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中国现代医学杂志 2015年第16期25卷 15-18页

作者：于洋柳春辽宁医学院基础医学院生理学教研室辽宁锦州121001 辽宁中医药大学基础医学院生化教研室辽宁沈阳110032

目的为了解神经生长因子(NGF)对小鼠卵巢腔前颗粒细胞促增殖情况并探索其机制,同时建立方便灵敏、无污染和毒性小的细胞增殖检测方法。方法用NGF刺激培养的小鼠卵巢腔前颗粒细胞,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验分析,溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd... 详细信息

目的为了解神经生长因子(NGF)对小鼠卵巢腔前颗粒细胞促增殖情况并探索其机制,同时建立方便灵敏、无污染和毒性小的细胞增殖检测方法。方法用NGF刺激培养的小鼠卵巢腔前颗粒细胞,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验分析,溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)掺入标记,免疫荧光技术检测颗粒细胞在体外培养中的增殖情况和Brd U标记指数。结果 NGF明显促进颗粒细胞增殖,并且具有一定的时效关系。荧光显微镜下可见Brd U阳性标记的颗粒细胞,提示细胞处于增殖期。NGF组的Brd U标记指数为45.03%,明显高于对照组20.65%(P<0.01)。NGF使增殖期的细胞显著增多及增殖指数明显升高。结论该研究证实NGF能够促进颗粒细胞增殖,CCK-8分析和Brd U标记是高效、灵敏的标记腔前颗粒细胞增殖的方法,NGF促进颗粒细胞增殖与促进颗粒细胞DNA的合成有关系。

关键词：神经生长因子颗粒细胞细胞计数试剂盒-8 溴脱氧尿嘧啶核苷增殖

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siRNA沉默TLR4表达对人肺腺癌A549细胞增殖和侵袭的影响

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中国肿瘤生物治疗杂志 2014年第6期21卷 635-639页

作者：郭隽馥苗兰英王艳杰丛培玮辽宁中医药大学教学实验中心生物技术实验室辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学基础医学院生物化学教研室辽宁沈阳110847

目的:探讨靶向TLR4基因的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)对人肺腺癌A549细胞增殖和侵袭的影响。方法:设计并合成针对TLR4基因的3条siRNA(siRNA722、siRNA1673和siRNA2560)及1条与TLR4基因无同源性的阴性对照siRNA,采用Real-time PCR和Western blotting方法测定干扰后A549细胞中TLR4 mRNA及蛋白的表达水平,筛选出有效抑制靶基因表达的siRNA并确定最佳转染条件。TLR4特异性siRNA(TLR4-siRNA)转染A549细胞后,采用CCK-8法和Transwell小室法分别检测沉默TLR4对A549细胞增殖和侵袭能力的影响。结果:与阴性对照相比,siRNA1673在转染48 h后对TLR4 mRNA和蛋白表达的抑制最为明显[(0.45±0.03)vs(0.83±0.02),(0.23±0.06)vs(0.98±0.09);均P<0.01]。TLR4-siRNA转染72 h后A549细胞增殖活性显著下降[(0.77±0.01)vs(0.98±0.11)、(0.93±0.04),P<0.01];转染48 h后,TLR4-siRNA组A549细胞的侵袭细胞数明显少于阴性对照组[(23.60±2.88)vs(59.80±5.54)个,P<0.01]。结论:TLR4-siRNA能够沉默A549细胞中TLR4基因表达,抑制A549细胞的增殖和侵袭能力,TLR4可能成为肺癌基因治疗的候选靶点。

关键词：肺癌 TLR4基因 siRNA 增殖侵袭

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基于文献计量方法的近30年国内二至丸研究热点和趋势分析

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医学信息 2025年第6期 29-34页

作者：王蒙张彬彬张林吴怡王超周子尧刘震辽宁中医药大学中医学院解放军陆军第79集团军医院药剂科辽宁中医药大学中西医结合学院生物化学与分子生物学教研室辽宁省中医药研究院科技产业处辽宁中医药大学中西医结合临床神经内科

目的基于文献计量方法分析二至丸领域的研究方向、热点和趋势。方法检索中国知网（CNKI）中从1993-2023年收录有关二至丸的文献，应用CiteSpace 6.2 R4软件对所纳入文前的作者、机构、关键词等信息进行分析，绘制视化图谱。结果经过... 详细信息

目的基于文献计量方法分析二至丸领域的研究方向、热点和趋势。方法检索中国知网（CNKI）中从1993-2023年收录有关二至丸的文献，应用CiteSpace 6.2 R4软件对所纳入文前的作者、机构、关键词等信息进行分析，绘制视化图谱。结果经过筛选，共纳入了744篇关于二至丸的文献，年度发文量呈现稳步上升趋势。南京中医药大学是中文论文产出最多的机构，丁安伟是发表论文数量最多的作者，最新的高频关键词是“作用机制”。结论在过去的30年中，二至丸的研究主要集中在临床疗效和药理研究等方面。基于网络药理学和分子对接技术的探究治疗不同疾病的作用机制已成为未来的热点趋势。加强区域间的合作与交流，促进信息资源的共享，并不断深化基础研究，有助于促进该领域的进一步发展。

关键词：二至丸 CiteSpace 可视化分析保肝作用骨质疏松

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异丙酚对局灶性脑缺血／再灌注星形胶质细胞GFAP表达的影响

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中国应用生理学杂志 2009年第1期25卷 16-17,40页

作者：尚宇吕红梅顾佩菲解放军第463医院麻醉科辽宁沈阳110042 辽宁中医药大学基础医学院药理教研室辽宁沈阳110042

目的:探讨异丙酚对局灶性脑缺血/再灌注后星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法:大脑中动脉插线法制作大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型。观察脑缺血2 h再灌注24 h后神经功能损害改变并评分,并采用免疫荧光组织化学法检测大... 详细信息

目的:探讨异丙酚对局灶性脑缺血/再灌注后星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法:大脑中动脉插线法制作大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型。观察脑缺血2 h再灌注24 h后神经功能损害改变并评分,并采用免疫荧光组织化学法检测大鼠齿状回GFAP蛋白的表达。结果:缺血/再灌注后可诱导大鼠齿状回GFAP表达明显增强,异丙酚可抑制缺血/再灌注后GFAP的表达,明显改善大鼠神经功能损害(P<0.05或0.01)。结论:异丙酚通过抑制脑缺血后星形胶质细胞GFAP的过度表达发挥抗脑缺血损伤保护神经元作用。

关键词：异丙酚缺血/再灌注胶质纤维酸性蛋白星形胶质细胞

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绞股蓝总皂苷对紫外线照射的人皮肤细胞原癌基因表达的影响

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重庆医科大学学报 2014年第3期39卷 360-363页

作者：马月丹张燚王继慧吴景东马贤德辽宁中医药大学经济管理学院公共管理教研室沈阳110847 辽宁中医药大学附属第三医院沈阳110847 辽宁中医药大学基础医学院中医基础理论教研室沈阳110847 辽宁中医药大学学生工作处沈阳110847 辽宁中医药大学教学实验中心生物技术实验室沈阳110847

目的:探讨绞股蓝总皂苷对紫外线照射的人皮肤相关原癌基因c-Fos和c-Jun表达的影响。方法:制备空白大鼠血清和绞股蓝含药血清。将人永生化角质形成细胞(human immortal skin keratinocytes,HaCaT)40瓶随机分为4组(A^D组),每组10瓶,将人... 详细信息

目的:探讨绞股蓝总皂苷对紫外线照射的人皮肤相关原癌基因c-Fos和c-Jun表达的影响。方法:制备空白大鼠血清和绞股蓝含药血清。将人永生化角质形成细胞(human immortal skin keratinocytes,HaCaT)40瓶随机分为4组(A^D组),每组10瓶,将人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblast,HSF)60瓶随机分为6组(Ⅰ~Ⅵ组),每组10瓶。分别用中波紫外线(ultraviolet B,UVB)对HaCaT细胞B^D组、用长波紫外线(ultraviolet A,UVA)对HSF细胞Ⅱ~Ⅵ组进行照射。将HaCaT 4组细胞培养上清液分别加入HSF细胞的Ⅲ~Ⅵ组。最终制成用于检测的6组细胞,分别为空白对照组(Ⅰ组)、UVA模型组(Ⅱ组)、HaCaT培养上清液A组(Ⅲ组)、HaCaT培养上清液B组(Ⅳ组)、HaCaT培养上清液C组(Ⅴ组)、HaCaT培养上清液D组(Ⅵ组)。采用反转录聚合酶链反应(reverse transcription-PRC,RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)方法检测Ⅰ~Ⅵ组细胞cFos和c-Jun基因和蛋白的表达水平。结果:与Ⅰ组比较,Ⅱ组细胞c-Fos和c-Jun基因和蛋白的表达水平明显上调(各组P值均为0.000);与Ⅱ组比较,Ⅳ组c-Fos和c-Jun基因和蛋白表达均上调(Pc-Fos基因=0.016、Pc-Fos蛋白=0.001、Pc-Jun基因=0.005、Pc-Jun蛋白=0.000),而Ⅲ组变化不明显;与Ⅳ组比较,Ⅵ组c-Fos和c-Jun基因和蛋白表达均下调(各组P值均为0.000),而Ⅴ组变化不明显(Pc-Fos基因=0.081、Pc-Fos蛋白=0.088、Pc-Jun基因=0.109、Pc-Jun蛋白=0.026)。结论:经UVB照射的HaCaT细胞分泌细胞因子促进经UVA照射的HSF细胞原癌基因c-Fos和c-Jun基因和蛋白的表达。绞股蓝总皂苷对UVB照射HaCaT细胞培养上清液作用的UVA照射HSF细胞中原癌基因c-Fos和c-Jun的表达具有抑制作用。

关键词：绞股蓝总皂苷紫外线照射皮肤细胞原癌基因 c-Fos c-Jun

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中医证候规范化文献研究的思路与方法

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中医杂志 2009年第8期50卷 743-744页

作者：吕爱平邓洋洋辽宁中医药大学基础医学院中医基础教研室沈阳市皇姑区崇山东路79号110032

证候研究是中医研究的热点和难点。主要包括证候概念、证候分类、证候命名、证候规范化、证候实质以及证候量化诊断等方面,其中对证候规范化的研究,虽然在一定程度上取得了成绩,但是距离真正的规范化还相差很远。在温习文献的基础上,提... 详细信息

证候研究是中医研究的热点和难点。主要包括证候概念、证候分类、证候命名、证候规范化、证候实质以及证候量化诊断等方面,其中对证候规范化的研究,虽然在一定程度上取得了成绩,但是距离真正的规范化还相差很远。在温习文献的基础上,提出以现代手段研究古代文献中证(候)、症、病的含义为基础,并以现代手段研究古今脾、肾证谱的演变规律为切入点,进行证候规范化的文献研究。

关键词：中医学证候方法学研究

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基于脂肪组织细胞因子探讨黄芪葛根配伍对糖尿病大鼠降糖降脂的作用机制

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中药药理与临床 2019年第4期35卷 20-23页

作者：刘倩范颖刘丽李军李新林庶茹辽宁中医药大学基础医学院辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁中医药大学信息工程学院沈阳110084

目的:考察黄芪葛根配伍对脂肪细胞因子的调控作用,明确两药配伍降低血糖血脂的作用机制。方法:雄性SD大鼠随机分为:正常对照组、模型对照组、金芪降糖片1.47 g/kg组、黄芪2.7 g/kg组、葛根1.35 g/kg组、黄芪葛根汤4.05 g/kg组。一次性... 详细信息

目的:考察黄芪葛根配伍对脂肪细胞因子的调控作用,明确两药配伍降低血糖血脂的作用机制。方法:雄性SD大鼠随机分为:正常对照组、模型对照组、金芪降糖片1.47 g/kg组、黄芪2.7 g/kg组、葛根1.35 g/kg组、黄芪葛根汤4.05 g/kg组。一次性腹腔注射STZ诱导糖尿病模型。造模同日给予相应药物或蒸馏水10 ml/kg,连续灌胃30天。检测血糖(Glu)、三酰甘油(TG)、胆固醇(CHO),酶联免疫吸附实验(ELISA)检测脂联素(APN)、瘦素(LEP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-12(IL-12)、IL-15含量,实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)检测趋化素(chemerin)、趋化素受体(chemR23)mRNA相对表达量。结果:与正常对照组比较,造模30天模型对照组Glu、TG、CHO含量明显升高,APN、LEP含量明显降低,TNF-α、IL-12、IL-15含量增加,chemerin、chemR23mRNA表达上调。黄芪、葛根及其配伍能明显降低模型对照组大鼠Glu、TG、CHO(黄芪葛根配伍除外)、TNF-α(葛根除外)、IL-12(葛根除外)、IL-15、下调chemerin(黄芪葛根配伍除外)、chemR23 mRNA表达,黄芪葛根配伍降低糖尿病大鼠TG、IL-2作用优于单一用药,黄芪抑制TNF-α、IL-15分泌作用优于两药合用。黄芪、黄芪葛根配伍能升高模型对照组APN、LEP含量,但两药没有交互作用。结论:黄芪葛根配伍通过促进脂肪组织APN、LEP分泌,降低TNF-α、IL-12含量、下调chemR23 mRNA表达达到降低糖尿病大鼠血糖、三酰甘油的作用。

关键词：黄芪葛根配伍脂肪组织细胞因子血糖血脂

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四君子丸对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织Bax和Bcl2表达的影响

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天然产物研究与开发 2017年第4期29卷 648-652页

作者：宋军姚辉王艳杰郭隽馥丛培玮辽宁中医药大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室沈阳110847

本实验通过观察四君子丸对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织生长抑制作用及凋亡相关蛋白Bax和Bcl2表达的影响,探讨培土生金法中药复方干预肺癌的作用机制。首先在小鼠右侧腋窝皮下,接种浓度为1×107个/m L的小鼠肺癌Lewis细胞悬液0.1 m L,建... 详细信息

本实验通过观察四君子丸对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织生长抑制作用及凋亡相关蛋白Bax和Bcl2表达的影响,探讨培土生金法中药复方干预肺癌的作用机制。首先在小鼠右侧腋窝皮下,接种浓度为1×107个/m L的小鼠肺癌Lewis细胞悬液0.1 m L,建立肺癌小鼠模型,成瘤后,将小鼠分为3组:Lewis肺癌组、中药治疗组、顺铂组。中药治疗组每天采用四君子丸0.0936 g/10 g,灌胃一次,连续14 d;顺铂组每周一次腹腔注射顺铂0.05mg/10 g,持续2次。然后取材,采用TUNEL荧光染色法观察各组肿瘤组织细胞凋亡的变化,采用免疫组化和免疫印迹测定肿瘤组织Bax和Bcl2蛋白表达的变化。TUNEL法荧光染色显示:和Lewis肺癌组比较,中药治疗组、顺铂组细胞凋亡指数显著增加(P<0.01);免疫组化和免疫印迹结果显示:和Lewis肺癌组比较,中药治疗组和顺铂组Bax的蛋白表达水平显著升高,Bcl-2的蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。实验表明四君子丸能够干预Lewis肺癌小鼠模型肿瘤组织中Bax和Bcl2的表达,从而促进肿瘤细胞凋亡。

关键词：培土生金肺癌凋亡四君子丸

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脾气虚证与肾气虚证大鼠小肠组织cAMP-PKA信号转导通路变化的比较研究

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北京中医药大学学报 2018年第7期41卷 579-584页

作者：吕晓明宋囡王德山单德红杨关林贾连群辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁110847 辽宁省中医转化医学研究中心辽宁中医药大学基础医学院

目的比较脾气虚证和肾气虚证大鼠回肠组织环磷酸腺苷-蛋白激酶(cAMP-PKA)信号转导通路的变化。方法将24只雄性SD大鼠随机分为正常组、脾气虚组、肾气虚组。脾气虚采用饱食1 d、禁食2 d、3 d为1个循环,并每日游泳至力竭,连续15 d;肾气虚... 详细信息

目的比较脾气虚证和肾气虚证大鼠回肠组织环磷酸腺苷-蛋白激酶(cAMP-PKA)信号转导通路的变化。方法将24只雄性SD大鼠随机分为正常组、脾气虚组、肾气虚组。脾气虚采用饱食1 d、禁食2 d、3 d为1个循环,并每日游泳至力竭,连续15 d;肾气虚采用腹腔注射卡那霉素,用药量250 mg/kg,分2次注射,用药14 d。造模后采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组大鼠回肠组织环磷酸腺苷(cAMP)活性,实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法(Western blot)检测蛋白激酶(PKA)、糖原磷酸化酶(GP)、磷酸化酶激酶(PHK)m RNA和蛋白的表达。结果与正常组比较,脾气虚组和肾气虚组大鼠的回肠组织cAMP含量均明显降低(P<0.05或P<0.01),在脾气虚组与肾气虚组之间,脾气虚组cAMP含量降低更多(P<0.01)。与正常组比较,脾气虚组大鼠回肠组织PKA m RNA和蛋白的表达明显减弱(P<0.01),肾气虚组仅PKA蛋白表达有所下降(P<0.05)。与正常组比较,脾气虚组大鼠回肠组织PHK m RNA和蛋白的表达有明显减弱(P<0.01),肾气虚组仅PHK蛋白表达有减弱(P<0.05);并且在脾气虚组与肾气虚组之间,肾气虚组PHK m RNA表达高于脾气虚组(P<0.05)。与正常组比较,脾气虚组大鼠回肠组织GP m RNA和蛋白的表达有显著减弱(P<0.01),肾气虚组大鼠回肠组织GP m RNA表达下降(P<0.01);并且在脾气虚组与肾气虚组之间,肾气虚组GP m RNA和蛋白表达高于脾气虚组(P<0.01)。结论脾气虚证与肾气虚证大鼠回肠组织cAMP-PKA信号传导通路的变化存在差异,特别是在cAMP含量上,与正常组相比,由于脾气虚组较肾气虚组cAMP含量降低更多,推断脾气虚证出现乏力等低能量表现重于肾气虚组。

关键词：脾气虚证肾气虚证环磷酸腺苷一蛋白激酶信号转导大鼠

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苦荞麦总黄酮对软脂酸诱导的***926细胞Bcl-2表达的影响

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中国老年学杂志 2014年第19期34卷 5519-5520页

作者：柳春杨雪峰张瑞鹏赵丹玉王艳杰辽宁中医药大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁沈阳110032

目的研究苦荞麦总黄酮对软脂酸诱导的人脐静脉血管内皮细胞株(***926)Bcl-2表达的影响。方法苦荞麦总黄酮作用于高浓度软脂酸刺激下的***926细胞,RT-PCR技术检测Bcl-2 mRNA表达水平,免疫组织化学方法检测Bcl-2蛋白的表达情况。结果与对... 详细信息

目的研究苦荞麦总黄酮对软脂酸诱导的人脐静脉血管内皮细胞株(***926)Bcl-2表达的影响。方法苦荞麦总黄酮作用于高浓度软脂酸刺激下的***926细胞,RT-PCR技术检测Bcl-2 mRNA表达水平,免疫组织化学方法检测Bcl-2蛋白的表达情况。结果与对照组相比,模型组细胞Bcl-2 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组相比较,苦荞麦总黄酮组与二甲双胍组细胞Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01);苦荞麦总黄酮组与二甲双胍组之间无显著差异(P>0.05)。结论苦荞麦总黄酮可以促进***926细胞Bcl-2基因及蛋白的表达发挥抑制凋亡的作用。

关键词： EA.hy926细胞苦荞麦总黄酮软脂酸凋亡 Bcl-2

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