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基于apoA-Ⅰ介导AMPK/mTOR/ULK1通路探讨化瘀祛痰方对ApoE^(-/-)AS小鼠肝脏自噬的作用机制

时珍国医国药 2024年第6期35卷 1337-1341页

作者：蔡浩冉贾连群隋国媛王杰张琦曹慧敏赵娜王翊丞刘玥彤辽宁中医药大学辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁沈阳110847

目的基于apoA-Ⅰ介导AMPK/mTOR/ULK1自噬信号通路探讨化瘀祛痰方改善动脉粥样硬化模型小鼠肝脏脂质沉积的作用机制。方法将7只C57BL/6J野生型小鼠作为空白对照组,21只ApoE^(-/-)AS型小鼠随机分为模型组、化瘀祛痰方组和瑞舒伐他汀组,每... 详细信息

目的基于apoA-Ⅰ介导AMPK/mTOR/ULK1自噬信号通路探讨化瘀祛痰方改善动脉粥样硬化模型小鼠肝脏脂质沉积的作用机制。方法将7只C57BL/6J野生型小鼠作为空白对照组,21只ApoE^(-/-)AS型小鼠随机分为模型组、化瘀祛痰方组和瑞舒伐他汀组,每组7只。空白对照组小鼠喂养正常饲料,模型组、化瘀祛痰方组和瑞舒伐他汀组小鼠喂养高脂饲料12周。12周后,化瘀祛痰方组和瑞舒伐他汀组小鼠分别给予化瘀祛痰方和瑞舒伐他汀灌胃;空白对照组和模型组小鼠给予等体积的生理盐水灌胃。4周后采用全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;使用HE染色,油红O染色观察肝脏组织形态学变化和肝脏脂质沉积水平,实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)测定肝脏组织中apoA-Ⅰ,Beclin1,LC3mRNA水平;WesternBlot法检测肝脏组织中apoA-Ⅰ,p-AMPK,p-mTOR,p-ULK1,Beclin1,LC3蛋白表达水平。结果与空白对照组相比,模型组ApoE^(-/-)小鼠血清TC、TG及LDL-C水平升高(P<0.05),HDL-C水平降低(P<0.05);肝脏脂质沉积明显,细胞内存在大量脂滴;apoA-Ⅰ和p-AMPK、p-ULK1、Beclin1、LC3蛋白及mRNA表达水平降低(P<0.05),p-mTOR蛋白表达水平升高(P<0.05)。与模型组相比,化瘀祛痰方组以及瑞舒伐他汀组ApoE^(-/-)小鼠血清TC、TG和LDL-C水平降低(P<0.05),HDL-C水平升高(P<0.05);脂质沉积情况改善,肝脏细胞肿胀明显减轻,脂滴分布明显减少;apoA-Ⅰ和p-AMPK、p-ULK1、Beclin1、LC3mRNA及蛋白表达升高(P<0.05),p-mTOR蛋白表达降低(P<0.05)。结论化瘀祛痰方可能通过调控apoA1介导的AMPK/mTOR/ULK1通路来调控肝脏自噬,从而改善肝脏脂质沉积。

关键词：动脉粥样硬化自噬化瘀祛痰方 apoA-Ⅰ AMPK/mTOR/ULK1

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基于HPLC–Q–TOF MS的栀子柏皮汤化学成分研究

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沈阳药科大学学报 2023年

作者：于新颖尹然张瓒韩飞沈阳药科大学药学院辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室

目的建立高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(HPLC-Q-TOFMS)法分析鉴定栀子柏皮汤中的化学成分。方法采用Phenomenex KinetexC18(150mm×4.6mm，2.6μm)色谱柱，乙腈-体积分数0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，流速为0.8mL·... 详细信息

目的建立高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(HPLC-Q-TOFMS)法分析鉴定栀子柏皮汤中的化学成分。方法采用Phenomenex KinetexC18(150mm×4.6mm，2.6μm)色谱柱，乙腈-体积分数0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，流速为0.8mL·min-1，柱温35℃，电喷雾正、负离子模式下检测。根据化合物精确分子质量、保留时间、碎片离子、裂解规律及与对照品比对，对检测到的化学成分进行鉴定。结果在栀子柏皮汤中共鉴定了137个化合物，其中包含40个黄酮类化合物、28个生物碱类化合物、19个有机酸类化合物、19个三萜类化合物、18个环烯醚萜类化合物、8个单萜类化合物、4个二萜类化合物和1个香豆素类化合物。上述化学成分中，44个来自于栀子，35个来自于黄柏，54个来自于炙甘草，4个为栀子、黄柏共有成分。结论建立的HPLC-Q-TOF MS法可较为全面地表征栀子柏皮汤中的化学成分，为栀子柏皮汤的质量控制与药效物质基础研究提供数据参考。

关键词：栀子柏皮汤 HPLC-Q-TOF MS 化学成分鉴定

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基于miR-34a/SIRT1/PGC-1α通路探讨化瘀祛痰方对ApoE^(-/-)AS小鼠肝脏脂质沉积的作用机制

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时珍国医国药 2024年第1期35卷 17-20页

作者：王翊丞贾连群隋国媛王杰张琦王琪格蔡浩冉辽宁中医药大学辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁沈阳110847

目的以miR-34a/SIRT1/PGC-1α信号通路为切入点探讨化瘀祛痰方对ApoE^(-/-)AS小鼠肝脏脂质沉积的作用机制。方法将C57BL/6J野生型小鼠7只作为空白对照组,21只ApoE^(-/-)AS小鼠随机分为模型组、化瘀祛痰方组、瑞舒伐他汀组,每组7只。... 详细信息

目的以miR-34a/SIRT1/PGC-1α信号通路为切入点探讨化瘀祛痰方对ApoE^(-/-)AS小鼠肝脏脂质沉积的作用机制。方法将C57BL/6J野生型小鼠7只作为空白对照组,21只ApoE^(-/-)AS小鼠随机分为模型组、化瘀祛痰方组、瑞舒伐他汀组,每组7只。空白对照组小鼠给予正常饮食,模型组、辛伐他汀组和化瘀祛痰方组小鼠给予高脂饲料。8周后,辛伐他汀组和化瘀祛痰方组小鼠灌胃相应药物;空白对照组和模型组小鼠给予等体积生理盐水。全自动生化分析仪测定肝脏TC、TG、 HDL、 LDL水平;试剂盒检测肝脏游离脂肪酸含量;HE染色法,油红O染色观察肝脏组织形态学变化;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法测定miR-34a、SIRT1、PPAR-α、PGC-1α及CPT1AmRNA表达水平;Western Blot检测各组小鼠肝脏SIRT1、PPAR-α、PGC-1α、CPT1A蛋白表达水平。结果与空白对照组比较,模型组ApoE^(-/-)小鼠血清、TG、TC及LDL-C水平升高(P<0.05),HDL-C水平降低(P<0.05);游离脂肪酸含量升高;脂质沉积明显,肝细胞肿胀严重,存在大量脂滴;miR-34a基因表达水平降低(P<0.05),SIRT1、PPAR-α、PGC-1α、CPT1A蛋白及mRNA表达水平降低(P<0.05);与模型组比较,化瘀祛痰方组以及瑞舒伐他汀组ApoE^(-/-)小鼠血清TG、TC和LDL-C水平降低(P<0.05),HDL-C水平升高(P<0.05);游离脂肪酸含量降低;脂质沉积情况改善,肝脏细胞肿胀明显减轻,脂滴分布明显减少;游离脂肪酸含量下降;miR-34a基因表达水平升高(P<0.05);SIRT1、PPAR-α、PGC-1α和CPT1AmRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论化瘀祛痰方可能通过调控miR-34a/SIRT1/PGC-1α信号通路促进ApoE^(-/-)AS小鼠脂肪酸β氧化,改善ApoE^(-/-)AS小鼠肝脏脂质沉积情况,进而防治动脉粥样硬化的发生发展。

关键词：动脉粥样硬化脂肪酸β氧化 miR-34a SIRT1 化瘀祛痰方

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“逆针灸”理论治疗高血压前期的应用

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中华中医药学刊 2015年第7期33卷 1722-1725页

作者：王建波曲怡张立德辽宁中医药大学中医脏象理论及应用省部共建教育部重点实验室辽宁沈阳110847

逆针灸理论早在东晋便有提及,并且已经被大量应用于各种疾病前期的治疗。而随着人们对于生活质量的要求越来越高,"绿色健康"的理念方兴未艾。高血压前期作为高血压病的欲病状态,也被越来越多的学者研究。将"逆针灸"... 详细信息

逆针灸理论早在东晋便有提及,并且已经被大量应用于各种疾病前期的治疗。而随着人们对于生活质量的要求越来越高,"绿色健康"的理念方兴未艾。高血压前期作为高血压病的欲病状态,也被越来越多的学者研究。将"逆针灸"的治疗思想与选穴原则运用于高血压前期的治疗,"欲病救萌,防微杜渐",为未来高血压前期的实验研究及临床治疗方面提供了一条新的思路。

关键词：逆针灸高血压前期治未病治疗

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冠心病合并肾病证候特征

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中国老年学杂志 2016年第6期36卷 1318-1321页

作者：谷丽艳张明雪辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学附属医院

目的研究冠心病合并肾病证候特征。方法采用临床流调学方法,并运用聚类的统计方法,对大样本的冠心病合并心肾病专家调查问卷数据库进行统计分析,归纳出5个阶段证候特征。结果 1冠心病合并肾病1期:气虚湿滞证、脾肾两虚,风水相搏证;2冠... 详细信息

目的研究冠心病合并肾病证候特征。方法采用临床流调学方法,并运用聚类的统计方法,对大样本的冠心病合并心肾病专家调查问卷数据库进行统计分析,归纳出5个阶段证候特征。结果 1冠心病合并肾病1期:气虚湿滞证、脾肾两虚,风水相搏证;2冠心病合并肾病2期:风水袭心,阴水泛溢证、心肾两虚,蕴湿酿浊证;3冠心病合并肾病3期:脾肾气虚,湿邪内阻证、肾虚水停,湿毒瘀滞证;4冠心病合并肾病4期:心肾气亏,水阻络滞证、湿浊上泛,血络瘀滞证;5冠心病合并肾病5期:脾肾虚衰,水气凌心证、阳微血瘀,湿毒蒙神证。结论冠心病合并肾病证候随病情的发展不断变化,气虚、阴虚为本,气、火、痰、瘀等病理因素贯穿发病各个阶段,冠心病合并肾病1期主要涉及心、肝、脾三脏,以阳虚内热、气虚不足为主。冠心病合并肾病2期主要涉及心、肝、脾、胃,以热邪、痰浊、血瘀为病理因素,兼有气阴耗伤表现。慢性并发症期主要涉及心、脾、肾脏,气血衰败,阴阳两虚,兼有血瘀、痰浊。

关键词：冠心病合并肾病证候特征

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基于“心受气于脾”理论探讨冠心病的发病机制

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时珍国医国药 2019年第7期30卷 1675-1677页

作者：刘悦张帆王洋孔德昭尹妮高晓宇李佳陈莹张哲杨关林辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室沈阳110847 辽宁中医药大学附属医院沈阳110032

《内经》“心受气于脾”提出了心病发生发展的病机关键在脾,而在冠心病的发生发展过程中“痰浊血瘀”是“心脉阻滞”的关键因素。深入探究以“心受气于脾”理论为中心的冠心病“痰浊血瘀”的生物学基础及从脾论治冠心病的理论基础对中... 详细信息

《内经》“心受气于脾”提出了心病发生发展的病机关键在脾,而在冠心病的发生发展过程中“痰浊血瘀”是“心脉阻滞”的关键因素。深入探究以“心受气于脾”理论为中心的冠心病“痰浊血瘀”的生物学基础及从脾论治冠心病的理论基础对中西医结合防治心血管疾病尤为关键,对丰富中医脾脏象理论的科学内涵具有重要意义,我们基于课题组前期研究进展及其他相关研究对其进行简要探讨。

关键词：心受气于脾冠心病动脉粥样硬化痰浊血瘀从脾论治

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聚苯乙烯微塑料对小鼠生长发育和肝脏脂质代谢的影响

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中国组织工程研究 2024年第29期28卷 4634-4638页

作者：高心雪高佳新朱建宇石鑫琦陶伯成李宁陈丽娟辽宁中医药大学辽宁省沈阳市110847 中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁省沈阳市110847

背景:塑料作为耐用、廉价、易于制造的有机合成高分子材料被广泛应用,同时塑料耐高温、耐酸碱、耐腐蚀的特性使其在自然界难以降解,最终形成数量庞大的微塑料污染威胁人类身体健康。目的:探究微塑料暴露对小鼠生长发育和肝脏脂质代谢的... 详细信息

背景:塑料作为耐用、廉价、易于制造的有机合成高分子材料被广泛应用,同时塑料耐高温、耐酸碱、耐腐蚀的特性使其在自然界难以降解,最终形成数量庞大的微塑料污染威胁人类身体健康。目的:探究微塑料暴露对小鼠生长发育和肝脏脂质代谢的影响。方法:20只雄性C57BL/6J小鼠适应性喂养1周后,采用随机数字表法分为正常组与微塑料组,每组10只,正常组小鼠予以普通饮食,自由饮水,饮用4周;微塑料组小鼠予以普通饮食,自由饮用1000μg/L的微塑料(聚苯乙烯)水,饮用4周。饮水2,4周后,检测小鼠体质量与抓力、血脂与肝肾功能、肝脏超声形态及病理形态与肝脏脂质沉积情况。结果与结论:①随着时间的延长,两组小鼠体质量逐渐增加,微塑料组小鼠饮水2,4周后的体质量大于正常组(P<0.05);随着时间的延长,正常组小鼠抓力逐渐升高,微塑料组小鼠抓力先降低后升高,微塑料组饮水4周后的抓力低于正常组(P<0.05);②肝脏超声检查显示,与正常组比较,微塑料组小鼠饮水2,4周后的肝脏超声回声信号增强;③苏木精-伊红染色显示,微塑料组小鼠饮水2,4周后的肝细胞形态无明显变化,但可见炎性细胞浸润;油红O染色显示,微塑料组小鼠饮水2,4周后肝脏可见明显脂质沉积;④与正常组比较,微塑料组小鼠饮水2周后的血清高密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油、天门冬氨酸氨基转移酶水平均降低(P<0.05),饮水4周后的血清三酰甘油浓度降低(P<0.05);⑤结果表明,微塑料可能导致小鼠体质量增加、体力下降及肝脏脂质代谢异常。

关键词：聚苯乙烯微塑料小鼠生长发育脂质代谢肝肾功能

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脾气虚模型大鼠海马与下丘脑神经元线粒体分裂因子和线粒体分裂蛋白1的表达

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中国中西医结合杂志 2017年第11期37卷 1356-1360页

作者：刘文俊陈伟仁宋囡刘子怡柴纪严王德山单德红辽宁中医药大学教学实验中心机能实验室沈阳110847 辽宁中医药大学研究生学院沈阳110847 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室沈阳110847 辽宁中医药大学基础医学院生理与心理教研室沈阳110847

目的观察脾气虚模型大鼠海马、下丘脑神经元线粒体形态学变化及其分裂情况,探讨脾气虚的发生机制。方法 20只SPF级雄性SD大鼠随机分为非脾气虚组和脾气虚模型组,每组10只。脾气虚模型组采用饮食失节+劳倦方法制脾气虚模型。透射电镜观... 详细信息

目的观察脾气虚模型大鼠海马、下丘脑神经元线粒体形态学变化及其分裂情况,探讨脾气虚的发生机制。方法 20只SPF级雄性SD大鼠随机分为非脾气虚组和脾气虚模型组,每组10只。脾气虚模型组采用饮食失节+劳倦方法制脾气虚模型。透射电镜观察海马CA1区及下丘脑神经元线粒体的形态学变化;ELISA法检测海马和下丘脑组织ATP含量;Western blot法检测上述组织线粒体分裂因子(MFF)和线粒体分裂蛋白1(Fis1)的表达。结果非脾气虚组线粒体较丰富,形态基本正常,而脾气虚模型组线粒体数量减少,其中海马CA1区神经元线粒体出现肿胀、嵴减少,甚至空泡化,而下丘脑还存在较多线粒体自噬现象。与非脾气虚组比较,脾气虚模型组体重、进食量、饮水量、运动距离、站立次数以及前肢抓力均下降,海马和下丘脑神经元ATP含量降低,MFF及Fis1蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论海马和下丘脑相关神经元线粒体功能低下及其促分裂成分表达增加与脾气虚的发生密切相关。

关键词：脾气虚线粒体线粒体分裂因子线粒体分裂蛋白1 海马下丘脑

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中药方剂配伍的研究思路与方法

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中华中医药学刊 2019年第5期37卷 1092-1095页

作者：刘倩刘丽范颖辽宁中医药大学方剂学科中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁沈阳110847

中药配伍是中医用药的主要形式,当中药按一定法度加以组合便会形成方剂。将现有的中药、方剂配伍研究方法进行归纳总结,从中医理角度论述七情、性味、君臣佐使、随证加减、剂量改变配伍的研究方法,从现代医学研究角度对中药不同配伍方... 详细信息

中药配伍是中医用药的主要形式,当中药按一定法度加以组合便会形成方剂。将现有的中药、方剂配伍研究方法进行归纳总结,从中医理角度论述七情、性味、君臣佐使、随证加减、剂量改变配伍的研究方法,从现代医学研究角度对中药不同配伍方式及数理模型设计方法进行论述,为今后的中药方剂配伍研究提供思路与方法。

关键词：中药方剂配伍中医理论现代模式研究方法

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三黄糖肾康对糖尿病大鼠骨组织Wnt/β-catenin信号通路的影响

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中国实验方剂学杂志 2023年第18期29卷 69-77页

作者：孙立亚谷丽艳刘北王嘉熙冯一楠奚悦辽宁中医药大学沈阳110847 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室沈阳110847 沈北新区卫生健康监督中心沈阳110127 锦州医科大学附属第三医院辽宁锦州121001

目的:观察三黄糖肾康对糖尿病大鼠骨组织Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。方法:采用高糖高脂饮食4周联合左下腹腔内注射新鲜配制的2%链脲佐菌素(pH 4.5)30 mg·kg^(-1)体质量制备糖尿病模型,成模大鼠按血糖水平随机分... 详细信息

目的:观察三黄糖肾康对糖尿病大鼠骨组织Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。方法:采用高糖高脂饮食4周联合左下腹腔内注射新鲜配制的2%链脲佐菌素(pH 4.5)30 mg·kg^(-1)体质量制备糖尿病模型,成模大鼠按血糖水平随机分为模型组、三黄糖肾康低、高剂量组(12.8、38.4 g·kg^(-1))、骨疏康组(1.8 g·kg^(-1)),另设同周龄喂食普通饲料大鼠为空白组。各组予相应药物或生理盐水灌胃12周后,全自动生化仪检测各组大鼠空腹血糖(FBG);酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清空腹胰岛素(FINS)、骨特异性碱性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP);计算机微断层扫描(Micro-CT)扫描大鼠股骨,观察骨组织微结构,检测骨密度(BMD);苏木素-伊红(HE)染色、番红O-固绿染色观察大鼠股骨组织病理变化;免疫组化(IHC)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Wnt3a、低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP-5)及β-catenin蛋白的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠FBG、FINS、TRAP显著升高(P<0.01),BALP显著降低(P<0.01),BMD显著降低(P<0.01),骨小梁结构松散不规则,细长疏稀,出现断裂,脂滴增多,Wnt3a、LRP-5和β-catenin蛋白表达下降(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,三黄糖肾康低、高剂量组FBG降低、BALP升高(P<0.05),三黄糖肾康低剂量组FINS降低(P<0.05),各给药组TRAP均显著降低(P<0.01);各给药组BMD均有不同程度提高(P<0.05,P<0.01);各给药组大鼠股骨骨小梁增多、增粗,排列较紧密、整齐,脂滴数量减少,骨微结构形态得到一定的改善;各给药组Wnt3a、LRP-5和β-catenin蛋白平均光密度值均有不同程度提高(P<0.05,P<0.01);Wnt3a、LRP-5和β-catenin蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论:三黄糖肾康可能通过提高骨组织Wnt3a、LRP-5及β-catenin蛋白的表达,调节Wnt/β-catenin信号传导通路的失调状态,促进骨形成,减少骨吸收,降低血糖,从而达到防治糖尿病骨质疏松症的效果。

关键词：糖尿病骨质疏松症三黄糖肾康 Wnt/β-连环蛋白信号通路

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