目的:建立急性放射性肠炎小鼠模型,采用16S r RNA测序技术研究葛根芩连汤对放射性肠炎小鼠肠道菌群的调节作用,为葛根芩连汤的临床应用提供理论及实验依据。材料与方法:将41只SPF级的雄性BALB/c小鼠按照体重排序随机分成六组,分别为空...
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目的:建立急性放射性肠炎小鼠模型,采用16S r RNA测序技术研究葛根芩连汤对放射性肠炎小鼠肠道菌群的调节作用,为葛根芩连汤的临床应用提供理论及实验依据。材料与方法:将41只SPF级的雄性BALB/c小鼠按照体重排序随机分成六组,分别为空白对照组（6只）、模型对照组（7只）、低剂量葛根芩连汤组（7只）、中剂量葛根芩连汤组（7只）、高剂量葛根芩连汤组（7只）及蒙脱石散组（7只）[1]。每组小鼠给予SPF级饲料及纯净水喂养,饲养一周后,建立急性放射性肠炎小鼠模型。造模前小鼠禁食24h,除空白对照组不予以照射处理,其余五组小鼠麻醉后,采用6MV高能X线直线加速器进行11Gy单次全腹部照射。各组均于照射后次日开始灌胃,空白对照组和模型对照组均给予0.9%生理盐水0.5ml灌胃,低、中、高剂量葛根芩连汤组分别给予0.25g/ml、0.75g/ml、1.25g/ml浓度葛根芩连汤0.5ml灌胃,蒙脱石散组给予0.05g/ml浓度蒙脱石散混合液0.5ml灌胃,每日一次,共给药一周[2]。期观察小鼠体质量、排便情况及自由活动度等一般情况,记录每日DAI评分。一周后收集每只小鼠的新鲜粪便,于-80℃超低温冰箱冻存,通过16S r RNA高通量测序,分析和比较各组小鼠肠道菌群的构成、丰富度及多样性。采集小鼠血液进行内毒素（ET）检测,留取各组小鼠小肠组织,分成两部分,一部分进行常规切片HE染色,光镜下观察小肠组织的形态学改变[3],另一部分做组织匀浆,进行一氧化氮（NO）检测。结果:1.小鼠一般情况观察:照射后各组小鼠均出现不同程度的饮食饮水量下降、体质量减轻、软便、肛周不洁、弓背、毛发凌乱及蜷缩少动等表现,照射后第6天开始有所改善。2.小鼠体质量分析结果:照射后第1天,各组小鼠体质量未见明显差异（P>0.05）。与空白对照组相比其余五组小鼠体质量在照射后第2-5天内明显下降,第6天开始略有回升,具有统计学意义（P<0.05）。***评分结果:模型对照组的DAI评分明显高于空白对照组,具有显著性差异（P<0.0001）。各给药组的DAI评分均低于模型对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。低剂量葛根芩连汤组的DAI评分明显高于与高剂量葛根芩连汤组和蒙脱石散组,具有统计学意义（P<0.05,P<0.0001）。中剂量葛根芩连汤组DAI评分高于高剂量葛根芩连汤组及蒙脱石散组,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.0001）[4、5]。4.小肠组织形态学结果:光镜下观察空白对照组小鼠的小肠绒毛长而整齐,隐窝结构清晰无破坏,上皮细胞排列整齐,腺体结构正常,未见炎性细胞浸润和聚集[6]。模型对照组小鼠小肠绒毛变短、倒伏或缺失,隐窝和上皮细胞破坏,腺体多数不完整,甚至缺失,炎症细胞广泛浸润,肌层明显变薄。各给药组小鼠小肠绒毛稍变短,隐窝及上皮细胞较完整,炎症细胞少量浸润,对比模型对照组得到一定程度的恢复,高剂量葛根芩连汤组较为明显。与空白对照组相比,模型对照组小鼠的小肠绒毛高度明显降低,有显著性差异（P<0.0001）。对比模型对照组,中、高剂量葛根芩连汤组的小肠绒毛高度明显回调,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。低剂量葛根芩连汤组的小肠绒毛高度小于高剂量组,具有统计学意义（P<0.05）[5]。模型对照组小鼠的小肠壁全层厚度明显小于空白对照组（P<0.001）。与模型对照组相比,各给药组的小肠壁全层厚度均有所回调,以中、高剂量葛根芩连汤组及蒙脱石散组较明显,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。高剂量葛根芩连汤组与蒙脱石散组的小肠壁全层厚度明显大于低剂量组葛根芩连汤组,有统计学意义（P<0.05）[5]。5.生化指标检测结果:模型对照组小鼠体内ET含量较空白对照组显著增多,有统计学意义（P<0.0001）。与模型对照组相比,各给药组ET的含量显著减少,结果具有统计学意义（P<0.001,P<0.0001）。低剂量葛根芩连汤组ET含量高于中、高剂量葛根芩连汤组及蒙脱石散组,有统计学意义（P<0.05,P<0.0001）。中剂量葛根芩连汤组ET含量高于高剂量葛根芩连汤组及蒙脱石散组,结果具有统计学意义（P<0.05）,高剂量葛根芩连汤组和蒙脱石散组ET含量无明显差别,不具有统计学意义（P>0.05）[7]。与空白对照组相比,模型对照组小鼠体内的NO含量显著增多,结果具有统计学意义（P<0.0001）。对比模型对照组,各给药组的NO含量较显著减少,具有统计学意义（P<0.05）,但各给药组间未见明显差异,结果无统计学意义（P>0.05）[8]。6.16S r RNA高通量测序结果:在门分类水平上,各组的优势菌门为厚壁菌门Firmicutes、拟杆菌门Bacteroidetes、变形菌门Proteobacteria[6]。与空
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