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人眼睑组织来源的成纤维细胞作为饲养层细胞构建人口腔黏膜上皮细胞片层的研究

沈阳医学院学报 2023年第2期25卷 127-130页

作者：张明琦王乐孙岩郑玉强李娜王卓实辽宁何氏医学院精准医疗研究院辽宁沈阳110001 沈阳何氏眼科医院辽宁省眼科干细胞组织工程重点实验室

目的:探讨人眼睑组织来源的成纤维细胞作为饲养层细胞代替鼠源饲养层细胞在体外培养人口腔黏膜上皮细胞的可行性。方法:通过酶消化法从人眼睑组织中分离成纤维细胞传代培养,取P5代成纤维细胞通过丝裂霉素C方法制备饲养层细胞,将其制备... 详细信息

目的:探讨人眼睑组织来源的成纤维细胞作为饲养层细胞代替鼠源饲养层细胞在体外培养人口腔黏膜上皮细胞的可行性。方法:通过酶消化法从人眼睑组织中分离成纤维细胞传代培养,取P5代成纤维细胞通过丝裂霉素C方法制备饲养层细胞,将其制备成的饲养层细胞用来培养商品化人口腔黏膜上皮细胞。通过罗丹明染色观察其细胞克隆形成率;HE染色观察细胞片层的结构;免疫荧光检测特征蛋白P63、β1-integrin的表达。结果:人眼睑组织来源的成纤维细胞在体外具有较强的增殖能力,高表达成纤维细胞特异性标志性蛋白CD90,培养的人口腔黏膜上皮细胞呈克隆样生长,细胞克隆形成率约为2.2%,并将其构建成3~4层口腔黏膜细胞片层,且高表达上皮细胞标志物P63及β1-integrin。结论:人眼睑组织来源的成纤维细胞可以作为饲养层细胞构建人口腔黏膜上皮细胞片层,为临床应用提供一种新的人源化饲养层工具细胞。

关键词：人口腔黏膜上皮细胞成纤维细胞饲养层细胞眼睑组织

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一种抗青光眼中药数据库的构建方法和应用

一种抗青光眼中药数据库的构建方法和应用

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作者：滕丹曹晶李乐李礼桓晓龙 110163 辽宁省沈阳市浑南区泗水街66号

本发明提供一种抗青光眼中药数据库的构建方法和应用，所述构建方法包括：通过GEO数据库，获得数据集GSE27276；将数据集GSE27276中的探针名转换为基因名，确定同一基因名的表达值以及确定校正后的P值，筛选获得差异表达基因，并对其进... 详细信息

标准号: CN115881233A

本发明提供一种抗青光眼中药数据库的构建方法和应用，所述构建方法包括：通过GEO数据库，获得数据集GSE27276；将数据集GSE27276中的探针名转换为基因名，确定同一基因名的表达值以及确定校正后的P值，筛选获得差异表达基因，并对其进行蛋白质‑蛋白质相互作用分析、Cytoscape软件分析之后得到核心差异基因；在TCMSP数据库内抓取化合物并进行降重处理；在TCMSP数据库内抓取相应的中药名并进行降重处理，根据中药名构建抗青光眼中药数据库。基于该数据库设计出的抗青光眼中药数据库查询系统，可便捷快速高效的开展抗青光眼中药及组方的筛选工作，节约药物研发成本与时间，加快青光眼治疗药物的上市进程。

关键词：青光眼中药数据库构建抓取数据库数据集中药蛋白质相互作用青光眼治疗药物筛选差异表达基因数据库设计查询系统差异基因软件分析药物研发基因探针校正蛋白质转换节约应用分析进程

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重组VEGFB的制备方法与应用

重组VEGFB的制备方法与应用

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作者：张朔李雪娇冯铃刘辉赵航吴骁康慧颖张鹏赵洪礼何伟 110163 辽宁省沈阳市浑南区泗水街77-3号

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及重组VEGFB的制备方法与应用。本发明提供的重组VEGFB的制备方法主要包括重组VEGFB的纯化方法，包括包涵体溶解、亲和层析纯化、复性、凝胶过滤层析的步骤，纯化获得的重组VEGFB不仅具有良好的收率和纯... 详细信息

标准号: CN113603764B

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及重组VEGFB的制备方法与应用。本发明提供的重组VEGFB的制备方法主要包括重组VEGFB的纯化方法，包括包涵体溶解、亲和层析纯化、复性、凝胶过滤层析的步骤，纯化获得的重组VEGFB不仅具有良好的收率和纯度，并且具有良好的生理活性，对视网膜色素上皮细胞具有良好的保护作用。

关键词：制备视网膜色素上皮细胞凝胶过滤层析亲和层析纯化生物技术领域生理活性包涵体复性收率溶解应用

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一种药学精准定量计量器

一种药学精准定量计量器

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作者：骆玲李冰韩旭孔令雪程艳华姚满 110163 辽宁省沈阳市东陵区泗水街66号

本实用新型公开了一种药学精准定量计量器，包括：计量装置；测量管，设于所述计量装置；所述计量装置用于对取出并进入所述测量管的液体药物进行计量称重；真空装置，用于对所述测量管进行抽真空，使所述测量管内部为真空密封状态；补... 详细信息

标准号: CN215613854U

本实用新型公开了一种药学精准定量计量器，包括：计量装置；测量管，设于所述计量装置；所述计量装置用于对取出并进入所述测量管的液体药物进行计量称重；真空装置，用于对所述测量管进行抽真空，使所述测量管内部为真空密封状态；补气装置，用于向所述测量管内注入不影响其内部药物的惰性气体，保证所述测量管内的气压；抽液装置，用于从液体药物容器中将液体药物输送至所述测量管，所述测量管底端设有用于将液体药物输出到收集装置内的输出管；清洗装置，用于对所述测量管进行清洗。该计量器的抽液过程在密封状态下进行，能够使液体药物不会被空气污染，从而保证药物的药性良好。

关键词：测量管计量装置液体药物液体药物容器液体药物输送真空密封状态本实用新型定量计量器补气装置抽液装置惰性气体计量称重密封状态内部药物清洗装置收集装置真空装置抽真空计量器输出管空气污染抽液底端药性气压清洗取出保证输出

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一种全自动空气微生物采样器

一种全自动空气微生物采样器

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作者：李冰骆玲韩旭孔令雪丁娜姚满 110163 辽宁省沈阳市东陵区泗水街66号

本实用新型公开了一种全自动空气微生物采样器，包括外筒、顶盖以及设于所述外筒的进气过滤机构、保温机构和分级机构；所述进气过滤机构包括空气进料仓和过滤仓，所述空气进料仓设有进气孔，并在内部设有电机和吸附风扇，所述过滤仓内... 详细信息

标准号: CN215757334U

本实用新型公开了一种全自动空气微生物采样器，包括外筒、顶盖以及设于所述外筒的进气过滤机构、保温机构和分级机构；所述进气过滤机构包括空气进料仓和过滤仓，所述空气进料仓设有进气孔，并在内部设有电机和吸附风扇，所述过滤仓内设有空气过滤元件；所述保温机构包括处理仓，所述处理仓的侧壁设有制冷元件和保温层；所述分级机构包括上下分隔的分料仓和置物仓，所述分料仓的底部设有次等收集筒和优等收集筒，所述置物仓内设有次等承载罐和优等承载罐。该全自动空气微生物采样器可以提高空气收集的速率，防止受到高温影响杀死空气中大部分不耐热的细菌，并使空气的质量具有区分性，从而保证收集后的空气质量较高，增加检测数据的准确性。

关键词：空气微生物采样器保温机构分级机构进气过滤空气进料承载罐处理仓分料仓过滤仓收集筒置物仓外筒空气过滤元件本实用新型高温影响检测数据空气收集制冷元件顶盖保温层进气孔区分性风扇耐热侧壁吸附分隔杀死电机细菌保证

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秦皮乙素对氧化损伤ARPE-19细胞的保护作用及其机制

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中华实验眼科杂志 2020年第12期38卷 1025-1031页

作者：张英俊白鸽何向东张东蕾何伟沈阳眼产业技术研究院 110163 辽宁中医药大学沈阳110847 辽宁何氏医学院沈阳110163 沈阳何氏眼科医院 110034

目的研究秦皮乙素对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的人视网膜色素上皮细胞系ARPE-19细胞氧化损伤的影响及其机制。方法将传代ARPE-19细胞贴壁培养后分为空白对照组、模型对照组、20μmol/L秦皮乙素组、40μmol/L秦皮乙素组、80μmol/L秦皮... 详细信息

目的研究秦皮乙素对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的人视网膜色素上皮细胞系ARPE-19细胞氧化损伤的影响及其机制。方法将传代ARPE-19细胞贴壁培养后分为空白对照组、模型对照组、20μmol/L秦皮乙素组、40μmol/L秦皮乙素组、80μmol/L秦皮乙素组和100μmol/L秦皮乙素组,空白对照组细胞采用正常培养液培养,模型对照组使用900μmol/L t-BHP单独作用细胞4 h,后4个组分别使用900μmol/L t-BHP+不同浓度的秦皮乙素共同作用细胞4 h。采用MTS法检测细胞存活率;采用荧光染色分析法检测细胞内活性氧簇(ROS)活性;采用试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,以及丙二醛(MDA)含量。结果空白对照组、模型对照组、20μmol/L秦皮乙素组、40μmol/L秦皮乙素组、80μmol/L秦皮乙素组和100μmol/L秦皮乙素组细胞存活率分别为(100.00±1.58)%、(49.19±1.06)%、(76.82±3.48)%、(103.90±1.60)%、(111.70±3.36)%和(113.40±3.08)%,组间总体比较差异有统计学意义(F=95.44,P<0.01),其中与空白对照组比较,模型对照组细胞存活率明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);与模型对照组比较,各浓度秦皮乙素组细胞存活率明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.01)。各组ROS荧光强度相对值、MDA水平、SOD活力值、CAT活力值、GSH-Px活力值总体比较差异均有统计学意义(F=575.20、40.61、1802.00、41.62、38.31,均P<0.01),其中与模型对照组比较,各浓度秦皮乙素组ROS荧光强度相对值、MDA水平明显降低,SOD活性、CAT活性和GSH-Px活性明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论秦皮乙素通过上调细胞内抗氧化酶类活性或抗氧化蛋白的表达对氧化损伤的ARPE-19细胞起到保护作用。

关键词：秦皮乙素人视网膜色素上皮细胞氧化损伤抗氧化酶

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覆盆子提取物在制备预防和治疗视网膜损伤性疾病药物中的应用

覆盆子提取物在制备预防和治疗视网膜损伤性疾病药物中的应用

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作者：张东蕾杜威威何向东何伟 110000 辽宁省沈阳市浑南区泗水街66号

本发明公开了覆盆子提取物在制备预防和治疗视网膜损伤性疾病药物中的应用。本发明通过观察覆盆子提取物对过氧化氢(H2O2)诱导的氧化应激损伤人视网膜相关细胞(ARPE‑19，RGC5，Muller)的保护作用，并筛选出覆盆子中对视网膜色素上皮细胞... 详细信息

标准号: CN108159143B

本发明公开了覆盆子提取物在制备预防和治疗视网膜损伤性疾病药物中的应用。本发明通过观察覆盆子提取物对过氧化氢(H₂O₂)诱导的氧化应激损伤人视网膜相关细胞(ARPE‑19，RGC5，Muller)的保护作用，并筛选出覆盆子中对视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium，RPE)损伤具有保护作用的有效活性组分单体。为将来利用覆盆子提取物及其相关组分单体预防和治疗视网膜细胞损伤相关眼病提供理论依据。

关键词：覆盆子提取物组分单体损伤视网膜色素上皮细胞氧化应激损伤视网膜损伤视网膜细胞过氧化氢人视网膜有效活性覆盆子性疾病眼病治疗预防制备诱导筛选细胞观察应用

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一种用于延缓糖尿病认知功能障碍的中药组合物及其制备方法

一种用于延缓糖尿病认知功能障碍的中药组合物及其制备方法

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作者：岳欣欣田京立王敏郝崴魏兵何伟 110000 辽宁省沈阳市浑南区泗水街66号

本发明涉及一种用于延缓糖尿病认知功能障碍的保健品，所述的保健品组成为：人参提取物，黄芪提取物，何首乌提取物、枸杞子提取物，玉麦须提取物和水蛭提取物。糖尿病认知功能障碍属于中医“痴呆”范畴。由于脑消髓减，神机失用而致。... 详细信息

标准号: CN108066647B

本发明涉及一种用于延缓糖尿病认知功能障碍的保健品，所述的保健品组成为：人参提取物，黄芪提取物，何首乌提取物、枸杞子提取物，玉麦须提取物和水蛭提取物。糖尿病认知功能障碍属于中医“痴呆”范畴。由于脑消髓减，神机失用而致。表现为智力低下，反应迟钝，善忘等。治疗上以补肾益髓填精之法。本发明中，人参，黄芪为益气之要药，制何首乌，枸杞子为补肾之佳品，玉麦须为调脂降糖之佳品，水蛭为活血之要药，六味药合用，填精益髓，提高SOD和过氧化氢酶活性，降低过氧化脂质(LPO)和脂褐质，从而提高学习能力，缓解记忆力减退，改善学习及记忆障碍，最终达到改善糖尿病认知功能障碍症状的目的。

关键词：认知功能障碍糖尿病补肾保健品过氧化氢酶活性何首乌提取物枸杞子提取物过氧化脂质黄芪提取物记忆力减退人参提取物水蛭提取物记忆障碍学习能力制何首乌黄芪提取物脂褐质枸杞子调脂活血降糖精益水蛭味药益气人参延缓中医智力缓解治疗表现学习

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蒺藜在制备预防和治疗视网膜损伤性疾病药物中的应用

蒺藜在制备预防和治疗视网膜损伤性疾病药物中的应用

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作者：张东蕾袁振丽何向东何伟 110163 辽宁省沈阳市浑南区泗水街66号

本发明公开了蒺藜在制备预防和治疗视网膜损伤性疾病药物中的应用。本发明通过观察蒺藜对过氧化氢(H2O2)诱导的氧化应激损伤人视网膜色素上皮细胞的保护作用，以及观察蒺藜对视网膜色素上皮细胞在H2O2处理后与细胞凋亡相关分子的表达变... 详细信息

标准号: CN108938687B

本发明公开了蒺藜在制备预防和治疗视网膜损伤性疾病药物中的应用。本发明通过观察蒺藜对过氧化氢(H₂O₂)诱导的氧化应激损伤人视网膜色素上皮细胞的保护作用，以及观察蒺藜对视网膜色素上皮细胞在H₂O₂处理后与细胞凋亡相关分子的表达变化，探讨了蒺藜对氧化损伤的视网膜色素上皮细胞的抗凋亡作用及其分子作用机制，为将来利用蒺藜预防和治疗视网膜色素上皮细胞损伤相关眼病提供了理论依据。

关键词：蒺藜视网膜色素上皮细胞视网膜色素上皮细胞损伤分子作用机制色素上皮细胞氧化应激损伤抗凋亡作用视网膜损伤表达变化过氧化氢人视网膜细胞凋亡氧化损伤性疾病眼病观察制备治疗预防诱导应用

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UPLC-MS/MS法测定人血浆替代基质中8-HETE浓度的不确定度评定

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实用中医内科杂志 2021年第12期35卷 14-17页

作者：慕杨娜邸子真赵磊杨瑞唐思刘君滕丹于珊珊李国信辽宁省中医药研究院辽宁沈阳10034 辽宁何氏医学院辽宁沈阳110163

目的评定UPLC-MS/MS法测定人血浆替代基质中8-HETE浓度的不确定度。方法借助数学模型分析不确定度的来源,确定影响因素。以A类评定程序评价分析过程中随机效应引起的不确定度,以B类评定程序评价分析过程的其他因素引起的不确定度,包括:... 详细信息

目的评定UPLC-MS/MS法测定人血浆替代基质中8-HETE浓度的不确定度。方法借助数学模型分析不确定度的来源,确定影响因素。以A类评定程序评价分析过程中随机效应引起的不确定度,以B类评定程序评价分析过程的其他因素引起的不确定度,包括:称量、标准品纯度、量瓶允差、移液器及移液管允差、回收率及标准曲线的拟合等,计算合成不确定度及扩展不确定度。结果置信概率P为95%时,人血浆替代基质中低(2.06μg/L)、中(25.28μg/L)、高(80.72μg/L)浓度8-HETE的扩展不确定度分别为1.44μg/L、3.08μg/L及8.78μg/L。结论本方法绿色环保,样品回收率高,数据准确、可靠,适用于UPLC-MS/MS法测定人血浆替代基质中8-HETE浓度,测量不确定度主要由线性回归过程引入,其他分量影响较小。该方法能够满足检测标准的要求,确保数据的国际互认。

关键词： 8-HETE UPLC-MS/MS法人血浆替代基质不确定度扩展不确定度

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