检索结果-内蒙古大学图书馆

中国肿瘤生物治疗杂志 2014年第6期21卷 635-639页

作者：郭隽馥苗兰英王艳杰丛培玮辽宁中医药大学教学实验中心生物技术实验室辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学基础医学院生物化学教研室辽宁沈阳110847

目的:探讨靶向TLR4基因的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)对人肺腺癌A549细胞增殖和侵袭的影响。方法:设计并合成针对TLR4基因的3条siRNA(siRNA722、siRNA1673和siRNA2560)及1条与TLR4基因无同源性的阴性对照siRNA,采用Real-time PCR和Western blotting方法测定干扰后A549细胞中TLR4 mRNA及蛋白的表达水平,筛选出有效抑制靶基因表达的siRNA并确定最佳转染条件。TLR4特异性siRNA(TLR4-siRNA)转染A549细胞后,采用CCK-8法和Transwell小室法分别检测沉默TLR4对A549细胞增殖和侵袭能力的影响。结果:与阴性对照相比,siRNA1673在转染48 h后对TLR4 mRNA和蛋白表达的抑制最为明显[(0.45±0.03)vs(0.83±0.02),(0.23±0.06)vs(0.98±0.09);均P<0.01]。TLR4-siRNA转染72 h后A549细胞增殖活性显著下降[(0.77±0.01)vs(0.98±0.11)、(0.93±0.04),P<0.01];转染48 h后,TLR4-siRNA组A549细胞的侵袭细胞数明显少于阴性对照组[(23.60±2.88)vs(59.80±5.54)个,P<0.01]。结论:TLR4-siRNA能够沉默A549细胞中TLR4基因表达,抑制A549细胞的增殖和侵袭能力,TLR4可能成为肺癌基因治疗的候选靶点。

关键词：肺癌 TLR4基因 siRNA 增殖侵袭

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山茱萸对苯扎氯铵诱导的干眼症小鼠视黄醇转运的调控作用

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吉林大学学报（医学版） 2019年第4期45卷 752-758,I0001页

作者：陈宇马贤德刘昱麟宫照东姜开运辽宁中医药大学教学实验中心综合实验室辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学教学实验中心生物技术实验室辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学研究生学院辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学附属医院辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学中医学院辽宁沈阳110847

目的:观察山茱萸对视黄醇转运的调控作用,阐明山茱萸对干眼症的治疗作用机制。方法: 60只BALB/c小鼠随机分为空白对照组,模型组,阳性对照组,低、中和高剂量山茱萸组。采用苯扎氯铵滴眼法制备干眼症小鼠模型。阳性对照组小鼠经口灌服石... 详细信息

目的:观察山茱萸对视黄醇转运的调控作用,阐明山茱萸对干眼症的治疗作用机制。方法: 60只BALB/c小鼠随机分为空白对照组,模型组,阳性对照组,低、中和高剂量山茱萸组。采用苯扎氯铵滴眼法制备干眼症小鼠模型。阳性对照组小鼠经口灌服石斛夜光丸(20 mL·kg^-1 体质量),低、中和高剂量山茱萸组小鼠分别经口灌服600、1 200和2 400 g·L^-1 山茱萸水煎剂(20 mL·kg^-1 体质量),空白对照组小鼠不处理,模型组小鼠经口灌服等量生理盐水;各给药组大鼠均每日给药1次,连续4周。泪液测试试纸法检测各组小鼠泪液分泌量,荧光素染色法检测各组小鼠泪膜破裂时间,ELISA法检测各组小鼠血清中前蛋白(PA)、视黄醇结合蛋白(RBP)和肝组织中视黄醇水平,免疫组织化学法和免疫印迹法检测各组小鼠泪腺组织中胞内视黄醇结合蛋白(CRBP)和RBP受体—维甲酸诱导蛋白6(STRA6)蛋白表达水平。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠泪液分泌量明显减少(P<0.01),泪膜破裂时间明显缩短(P<0.01);与模型组比较,阳性对照组和不同剂量山茱萸组小鼠泪液分泌量明显增加(P<0.05或 P<0.01),泪膜破裂时间明显延长(P<0.01)。与空白对照组比较,模型组小鼠血清中PA和RBP水平及肝组织中视黄醇水平明显降低(P<0.01),泪腺组织中CRBP和STRA6蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与模型组比较,阳性对照组和不同剂量山茱萸组小鼠血清中PA和RBP水平及肝组织中视黄醇水平明显升高(P<0.01),泪腺组织中CRBP和STRA6蛋白表达水平明显升高(P<0.05 或 P<0.01);与阳性对照组比较,高剂量山茱萸组小鼠血清中PA和RBP水平明显升高(P<0.05或 P<0.01),泪腺组织中CRBP和STRA6蛋白表达水平进一步升高(P<0.01)。结论:干眼症发生时,机体伴随视黄醇缺乏和视黄醇转运障碍,而酸味药山茱萸水煎液可以促进视黄醇吸收,改善机体视黄醇缺乏状态,进而调控视黄醇转运过程。

关键词：干眼症视黄醇山茱萸视黄醇转运

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四君子丸对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织细胞caspase-3表达的影响

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中国老年学杂志 2015年第23期35卷 6644-6646页

作者：丛培玮王艳杰赵丹玉郭隽馥辽宁中医药大学教学实验中心生物技术实验室辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学基础医学院生物化学教研室

目的探讨四君子丸对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织细胞凋亡相关蛋白caspase-3表达的影响。方法在小鼠右侧腋窝皮下,接种浓度为1×10~7个/ml的小鼠肺癌Lewis细胞悬液0.1 ml,模型建立成功后将小鼠分为Lewis肺癌组、中药治疗组(成瘤后灌胃四... 详细信息

目的探讨四君子丸对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织细胞凋亡相关蛋白caspase-3表达的影响。方法在小鼠右侧腋窝皮下,接种浓度为1×10~7个/ml的小鼠肺癌Lewis细胞悬液0.1 ml,模型建立成功后将小鼠分为Lewis肺癌组、中药治疗组(成瘤后灌胃四君子丸0.093 6 g/10 g,1次/d,连续14 d)、顺铂组(腹腔注射0.05 mg/10 g,1次/w,持续2次)。采用透射电镜观察各组肿瘤组织细胞形态学变化,采用Real-time PCR和免疫组化测定肿瘤组织caspase-3 mRNA及蛋白的表达水平。结果透射电镜结果显示:Lewis肺癌组细胞镜下呈现出明显恶性肿瘤细胞特征;中药治疗组镜下可见肿瘤细胞以凋亡变化为主,大量凋亡细胞、凋亡小体及坏死细胞;顺铂组镜下可见坏死细胞和典型凋亡细胞及凋亡小体。Real-time PCR及免疫组化结果共同显示:和Lewis肺癌组比较,中药治疗组和顺铂组caspase-3 mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。结论四君子丸能够显著提高Lewis肺癌小鼠模型肿瘤组织中caspase-3的表达,从而促进肿瘤细胞凋亡。

关键词：四君子丸肺癌凋亡 caspase-3

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眼针与体针对急性脑缺血再灌注损伤大鼠脑皮质脑源性神经营养因子表达的影响

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中国老年学杂志 2015年第15期35卷 4105-4107页

作者：高原王哲于丹王莹井欢潘茜赵金茹王守岩关洪全辽宁中医药大学基础医学院病理学教研室辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学教学实验中心形态实验室辽宁中医药大学基础医学院免疫与病原生物学教研室

目的分别观察眼针与体针对急性脑缺血再灌注损伤大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,探讨眼针疗法与体针疗法的效应差异性,为眼针疗法自成诊疗体系提供相关依据。方法线栓法制备SD大鼠大脑中动脉梗死(MCAO)再灌注模型。将SD大鼠随... 详细信息

目的分别观察眼针与体针对急性脑缺血再灌注损伤大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,探讨眼针疗法与体针疗法的效应差异性,为眼针疗法自成诊疗体系提供相关依据。方法线栓法制备SD大鼠大脑中动脉梗死(MCAO)再灌注模型。将SD大鼠随机分为六组,即正常对照组、假手术组、模型组、眼针穴区组、眼针穴区外组与体针组。采用Zea Longa评分法进行大鼠神经功能评分;实时定量PCR方法检测缺血再灌注3 h后脑皮质BDNF mRNA的表达;Western印迹法检测缺血再灌注3 h后脑皮质BDNF蛋白的表达。结果脑缺血再灌注3 h后,眼针穴区组和体针组大鼠神经功能缺损评分较模型组大鼠降低(P<0.01),眼针穴区组与体针组相比差异无统计学意义(P>0.05);眼针穴区组、体针组和眼针穴区外组较模型组大鼠脑皮质BDNF mRNA和蛋白质含量均升高(P<0.01),但以眼针穴区组和体针组升高较明显,眼针穴区组与体针组比较无统计学差异(P>0.05)。结论眼针与体针在改善急性脑缺血再灌注损伤中的效应相当,且两种疗法的作用机制可能与上调脑皮质BDNF表达有关。

关键词：急性脑缺血再灌注损伤脑源性神经营养因子眼针疗法体针疗法

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白色念珠菌感染对脾虚模型小鼠T细胞亚群的影响

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中国医科大学学报 2015年第12期44卷 1070-1074页

作者：马贤德张威关洪全辽宁中医药大学教学实验中心生物技术实验室沈阳110847 辽宁中医药大学附属医院神经内科沈阳110847 辽宁中医药大学基础医学院免疫病原生物教研室沈阳110847

目的探讨白色念珠菌感染后脾虚小鼠T细胞亚群的变化及其免疫机制。方法将健康SPF级昆明种小白鼠150只随机分为空白对照组(N1组,n=30)、空白感染白念组(N2组,n=40)、脾虚模型对照组(M1组,n=40)、脾虚感染白念组(M2组,n=40)。N2和M2组小... 详细信息

目的探讨白色念珠菌感染后脾虚小鼠T细胞亚群的变化及其免疫机制。方法将健康SPF级昆明种小白鼠150只随机分为空白对照组(N1组,n=30)、空白感染白念组(N2组,n=40)、脾虚模型对照组(M1组,n=40)、脾虚感染白念组(M2组,n=40)。N2和M2组小鼠经口感染白色念珠菌(2×108CFU/m L,0.2 m L/10 g体质量)。分别于染菌第7、14、21天,从各组小鼠中随机抽取10只,检测小鼠肠黏膜固有层中CD4+/CD8+T细胞百分比、小肠组织中干扰素γ(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)m RNA及蛋白的表达水平。结果与N1组比较,N2组、M1组及M2组小鼠小肠黏膜固有层中CD4+T细胞比例下降(P<0.01),CD8+T细胞比例上升(P<0.01),CD4/CD8比值显著下降(P<0.01),IFN-γ、IL-4 m RNA及蛋白的表达水平上调(P<0.01)。IFN-γ以M2组上调最为明显,而IL-4则以N2组上调最为明显。结论脾虚小鼠对白色念珠菌的易感性增加,感染的发生机制可能与机体自身对Th1/Th2平衡的调节密切相关。

关键词：脾虚证白色念珠菌感染 T细胞亚群

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绞股蓝总皂苷对紫外线照射的人皮肤细胞原癌基因表达的影响

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重庆医科大学学报 2014年第3期39卷 360-363页

作者：马月丹张燚王继慧吴景东马贤德辽宁中医药大学经济管理学院公共管理教研室沈阳110847 辽宁中医药大学附属第三医院沈阳110847 辽宁中医药大学基础医学院中医基础理论教研室沈阳110847 辽宁中医药大学学生工作处沈阳110847 辽宁中医药大学教学实验中心生物技术实验室沈阳110847

目的:探讨绞股蓝总皂苷对紫外线照射的人皮肤相关原癌基因c-Fos和c-Jun表达的影响。方法:制备空白大鼠血清和绞股蓝含药血清。将人永生化角质形成细胞(human immortal skin keratinocytes,HaCaT)40瓶随机分为4组(A^D组),每组10瓶,将人... 详细信息

目的:探讨绞股蓝总皂苷对紫外线照射的人皮肤相关原癌基因c-Fos和c-Jun表达的影响。方法:制备空白大鼠血清和绞股蓝含药血清。将人永生化角质形成细胞(human immortal skin keratinocytes,HaCaT)40瓶随机分为4组(A^D组),每组10瓶,将人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblast,HSF)60瓶随机分为6组(Ⅰ~Ⅵ组),每组10瓶。分别用中波紫外线(ultraviolet B,UVB)对HaCaT细胞B^D组、用长波紫外线(ultraviolet A,UVA)对HSF细胞Ⅱ~Ⅵ组进行照射。将HaCaT 4组细胞培养上清液分别加入HSF细胞的Ⅲ~Ⅵ组。最终制成用于检测的6组细胞,分别为空白对照组(Ⅰ组)、UVA模型组(Ⅱ组)、HaCaT培养上清液A组(Ⅲ组)、HaCaT培养上清液B组(Ⅳ组)、HaCaT培养上清液C组(Ⅴ组)、HaCaT培养上清液D组(Ⅵ组)。采用反转录聚合酶链反应(reverse transcription-PRC,RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)方法检测Ⅰ~Ⅵ组细胞cFos和c-Jun基因和蛋白的表达水平。结果:与Ⅰ组比较,Ⅱ组细胞c-Fos和c-Jun基因和蛋白的表达水平明显上调(各组P值均为0.000);与Ⅱ组比较,Ⅳ组c-Fos和c-Jun基因和蛋白表达均上调(Pc-Fos基因=0.016、Pc-Fos蛋白=0.001、Pc-Jun基因=0.005、Pc-Jun蛋白=0.000),而Ⅲ组变化不明显;与Ⅳ组比较,Ⅵ组c-Fos和c-Jun基因和蛋白表达均下调(各组P值均为0.000),而Ⅴ组变化不明显(Pc-Fos基因=0.081、Pc-Fos蛋白=0.088、Pc-Jun基因=0.109、Pc-Jun蛋白=0.026)。结论:经UVB照射的HaCaT细胞分泌细胞因子促进经UVA照射的HSF细胞原癌基因c-Fos和c-Jun基因和蛋白的表达。绞股蓝总皂苷对UVB照射HaCaT细胞培养上清液作用的UVA照射HSF细胞中原癌基因c-Fos和c-Jun的表达具有抑制作用。

关键词：绞股蓝总皂苷紫外线照射皮肤细胞原癌基因 c-Fos c-Jun

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基于血清蛋白质组学研究强迫游泳应激抑制大鼠自然杀伤细胞杀伤活性的机制

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国际免疫学杂志 2018年第3期41卷 260-264页

作者：侯殿东王德成高嵋马贤德雷萍徐铭韩晓伟关洪全辽宁中医药大学基础医学院免疫与病原生物学教研室沈阳110847 辽宁中医药大学附属第二医院检验科沈阳110034 辽宁中医药大学附属医院电检科沈阳110032 辽宁中医药大学基础医学院教学实验中心生物技术实验室沈阳110847

目的基于血清差异蛋白质组学技术研究强迫游泳应激抑制大鼠自然杀伤细胞（natural killer cells，NK）杀伤活性的机制。方法采用游泳力竭法制备应激大鼠模型，大鼠随机分为正常对照（A）组，强迫游泳（B）组，每组12只。MTT法检测NK细... 详细信息

目的基于血清差异蛋白质组学技术研究强迫游泳应激抑制大鼠自然杀伤细胞（natural killer cells，NK）杀伤活性的机制。方法采用游泳力竭法制备应激大鼠模型，大鼠随机分为正常对照（A）组，强迫游泳（B）组，每组12只。MTT法检测NK细胞杀伤活性，酶联免疫吸附方法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测血清γ-干扰素（interferon-γ，INF-γ）水平，采用iTRAQ蛋白质组学技术筛选差异表达蛋白，并采用ELISA方法验证蛋白组学检测结果的可靠性。结果与正常对照组大鼠相比，强迫游泳应激组大鼠NK细胞杀伤活性和血清IFN-γ水平降低（t＝3.68和t＝2.76，P〈0.05）。蛋白质组学检测结果表明，与正常对照组大鼠相比，强迫游泳应激大鼠111个蛋白质表达发生明显变化，其中47个蛋白质表达明显增加，54个蛋白质表达明显下降。ELISA验证结果与蛋白质组学检测结果一致。结论蛋白质组学筛选的差异表达蛋白对探讨慢性应激致免疫功能降低的机制有重要意义。

关键词：强迫游泳应激蛋白质组学自然杀伤细胞

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