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Wortmannin对急性肺损伤小鼠肺组织VEGF和NF-кB表达的影响

解剖科学进展 2015年第4期21卷 394-396,400页

作者：金龙吴晓兰周昕欣马腾沈阳军区总医院医务部保健科沈阳110840 辽宁卫生职业技术学院医学基础部机能教研室沈阳110101 辽宁中医药大学附属第二医院皮肤科沈阳110034 中国医科大学基础医学院神经生物学教研室沈阳110122

目的研究Wortmannin对急性肺损伤模型小鼠肺组织血管内皮生长因子(VEGF)和核转录因子-кB(NF-кB)表达的影响。方法 30只昆明小鼠随机分为正常对照组、急性肺损伤组和Wortmannin处理组。采用腹腔注射LPS(10 mg/kg)建立小鼠急性肺损伤模... 详细信息

目的研究Wortmannin对急性肺损伤模型小鼠肺组织血管内皮生长因子(VEGF)和核转录因子-кB(NF-кB)表达的影响。方法 30只昆明小鼠随机分为正常对照组、急性肺损伤组和Wortmannin处理组。采用腹腔注射LPS(10 mg/kg)建立小鼠急性肺损伤模型,对照组腹腔注射同体积的生理盐水,Wortmannin处理组则于造模前2 h腹腔注射Wortmannin(1.4 mg/kg)。LPS注射后6 h处死大鼠,计算肺组织湿/干重(W/D)比值,Western blot方法检测三组小鼠肺组织内VEGF和NF-кB的表达变化,RT-PCR方法检测三组小鼠肺组织内VEGF mRNA和NF-кB mRNA的表达变化。结果急性肺损伤组小鼠肺组织VEGF和NF-кB蛋白和mRNA表达产物的平均光密度值显著高于正常对照组,而Wortmannin处理组显著低于急性肺损伤组小鼠。结论 Wortmannin能抑制急性肺损伤小鼠肺组织VEGF和NF-кB表达。

关键词：急性肺损伤 Wortmannin 血管内皮生长因子核转录因子-кB 肺小鼠

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补中益气汤含药血清对人肺腺癌A549/DDP细胞耐药作用的影响

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中国病理生理杂志 2014年第2期30卷 233-238页

作者：刘亚莉王莹易佳丽史妍婷刘春英辽宁中医药大学基础医学院病理教研室辽宁沈阳110032 辽宁卫生职业技术学院医学技术系卫生检验教研室辽宁沈阳110101

目的:观察补中益气汤含药血清对人肺腺癌细胞株A549/DDP耐药作用的影响并探讨其机制。方法:采用血清药理学方法制备含药血清;用MTT比色法筛选出最佳含药血清;以最佳含药血清和不同浓度梯度的顺铂干预A549和A549/DDP细胞,MTT比色法计算2... 详细信息

目的:观察补中益气汤含药血清对人肺腺癌细胞株A549/DDP耐药作用的影响并探讨其机制。方法:采用血清药理学方法制备含药血清;用MTT比色法筛选出最佳含药血清;以最佳含药血清和不同浓度梯度的顺铂干预A549和A549/DDP细胞,MTT比色法计算2种细胞的IC50,同时计算A549/DDP耐药指数和逆转指数;将A549/DDP细胞分为对照血清组、最佳含药血清组、LY294002组、LY294002+最佳含药血清组(联合组)和阴性对照组,给予相应的处置因素后,培养48 h,采用免疫细胞化学方法、Western blotting和real-time PCR等方法检测各组中PI3K、Akt蛋白与mRNA的表达情况。结果:10%中剂量含药血清作用48 h为最佳含药血清及最佳作用时间。最佳含药血清与顺铂联合作用时,A549/DDP细胞对顺铂的敏感性明显增强,最佳含药血清的逆转指数约为2.46。最佳含药血清组和联合组的PI3K、Akt蛋白和mRNA的表达水平均下降,与对照血清组比较差异有统计学意义(P<0.05)。LY294002组的PI3K、Akt蛋白和mRNA的表达水平与对照血清组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:补中益气汤通过减少PI3K的表达而降低A549/DDP细胞的耐药指数,增加A549/DDP细胞对顺铂的敏感性,干预或调整A549/DDP细胞对顺铂的耐药作用。

关键词：补中益气汤含药血清肺腺癌耐药性 PI3K蛋白 Akt蛋白

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补中益气汤含药血清对A549/DDP细胞PI3K/AKT信号转导通路影响的实验研究

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中国医科大学学报 2014年第1期43卷 14-18页

作者：刘亚莉易佳丽王莹井欢刘春英辽宁中医药大学基础医学院病理学教研室沈阳110032 辽宁卫生职业技术学院医学技术系卫生检验教研室沈阳110101

目的观察补中益气汤含药血清对肺腺癌顺铂耐药细胞A549/DDP的抑制作用,并探讨其对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白和mRNA表达的影响。方法以SD大鼠制备高、中、低剂量的补中益气汤含药血清和空白对照血清。MTT法筛选... 详细信息

目的观察补中益气汤含药血清对肺腺癌顺铂耐药细胞A549/DDP的抑制作用,并探讨其对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白和mRNA表达的影响。方法以SD大鼠制备高、中、低剂量的补中益气汤含药血清和空白对照血清。MTT法筛选最佳含药血清组。培养细胞分为空白血清组、最佳含药血清组、LY294002组(阻滞剂组)、最佳含药血清+LY294002组(联合组)和阴性对照组。免疫细胞化学方法和实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测PI3K、p-AKT蛋白和mRNA的表达情况。结果随着含药血清浓度的升高,对顺铂的逆转倍数不断增加;中剂量含药血清作用48 h为最佳含药血清及最佳作用时间;最佳含药血清可使A549/DDP细胞中PI3K、p-AKT蛋白表达减少,与空白血清组比较差异有统计学意义(P<0.05);补中益气汤诱导A549/DDP细胞PI3K、p-AKT mRNA表达显著减少,与空白血清组比较,差异有统计学意义(P<0.05),与阻滞剂联合作用p-AKT mRNA下降更为明显。结论补中益气汤可通过降低A549/DDP细胞中PI3K、p-AKT mRNA的表达而影响PI3K/AKT信号转导通路,进而发挥对顺铂耐药的增敏作用。

关键词：补中益气汤磷脂酰肌醇3激酶磷酸化蛋白激酶

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Wortmannin对急性肺损伤小鼠肺组织IL-6和IL-10表达的影响

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解剖学研究 2014年第3期36卷 180-183页

作者：金龙吴晓兰周昕欣马腾沈阳军区总医院医务部保健科辽宁沈阳110840 辽宁卫生职业技术学院医学基础部机能教研室辽宁中医药大学附属第二医院皮肤科中国医科大学基础医学院神经生物学教研室

目的研究Wortmannin对急性肺损伤模型小鼠肺组织白介素-6(IL-6)和白介素-10(IL-10)表达的影响。方法30只昆明小鼠随机分为正常对照组、急性肺损伤组和Wortmannin处理组。采用腹腔注射LPS(10 mg/kg)建立小鼠急性肺损伤模型,对照组腹腔注... 详细信息

目的研究Wortmannin对急性肺损伤模型小鼠肺组织白介素-6(IL-6)和白介素-10(IL-10)表达的影响。方法30只昆明小鼠随机分为正常对照组、急性肺损伤组和Wortmannin处理组。采用腹腔注射LPS(10 mg/kg)建立小鼠急性肺损伤模型,对照组腹腔注射同体积的生理盐水,Wortmannin处理组则于造模前2 h腹腔注射Wortmannin(1.4 mg/kg)。LPS注射后6 h处死大鼠,计算肺组织湿/干重(w/D)比值,Western blot方法检测三组小鼠肺组织内IL-6和IL-10的表达变化,RT-PCR方法检测三组小鼠肺组织内IL-6 mRNA和IL-10 mRNA的表达变化。结果急性肺损伤组小鼠肺组织IL-6蛋白表达显著上升,平均光密度值为(0.38±0.03),显著高于正常对照组的表达(0.09±0.01),P<0.05;相比于急性肺损伤组小鼠,Wortmannin处理组小鼠肺组织IL-6蛋白表达显著降低,光密度值为(0.21±0.02),P<0.05;急性肺损伤组小鼠肺组织IL-10蛋白表达显著降低,平均光密度值为(0.11±0.01),显著低于正常对照组的表达(0.21±0.01),P<0.05;相比于急性肺损伤组小鼠,Wortmannin处理组小鼠肺组织IL-10蛋白表达显著升高,光密度值为(0.18±0.02),P<0.05。RT-PCR方法检测三组小鼠IL-6mRNA时发现,Wortmannin处理组小鼠肺组织IL-6 mRNA的平均光密度值为(0.37±0.03),显著低于急性肺损伤组小鼠肺组织IL-6 mRNA的的平均光密度值为(0.26±0.02),P<0.05;RT-PCR方法检测三组小鼠IL-10mRNA时发现,Wortmannin处理组小鼠肺组织IL-10 mRNA的平均光密度值为(0.27±0.02),显著高于急性肺损伤组小鼠肺组织IL-10 mRNA(0.18±0.02)的表达,P<0.05。结论 Wortmannin能抑制急性肺损伤小鼠肺组织IL-6表达,上调IL-10的表达。

关键词：急性肺损伤 Wortmannin 白介素-6 白介素-10 肺小鼠

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Wortmannin对急性肺损伤小鼠肺组织IL-1β和TNF-α表达的影响

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解剖科学进展 2014年第4期20卷 352-355页

作者：金龙吴晓兰周昕欣马腾沈阳军区总医院医务部保健科沈阳110840 辽宁卫生职业技术学院医学基础部机能教研室沈阳110101 辽宁中医药大学附属第二医院皮肤科沈阳110034 中国医科大学基础医学院神经生物学教研室沈阳110001

目的研究Wortmannin对急性肺损伤模型小鼠肺组织白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法 30只昆明小鼠随机分为正常对照组、急性肺损伤组和Wortmannin处理组。采用腹腔注射LPS(10 mg/kg)建立小鼠急性肺损伤模型,... 详细信息

目的研究Wortmannin对急性肺损伤模型小鼠肺组织白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法 30只昆明小鼠随机分为正常对照组、急性肺损伤组和Wortmannin处理组。采用腹腔注射LPS(10 mg/kg)建立小鼠急性肺损伤模型,对照组腹腔注射同体积的生理盐水,Wortmannin处理组则于造模前2 h腹腔注射Wortmannin(1.4 mg/kg)。LPS注射后6 h处死大鼠,计算肺组织湿/干重(W/D)比值,Western blot方法检测三组小鼠肺组织内IL-1β和TNF-α蛋白的表达变化,RT-PCR方法检测三组小鼠肺组织内IL-1βmRNA和TNF-αmRNA的表达变化。结果急性肺损伤组小鼠肺组织IL-1β和TNF-α蛋白及mRNA表达水平显著上升,显著高于正常对照组(<0.05);相比于急性肺损伤组小鼠,Wortmannin处理组小鼠肺组织IL-1β和TNF-α蛋白及mRNA表达水平显著降低(<0.05)。结论 Wortmannin能抑制急性肺损伤小鼠肺组织IL-1β和TNF-α表达。

关键词：急性肺损伤 Wortmannin 白介素-1β 肿瘤坏死因子-α 肺昆明小鼠

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加味四君子汤含药血清对B16恶性黑色素瘤细胞NF-κB(p65)活性和表达的影响

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中药药理与临床 2013年第6期29卷 121-124页

作者：周昕欣金龙吴晓兰辽宁中医药大学附属第二医院皮肤科沈阳110034 沈阳军区总医院医务部保健科沈阳110840 辽宁卫生职业技术学院医学基础部机能教研室沈阳110101

目的:研究加味四君子汤含药血清对转录因子核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)p65的活性和表达的影响。方法:应用血清药理学方法给药,37℃、5%CO2的恒温培养箱中培养B16恶性黑色素瘤细胞,收集对数期细胞,小鼠含药血清终浓度为1... 详细信息

目的:研究加味四君子汤含药血清对转录因子核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)p65的活性和表达的影响。方法:应用血清药理学方法给药,37℃、5%CO2的恒温培养箱中培养B16恶性黑色素瘤细胞,收集对数期细胞,小鼠含药血清终浓度为10%,作用24h。实验分为空白对照组、血清对照组、4.61 g/kg、9.22 g/kg、18.44 g/kg加味四君子汤含药血清组和5 mg/L顺铂组,每组含5个样本数。分别应用Real-Time PCR法、EMSA法、Western blot法检测加味四君子汤含药血清对B16恶性黑色素瘤细胞活性和表达的影响。结果:加味四君子汤含药血清作用24 h后,呈剂量依赖式降低NF-κB(p65)的活性和基因蛋白表达,与空白对照组和血清对照组相比,9.22 g/kg中药组、18.44 g/kg中药组和5 mg/L顺铂组分别显著降低NF-κB(p65)活性、mRNA及蛋白表达(P<0.05),但5 mg/L顺铂组活性、mRNA及蛋白表达低于9.22 g/kg中药组,高于18.44 g/kg中药组。结论:加味四君子汤含药血清能够降低恶性黑色素瘤细胞NF-κB(p65)的活性和表达水平,NF-κB(p65)可能是加味四君子汤含药血清抗恶性黑色素瘤的机制之一。

关键词：加味四君子汤血清药理学 B16恶性黑色素瘤细胞 NF—κB(p65)

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pcDNA3.1/NF-κB(p65)表达载体的构建及蛋白表达

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解剖科学进展 2013年第6期19卷 497-499页

作者：金龙吴晓兰周昕欣马腾沈阳军区总医院医务部保健科沈阳110840 辽宁医学院研究生学院锦州121001 辽宁卫生职业技术学院医学基础部机能教研室沈阳110101 辽宁中医药大学附属第二医院皮肤科沈阳110034 中国医科大学基础医学院神经生物学教研室沈阳110001

目的克隆NF-κB(p65)基因,构建真核表达载体pcDNA3.1/NF-κB(p65),并进行体外表达研究。方法提取B16总RNA,RT-PCR扩增出NF-κB(p65)基因片段,并将其克隆到pcDNA3.1载体中进行序列分析,转染到B16细胞中,Real-time PCR和Western-blot检测NF-κB(p65)的抗原性和表达量。结果获得高质量的B16总RNA,RT-PCR扩增出1.65kb的cDNA片段,成功构建了pcDNA3.1/NF-κB(p65)载体,Blast序列分析与GenBank中NM_009045.4完全一致。NF-κB(p65)重组蛋白具有抗原性,其基因和蛋白表达高于B16细胞组和空质粒pcDNA3.1组。结论成功构建pcDNA3.1/NF-κB(p65)表达载体和表达出具有NF-κB(p65)抗原性的重组蛋白。

关键词： NF-κB(p65)基因 pcDNA3 1载体 B16细胞

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改良头针刺法对缺血性脑血管疾病的临床研究

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医学信息（下旬刊） 2011年第4期24卷 279-280页

作者：郭源秩于丹王莹许慧艳戴莉莉辽宁卫生职业技术学院针灸推拿教研室 110101 辽宁中医药大学基础医学院 110847

目的：观察改良头针刺法治疗缺血性脑血管疾病的临床疗效及作用机理。方法：将68例患者随机分成两组，治疗组给予改良头针刺法，对照组给予传统头针刺法。结果：治疗组临床疗效优于对照组（P〈0．05），治疗后，治疗组血清内皮素明显低... 详细信息

目的：观察改良头针刺法治疗缺血性脑血管疾病的临床疗效及作用机理。方法：将68例患者随机分成两组，治疗组给予改良头针刺法，对照组给予传统头针刺法。结果：治疗组临床疗效优于对照组（P〈0．05），治疗后，治疗组血清内皮素明显低于对照组（P〈0．05），治疗组血清内皮素在治疗后也明显低于治疗前（P〈0．05），而对照组血清内皮素在治疗前后变化不明显（P〉0．05）。结论：改良头针刺法治疗缺血性脑血管疾病疗效显著，通过减少内皮素的分泌进而扩张血管是其作用机理之一。

关键词：头针缺血性脑血管疾病中风临床研究

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改良头针疗法用于缺血性脑卒中的临床观察

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国际中医中药杂志 2011年第6期33卷 545-546页

作者：郭源秩王莹许慧艳戴莉莉赵云辽宁卫生职业技术学院针灸推拿教研室沈阳110101 辽宁中医药大学基础医学院病理教研室沈阳110847

脑卒中分为缺血性和出血性两类，属中医“中风”范畴。临床以突然昏倒、半身不遂、口舌歪斜、言语蹇涩或不语、偏身麻木为主症，死亡率和致残率较高^[1]。头针疗法在脑卒中恢复期和后遗症期的治疗中具有明显的优势。但传统的头针疗法进... 详细信息

脑卒中分为缺血性和出血性两类，属中医“中风”范畴。临床以突然昏倒、半身不遂、口舌歪斜、言语蹇涩或不语、偏身麻木为主症，死亡率和致残率较高^[1]。头针疗法在脑卒中恢复期和后遗症期的治疗中具有明显的优势。但传统的头针疗法进针后快速捻转，刺激强烈，易引起明显疼痛或不适。笔者应用改良头针疗法对缺血性脑卒中患者进行了相关的临床观察。

关键词：缺血性脑卒中头针疗法临床观察改良脑卒中恢复期脑卒中患者半身不遂后遗症期

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Rab13 GTPase在大鼠睾丸中的表达及其与生精上皮周期的关系

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中国实验动物学报 2010年第5期18卷 402-405,I0008页

作者：宿文辉张天彪张丽雁翟玲玲中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室沈阳110001 辽宁中医药大学职业技术学院临床护理教研室沈阳110101 中国医科大学公共卫生学院儿童少年卫生教研室沈阳110001

目的初步明确Rab13 GTPase在大鼠精子发生及成熟过程中的表达情况和可能发挥的作用。方法首先通过RT-PCR技术检测了Rab13 GTPase在不同日龄大鼠睾丸组织中的表达,又利用RT-PCR和Western-blot检测了Rab13在大鼠不同组织中的表达情况,最... 详细信息

目的初步明确Rab13 GTPase在大鼠精子发生及成熟过程中的表达情况和可能发挥的作用。方法首先通过RT-PCR技术检测了Rab13 GTPase在不同日龄大鼠睾丸组织中的表达,又利用RT-PCR和Western-blot检测了Rab13在大鼠不同组织中的表达情况,最后采用免疫组化技术检测Rab13 GTPase在大鼠不同期别生精上皮中的分布。结果 RT-PCR显示Rab13 GTPase mRNA水平在40日龄大鼠睾丸组织中表达达到最高峰;在40日龄大鼠,Rab13 GTPase在心、脑、肺、脾、睾丸等5种组织中均有表达,在肺组织中表达量最多;在精子细胞成熟过程中,Rab13在生精上皮基底部及生精细胞周围都有分布,在精子释放前则主要集中分布于生精上皮基底部。结论 Rab13 GTPase的分布,可能随生精上皮周期的变化而对精子发生过程具有一定的调节作用。

关键词： Rab13 GTPase 睾丸生精上皮周期

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