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电针调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路抑制细胞焦亡改善溃疡性结肠炎小鼠结肠黏膜屏障损伤

针刺研究 2025年第3期50卷 277-286页

作者：王熙涵刘继东曲怡董佳梓王建波薛亚楠李阳张家豪金璐王天朗王希宁辽宁中医药大学针灸推拿学院沈阳110847 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室沈阳110847 辽宁中医药大学实验动物医学院沈阳110847

目的:观察电针“天枢”“足三里”对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的NOD样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)细胞焦亡信号通路的影响,探讨电针通过保护肠道屏障进而改善UC的相关机制。方法:C57BL/6小... 详细信息

目的:观察电针“天枢”“足三里”对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的NOD样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)细胞焦亡信号通路的影响,探讨电针通过保护肠道屏障进而改善UC的相关机制。方法:C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、电针组、假针刺组和西药组,10只/组。采用每日3%葡聚糖硫酸钠自由饮用的方法建立UC小鼠模型,同时给予对应治疗,电针组电针双侧“天枢”“足三里”,假针刺组仅浅刺入穴位皮下不通电,西药组予美沙拉嗪溶液(33.4 g/kg)灌胃。记录小鼠体质量变化、粪便性状和便血情况并计算疾病活动指数(DAI)评分,测量结肠长度;利用小动物活体成像系统观察小鼠肠黏膜通透性FITC荧光信号强度;HE染色法观察小鼠结肠组织病理变化;TUNEL染色观察小鼠结肠组织细胞凋亡情况;ELISA法检测小鼠血清白细胞介素(IL)-18和IL-1β含量;免疫荧光法检测小鼠结肠组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6平均荧光强度;免疫组织化学法检测小鼠结肠组织中IL-18、IL-1β阳性表达;Western blot法检测小鼠结肠组织中闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、闭锁蛋白(Occludin)、NLRP3、Caspase-1和GSDMD的蛋白相对表达量;qPCR法检测各组小鼠结肠组织NLRP3、Caspase-1和GSDMD mRNA表达。结果:与正常组相比,模型组小鼠DAI评分升高(P<0.01),结肠长度缩短(P<0.01),结肠组织出现炎性浸润,绒毛和隐窝结构显著破坏,凋亡细胞数量增多(P<0.01),TNF-α、IL-6与肠道FITC荧光强度增强(P<0.01),IL-18、IL-1β阳性表达升高(P<0.01),结肠组织NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白相对表达量升高(P<0.01),NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA表达水平升高(P<0.01),ZO-1、Occludin蛋白相对表达量降低(P<0.01),血清IL-18、IL-1β含量升高(P<0.01)。电针组和西药组与模型组相比及电针组与假针刺组比较,小鼠毛色光泽度高,活动度高,DAI评分显著降低(P<0.01),结肠长度增加(P<0.01),小鼠结肠黏膜形态相对完好,腺体排列较为有序,绒毛排列相对整齐,隐窝结构恢复较好,炎性渗出减少,凋亡细胞数量减少(P<0.01),结肠组织TNF-α、IL-6与肠道FITC荧光强度减弱(P<0.01),IL-18、IL-1β阳性表达降低(P<0.01),NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白相对表达量降低(P<0.05,P<0.01),NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA表达水平降低(P<0.01),ZO-1、Occludin蛋白相对表达量升高(P<0.05,P<0.01),血清IL-18、IL-1β含量降低(P<0.01,P<0.05)。结论:电针“天枢”“足三里”可以恢复UC小鼠结肠黏膜通透性,其机制可能与调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD轴抑制细胞焦亡,改善肠黏膜炎性损伤有关。

关键词：电针溃疡性结肠炎细胞焦亡肠道屏障

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基于NF-κB/NLRP3/caspase-1信号轴探讨牛膝皂苷Ⅰ抑制软骨细胞焦亡的研究

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中国临床药理学杂志 2025年第2期41卷 198-202页

作者：刘泽萱韩易言关雪峰张宇戴俭宇辽宁中医药大学针灸推拿学院沈阳药科大学党政办公室辽宁中医药大学辽宁省教育厅针灸生物学重点实验室

目的探索牛膝皂苷Ⅰ通过核因子κB（NF-κB）/DON样受体蛋白3（NLRP3）/半胱氨酸蛋白酶-1（caspase-1）信号传导途径抑制软骨细胞发生焦亡的作用机制。方法将小鼠原代软骨细胞分为空白组（加入等体积的磷酸盐缓冲溶液）、模型组[10 ng... 详细信息

目的探索牛膝皂苷Ⅰ通过核因子κB（NF-κB）/DON样受体蛋白3（NLRP3）/半胱氨酸蛋白酶-1（caspase-1）信号传导途径抑制软骨细胞发生焦亡的作用机制。方法将小鼠原代软骨细胞分为空白组（加入等体积的磷酸盐缓冲溶液）、模型组[10 ng·mL-1白细胞介素1β（IL-1β）]、对照组(10ng·mL-1IL-1β+20μmol·L-1塞来昔布)和实验组(10ng·mL-1IL-1β+3μg·mL-1牛膝皂苷Ⅰ)。干预24h后，用细胞计数试剂盒8法检测细胞增殖能力，用酶联免疫吸附试验法检测细胞上清液中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、IL-1和IL-6水平，用蛋白质印迹法检测NF-κBp65、NLRP3和caspase-1的表达水平。结果实验组、对照组、模型组和空白组的细胞凋亡率分别为（13.34±0.61）%、（15.64±1.01）%、（21.81±1.10）%和0,SOD水平分别为（147.03±16.49）、（130.09±7.33）、（122.03±10.71）和（164.40±22.74）nU·mL-1,MDA水平分别为（6.43±0.71）、（7.63±1.01）、（8.89±1.84）和（5.69±0.81）nmol·L-1,IL-1水平分别为（338.69±40.95）、（361.78±32.15）、（391.44±30.59）和（289.23±25.19）pg·mL-1,IL-6水平分别为（89.96±8.81）、（101.10±11.59）、（120.39±14.71）和（60.29±6.03）pg·mL-1,NF-κBp65蛋白相对表达水平分别为0.68±0.05、0.97±0.05、1.26±0.05和0.57±0.05,NLRP3蛋白相对表达水平分别为0.71±0.08、1.02±0.10、1.50±0.06和0.31±0.05,caspase-1蛋白相对表达水平分别为0.70±0.07、1.29±0.08、1.66±0.07和0.51±0.07。实验组的上述指标与模型组相比，在统计学上差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论牛膝皂苷Ⅰ可以改善IL-1β诱导软骨细胞炎症的氧化应激状态，降低NF-κB信号通路相关蛋白的表达，减少caspase-1依赖性细胞焦亡的发生，从而对软骨细胞起到保护作用。

关键词：牛膝皂苷Ⅰ 软骨细胞氧化应激半胱氨酸蛋白酶-1依赖性细胞焦亡

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通督调神针法调控外泌体抑制大脑中动脉闭塞/再通大鼠脑凋亡的机制研究

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环球中医药 2025年第4期18卷 693-700页

作者：王一鹤杨家庆赵忠海董宝强隋月皎杨芳张小卿沈阳医学院附属中心医院康复医学科 110075 辽宁中医药大学针灸推拿学院辽宁省教育厅针灸生物学重点实验室辽宁中医药大学中医学院

目的探讨通督调神针法是否通过外泌体途径改善脑缺血再灌注大鼠的运动功能。方法 40只雄性SD大鼠随机划分假手术组10只与手术组30只。手术组以改良线栓法制备大脑中动脉闭塞/再通(middle cerebral artery occlusion/reperfusion, MCAO... 详细信息

目的探讨通督调神针法是否通过外泌体途径改善脑缺血再灌注大鼠的运动功能。方法 40只雄性SD大鼠随机划分假手术组10只与手术组30只。手术组以改良线栓法制备大脑中动脉闭塞/再通(middle cerebral artery occlusion/reperfusion, MCAO/R)模型,缺血2小时后再灌注。按Longa 5级神经功能评分进行模型评价,将造模成功的大鼠随机划分为模型组与电针组,每组12只。电针组干预“百会”“印堂”“足三里”,连续7天。7天后,观察各组大鼠步态;脑组织取材进行苏木素—伊红染色,观察皮质海马区病理改变;蛋白免疫印迹法检测脑组织中CD9、CD63、CD81、热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)、肿瘤易感基因101(tumor susceptibility gene 101,TSG101)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X,Bax)的含量。结果与模型组相比,电针组大鼠神经功能评分降低(P<0.05),步态表现提升,脑组织形态结构改善;CD9、CD63、CD81、HSP70及TSG101的表达量增加(均P<0.05);Bax的表达量降低(P<0.05),Bcl-2的表达量及Bcl-2/Bax比值提高(均P<0.05)。结论通督调神针法能改善MCAO/R大鼠的运动功能,其机制可能与促进外泌体分泌从而抑制凋亡有关。

关键词：脑缺血再灌注 MCAO/R 电针外泌体通督调神针法凋亡步态

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电针内关穴及列缺穴对心肌缺血大鼠心肌细胞蛋白激酶表达的影响

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中国中西医结合杂志 2015年第3期35卷 338-342页

作者：王颖李迪戴俭宇刘昱甫荆秦王熙王列辽宁中医药大学针灸推拿学院针灸临床教研室沈阳110032

目的研究电针内关穴及列缺穴对心肌缺血大鼠心肌细胞蛋白激酶表达的影响。方法健康雄性SD大鼠按照随机数字表随机分为对照组、模型组、内关组、列缺组、非经非穴组,每组10只。采用注射盐酸异丙肾上腺素(85 mg/kg)制作大鼠心肌缺血模型,... 详细信息

目的研究电针内关穴及列缺穴对心肌缺血大鼠心肌细胞蛋白激酶表达的影响。方法健康雄性SD大鼠按照随机数字表随机分为对照组、模型组、内关组、列缺组、非经非穴组,每组10只。采用注射盐酸异丙肾上腺素(85 mg/kg)制作大鼠心肌缺血模型,针刺内关、列缺、非经非穴进行干预,通过Western blot检测技术,观察电针前后各组大鼠心肌细胞蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)、蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)及蛋白激酶G(protein kinase G,PKG)表达量的变化情况。结果与对照组比较,模型组PKA、PKC、PKG的表达明显升高(P<0.01)。与模型组比较,内关组和列缺组PKA、PKC、PKG蛋白表达量均降低(P<0.01,P<0.05),非经非穴组PKA蛋白表达量降低(P<0.01);与内关组比较,列缺组、非经非穴组PKA、PKC、PKG的表达量明显升高(P<0.01,P<0.05);与列缺组比较,非经非穴组PKA、PKC、PKG表达量升高(P<0.01,P<0.05)。结论电针内关穴和列缺穴均可以降低心肌缺血大鼠心肌细胞蛋白激酶的表达量,且内关穴的针刺效应优于列缺穴。

关键词：心肌缺血蛋白激酶A 蛋白激酶C 蛋白激酶G 内关穴列缺穴

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针刺“曲池”穴循经感传的循经表面肌电变化研究

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重庆医科大学学报 2014年第8期39卷 1128-1130页

作者：李春日谷忠悦辽宁中医药大学针灸推拿学院实验针灸教研室沈阳110847 辽宁中医药大学针灸推拿学院针灸基础教研室沈阳110847

目的:研究针刺"曲池"穴激发的循经感传与循经表面肌电的关系。方法:分别针刺"曲池"穴、经脉非穴、非经非穴,引发循经感传,观察肱桡肌肌电活动的变化,记录肌电振幅和肌电变化维持时间。结果:针刺"曲池"穴... 详细信息

目的:研究针刺"曲池"穴激发的循经感传与循经表面肌电的关系。方法:分别针刺"曲池"穴、经脉非穴、非经非穴,引发循经感传,观察肱桡肌肌电活动的变化,记录肌电振幅和肌电变化维持时间。结果:针刺"曲池"穴,经脉非穴和非经非穴的循经感传阳性率有统计学差异(χ2=28.298,P=0.000),且针刺"曲池"穴和经脉非穴的循经感传阳性率高于非经非穴(χ2=24.783,P=0.000;χ2=19.113,P=0.000);针刺"曲池"穴,经脉非穴和非经非穴的肱桡肌肌电振幅有明显差异(χ2=61.659,P=0.000),且针刺"曲池"穴对肱桡肌肌电振幅高于经脉非穴和非经非穴(P=0.000);针刺"曲池"穴,经脉非穴和非经非穴的肌电变化维持时间有统计学差异(F=129.846,P=0.000),且针刺"曲池"穴的肌电变化维持时间长于经脉非穴和非经非穴,针刺"曲池"穴、经脉非穴、非经非穴均能引发肱桡肌肌电振幅的改变。结论:针刺"曲池"穴循经感传相伴的肱桡肌肌电活动强于经脉非穴和非经非穴,针刺"曲池"穴对肱桡肌表面肌电活动影响具有穴位特异性。

关键词： “曲池”穴循经感传表面肌电肱桡肌

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得气的生物反馈作用及意义的探讨

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中国针灸 2009年第5期29卷 379-381页

作者：谷忠悦马铁明辽宁中医药大学针灸推拿学院针灸基础教研室沈阳110032

本文介绍了生物反馈疗法的基本概念及针刺得气与生物反馈的关系。针刺得气作为医患之间可控的生物信息反馈的指标,符合生物反馈疗法的技术操作要求。得气对患者的心理和生理功能具有双重调节作用,在纠正患者认知错误方面有语言暗示和行... 详细信息

本文介绍了生物反馈疗法的基本概念及针刺得气与生物反馈的关系。针刺得气作为医患之间可控的生物信息反馈的指标,符合生物反馈疗法的技术操作要求。得气对患者的心理和生理功能具有双重调节作用,在纠正患者认知错误方面有语言暗示和行为暗示的治疗效果。以得气为指标治疗心理性疾病既符合中医理论又具有现代医学研究成果支撑,丰富了生物反馈疗法的内容和手段,可促进针灸医学向生理─心理─社会医学模式发展。

关键词：得气生物反馈(心理学) 抑郁症针刺行气

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麦粒灸结合针刺与单纯针刺治疗慢性功能性便秘的疗效比较

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世界华人消化杂志 2013年第23期21卷 2359-2363页

作者：李春日荆秦刘林谷忠悦辽宁中医药大学针灸推拿学院实验针灸教研室辽宁省沈阳市110847 辽宁中医药大学附属医院脾胃科辽宁省沈阳市110032 辽宁中医药大学针灸推拿学院针灸基础教研室辽宁省沈阳市110847

目的:比较分析麦粒灸合针刺与单纯针刺治疗慢性功能性便秘(chronic functional constipation,CFC)的疗效.方法:将70例CFC患者分为2组,每组各35例.其中观察组给予麦粒灸与针刺联合治疗,对照组单用针刺治疗.观察治疗前后2组患者的排便方... 详细信息

目的:比较分析麦粒灸合针刺与单纯针刺治疗慢性功能性便秘(chronic functional constipation,CFC)的疗效.方法:将70例CFC患者分为2组,每组各35例.其中观察组给予麦粒灸与针刺联合治疗,对照组单用针刺治疗.观察治疗前后2组患者的排便方式、便秘临床评分以及总疗效等指标.结果:观察组治疗总有效率为80.0%,高于对照组的51.43%(2=6.34,P<0.05).治疗后观察组能自主排便患者比例多于对照组(74.29%vs 45.71%,P<0.05),依赖泻药患者比例低于对照组(20.0%vs 45.71%,P<0.05).便秘临床评分方面,观察组排便费力程度、排便时间、腹痛、排气不畅、排便不尽感、肛门梗阻感、依赖泻剂等得分均低于对照组(P<0.05).结论:麦粒灸结合针刺治疗CFC,疗效优于单纯针刺,能显著改善CFC患者各项临床症状.

关键词：麦粒灸针刺慢性功能性便秘

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艾灸对肌筋膜疼痛综合征大鼠脊髓背角小胶质细胞和脑源性神经营养因子表达的影响

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针刺研究 2021年第9期46卷 769-774页

作者：马俊杰马铁明王列胡哲辽宁中医药大学针灸推拿学院沈阳110847 辽宁省针灸养生康复重点实验室沈阳110847

目的:观察艾灸激痛点对肌筋膜疼痛综合征(MPS)大鼠脊髓小胶质细胞及脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,探讨艾灸镇痛效应的部分中枢机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、艾灸组,每组8只。采用钝性打击联合离心运动法制备MPS大... 详细信息

目的:观察艾灸激痛点对肌筋膜疼痛综合征(MPS)大鼠脊髓小胶质细胞及脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,探讨艾灸镇痛效应的部分中枢机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、艾灸组,每组8只。采用钝性打击联合离心运动法制备MPS大鼠模型。艾灸组大鼠左股内侧肌激痛点部位行温和灸,每日1次,每次15 min,治疗7 d。分别于造模前及治疗前后1 d,使用热刺痛仪检测热痛阈值(TWL);HE染色法观察大鼠股内侧肌病理形态变化;免疫组织化学法检测大鼠脊髓背角小胶质细胞标记物OX-42表达;蛋白免疫印迹法检测大鼠脊髓BDNF蛋白表达。结果:造模后,模型组、艾灸组大鼠TWL较本组造模前及同时点空白组显著降低(P<0.01);治疗后艾灸组大鼠TWL较本组造模后及同时点模型组显著升高(P<0.01)。空白组肌纤维粗细均匀,排列紧密而规律;模型组见部分肌纤维断裂和结缔结构组织新生,排列不规则、紊乱,炎性细胞浸润;艾灸组肌纤维形态接近正常,排列较整齐有序,少量炎性细胞浸润。与空白组比较,模型组大鼠脊髓背角OX-42染色变深、数量增多、胞体肥大,平均吸光度值升高(P<0.01),经治疗后艾灸组OX-42染色变浅、数量减少、胞体变小,平均吸光度值降低(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠脊髓BDNF蛋白表达上调(P<0.01);与模型组比较,艾灸组BDNF蛋白表达下调(P<0.05)。结论:艾灸可以明显改善MPS大鼠股内侧肌组织损伤,提高热痛阈值,其部分中枢机制可能与抑制脊髓背角小胶质细胞活化,降低BDNF蛋白表达有关。

关键词：肌筋膜疼痛综合征艾灸激痛点小胶质细胞脑源性神经营养因子

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“是动病”“所生病”的理论研究与探讨

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辽宁中医杂志 2006年第5期33卷 544-545页

作者：韩红辽宁中医药大学针灸推拿学院针灸基础教研室辽宁沈阳110032

纵观“是动病”“所生病”的古今争论焦点,提出“是动病”,为本条经脉异常变动所发生的系列疾病症候,侧重是经脉病候的诊断意义;“所生病”是古代医家对经脉病候的不断认识和补充,侧重是经脉腧穴的治疗意义,揭示了《内经》时期经络理论... 详细信息

纵观“是动病”“所生病”的古今争论焦点,提出“是动病”,为本条经脉异常变动所发生的系列疾病症候,侧重是经脉病候的诊断意义;“所生病”是古代医家对经脉病候的不断认识和补充,侧重是经脉腧穴的治疗意义,揭示了《内经》时期经络理论在认识疾病和治疗疾病上的实际差别。

关键词：经络是动病所生病理论探讨

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预电针止痒穴对调节炎性反应防治荨麻疹的机制研究

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针刺研究 2024年第10期49卷 1047-1055页

作者：李记泉马铁明李思佳王巍金颖陈怡然马俊杰王列李格格丁志国辽宁中医药大学针灸推拿学院沈阳110847 辽宁省教育厅针灸生物学重点实验室沈阳110847 辽宁中医药大学中医学院沈阳110847

目的:观察预电针止痒穴对“曲池”“血海”对荨麻疹(UR)的防治作用,并探讨其调节炎性反应的机制。方法:取3只SD大鼠采用卵蛋白与免疫佐剂联合注射法制备抗卵蛋白血清,再将16只SD大鼠采用皮肤被动过敏反应法制备UR模型,随机分为模型组、... 详细信息

目的:观察预电针止痒穴对“曲池”“血海”对荨麻疹(UR)的防治作用,并探讨其调节炎性反应的机制。方法:取3只SD大鼠采用卵蛋白与免疫佐剂联合注射法制备抗卵蛋白血清,再将16只SD大鼠采用皮肤被动过敏反应法制备UR模型,随机分为模型组、预电针组,每组8只,另取8只大鼠作为空白组。预电针组电针“曲池”“血海”预处理,1次/d,连续10 d。造模0.5 h后,记录0.5 h内大鼠搔抓背部致敏皮肤次数,HE染色法观察皮肤组织病理变化,甲苯胺蓝染色法观察皮肤、血液、肠系膜及腹腔液肥大细胞(MCs)形态并计算脱颗粒率,免疫组织化学法检测皮下组织免疫球蛋白E(IgE)、组胺(HIS)、5-羟色胺(5-HT)表达,Western blot法检测皮肤组织中细胞焦亡相关分子NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、凋亡相关微粒蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸酶-1(Caspase-1)蛋白表达水平,ELISA法检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-18含量。结果:与空白组比较,模型组大鼠搔抓致敏皮肤次数显著增加(P<0.01),致敏皮肤伊文斯蓝渗出量增多(P<0.01),致敏皮肤组织炎性反应明显,皮肤、血液、肠系膜与腹腔液MCs脱颗粒率显著增加(P<0.01),皮下组织IgE、HIS、5-HT阳性表达及皮肤组织NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达水平与血清IL-1β、IL-18含量均显著升高(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,预电针组大鼠搔抓致敏皮肤次数显著下降(P<0.01),致敏皮肤伊文斯蓝渗出量降低(P<0.01),致敏皮肤组织炎性反应减轻,皮肤、血液、肠系膜与腹腔液MCs脱颗粒率显著下降(P<0.01),皮下组织IgE、HIS、5-HT阳性表达及皮肤组织NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达水平与血清IL-1β、IL-18含量均显著下降(P<0.01,P<0.05)。结论:预电针止痒对穴“曲池”“血海”可通过抑制炎性反应防治UR,该效应与针刺调节过敏反应及细胞焦亡两种途径有关。

关键词：预电针荨麻疹炎性反应过敏反应细胞焦亡肥大细胞

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