检索结果-内蒙古大学图书馆

新乡医学院学报 2025年第4期42卷 260-265页

作者：朱振东皇甫晶晶李月路坦姜来胡涛任文杰新乡医学院组织工程与再生临床医学中心河南新乡453003 新乡医学院第三附属医院河南省创伤与骨科研究医学重点实验室河南新乡453003 新乡医学院第一附属医院骨科河南卫辉453100 南京吾岳道医疗科技发展有限公司江苏南京210000 上海骁博科技发展有限公司上海200120

随着生物医学工程的不断发展,镁基生物材料因其优异的生物相容性、适中的密度以及良好的生物降解性,成为骨科植入材料研究的热点。镁基生物材料能够在体内逐渐降解并被骨组织吸收,从而避免传统金属生物材料在治疗过程中需要二次手术取... 详细信息

随着生物医学工程的不断发展,镁基生物材料因其优异的生物相容性、适中的密度以及良好的生物降解性,成为骨科植入材料研究的热点。镁基生物材料能够在体内逐渐降解并被骨组织吸收,从而避免传统金属生物材料在治疗过程中需要二次手术取出的弊端。然而,镁基生物材料仍然面临降解速率过快、耐腐蚀性较差、力学性能不稳定等问题,限制了其在临床上的广泛应用。为了解决这些挑战,研究人员开发了多种改性方法,包括合金化、表面处理、多孔结构设计以及纳米技术等。本文总结了镁基生物材料的基本特性,探讨了各类改性技术的原理、优势与局限性,并展望了未来的发展方向。

关键词：镁基生物材料骨科植入材料合金化改性表面处理多孔化纳米技术

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靶向LOX-1基因RNAi慢病毒载体的构建及鉴定

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中国细胞生物学学报 2013年第7期35卷 973-978页

作者：李俊陶贵周黄建华辽宁医学院附属第一医院心内科锦州121001 辽宁医学院附属第一医院组织工程重点实验室锦州121001

该研究针对LOX-1基因(OLR1)设计并合成3条siRNA干扰序列,与双酶切的U6-vshR-NA-CMV-GFP慢病毒载体连接得到重组载体,包装慢病毒并测定滴度。采用最佳MOI值及转染条件,转染人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVE... 详细信息

该研究针对LOX-1基因(OLR1)设计并合成3条siRNA干扰序列,与双酶切的U6-vshR-NA-CMV-GFP慢病毒载体连接得到重组载体,包装慢病毒并测定滴度。采用最佳MOI值及转染条件,转染人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC),转染96 h后通过RT-PCR和Western blot检测LOX-1 mRNA及蛋白的表达,流式细胞仪检测转染后ox-LDL诱导HUVEC的凋亡情况。测序证实靶向LOX-1 RNAi慢病毒载体构建成功;RT-PCR和Western blot结果显示转染后LOX-1 mRNA及蛋白均受到不同程度抑制(P<0.05);流式检测结果显示抑制LOX-1表达后ox-LDL诱导HUVEC凋亡显著减少(P<0.05)。该研究应用RNAi技术成功构建LOX-1 RNAi慢病毒载体,有效抑制了LOX-1的表达,显著减少了ox-LDL诱导的凋亡,为进一步研究LOX-1基因沉默减轻内皮细胞损伤及相应保护机制奠定了基础。

关键词： LOX-1 慢病毒载体 RNA干扰人脐静脉内皮细胞凋亡

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突变型低氧诱导因子-1α腺病毒载体的构建及常氧表达

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中华实验外科杂志 2011年第9期28卷 1539-1540,F0003,F0004页

作者：李谌靳云龙胡亮刘丹平辽宁医学院附属第一医院辽宁省医学组织工程重点实验室锦州121001 辽宁医学院附属第一医院骨关节外科锦州121001

目的为了在常氧条件下观察低氧诱导因子-1α（HIF-1α）在骨缺损部位促新血管生成作用，构建能够同时表达突变型HIF-1仅和人源化绿色荧光蛋白（hrGFP）的腺病毒载体并检测其在兔骨髓间充质干细胞（MSCs）中的表达。方法利用聚合酶链式... 详细信息

目的为了在常氧条件下观察低氧诱导因子-1α（HIF-1α）在骨缺损部位促新血管生成作用，构建能够同时表达突变型HIF-1仅和人源化绿色荧光蛋白（hrGFP）的腺病毒载体并检测其在兔骨髓间充质干细胞（MSCs）中的表达。方法利用聚合酶链式反应（PCR）定点突变人HIF-1α编码区（CDS）第402、564和803位氨基酸，将突变后HIF-1α和hrGFP重组入pAdEasy-1系统，包装病毒并测定滴度。以感染复数（MOI）=100将腺病毒转染MSCs，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和Westernblot方法检测转染细胞中HIF-1αmRNA和蛋白表达。结果（1）第402、564和803位氨基酸均定点突变为丙氨酸。（2）A、B两组HIF-10tmRNA表达量明显高于C、D两组，差异有统计学意义（P〈0．01）；A组HIF-1α蛋白表达量明显高于其他3组，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论（1）腺病毒载体Ad—HIF-1α mu-IRES—hrGFP-1构建成功。（2）突变后HIF-1α基因能够在常氧条件下大量且高效表达。

关键词：低氧诱导因子-1α 基因突变重组腺病毒载体骨髓间充质干细胞

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羟基红花黄色素通过RhoA/ROCK通路保护大鼠心肌再灌注损伤的机制研究

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临床心血管病杂志 2015年第7期31卷 791-794页

作者：王亚光王鹏刘洪光张媛媛陶贵周黄建华辽宁医学院附属第一医院心内科辽宁锦州121001 辽宁医学院附属第一医院组织工程重点实验室

目的:研究羟基红花黄色素A对大鼠离体缺血心脏再灌注的保护作用,探讨其与Rho/ROCK信号通路的作用。方法:36只大鼠被随机分为7组,采用离体心脏灌流模型,给予缺血预处理及药物灌流,比较各组心率、冠状动脉流量,测定左心室内压,TTC心肌染... 详细信息

目的:研究羟基红花黄色素A对大鼠离体缺血心脏再灌注的保护作用,探讨其与Rho/ROCK信号通路的作用。方法:36只大鼠被随机分为7组,采用离体心脏灌流模型,给予缺血预处理及药物灌流,比较各组心率、冠状动脉流量,测定左心室内压,TTC心肌染色评估梗死范围,Western blot检测心肌组织内ROCK1、ROCK2活性以及Caspase-3的表达。结果:治疗组大鼠心脏缺血再灌注损伤减轻,心肌梗死面积减少,ROCK1、ROCK2活性以及Caspase-3的表达减低。结论:羟基红花黄色素A能够减轻大鼠心脏缺血再灌注损伤,同时减少心肌梗死面积,其作用机制可能与其抑制RhoA/ROCK信号通路,减少Caspase-3的表达有关。

关键词：羟基红花黄色素A 缺血再灌注损伤 RhoA/ROCK Caspase-3

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黄芩苷对再灌注心肌细胞保护作用及与心肌细胞自噬的相关性

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中国循环杂志 2016年第7期31卷 701-705页

作者：王鹏马军军杜亚明辽宁医学院附属第一医院胸心外科辽宁省锦州市121001 辽宁医学院附属第一医院组织工程重点实验室辽宁省锦州市121001

目的 :探讨黄芩苷对再灌注心肌细胞保护作用及与心肌细胞自噬的相关性。方法 :将48只大鼠随机分为4组(n=12):假手术组,假手术+黄芩苷组,缺血再灌注组,黄芩苷处理组。术前7天每日1次灌胃,建立各组模型。统计各组同时间点的血流动力学及... 详细信息

目的 :探讨黄芩苷对再灌注心肌细胞保护作用及与心肌细胞自噬的相关性。方法 :将48只大鼠随机分为4组(n=12):假手术组,假手术+黄芩苷组,缺血再灌注组,黄芩苷处理组。术前7天每日1次灌胃,建立各组模型。统计各组同时间点的血流动力学及再灌注45 min后心肌梗死面积情况,免疫印迹试验(Western blot)测定再灌注30 min后心肌微管相关蛋白(LC3-Ⅱ)及自噬体膜标记蛋白(Becl-1)表达情况,再灌注30 min后检测线粒体膜通道转换孔(m PTP)开放情况。结果 :假手术组和假手术+黄芩苷组心肌梗死面积极小,不便进行比较。缺血再灌注组心肌梗死面积(41.32±1.85)%,黄芩苷处理组心肌梗死面积(23.30±1.60)%,两组差异有统计学意义(P<0.001)。再灌注30min后LC3-Ⅱ及Becl-1蛋白表达量,缺血再灌注组(LC3-Ⅱ:1.051±0.005,Becl-1:1.169±0.002)和黄芩苷处理组(LC3-Ⅱ:0.863±0.009,Becl-1:0.943±0.005)较假手术组(LC3-Ⅱ:0.763±0.007,Becl-1:0.647±0.014)明显增加(P<0.01);黄芩苷处理组较缺血再灌注组明显下降(P<0.01)。再灌注30 min后烟酰胺腺嘌呤=核苷酸(NAD+)含量(nmol/mg),缺血再灌注组(6.02±0.33)和黄芩苷处理组(9.56±0.53)较假手术组(11.28±0.37)明显下降(P<0.01);黄芩苷处理组较缺血再灌注组明显增加(P<0.01)。结论 :黄芩苷对正常心肌细胞自噬无影响,但能显著减少缺血再灌注心肌梗死面积,降低再灌注后的过度自噬发生,其机制可能通过抑制m PTP开放从而减少自噬的相关诱导因素发挥作用。

关键词：黄芩苷心肌再灌注保护自噬

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急性冠脉综合征患者血液Rho激酶活性分析

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医学与哲学（B） 2014年第7期35卷 26-29页

作者：刘洪光陶贵周黄建华虞改雪辽宁医学院附属第一医院心内科辽宁锦州121001 辽宁医学院附属第一医院组织工程重点实验室辽宁锦州121001 山东省莘县人民医院山东聊城252400

探讨Rho激酶(ROCK)活性与急性冠脉综合征(ACS)患者冠状动脉狭窄程度及预后的关系。选取2012年6月至2013年3月住院的129例患者,其中急性心肌梗死(AMI)组68例、不稳定型心绞痛(UA)组30例、对照(CON)组31例。Western Blot检测血液白细胞中R... 详细信息

探讨Rho激酶(ROCK)活性与急性冠脉综合征(ACS)患者冠状动脉狭窄程度及预后的关系。选取2012年6月至2013年3月住院的129例患者,其中急性心肌梗死(AMI)组68例、不稳定型心绞痛(UA)组30例、对照(CON)组31例。Western Blot检测血液白细胞中ROCK、ROCK1、ROCK2活性,同时根据冠状动脉的狭窄程度及是否发生心血管意外分组再次比较。AMI组和UA组ROCK、ROCK1、ROCK2活性均增高;且AMI组高于UA组;三支、双支、单支病变组活性依次减低,Gensini评分≥20分组及发生心血管意外组均高于Gensini评分<20分组及未发生心血管意外组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROCK活性可能对ACS患者预后观察、评估有重要意义。

关键词：急性冠脉综合征 Rho 激酶 Gensini 评分预后

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骨髓间充质干细胞中突变型人低氧诱导因子1α真核表达载体的表达

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中国组织工程研究与临床康复 2011年第45期15卷 8495-8498页

作者：张男李谌郭韬刘丹平辽宁医学院附属第一医院中心实验室辽宁省医学组织工程重点实验室辽宁省外科学重点实验室辽宁省锦州市121000 辽宁医学院附属第一医院骨关节外科辽宁省锦州市121000

背景:转基因小鼠体内实验证实,重组的低氧诱导因子1α可以促进皮肤形态功能正常的血管新生。目的:构建能够在常氧条件下同时表达突变型低氧诱导因子1α目的蛋白和绿色荧光蛋白报告分子的新型腺病毒真核表达载体,并转染SD大鼠骨髓间充质... 详细信息

背景:转基因小鼠体内实验证实,重组的低氧诱导因子1α可以促进皮肤形态功能正常的血管新生。目的:构建能够在常氧条件下同时表达突变型低氧诱导因子1α目的蛋白和绿色荧光蛋白报告分子的新型腺病毒真核表达载体,并转染SD大鼠骨髓间充质干细胞,检测该基因在细胞中的表达情况。方法:利用Lipofectamine2000介导将构建成功的重组腺病毒真核表达载体pAd-HIF1αmu-IRES-hrGFP-1转染HEK293A细胞,包装病毒,以最佳感染指数=50将重组腺病毒转染大鼠骨髓间充质干细胞,并设3个对照组,即阳性对照组:转染Ad-CMV-HIF1α-IRES-hrGFP-1;阴性对照组:转染Ad-CMV-IRES-hrGFP-1组;空白组:未转染病毒。结果与结论:①腺病毒载体成功转染HEK293A细胞,包装成功,细胞内有大量绿色荧光表达。②转染突变型低氧诱导因子1α腺病毒表达载体的细胞在常氧条件下蛋白表达量明显高于转其他3组,3个对照组间差异无显著性意义(P>0.05)。提示突变型腺病毒真核表达载体Ad-HIF1α-IRES-hrGFP-1在HEK293A内成功包装;突变后低氧诱导因子1α基因能够在常氧条件下大量且高效表达。

关键词：低氧诱导因子1α 基因突变重组腺病毒载体骨髓间充质干细胞转染

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RNA干扰LOX-1表达对氧化型低密度脂蛋白诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护机制

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中国动脉硬化杂志 2014年第9期22卷 891-896页

作者：刘洪光陶贵周李俊黄建华虞改雪辽宁医学院附属第一医院心内科辽宁省锦州市121001 辽宁医学院附属第一医院组织工程重点实验室辽宁省锦州市121001 莘县人民医院山东省莘县252400

目的构建血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)基因的RNA干扰慢病毒载体并转染人脐静脉内皮细胞。观察干扰LOX-1表达后对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导内皮细胞损伤的保护机制。方法针对已经筛选确定的小干扰RNA有效干扰序列,合成... 详细信息

目的构建血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)基因的RNA干扰慢病毒载体并转染人脐静脉内皮细胞。观察干扰LOX-1表达后对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导内皮细胞损伤的保护机制。方法针对已经筛选确定的小干扰RNA有效干扰序列,合成慢病毒LV-si-OLR1最佳干扰序列,测定滴度。转染人脐静脉内皮细胞96 h后,通过荧光显微镜观察转染效率,逆转录聚合酶链反应和Western blot检测LOX-1的抑制效率。转染72 h后加入150 mg/L ox-LDL处理24 h;噻唑蓝比色法检测细胞存活率;硝酸还原酶法检测各组内皮细胞培养液一氧化氮(NO)的含量;Western blot检测各组细胞间黏附分子1(ICAM-1)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、RhoA、Rho激酶1(ROCK1)、Rho激酶2(ROCK2)的表达。结果测序结果证实,靶向人LOX-1的干扰慢病毒载体构建成功,包装后慢病毒滴度为6×1011TU/L。转染组与未转染组比较,LOX-1 mRNA与蛋白的表达明显减少(P<0.01)。与正常对照组相比,ox-LDL处理组能明显减低内皮细胞的存活率及NO的生成量,增高ICAM-1、MCP-1、RhoA、ROCK1、ROCK2的表达(P<0.05);与ox-LDL处理组相比,干扰LOX-1表达后对ox-LDL诱导的内皮细胞存活率、NO生成量减低和ICAM-1、MCP-1、RhoA、ROCK1、ROCK2表达增高均有明显抑制作用(P<0.05)。结论干扰LOX-1表达,对ox-LDL诱导内皮细胞引起的ICAM-1、MCP-1高表达和RhoA/Rho激酶信号通路的激活及细胞存活率、NO生成量的减低均有明显抑制作用,起到对内皮细胞损伤的保护作用。本研究为LOX-1作为靶基因治疗动脉粥样硬化提供了实验依据。

关键词：血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1 RNA干扰细胞间黏附分子1 单核细胞趋化蛋白1 一氧化氮 RhoA/Rho激酶

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三种生物骨衍生材料修复节段性骨缺损的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2005年第2期19卷 118-123页

作者：李彦林杨浩韩睿李林芝李秀群李世和赵晓霞昆明医学院第一附属医院骨科昆明650032 四川大学华西医院人类疾病生物治疗教育部重点实验室:干细胞与组织工程研究室

目的　评价 3种生物骨衍生材料修复节段性骨缺损的成骨作用。　方法　将 6 0只健康日本大耳白兔双侧桡骨中段制成 10 mm节段性骨缺损 ,并随机分为 A、B、C、D和 E组 ,每组 12只 ,其中 A组植入复合型完全脱蛋白骨 (composite fully depro... 详细信息

目的　评价 3种生物骨衍生材料修复节段性骨缺损的成骨作用。　方法　将 6 0只健康日本大耳白兔双侧桡骨中段制成 10 mm节段性骨缺损 ,并随机分为 A、B、C、D和 E组 ,每组 12只 ,其中 A组植入复合型完全脱蛋白骨 (composite fully deproteinised bone,CFDB)、B组植入部分脱蛋白骨 (partially deproteinised bone,PDPB)、C组植入部分脱钙骨 (partially decalcified bone,PDCB)修复兔桡骨节段性缺损 ,D组自体髂骨移植 ,E组以空白缺损为对照 ,于术后4、8、12及 2 4周取材 ,通过 X线摄片和不脱钙硬组织切片检测 ,评价 3种材料的成骨作用。　结果　 X线摄片观察 :A、B与 C组 4周时材料密度较高 ;8周时材料与宿主骨交界处模糊 ;12周时材料边缘部分区域密度接近宿主骨 ;2 4周时 B组髓腔再通 ,C组缺损区域密度大部分接近宿主骨 ,有少许高密度影 ,A组缺损区域有较多高密度影。 X线片评分 4周和8周时各材料组无统计学差异 (P>0 .0 5 ) ;12周时 B组和 C组高于 A组 (P<0 .0 5 ) ;2 4周时 D组 >B组 >C组 >A组(P<0 .0 5 )。经组织学形态观察可见 4周和 8周时新骨贴附材料生长 ;以后新骨增多 ;材料随着时间的推移逐渐降解吸收 ;2 4周时成骨量 D组 >B组 >C组 >A组 (P<0 .0 5 )。　结论　 PDPB修复节段性骨缺损的效果佳 ,

关键词：节段性骨缺损植入修复桡骨 X线摄片成骨作用宿主生物蛋白硬组织

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RNA干扰人血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体表达对内皮细胞骨架损伤的影响

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中华老年心脑血管病杂志 2015年第1期17卷 79-82页

作者：刘洪光屈宝泽陶贵周黄建华辽宁医学院附属第一医院心内科锦州121001 辽宁医学院附属第一医院组织工程重点实验室锦州121001

目的构建针对人血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)基因的RNA干扰慢病毒载体,并转染人脐静脉内皮细胞后,采取氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导观察对内皮细胞骨架损伤的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞分为对照组、ox-LDL组(ox-... 详细信息

目的构建针对人血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)基因的RNA干扰慢病毒载体,并转染人脐静脉内皮细胞后,采取氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导观察对内皮细胞骨架损伤的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞分为对照组、ox-LDL组(ox-LDL处理)、阴性转染组(ox-LDL处理+阴性慢病毒转染)和慢病毒转染组(ox-LDL处理+最佳干扰序列慢病毒转染)。荧光显微镜观察转染效率,Western blot检测磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)、Rho激酶(ROCK)、LOX-1蛋白的表达;免疫荧光法观察细胞骨架肌动蛋白(F-actin)的变化。结果与对照组比较,ox-LDL组和阴性转染组p-MLC、ROCK、LOX-1蛋白表达增高;细胞F-actin发生损伤并伴含量减少(P<0.05)。与阴性转染组比较,慢病毒转染组抑制p-MLC、ROCK、LOX-1蛋白表达,减轻F-actin损伤及伴含量增加(P<0.05)。结论干扰LOX-1表达对ox-LDL诱导引起的内皮细胞ROCK、p-MLC表达增加及细胞骨架损伤均有抑制作用。

关键词： RNA干扰脂蛋白类 LDL 内皮细胞细胞骨架肌动蛋白类 rho相关激酶类

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