检索结果-内蒙古大学图书馆

羟基红花黄色素通过RhoA/ROCK通路保护大鼠心肌再灌注损伤的机制研究

临床心血管病杂志 2015年第7期31卷 791-794页

作者：王亚光王鹏刘洪光张媛媛陶贵周黄建华辽宁医学院附属第一医院心内科辽宁锦州121001 辽宁医学院附属第一医院组织工程重点实验室

目的:研究羟基红花黄色素A对大鼠离体缺血心脏再灌注的保护作用,探讨其与Rho/ROCK信号通路的作用。方法:36只大鼠被随机分为7组,采用离体心脏灌流模型,给予缺血预处理及药物灌流,比较各组心率、冠状动脉流量,测定左心室内压,TTC心肌染... 详细信息

目的:研究羟基红花黄色素A对大鼠离体缺血心脏再灌注的保护作用,探讨其与Rho/ROCK信号通路的作用。方法:36只大鼠被随机分为7组,采用离体心脏灌流模型,给予缺血预处理及药物灌流,比较各组心率、冠状动脉流量,测定左心室内压,TTC心肌染色评估梗死范围,Western blot检测心肌组织内ROCK1、ROCK2活性以及Caspase-3的表达。结果:治疗组大鼠心脏缺血再灌注损伤减轻,心肌梗死面积减少,ROCK1、ROCK2活性以及Caspase-3的表达减低。结论:羟基红花黄色素A能够减轻大鼠心脏缺血再灌注损伤,同时减少心肌梗死面积,其作用机制可能与其抑制RhoA/ROCK信号通路,减少Caspase-3的表达有关。

关键词：羟基红花黄色素A 缺血再灌注损伤 RhoA/ROCK Caspase-3

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人胚胎干细胞向肌腱细胞分化方法的专家共识

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浙江大学学报（医学版） 2016年第2期45卷 105-111页

作者：陈晓邹晓晖俞光岩傅歆曹彤肖殷欧阳宏伟浙江大学医学院干细胞与再生医学系浙江大学李达三·叶耀珍干细胞与再生医学研究中心浙江省组织工程与再生医学技术重点实验室浙江杭州310058 浙江大学医学院附属第一医院中心实验室浙江杭州310003 北京大学口腔医学院口腔颌面外科北京100081 中国医学科学院整形外科医院研究中心北京100144 新加坡国立大学口腔医学院口腔科学系干细胞实验室新加坡119083 澳大利亚昆士兰科技大学健康与生物医学研究所澳大利亚布里斯班QLD4059

胚胎干细胞具有无限增殖能力，可能为组织工程提供肌腱细胞或肌腱祖细胞的来源。为规范人胚胎干细胞来源的肌腱细胞的分化方法，提高人肌腱细胞的纯度，保证分化方法的可重复性，使其更系统、规范和有效地应用于临床和生物安全性评价体... 详细信息

胚胎干细胞具有无限增殖能力，可能为组织工程提供肌腱细胞或肌腱祖细胞的来源。为规范人胚胎干细胞来源的肌腱细胞的分化方法，提高人肌腱细胞的纯度，保证分化方法的可重复性，使其更系统、规范和有效地应用于临床和生物安全性评价体系中，科技部国际合作专项有关专家制定了《人胚胎干细胞向肌腱细胞分化方法共识》。共识建议通过两步法将人胚胎干细胞诱导为肌腱细胞：首先利用不同材料表面将人胚胎干细胞诱导为成体间充质干细胞，然后采用高密度种植形成无支架组织工程肌腱，并利用静态或动态力学刺激在体内外环境下将成体间充质干细胞诱导成肌腱细胞。由此建立的体外组织工程肌腱可作为检测评价模型。对小分子化合物、医用材料和药物进行肌腱相关的毒理学系统分析和安全性评价。

关键词：胚胎干细胞腱/细胞学间质干细胞组织工程细胞分化细胞培养技术

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原始骨髓间充质干细胞治疗慢性移植物抗宿主病临床研究方案

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基础医学与临床 2017年第3期37卷 296-299页

作者：黄河周道斌于力艾辉胜刘开彦赵春华浙江大学附属第一医院血液科浙江杭州310006 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院血液科北京100730 中国人民解放军总医院血液科北京100094 中国人民解放军307医院血液科北京100071 北京大学人民医院血液科北京大学血液病研究所北京100044 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所组织工程研究中心干细胞新药研发及临床转化研究北京市重点实验室北京100005

慢性移植物抗宿主病（chronic graft versus host disease,c GVHD）是发生于异基因造血干细胞移植100 d后重要并发症,发生率为30%~60%。c GVHD是表现为类似自身免疫及其他免疫疾病的多系统损害的一种全身性疾病,可累及皮肤、肝脏、肾脏... 详细信息

慢性移植物抗宿主病（chronic graft versus host disease,c GVHD）是发生于异基因造血干细胞移植100 d后重要并发症,发生率为30%~60%。c GVHD是表现为类似自身免疫及其他免疫疾病的多系统损害的一种全身性疾病,可累及皮肤、肝脏、肾脏、周围神经等多脏器,造成患者生活质量严重下降,是移植晚期导致死亡的主要原因[1-3]。

关键词： GVHD 全身性疾病多系统损害 graft versus 自身免疫骨髓穿刺针血药浓度生活质量固定器

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RNA干扰人血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体表达对内皮细胞骨架损伤的影响

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中华老年心脑血管病杂志 2015年第1期17卷 79-82页

作者：刘洪光屈宝泽陶贵周黄建华辽宁医学院附属第一医院心内科锦州121001 辽宁医学院附属第一医院组织工程重点实验室锦州121001

目的构建针对人血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)基因的RNA干扰慢病毒载体,并转染人脐静脉内皮细胞后,采取氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导观察对内皮细胞骨架损伤的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞分为对照组、ox-LDL组(ox-... 详细信息

目的构建针对人血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)基因的RNA干扰慢病毒载体,并转染人脐静脉内皮细胞后,采取氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导观察对内皮细胞骨架损伤的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞分为对照组、ox-LDL组(ox-LDL处理)、阴性转染组(ox-LDL处理+阴性慢病毒转染)和慢病毒转染组(ox-LDL处理+最佳干扰序列慢病毒转染)。荧光显微镜观察转染效率,Western blot检测磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)、Rho激酶(ROCK)、LOX-1蛋白的表达;免疫荧光法观察细胞骨架肌动蛋白(F-actin)的变化。结果与对照组比较,ox-LDL组和阴性转染组p-MLC、ROCK、LOX-1蛋白表达增高;细胞F-actin发生损伤并伴含量减少(P<0.05)。与阴性转染组比较,慢病毒转染组抑制p-MLC、ROCK、LOX-1蛋白表达,减轻F-actin损伤及伴含量增加(P<0.05)。结论干扰LOX-1表达对ox-LDL诱导引起的内皮细胞ROCK、p-MLC表达增加及细胞骨架损伤均有抑制作用。

关键词： RNA干扰脂蛋白类 LDL 内皮细胞细胞骨架肌动蛋白类 rho相关激酶类

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Akt/GSK-3β/eNOS通路在藏红花酸保护离体大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

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天津医药 2015年第11期43卷 1300-1303页

作者：王亚光王鹏陶贵周黄建华辽宁医学院附属第一医院心内科锦州121001 辽宁医学院附属第一医院院组织工程重点实验室锦州121001

目的研究藏红花酸(CRO)对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,探讨其与丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)/糖原合成酶激酶(GSK)-3β/一氧化氮合酶(eNOS)信号通路的关系。方法 SD大鼠40只,随机数字表法均分为正常(N)组、缺血再灌注(IR)组及5... 详细信息

目的研究藏红花酸(CRO)对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,探讨其与丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)/糖原合成酶激酶(GSK)-3β/一氧化氮合酶(eNOS)信号通路的关系。方法 SD大鼠40只,随机数字表法均分为正常(N)组、缺血再灌注(IR)组及5、10、15 mg/L加药(CRO_1、CRO_2、CRO_3)组,比较再灌注30 min时各组心率(HR),冠脉流量(CF),左心室内压测定(LVDP、LV+dp/dtmax、LV-dp/dtmax)。灌流结束TTC心肌染色评估梗死范围,分光光度法测定肌浆乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK-MB);Western blot检测各组心肌组织内Akt、磷酸化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)、GSK-3β、磷酸化的糖原合成酶激酶(p-GSK)-3β、eNOS、磷酸化的一氧化氮合酶(p-NOS)。结果 IR组再灌注30 min时HR、CF、LVDP、LV+dp/dtmax、LV-dp/dtmax较N组及加药组降低,心肌梗死面积较加药组增大,LDH、CK-MB表达较N组及加药组增加(均P<0.05),CRO_3组再灌注指标较CRO_1组升高,梗死面积降低,LDH、CK-MB表达减少(P<0.05)。IR组Akt、GSK-3b及eNOS较N组及加药组的表达差异无统计学意义,但p-Akt、p-GSK-3β及p-NOS与N组及加药组降低,且CRO_3组较CRO_1组增加(均P<0.05)。结论藏红花酸能够减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其作用机制可能与激活Akt/GSK-3β/eNOS通路并影响其磷酸化水平有关。

关键词：体外循环再灌注损伤蛋白激酶类糖原合成酶激酶-3β 一氧化氮合酶氧化磷酸化

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急性冠脉综合征患者血液Rho激酶活性分析

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医学与哲学（B） 2014年第7期35卷 26-29页

作者：刘洪光陶贵周黄建华虞改雪辽宁医学院附属第一医院心内科辽宁锦州121001 辽宁医学院附属第一医院组织工程重点实验室辽宁锦州121001 山东省莘县人民医院山东聊城252400

探讨Rho激酶(ROCK)活性与急性冠脉综合征(ACS)患者冠状动脉狭窄程度及预后的关系。选取2012年6月至2013年3月住院的129例患者,其中急性心肌梗死(AMI)组68例、不稳定型心绞痛(UA)组30例、对照(CON)组31例。Western Blot检测血液白细胞中R... 详细信息

探讨Rho激酶(ROCK)活性与急性冠脉综合征(ACS)患者冠状动脉狭窄程度及预后的关系。选取2012年6月至2013年3月住院的129例患者,其中急性心肌梗死(AMI)组68例、不稳定型心绞痛(UA)组30例、对照(CON)组31例。Western Blot检测血液白细胞中ROCK、ROCK1、ROCK2活性,同时根据冠状动脉的狭窄程度及是否发生心血管意外分组再次比较。AMI组和UA组ROCK、ROCK1、ROCK2活性均增高;且AMI组高于UA组;三支、双支、单支病变组活性依次减低,Gensini评分≥20分组及发生心血管意外组均高于Gensini评分<20分组及未发生心血管意外组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROCK活性可能对ACS患者预后观察、评估有重要意义。

关键词：急性冠脉综合征 Rho 激酶 Gensini 评分预后

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RNA干扰LOX-1表达对氧化型低密度脂蛋白诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护机制

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中国动脉硬化杂志 2014年第9期22卷 891-896页

作者：刘洪光陶贵周李俊黄建华虞改雪辽宁医学院附属第一医院心内科辽宁省锦州市121001 辽宁医学院附属第一医院组织工程重点实验室辽宁省锦州市121001 莘县人民医院山东省莘县252400

目的构建血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)基因的RNA干扰慢病毒载体并转染人脐静脉内皮细胞。观察干扰LOX-1表达后对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导内皮细胞损伤的保护机制。方法针对已经筛选确定的小干扰RNA有效干扰序列,合成... 详细信息

目的构建血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)基因的RNA干扰慢病毒载体并转染人脐静脉内皮细胞。观察干扰LOX-1表达后对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导内皮细胞损伤的保护机制。方法针对已经筛选确定的小干扰RNA有效干扰序列,合成慢病毒LV-si-OLR1最佳干扰序列,测定滴度。转染人脐静脉内皮细胞96 h后,通过荧光显微镜观察转染效率,逆转录聚合酶链反应和Western blot检测LOX-1的抑制效率。转染72 h后加入150 mg/L ox-LDL处理24 h;噻唑蓝比色法检测细胞存活率;硝酸还原酶法检测各组内皮细胞培养液一氧化氮(NO)的含量;Western blot检测各组细胞间黏附分子1(ICAM-1)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、RhoA、Rho激酶1(ROCK1)、Rho激酶2(ROCK2)的表达。结果测序结果证实,靶向人LOX-1的干扰慢病毒载体构建成功,包装后慢病毒滴度为6×1011TU/L。转染组与未转染组比较,LOX-1 mRNA与蛋白的表达明显减少(P<0.01)。与正常对照组相比,ox-LDL处理组能明显减低内皮细胞的存活率及NO的生成量,增高ICAM-1、MCP-1、RhoA、ROCK1、ROCK2的表达(P<0.05);与ox-LDL处理组相比,干扰LOX-1表达后对ox-LDL诱导的内皮细胞存活率、NO生成量减低和ICAM-1、MCP-1、RhoA、ROCK1、ROCK2表达增高均有明显抑制作用(P<0.05)。结论干扰LOX-1表达,对ox-LDL诱导内皮细胞引起的ICAM-1、MCP-1高表达和RhoA/Rho激酶信号通路的激活及细胞存活率、NO生成量的减低均有明显抑制作用,起到对内皮细胞损伤的保护作用。本研究为LOX-1作为靶基因治疗动脉粥样硬化提供了实验依据。

关键词：血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1 RNA干扰细胞间黏附分子1 单核细胞趋化蛋白1 一氧化氮 RhoA/Rho激酶

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靶向LOX-1基因RNAi慢病毒载体的构建及鉴定

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中国细胞生物学学报 2013年第7期35卷 973-978页

作者：李俊陶贵周黄建华辽宁医学院附属第一医院心内科锦州121001 辽宁医学院附属第一医院组织工程重点实验室锦州121001

该研究针对LOX-1基因(OLR1)设计并合成3条siRNA干扰序列,与双酶切的U6-vshR-NA-CMV-GFP慢病毒载体连接得到重组载体,包装慢病毒并测定滴度。采用最佳MOI值及转染条件,转染人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVE... 详细信息

该研究针对LOX-1基因(OLR1)设计并合成3条siRNA干扰序列,与双酶切的U6-vshR-NA-CMV-GFP慢病毒载体连接得到重组载体,包装慢病毒并测定滴度。采用最佳MOI值及转染条件,转染人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC),转染96 h后通过RT-PCR和Western blot检测LOX-1 mRNA及蛋白的表达,流式细胞仪检测转染后ox-LDL诱导HUVEC的凋亡情况。测序证实靶向LOX-1 RNAi慢病毒载体构建成功;RT-PCR和Western blot结果显示转染后LOX-1 mRNA及蛋白均受到不同程度抑制(P<0.05);流式检测结果显示抑制LOX-1表达后ox-LDL诱导HUVEC凋亡显著减少(P<0.05)。该研究应用RNAi技术成功构建LOX-1 RNAi慢病毒载体,有效抑制了LOX-1的表达,显著减少了ox-LDL诱导的凋亡,为进一步研究LOX-1基因沉默减轻内皮细胞损伤及相应保护机制奠定了基础。

关键词： LOX-1 慢病毒载体 RNA干扰人脐静脉内皮细胞凋亡

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组织因子途径抑制物2在胃间质瘤组织中的表达及临床意义

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解放军医学院学报 2013年第3期34卷 269-272页

作者：邓蓓蓓王贵军王玉彬李迪诺李谌辽宁医学院附属第一医院妇科辽宁锦州121001 辽宁医学院附属第一医院普外科辽宁锦州121001 辽宁医学院附属第一医院辽宁省医学组织工程重点实验室辽宁锦州121001

目的探讨组织因子途径抑制物2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)在胃间质瘤组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组化、RT-PCR、Western blot检测TFPI-2在72例胃间质瘤患者的肿瘤中心处组织、瘤旁组织及正常胃组织中的表达... 详细信息

目的探讨组织因子途径抑制物2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)在胃间质瘤组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组化、RT-PCR、Western blot检测TFPI-2在72例胃间质瘤患者的肿瘤中心处组织、瘤旁组织及正常胃组织中的表达。结果 TFPI-2在正常组织中的表达水平明显高于肿瘤旁组织,在瘤旁组织中表达水平明显高于瘤中心处组织(P<0.01)。胃间质瘤中心组织TFPI-2的表达水平随着NIH分级升高而下调(P<0.01),TFPI-2的低表达与肿瘤侵袭转移关系密切(P<0.05)。结论正常胃组织中TFPI-2的表达水平明显高于间质瘤组织,TFPI-2的表达下降可能与间质瘤的侵袭与转移有关。

关键词：胃肠道间质瘤组织因子途径抑制物2 侵袭转移

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TGF-β1基因转染在软骨组织工程中应用的研究进展

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中华全科医学 2013年第2期11卷 280-281,285页

作者：阮晓军周建生王志岩蚌埠医学院第一附属医院骨科安徽省蚌埠市233004 蚌埠医学院第一附属医院组织工程安徽重点实验室

关节软骨的损伤在骨科临床上十分常见。关节软骨主要由软骨细胞和软骨细胞外基质组成，由于关节软骨无血液供应和神经支配，软骨细胞代谢活性低，而且自我修复能力较弱，导致了关节软骨损伤的修复成为临床骨科的一大难题。

关键词： TGF—β1 软骨损伤基因转染组织工程

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