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神经生长因子及抑制剂K252α和UO126对颗粒细胞增殖及PCNA蛋白表达的影响

重庆医科大学学报 2015年第2期40卷 271-274页

作者：于洋赵丹玉王艳杰高海宁杨小静柳春辽宁医学院生理学教研室锦川121001 辽宁中医药大学基础医学院生化教研室沈阳110032

目的:观察神经生长因子(nerve growth factor,NGF)及抑制剂K252α、UO126对颗粒细胞增殖情况以及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)蛋白表达的影响,同时探索其作用机理。方法:用NGF及K252α、UO126作用培养的小... 详细信息

目的:观察神经生长因子(nerve growth factor,NGF)及抑制剂K252α、UO126对颗粒细胞增殖情况以及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)蛋白表达的影响,同时探索其作用机理。方法:用NGF及K252α、UO126作用培养的小鼠卵巢腔前颗粒细胞,采用2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐(cell counting Kit-8,CCK-8)法实验分析颗粒细胞在体外培养中的增殖情况,应用Western blot方法检测PCNA表达的改变。结果:NGF组(A值1.58)明显促进颗粒细胞增殖,与对照组(A值1.31)比较差异有统计学意义(PNGF=0.000),而应用K252α、UO126之后,颗粒细胞的增殖下降,K252α组(A值1.21),NGF+K252α组(A值1.19)、NGF+UO126组(A值1.14)比对照组明显减少,差异具有统计学意义(PK252α=0.001,PNGF+K252α=0.001,PNGF+UO126=0.000)。同时NGF组PCNA相对表达量为5.21,与对照组(表达量1.65)比较差异有统计学意义(PNGF=0.000);而K252α组、NGF+K252α组、NGF+UO126组PCNA相对表达量分别为1.48、0.84、0.41,与对照组比较有统计学意义(PK252α=0.02,PNGF+K252α=0.000,PNGF+UO126=0.000);同时与NGF组比较,差异均有统计学意义(PK252α=0.000,PNGF+K252α=0.000,PNGF+UO126=0.000)。结论:NGF促进颗粒细胞增殖的同时也刺激PCNA表达增高;抑制剂能够抑制细胞的增殖,其机制可能与抑制PCNA的表达有关。

关键词：神经生长因子 K252α UO126 细胞增殖增殖细胞核抗原

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眼针与体针对急性脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织TNF-α表达的差异研究

引用

中国生化药物杂志 2014年第1期34卷 22-25页

作者：井欢于丹高原王哲王莹潘茜关洪全辽宁中医药大学基础医学院病理学教研室辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学基础医学院免疫与病原生物学教研室辽宁沈阳110847

目的分别观察眼针与体针疗法对缺血再灌注损伤24 h后大鼠脑组织中TNF—α表达的影响,探讨眼针与体针不同疗法对免疫效应表达的差异,为眼针疗法的临床应用提供实验依据。方法线栓法制备SD大鼠大脑中动脉梗死(middle cerebral artery occl... 详细信息

目的分别观察眼针与体针疗法对缺血再灌注损伤24 h后大鼠脑组织中TNF—α表达的影响,探讨眼针与体针不同疗法对免疫效应表达的差异,为眼针疗法的临床应用提供实验依据。方法线栓法制备SD大鼠大脑中动脉梗死(middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注模型。将48只SD大鼠随机分为正常对照组、体针组、模型组、假手术组、眼针穴区组与眼针穴区外组(n=8)。模型组、眼针穴区组、眼针穴区外组与体针组均采用改良的线栓法制备SD大鼠大脑中动脉梗死(middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注模型。采用ZeaLonga评分法进行大鼠神经功能评分;ELISA方法检测缺血再灌注24 h后大鼠血清TNF—α含量,实时定量PCR方法检测缺血再灌注24 h后大鼠脑皮质TNF—αmRNA的表达,Western Blot法检测缺血再灌注24 h后大鼠脑皮质TNF—α蛋白的表达。结果脑缺血再灌注24 h后,眼针穴区组和体针组大鼠神经功能缺损评分均较模型组大鼠评分降低(P<0.01),但两者相比无统计学差异,眼针穴区外组大鼠评分与模型组相比较无统计学差异;眼针穴区组、体针组和和眼针穴区外组大鼠血清TNF—α含量均较模型组显著减少(P<0.01),但以眼针穴区组与体针组减少更明显,眼针穴区组与体针组比较无统计学差异;眼针穴区组、体针组和眼针穴区外组大鼠脑组织TNF—αmRNA含量和蛋白质含量均较模型组显著下调(P<0.01),眼针穴区组与体针组比较无统计学差异。结论眼针与体针在改善急性脑缺血再灌注损伤中的免疫效应相当,且两种疗法的作用机制可能均与脑组织TNF—α的表达下调有关。

关键词：急性脑缺血再灌注损伤肿瘤坏死因子眼针疗法体针疗法

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“胃家实”的内涵及其相关证候

引用

中国中医基础医学杂志 2017年第1期23卷 42-43页

作者：朱辉辽宁中医药大学基础医学院伤寒论教研室沈阳110032

《伤寒论》成书年代久远,虽经后世注家的释义,仍有令人费解之处。故时至今日,对原文反复推敲、前后互参,仍是领悟其中奥旨的有效途径。故就阳明病提纲证"胃家实"的含义及其所涵盖的证候进行探讨,通过文字与医理双重层面的分析... 详细信息

《伤寒论》成书年代久远,虽经后世注家的释义,仍有令人费解之处。故时至今日,对原文反复推敲、前后互参,仍是领悟其中奥旨的有效途径。故就阳明病提纲证"胃家实"的含义及其所涵盖的证候进行探讨,通过文字与医理双重层面的分析,结合张仲景在阳明病篇的行文特点而得出结论,即"胃家实"是阳明腑实证病机特点的反映,是张仲景对阳明病关键证候的概括之言,其作为阳明病提纲起到了执简驭繁的纲领性作用。

关键词：《伤寒论》阳明病胃家实腑实证下法

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论相须与相使

引用

辽宁中医杂志 2008年第11期35卷 1659-1660页

作者：姜开运辽宁中医药大学基础医学院中药教研室辽宁沈阳110032

“相须”、“相使”首见于《神农本草经》,序录中云:“药有阴阳配合,子母兄弟,……有单行者,有相须者,有相使者,……凡此七情,合和视之。当用相须相使者良……”其中没有对相须、相使的含义作出具体解释,只提到临床应用的原则—“当用... 详细信息

“相须”、“相使”首见于《神农本草经》,序录中云:“药有阴阳配合,子母兄弟,……有单行者,有相须者,有相使者,……凡此七情,合和视之。当用相须相使者良……”其中没有对相须、相使的含义作出具体解释,只提到临床应用的原则—“当用相须、相使者良”。“当用”不外乎使治疗效应增强或使毒副作用降低两种情况。[第一段]

关键词：相须相使中药配伍

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绞股蓝总皂苷对光老化HaCaT细胞中p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA表达的抑制作用

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吉林大学学报（医学版） 2012年第6期38卷 1147-1151页

作者：陶冶张小卿吴琼吴景东辽宁中医药大学基础医学院中医基础教研室辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学针灸推拿学院针灸教研室辽宁沈阳110847 中国医科大学附属盛京医院小儿神经内科辽宁沈阳110004 辽宁中医药大学学生工作处辽宁沈阳110847

目的:观察绞股蓝总皂苷含药血清对光老化HaCaT细胞p38促分裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)蛋白和Jun基因(c-Jun)mRNA表达的影响,探讨绞股蓝总皂苷含药血清抗皮肤光老化的作用机制。方法:采用中波紫外线(UVB)照射建立光老化HaCaT细胞模型,加... 详细信息

目的:观察绞股蓝总皂苷含药血清对光老化HaCaT细胞p38促分裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)蛋白和Jun基因(c-Jun)mRNA表达的影响,探讨绞股蓝总皂苷含药血清抗皮肤光老化的作用机制。方法:采用中波紫外线(UVB)照射建立光老化HaCaT细胞模型,加低、中、高剂量绞股蓝总皂苷含药血清于光老化HaCaT细胞模型培养液中培养,并设空白对照组、空白血清组和UVB模型组。采用Western blotting和RT-PCR方法检测各组细胞p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA的表达水平。结果:与空白对照组比较,UVB模型组细胞p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA表达显著上调,差异有统计学意义(P<0.01);与UVB模型组比较,低、中和高剂量含药血清组细胞p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA表达显著下调,差异有统计学意义(P<0.01);与空白血清组比较,低、中和高剂量含药血清组细胞p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA表达下降(P<0.01)。结论:绞股蓝总皂苷含药血清可能通过抑制p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA表达抑制皮肤光老化。

关键词：光老化绞股蓝总皂苷角质形成细胞中波紫外线 p38促分裂原活化蛋白激酶 Jun基因

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脾气虚模型大鼠海马与下丘脑神经元线粒体分裂因子和线粒体分裂蛋白1的表达

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中国中西医结合杂志 2017年第11期37卷 1356-1360页

作者：刘文俊陈伟仁宋囡刘子怡柴纪严王德山单德红辽宁中医药大学教学实验中心机能实验室沈阳110847 辽宁中医药大学研究生学院沈阳110847 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室沈阳110847 辽宁中医药大学基础医学院生理与心理教研室沈阳110847

目的观察脾气虚模型大鼠海马、下丘脑神经元线粒体形态学变化及其分裂情况,探讨脾气虚的发生机制。方法 20只SPF级雄性SD大鼠随机分为非脾气虚组和脾气虚模型组,每组10只。脾气虚模型组采用饮食失节+劳倦方法制脾气虚模型。透射电镜观... 详细信息

目的观察脾气虚模型大鼠海马、下丘脑神经元线粒体形态学变化及其分裂情况,探讨脾气虚的发生机制。方法 20只SPF级雄性SD大鼠随机分为非脾气虚组和脾气虚模型组,每组10只。脾气虚模型组采用饮食失节+劳倦方法制脾气虚模型。透射电镜观察海马CA1区及下丘脑神经元线粒体的形态学变化;ELISA法检测海马和下丘脑组织ATP含量;Western blot法检测上述组织线粒体分裂因子(MFF)和线粒体分裂蛋白1(Fis1)的表达。结果非脾气虚组线粒体较丰富,形态基本正常,而脾气虚模型组线粒体数量减少,其中海马CA1区神经元线粒体出现肿胀、嵴减少,甚至空泡化,而下丘脑还存在较多线粒体自噬现象。与非脾气虚组比较,脾气虚模型组体重、进食量、饮水量、运动距离、站立次数以及前肢抓力均下降,海马和下丘脑神经元ATP含量降低,MFF及Fis1蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论海马和下丘脑相关神经元线粒体功能低下及其促分裂成分表达增加与脾气虚的发生密切相关。

关键词：脾气虚线粒体线粒体分裂因子线粒体分裂蛋白1 海马下丘脑

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神经生长因子对颗粒细胞增殖检测方法的探讨

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中国现代医学杂志 2015年第16期25卷 15-18页

作者：于洋柳春辽宁医学院基础医学院生理学教研室辽宁锦州121001 辽宁中医药大学基础医学院生化教研室辽宁沈阳110032

目的为了解神经生长因子(NGF)对小鼠卵巢腔前颗粒细胞促增殖情况并探索其机制,同时建立方便灵敏、无污染和毒性小的细胞增殖检测方法。方法用NGF刺激培养的小鼠卵巢腔前颗粒细胞,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验分析,溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd... 详细信息

目的为了解神经生长因子(NGF)对小鼠卵巢腔前颗粒细胞促增殖情况并探索其机制,同时建立方便灵敏、无污染和毒性小的细胞增殖检测方法。方法用NGF刺激培养的小鼠卵巢腔前颗粒细胞,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验分析,溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)掺入标记,免疫荧光技术检测颗粒细胞在体外培养中的增殖情况和Brd U标记指数。结果 NGF明显促进颗粒细胞增殖,并且具有一定的时效关系。荧光显微镜下可见Brd U阳性标记的颗粒细胞,提示细胞处于增殖期。NGF组的Brd U标记指数为45.03%,明显高于对照组20.65%(P<0.01)。NGF使增殖期的细胞显著增多及增殖指数明显升高。结论该研究证实NGF能够促进颗粒细胞增殖,CCK-8分析和Brd U标记是高效、灵敏的标记腔前颗粒细胞增殖的方法,NGF促进颗粒细胞增殖与促进颗粒细胞DNA的合成有关系。

关键词：神经生长因子颗粒细胞细胞计数试剂盒-8 溴脱氧尿嘧啶核苷增殖

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siRNA沉默TLR4表达对人肺腺癌A549细胞增殖和侵袭的影响

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中国肿瘤生物治疗杂志 2014年第6期21卷 635-639页

作者：郭隽馥苗兰英王艳杰丛培玮辽宁中医药大学教学实验中心生物技术实验室辽宁沈阳110847 辽宁中医药大学基础医学院生物化学教研室辽宁沈阳110847

目的:探讨靶向TLR4基因的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)对人肺腺癌A549细胞增殖和侵袭的影响。方法:设计并合成针对TLR4基因的3条siRNA(siRNA722、siRNA1673和siRNA2560)及1条与TLR4基因无同源性的阴性对照siRNA,采用Real-time PCR和Western blotting方法测定干扰后A549细胞中TLR4 mRNA及蛋白的表达水平,筛选出有效抑制靶基因表达的siRNA并确定最佳转染条件。TLR4特异性siRNA(TLR4-siRNA)转染A549细胞后,采用CCK-8法和Transwell小室法分别检测沉默TLR4对A549细胞增殖和侵袭能力的影响。结果:与阴性对照相比,siRNA1673在转染48 h后对TLR4 mRNA和蛋白表达的抑制最为明显[(0.45±0.03)vs(0.83±0.02),(0.23±0.06)vs(0.98±0.09);均P<0.01]。TLR4-siRNA转染72 h后A549细胞增殖活性显著下降[(0.77±0.01)vs(0.98±0.11)、(0.93±0.04),P<0.01];转染48 h后,TLR4-siRNA组A549细胞的侵袭细胞数明显少于阴性对照组[(23.60±2.88)vs(59.80±5.54)个,P<0.01]。结论:TLR4-siRNA能够沉默A549细胞中TLR4基因表达,抑制A549细胞的增殖和侵袭能力,TLR4可能成为肺癌基因治疗的候选靶点。

关键词：肺癌 TLR4基因 siRNA 增殖侵袭

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绞股蓝总皂苷对紫外线照射的人皮肤细胞原癌基因表达的影响

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重庆医科大学学报 2014年第3期39卷 360-363页

作者：马月丹张燚王继慧吴景东马贤德辽宁中医药大学经济管理学院公共管理教研室沈阳110847 辽宁中医药大学附属第三医院沈阳110847 辽宁中医药大学基础医学院中医基础理论教研室沈阳110847 辽宁中医药大学学生工作处沈阳110847 辽宁中医药大学教学实验中心生物技术实验室沈阳110847

目的:探讨绞股蓝总皂苷对紫外线照射的人皮肤相关原癌基因c-Fos和c-Jun表达的影响。方法:制备空白大鼠血清和绞股蓝含药血清。将人永生化角质形成细胞(human immortal skin keratinocytes,HaCaT)40瓶随机分为4组(A^D组),每组10瓶,将人... 详细信息

目的:探讨绞股蓝总皂苷对紫外线照射的人皮肤相关原癌基因c-Fos和c-Jun表达的影响。方法:制备空白大鼠血清和绞股蓝含药血清。将人永生化角质形成细胞(human immortal skin keratinocytes,HaCaT)40瓶随机分为4组(A^D组),每组10瓶,将人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblast,HSF)60瓶随机分为6组(Ⅰ~Ⅵ组),每组10瓶。分别用中波紫外线(ultraviolet B,UVB)对HaCaT细胞B^D组、用长波紫外线(ultraviolet A,UVA)对HSF细胞Ⅱ~Ⅵ组进行照射。将HaCaT 4组细胞培养上清液分别加入HSF细胞的Ⅲ~Ⅵ组。最终制成用于检测的6组细胞,分别为空白对照组(Ⅰ组)、UVA模型组(Ⅱ组)、HaCaT培养上清液A组(Ⅲ组)、HaCaT培养上清液B组(Ⅳ组)、HaCaT培养上清液C组(Ⅴ组)、HaCaT培养上清液D组(Ⅵ组)。采用反转录聚合酶链反应(reverse transcription-PRC,RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)方法检测Ⅰ~Ⅵ组细胞cFos和c-Jun基因和蛋白的表达水平。结果:与Ⅰ组比较,Ⅱ组细胞c-Fos和c-Jun基因和蛋白的表达水平明显上调(各组P值均为0.000);与Ⅱ组比较,Ⅳ组c-Fos和c-Jun基因和蛋白表达均上调(Pc-Fos基因=0.016、Pc-Fos蛋白=0.001、Pc-Jun基因=0.005、Pc-Jun蛋白=0.000),而Ⅲ组变化不明显;与Ⅳ组比较,Ⅵ组c-Fos和c-Jun基因和蛋白表达均下调(各组P值均为0.000),而Ⅴ组变化不明显(Pc-Fos基因=0.081、Pc-Fos蛋白=0.088、Pc-Jun基因=0.109、Pc-Jun蛋白=0.026)。结论:经UVB照射的HaCaT细胞分泌细胞因子促进经UVA照射的HSF细胞原癌基因c-Fos和c-Jun基因和蛋白的表达。绞股蓝总皂苷对UVB照射HaCaT细胞培养上清液作用的UVA照射HSF细胞中原癌基因c-Fos和c-Jun的表达具有抑制作用。

关键词：绞股蓝总皂苷紫外线照射皮肤细胞原癌基因 c-Fos c-Jun

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中医证候规范化文献研究的思路与方法

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中医杂志 2009年第8期50卷 743-744页

作者：吕爱平邓洋洋辽宁中医药大学基础医学院中医基础教研室沈阳市皇姑区崇山东路79号110032

证候研究是中医研究的热点和难点。主要包括证候概念、证候分类、证候命名、证候规范化、证候实质以及证候量化诊断等方面,其中对证候规范化的研究,虽然在一定程度上取得了成绩,但是距离真正的规范化还相差很远。在温习文献的基础上,提... 详细信息

证候研究是中医研究的热点和难点。主要包括证候概念、证候分类、证候命名、证候规范化、证候实质以及证候量化诊断等方面,其中对证候规范化的研究,虽然在一定程度上取得了成绩,但是距离真正的规范化还相差很远。在温习文献的基础上,提出以现代手段研究古代文献中证(候)、症、病的含义为基础,并以现代手段研究古今脾、肾证谱的演变规律为切入点,进行证候规范化的文献研究。

关键词：中医学证候方法学研究

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