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中国老年学杂志 2014年第6期34卷 1583-1585页

作者：于洋赵丹玉王艳杰冯晓帆高海宁杨小静柳春辽宁医学院生理学教研室辽宁中医药大学基础医学院生化教研室辽宁沈阳110032

目的研究软脂酸(PA)对***926内皮细胞一氧化氮(NO)合成和内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)表达的影响及六味地黄丸(LWDHP)含药血清的干预作用。方法将培养的***926细胞分组,采用甘油醛-3-磷酸脱氢酶(NAPDH)依赖性硝酸盐还原酶法测定细胞裂解... 详细信息

目的研究软脂酸(PA)对***926内皮细胞一氧化氮(NO)合成和内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)表达的影响及六味地黄丸(LWDHP)含药血清的干预作用。方法将培养的***926细胞分组,采用甘油醛-3-磷酸脱氢酶(NAPDH)依赖性硝酸盐还原酶法测定细胞裂解上清液NO含量;RT-PCR及Western印迹检测细胞内eNOS mRNA和蛋白的表达。结果 PA损伤的细胞裂解液中NO含量减少,与正常对照组比较差异显著(P<0.01)。2.5%LWDHP含药血清组NO含量进一步减少,5%、10%LWDHP含药血清组及二甲双胍(MET)组均能显著增加细胞裂解液中NO含量,与PA组比较有差异显著(P<0.01),但三者之间互相比较无显著性差异(P>0.05)。同时PA组细胞内eNOS mRNA和蛋白的表达显著减少(P<0.01),LWDHP和MET组细胞内eNOS mRNA和蛋白表达量增加(P<0.01)。结论 LWDHP含药血清能够刺激PA损伤的***926细胞eNOS mRNA和蛋白的表达,从而有效促进NO的合成,发挥其保护作用。

关键词：软脂酸六味地黄丸 EA.hy926内皮细胞一氧化氮内皮型一氧化氮合成酶

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六味地黄丸含药血清对软脂酸诱导人脐静脉内皮细胞损伤抗氧化的机制

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中国老年学杂志 2014年第10期34卷 2794-2796页

作者：于洋赵丹玉王艳杰冯晓帆杨雪峰张瑞鹏柳春辽宁医学院生理学教研室辽宁中医药大学基础医学院生化教研室辽宁沈阳110032

目的探讨六味地黄丸(LWDHP)含药血清对软脂酸(PA)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤抗氧化的保护作用及机制。方法噻唑蓝(MTT)法观察HUVEC的存活率;氮蓝四唑(NBT)显色法测定细胞裂解上清液总超氧化物歧化酶(SOD)的活力;硫代巴比妥酸(TBA... 详细信息

目的探讨六味地黄丸(LWDHP)含药血清对软脂酸(PA)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤抗氧化的保护作用及机制。方法噻唑蓝(MTT)法观察HUVEC的存活率;氮蓝四唑(NBT)显色法测定细胞裂解上清液总超氧化物歧化酶(SOD)的活力;硫代巴比妥酸(TBA)反应法检测细胞裂解上清液丙二醛(MDA)的含量;RT-PCR及Western印迹检测细胞内NADPH氧化酶4(NOX4)mRNA和蛋白的表达。结果 LWDHP含药血清能促进PA损伤的HUVEC增殖,增加细胞裂解上清液总SOD活力,降低细胞内MDA含量,减少NOX4 mRNA和蛋白的表达。结论 LWDHP含药血清能够对PA诱导的HUVEC氧化损伤发挥保护作用,此作用可能与LWDHP降低HUVEC内NOX4的表达量有关。

关键词：六味地黄丸软脂酸人脐静脉内皮细胞超氧化物歧化酶丙二醛 NADPH氧化酶4

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匹维溴胺对腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠组织AQP3表达影响

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第三军医大学学报 2011年第3期33卷 233-236页

作者：刘慧慧王艳杰刘旭东关洪全柴纪严赵金茹王德山辽宁中医药大学基础医学院生理学教研室沈阳110032 辽宁中医药大学基础医学院生物化学教研室沈阳110032 辽宁中医药大学基础医学院免疫微生物学教研室沈阳110032 辽宁中医药大学实验中心沈阳110032

目的观察匹维溴胺对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)模型大鼠血清以及结肠组织血管活性肠肽(vasoactiveintestinal peptide,VIP)含量、结肠组织水通道蛋白3(aquaporin 3,AQP3)表达的影响,探讨其治疗D-IBS的作用机制。方法采用慢性应激与束缚... 详细信息

目的观察匹维溴胺对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)模型大鼠血清以及结肠组织血管活性肠肽(vasoactiveintestinal peptide,VIP)含量、结肠组织水通道蛋白3(aquaporin 3,AQP3)表达的影响,探讨其治疗D-IBS的作用机制。方法采用慢性应激与束缚相结合方法建立D-IBS大鼠模型。采用ELISA法检测VIP含量;采用Real time-PCR法和SABC免疫组化法检测AQP3的表达。结果在血清和结肠组织中VIP的含量,与对照组[(3.092±0.613)ng/ml,(3.811±0.275)ng/ml]比较,模型组[(10.460±1.666)ng/ml,(4.495±0.341)ng/ml]与匹维溴胺组[(5.639±1.163)ng/ml,(4.063±0.534)ng/ml]均升高(P<0.05),尤以模型组升高的更为明显(P<0.01);两组AQP3的表达均下调(P<0.01),尤以模型组AQP3蛋白表达下调显著。结论匹维溴胺治疗D-IBS的作用机制之一,可能与抑制结肠组织中VIP分泌和上调AQP3表达有关。

关键词：腹泻型肠易激综合征血管活性肠肽水通道蛋白3 匹维溴胺

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神经生长因子及抑制剂K252α和UO126对颗粒细胞增殖及PCNA蛋白表达的影响

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重庆医科大学学报 2015年第2期40卷 271-274页

作者：于洋赵丹玉王艳杰高海宁杨小静柳春辽宁医学院生理学教研室锦川121001 辽宁中医药大学基础医学院生化教研室沈阳110032

目的:观察神经生长因子(nerve growth factor,NGF)及抑制剂K252α、UO126对颗粒细胞增殖情况以及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)蛋白表达的影响,同时探索其作用机理。方法:用NGF及K252α、UO126作用培养的小... 详细信息

目的:观察神经生长因子(nerve growth factor,NGF)及抑制剂K252α、UO126对颗粒细胞增殖情况以及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)蛋白表达的影响,同时探索其作用机理。方法:用NGF及K252α、UO126作用培养的小鼠卵巢腔前颗粒细胞,采用2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐(cell counting Kit-8,CCK-8)法实验分析颗粒细胞在体外培养中的增殖情况,应用Western blot方法检测PCNA表达的改变。结果:NGF组(A值1.58)明显促进颗粒细胞增殖,与对照组(A值1.31)比较差异有统计学意义(PNGF=0.000),而应用K252α、UO126之后,颗粒细胞的增殖下降,K252α组(A值1.21),NGF+K252α组(A值1.19)、NGF+UO126组(A值1.14)比对照组明显减少,差异具有统计学意义(PK252α=0.001,PNGF+K252α=0.001,PNGF+UO126=0.000)。同时NGF组PCNA相对表达量为5.21,与对照组(表达量1.65)比较差异有统计学意义(PNGF=0.000);而K252α组、NGF+K252α组、NGF+UO126组PCNA相对表达量分别为1.48、0.84、0.41,与对照组比较有统计学意义(PK252α=0.02,PNGF+K252α=0.000,PNGF+UO126=0.000);同时与NGF组比较,差异均有统计学意义(PK252α=0.000,PNGF+K252α=0.000,PNGF+UO126=0.000)。结论:NGF促进颗粒细胞增殖的同时也刺激PCNA表达增高;抑制剂能够抑制细胞的增殖,其机制可能与抑制PCNA的表达有关。

关键词：神经生长因子 K252α UO126 细胞增殖增殖细胞核抗原

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眼针对腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠水通道蛋白3表达的影响

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世界华人消化杂志 2011年第9期19卷 899-904页

作者：王艳杰刘慧慧刘旭东柴纪严赵金茹王德山辽宁中医药大学基础医学院生物化学教研室辽宁省沈阳市110032 辽宁中医药大学基础医学院生理教研室辽宁省沈阳市110032 辽宁中医药大学基础医学院教学实验中心辽宁省沈阳市110032

目的:研究眼针对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)模型大鼠结肠血管活性肠肽(VIP)和水通道蛋白3(AQP3)表达的影响,探讨眼针对D-IBS模型大鼠结肠水液代谢的调控作用和机制.方法:SPF级Wistar大鼠30只,随机分为对照组、D-IBS模型组和眼针组,每组1... 详细信息

目的:研究眼针对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)模型大鼠结肠血管活性肠肽(VIP)和水通道蛋白3(AQP3)表达的影响,探讨眼针对D-IBS模型大鼠结肠水液代谢的调控作用和机制.方法:SPF级Wistar大鼠30只,随机分为对照组、D-IBS模型组和眼针组,每组10只.采用慢性应激结合束缚方法建立D-IBS大鼠模型.采用RT-PCR检测结肠VIP的mRNA表达水平变化;采用Realtime-PCR法检测AQP3的mRNA表达水平变化,采用SABC免疫组织化学法检测结肠AQP3的蛋白表达水平变化.结果:与对照组比较,D-IBS模型组结肠VIP的mRNA表达水平显著升高(0.94±0.07vs0.64±0.15,P<0.01),而结肠AQP3的mRNA和蛋白表达水平显著降低(1.09±0.09vs7.02±1.25;0.284±0.020vs0.601±0.027,均P<0.01).与D-IBS模型组比较,眼针组结肠VIP的mRNA表达水平显著降低(0.78±0.15vs0.94±0.07,P<0.01),而结肠AQP3的mRNA和蛋白表达水平显著升高(2.33±0.66vs1.09±0.09;0.374±0.03vs10.284±0.020,均P<0.01).结论:通过抑制结肠中VIP的表达和分泌及升高AQP3的表达,调控结肠水液代谢可能是眼针治疗D-IBS的作用机制之一.

关键词：眼针腹泻型肠易激综合征血管活性肠肽水通道蛋白3

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神经生长因子对颗粒细胞增殖检测方法的探讨

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中国现代医学杂志 2015年第16期25卷 15-18页

作者：于洋柳春辽宁医学院基础医学院生理学教研室辽宁锦州121001 辽宁中医药大学基础医学院生化教研室辽宁沈阳110032

目的为了解神经生长因子(NGF)对小鼠卵巢腔前颗粒细胞促增殖情况并探索其机制,同时建立方便灵敏、无污染和毒性小的细胞增殖检测方法。方法用NGF刺激培养的小鼠卵巢腔前颗粒细胞,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验分析,溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd... 详细信息

目的为了解神经生长因子(NGF)对小鼠卵巢腔前颗粒细胞促增殖情况并探索其机制,同时建立方便灵敏、无污染和毒性小的细胞增殖检测方法。方法用NGF刺激培养的小鼠卵巢腔前颗粒细胞,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验分析,溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)掺入标记,免疫荧光技术检测颗粒细胞在体外培养中的增殖情况和Brd U标记指数。结果 NGF明显促进颗粒细胞增殖,并且具有一定的时效关系。荧光显微镜下可见Brd U阳性标记的颗粒细胞,提示细胞处于增殖期。NGF组的Brd U标记指数为45.03%,明显高于对照组20.65%(P<0.01)。NGF使增殖期的细胞显著增多及增殖指数明显升高。结论该研究证实NGF能够促进颗粒细胞增殖,CCK-8分析和Brd U标记是高效、灵敏的标记腔前颗粒细胞增殖的方法,NGF促进颗粒细胞增殖与促进颗粒细胞DNA的合成有关系。

关键词：神经生长因子颗粒细胞细胞计数试剂盒-8 溴脱氧尿嘧啶核苷增殖

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下丘脑cAMP/PKA/PhK/GP通路在脾气虚食少腹胀中的作用研究

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中国中医基础医学杂志 2020年第2期26卷 177-180页

作者：于化新马丹刘旭东刘慧慧王凌志王路单德红王德山辽宁中医药大学基础医学院生理与心理教研室沈阳110847

目的:通过观察下丘脑环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate, cAMP)/蛋白激酶A(protein kinase, PKA)/磷酸化蛋白激酶(phosphorylase kinase, PhK)/糖原磷酸化酶(glycogen phosphorylase, GP)通路的变化,从中枢糖原分解方面探讨脾气虚食少腹胀发生机制。方法:16只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组和脾气虚组(模型组)各8只,代谢笼计量大鼠24 h进食水量,炭末推进法检测大鼠的胃残留率和小肠推进率,透射电镜观察下丘脑糖原颗粒情况,ELISA法检测下丘脑ATP、cAMP和PKA水平,Western blot法检测下丘脑PhK和GP表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠进食水量减少,胃残留率增加,小肠推进率下降,下丘脑ATP、cAMP和PKA水平下降,下丘脑PhK、GP表达降低,差异有统计学意义。结论:脾气虚食少腹胀与cAMP-PKA-PhK-GP通路抑制所导致的下丘脑能量供给不足有关。

关键词：脾气虚食少胃肠蠕动糖原下丘脑

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眼针与体针对急性脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织TNF-α表达的差异研究

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中国生化药物杂志 2014年第1期34卷 22-25页

作者：井欢于丹高原王哲王莹潘茜关洪全辽宁中医药大学基础医学院病理学教研室辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学基础医学院免疫与病原生物学教研室辽宁沈阳110847

目的分别观察眼针与体针疗法对缺血再灌注损伤24 h后大鼠脑组织中TNF—α表达的影响,探讨眼针与体针不同疗法对免疫效应表达的差异,为眼针疗法的临床应用提供实验依据。方法线栓法制备SD大鼠大脑中动脉梗死(middle cerebral artery occl... 详细信息

目的分别观察眼针与体针疗法对缺血再灌注损伤24 h后大鼠脑组织中TNF—α表达的影响,探讨眼针与体针不同疗法对免疫效应表达的差异,为眼针疗法的临床应用提供实验依据。方法线栓法制备SD大鼠大脑中动脉梗死(middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注模型。将48只SD大鼠随机分为正常对照组、体针组、模型组、假手术组、眼针穴区组与眼针穴区外组(n=8)。模型组、眼针穴区组、眼针穴区外组与体针组均采用改良的线栓法制备SD大鼠大脑中动脉梗死(middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注模型。采用ZeaLonga评分法进行大鼠神经功能评分;ELISA方法检测缺血再灌注24 h后大鼠血清TNF—α含量,实时定量PCR方法检测缺血再灌注24 h后大鼠脑皮质TNF—αmRNA的表达,Western Blot法检测缺血再灌注24 h后大鼠脑皮质TNF—α蛋白的表达。结果脑缺血再灌注24 h后,眼针穴区组和体针组大鼠神经功能缺损评分均较模型组大鼠评分降低(P<0.01),但两者相比无统计学差异,眼针穴区外组大鼠评分与模型组相比较无统计学差异;眼针穴区组、体针组和和眼针穴区外组大鼠血清TNF—α含量均较模型组显著减少(P<0.01),但以眼针穴区组与体针组减少更明显,眼针穴区组与体针组比较无统计学差异;眼针穴区组、体针组和眼针穴区外组大鼠脑组织TNF—αmRNA含量和蛋白质含量均较模型组显著下调(P<0.01),眼针穴区组与体针组比较无统计学差异。结论眼针与体针在改善急性脑缺血再灌注损伤中的免疫效应相当,且两种疗法的作用机制可能均与脑组织TNF—α的表达下调有关。

关键词：急性脑缺血再灌注损伤肿瘤坏死因子眼针疗法体针疗法

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眼针与体针对急性脑缺血再灌注损伤大鼠脑皮质脑源性神经营养因子表达的影响

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中国老年学杂志 2015年第15期35卷 4105-4107页

作者：高原王哲于丹王莹井欢潘茜赵金茹王守岩关洪全辽宁中医药大学基础医学院病理学教研室辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学教学实验中心形态实验室辽宁中医药大学基础医学院免疫与病原生物学教研室

目的分别观察眼针与体针对急性脑缺血再灌注损伤大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,探讨眼针疗法与体针疗法的效应差异性,为眼针疗法自成诊疗体系提供相关依据。方法线栓法制备SD大鼠大脑中动脉梗死(MCAO)再灌注模型。将SD大鼠随... 详细信息

目的分别观察眼针与体针对急性脑缺血再灌注损伤大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,探讨眼针疗法与体针疗法的效应差异性,为眼针疗法自成诊疗体系提供相关依据。方法线栓法制备SD大鼠大脑中动脉梗死(MCAO)再灌注模型。将SD大鼠随机分为六组,即正常对照组、假手术组、模型组、眼针穴区组、眼针穴区外组与体针组。采用Zea Longa评分法进行大鼠神经功能评分;实时定量PCR方法检测缺血再灌注3 h后脑皮质BDNF mRNA的表达;Western印迹法检测缺血再灌注3 h后脑皮质BDNF蛋白的表达。结果脑缺血再灌注3 h后,眼针穴区组和体针组大鼠神经功能缺损评分较模型组大鼠降低(P<0.01),眼针穴区组与体针组相比差异无统计学意义(P>0.05);眼针穴区组、体针组和眼针穴区外组较模型组大鼠脑皮质BDNF mRNA和蛋白质含量均升高(P<0.01),但以眼针穴区组和体针组升高较明显,眼针穴区组与体针组比较无统计学差异(P>0.05)。结论眼针与体针在改善急性脑缺血再灌注损伤中的效应相当,且两种疗法的作用机制可能与上调脑皮质BDNF表达有关。

关键词：急性脑缺血再灌注损伤脑源性神经营养因子眼针疗法体针疗法

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脾气虚模型大鼠海马与下丘脑神经元线粒体分裂因子和线粒体分裂蛋白1的表达

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中国中西医结合杂志 2017年第11期37卷 1356-1360页

作者：刘文俊陈伟仁宋囡刘子怡柴纪严王德山单德红辽宁中医药大学教学实验中心机能实验室沈阳110847 辽宁中医药大学研究生学院沈阳110847 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室沈阳110847 辽宁中医药大学基础医学院生理与心理教研室沈阳110847

目的观察脾气虚模型大鼠海马、下丘脑神经元线粒体形态学变化及其分裂情况,探讨脾气虚的发生机制。方法 20只SPF级雄性SD大鼠随机分为非脾气虚组和脾气虚模型组,每组10只。脾气虚模型组采用饮食失节+劳倦方法制脾气虚模型。透射电镜观... 详细信息

目的观察脾气虚模型大鼠海马、下丘脑神经元线粒体形态学变化及其分裂情况,探讨脾气虚的发生机制。方法 20只SPF级雄性SD大鼠随机分为非脾气虚组和脾气虚模型组,每组10只。脾气虚模型组采用饮食失节+劳倦方法制脾气虚模型。透射电镜观察海马CA1区及下丘脑神经元线粒体的形态学变化;ELISA法检测海马和下丘脑组织ATP含量;Western blot法检测上述组织线粒体分裂因子(MFF)和线粒体分裂蛋白1(Fis1)的表达。结果非脾气虚组线粒体较丰富,形态基本正常,而脾气虚模型组线粒体数量减少,其中海马CA1区神经元线粒体出现肿胀、嵴减少,甚至空泡化,而下丘脑还存在较多线粒体自噬现象。与非脾气虚组比较,脾气虚模型组体重、进食量、饮水量、运动距离、站立次数以及前肢抓力均下降,海马和下丘脑神经元ATP含量降低,MFF及Fis1蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论海马和下丘脑相关神经元线粒体功能低下及其促分裂成分表达增加与脾气虚的发生密切相关。

关键词：脾气虚线粒体线粒体分裂因子线粒体分裂蛋白1 海马下丘脑

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