通过差异分析及WGCNA得到617个疾病基因。mcode插件获得1个药物-疾病的核心调控亚群,包括99个基因。ssGSEA算法结果表明TGFβ家族成员、趋化因子、白介素受体可能是红花-丹参治疗CAD核心调控的免疫细胞。单细胞RNA测序结果表明巨噬细胞与单核细胞可能是核心细胞亚群。GO、KEGG富集分析结果表明内膜结合的细胞器与细胞核可能是核心细胞成分。红花-丹参可能通过调控TGFβ家族成员、趋化因子、白介素受体、巨噬细胞、单核细胞、内膜结合的细胞器与细胞核发挥治疗CAD的作用。

关键词：红花-丹参冠状动脉粥样硬化性心脏病生物信息学单细胞测序网络药理学

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基于液相芯片技术探讨香砂六君子汤对脾虚血脂异常人群血清细胞因子的影响

引用

时珍国医国药 2024年第2期35卷 378-381页

作者：刘玉王杰宋囡王莹于宁贾连群杨关林辽宁中医药大学中医药创新工程技术中心脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学辽宁沈阳110847

目的基于液相芯片技术探讨香砂六君子汤对脾虚血脂异常人群血清细胞因子的影响。方法依据相应标准选择血脂异常患者(疾病组)25例,给予香砂六君子汤治疗4周,对照组25例为健康体检者。采用Bio-Plex悬液芯片技术检测各组血清样本中12种细... 详细信息

目的基于液相芯片技术探讨香砂六君子汤对脾虚血脂异常人群血清细胞因子的影响。方法依据相应标准选择血脂异常患者(疾病组)25例,给予香砂六君子汤治疗4周,对照组25例为健康体检者。采用Bio-Plex悬液芯片技术检测各组血清样本中12种细胞因子水平含量。结果与对照组相比,疾病组血清中有6种细胞因子水平明显降低,分别是IL-7、IL-8、G-CSF、MCP-1、MIP-1b、TNF-α,差异均有统计学意义(P<0.05);与疾病组相比较,治疗组患者血清中IL-7、IL-8、G-CSF、MCP-1、MIP-1b、TNF-α水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论应用Bio-Plex悬液芯片技术进行检测,发现血脂异常患者体内有多种免疫失衡,经香砂六君子汤治疗后可以纠正这一失衡,并改善脾虚状态下膏脂转输障碍,进而防治血脂异常。

关键词：液相芯片技术血脂异常香砂六君子汤血清细胞因子

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