检索结果-内蒙古大学图书馆

遗传 2010年第11期32卷 1126-1132页

作者：乔旭吴芬芳苏鹏李庆伟辽宁师范大学海洋生物功能基因及蛋白质组学研究所大连116029

成孔毒素(Pore-forming toxins,PFTs)通常与细菌等原核生物的致病机理相关,在真核生物中,这类蛋白在免疫、胚胎发育、神经细胞迁移等方面发挥着重要作用。其中球状蛋白成孔毒素中的两大家族,胆固醇结合细胞溶素(Cholesterol-dependent c... 详细信息

成孔毒素(Pore-forming toxins,PFTs)通常与细菌等原核生物的致病机理相关,在真核生物中,这类蛋白在免疫、胚胎发育、神经细胞迁移等方面发挥着重要作用。其中球状蛋白成孔毒素中的两大家族,胆固醇结合细胞溶素(Cholesterol-dependent cytolysins,CDCs)和攻膜复合体/穿孔素超家族(Membrane attack complex/perforin superfamily,MACPF)以其独特的分子构型和功能受到研究者的关注。CDCs由革兰氏阳性细菌产生,在细菌的侵染过程中发挥裂解靶细胞膜的作用;在真核生物中,MACPF蛋白同时具有裂解和非裂解两种形式。目前,对于以产气荚膜梭菌溶血素(PFO)为代表的CDCs蛋白的结构及分子机制了解得较为透彻,近年来晶体学及生物化学研究揭示,尽管CDCs和MACPF这两大家族成孔毒素在氨基酸序列水平上存在较大差异,但它们共同的折叠模式预示:MACPF蛋白以一种类似于CDCs的成孔机制来行使其裂解靶膜的功能。文章对这两大家族成孔毒素的结构、成孔机制以及目前的研究热点问题予以综述,为该领域今后的研究提供有益参考。

关键词：成孔毒素胆固醇结合细胞溶素攻膜复合体/穿孔素超家族补体系统

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无颌类脊椎动物适应性免疫系统的研究进展

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遗传 2009年第10期31卷 969-976页

作者：梁佼刘欣吴芬芳李庆伟辽宁师范大学海洋生物功能基因及蛋白质组学研究所大连116029

在以七鳃鳗和盲鳗为代表的无颌类脊椎动物中,虽然发现了与有颌类脊椎动物T细胞受体(T-cell receptors,TLRs)、B细胞受体(B-cell receptors,BCRs)可变区具有相似结构的先天性免疫受体,却从未发现有颌类脊椎动物适应性免疫系统的核心组分:... 详细信息

在以七鳃鳗和盲鳗为代表的无颌类脊椎动物中,虽然发现了与有颌类脊椎动物T细胞受体(T-cell receptors,TLRs)、B细胞受体(B-cell receptors,BCRs)可变区具有相似结构的先天性免疫受体,却从未发现有颌类脊椎动物适应性免疫系统的核心组分:TCRs、BCRs、组织相容性复合体(Major histocompatibility complex,MHC)。因此,长期以来,人们一直认为适应性免疫系统只存在于有颌类脊椎动物中。但最近的一项发现彻底改变了这一传统观念,即在无颌类脊椎动物中,存在一种新型可变淋巴细胞受体VLRs(Variable lymphocyte receptors),VLRs通过改变亮氨酸富集序列LRRs(Leucine-rich repeats)的插入情况,实现对特异性抗原的高效识别。晶体衍射分析发现,盲鳗的VLRs呈现一种"马蹄"型结构,抗原结合位点则位于"马蹄"的凹面区。分泌型的VLRs以四聚体或五聚体的形式识别、结合特异性抗原。综上所述,无颌类和有颌类脊椎动物应用不同的抗原识别系统完成适应性免疫反应。文章对近年来无颌类脊椎动物适应性免疫系统相关分子的研究进展加以概述,为揭示适应性免疫系统起源与进化问题提供有益参考。

关键词：适应性免疫无颌类脊椎动物基因加倍可变淋巴受体亮氨酸重复序列

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激肽原基因的选择性剪接与功能研究进展

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遗传 2006年第12期28卷 1649-1655页

作者：周丽伟马飞李庆伟辽宁师范大学海洋生物功能基因与蛋白质组学研究所大连116029

激肽原基因在不同物种中有一定的差异,其编码的蛋白质产物也有所不同。在人类、牛和小鼠中存在的激肽原基因K是一种选择性剪接基因,其可以编码两种激肽原产物,而在大鼠中,除了激肽原基因K之外还有一类激肽原基因T,其只能编码一种激肽原... 详细信息

激肽原基因在不同物种中有一定的差异,其编码的蛋白质产物也有所不同。在人类、牛和小鼠中存在的激肽原基因K是一种选择性剪接基因,其可以编码两种激肽原产物,而在大鼠中,除了激肽原基因K之外还有一类激肽原基因T,其只能编码一种激肽原。激肽原属于半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族中家族3的成员,是一类具有多个结构域的多功能蛋白,在人体内多种功能协同作用,维持着机体的正常生理状态。激肽原的凝血和抗凝血两种相互拮抗的功能既能使破损的血管得到修复,防止流血不止,又能抑制血管内血栓的形成。本文将对目前研究较多的人、牛、小鼠和大鼠的激肽原基因的选择性剪接以及激肽原的凝血、抗凝血等多方面的功能做一综述,为更进一步地阐明激肽原基因的进化机制,加深对基因选择性剪接机制的了解,揭示激肽原功能的认识等方面有所启示,并为调节血管通透性、调节血压和抗肿瘤等新药的开发提供有益的参考。

关键词：激肽原选择性剪接抗凝血凝血疾病

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重组七鳃鳗细胞毒素蛋白rLj-RGD3表达及对Hela细胞活性的影响

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生物工程学报 2009年第5期25卷 686-694页

作者：张丕桥王继红刘欣褚丹李庆伟辽宁师范大学海洋生物功能基因与蛋白质组学研究所大连116029

为研究重组七鳃鳗细胞毒素蛋白rLj-RGD3的抗肿瘤活性,确定其生物学地位及意义,本研究提取成体七鳃鳗(Lampetra japonica)口腔腺组织总RNA,经RT-PCR获得cDNA序列长度为357bp的目的基因片段,将其克隆于pET23b载体,获得带有组氨酸标签的分... 详细信息

为研究重组七鳃鳗细胞毒素蛋白rLj-RGD3的抗肿瘤活性,确定其生物学地位及意义,本研究提取成体七鳃鳗(Lampetra japonica)口腔腺组织总RNA,经RT-PCR获得cDNA序列长度为357bp的目的基因片段,将其克隆于pET23b载体,获得带有组氨酸标签的分子量为15kD的基因重组蛋白rLj-RGD3的高效可溶性表达,通过组氨酸亲和层析纯化蛋白。采用MTT法检测不同浓度rLj-RGD3对bFGF诱导下的Hela细胞增殖的抑制作用,结果表明rLj-RGD3能显著抑制Hela细胞的增殖,IC50为2.6μmol/L。rLj-RGD3作用后的Hela细胞经Hoechst染色及DNAladder检测结果显示,细胞均发生凋亡。rLj-RGD3对Hela细胞黏附玻连蛋白(VN)作用的实验结果为有效抑制。采用Transwell细胞培养板对bFGF诱导下的Hela细胞迁移实验表明,rLj-RGD3能够抑制Hela细胞的迁移,且抑制率达60%。采用人工基质膜基质Matrigel及Transwell模仿体内环境研究rLj-RGD3对Hela细胞浸润行为实验显示,以bFGF为趋化剂的Hela细胞穿透Matrigel的浸润行为明显受到抑制。以上研究表明,rLj-RGD3具有典型的RGD毒素蛋白的功能,有望应用于抗肿瘤基因工程药物开发,具有重要的生物学意义。

关键词：七鳃鳗 RGD模体整合素基因重组抗肿瘤

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Y-box结合蛋白功能及对肿瘤发生的影响

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遗传 2006年第9期28卷 1153-1160页

作者：张玮玮黄惠芳李庆伟马飞辽宁师范大学海洋生物功能基因与蛋白质组学研究所大连116029

Y-box结合蛋白家族成员是一类高度保守的顺式作用元件,广泛存在于原核及真核生物细胞中。它是一种多功能蛋白,与转录调节、翻译调控、mRNA选择性剪接、DNA的修复、细胞增殖和再生等有关。Y-box结合蛋白的氨基酸序列包含3个结构域:氨基酸... 详细信息

Y-box结合蛋白家族成员是一类高度保守的顺式作用元件,广泛存在于原核及真核生物细胞中。它是一种多功能蛋白,与转录调节、翻译调控、mRNA选择性剪接、DNA的修复、细胞增殖和再生等有关。Y-box结合蛋白的氨基酸序列包含3个结构域:氨基酸N末端,亲水结构域C末端,冷休克结构域(coldshockdomainCSD),保守的冷休克结构域决定了Y-box结合蛋白的大部分功能。最近研究发现,定位于细胞核中的YB-1蛋白在局部晚期非小细胞肺癌的预防上可作为新的靶位点,YB-1蛋白还可通过对抑癌基因p53启动子抑制起负调控作用,此外,YB-1蛋白在PI3K/Akt信号通路中也起到重要的作用,这些研究都为肿瘤的治疗提供了新的线索和启示。文章就Y-box结合蛋白功能及其对肿瘤发生的影响等方面进行概述。

关键词： Y-box结合蛋白冷休克结构域转录调节翻译调控肿瘤发生

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Lck和Fyn对T细胞发育过程的影响

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遗传 2012年第3期34卷 289-295页

作者：戴鹏刘欣李庆伟辽宁师范大学海洋生物功能基因及蛋白质组学研究所大连116029 辽宁师范大学城市与环境学院大连116029

胸腺中T细胞的发育及次级淋巴组织中成熟T细胞的活化均需要细胞能够对环境信号分子做出适应性的反应。在共刺激分子及细胞因子受体介导的信号参与下通过TCR(T cell receptor)及其辅助受体CD4和CD8与MHC/抗原肽复合物相互作用,可以诱导TC... 详细信息

胸腺中T细胞的发育及次级淋巴组织中成熟T细胞的活化均需要细胞能够对环境信号分子做出适应性的反应。在共刺激分子及细胞因子受体介导的信号参与下通过TCR(T cell receptor)及其辅助受体CD4和CD8与MHC/抗原肽复合物相互作用,可以诱导TCR信号通路激活并最终导致T细胞免疫反应的发生。Src家族激酶Lck(Lymphocyte-specific protein tyrosine kinase)和Fyn(Proto-oncogene tyrosine-protein kinase)的激活是启动TCR信号通路的关键因素。在T细胞的发育、阳性选择、初始T细胞的外周存活及由淋巴细胞缺失诱导的细胞增殖中都起着关键性的作用。研究显示,虽然这两种信号分子紧密相关,但在某些条件下Lck发挥着比Fyn更重要的作用,并且Fyn仅可以补充Lck的部分功能。文章针对这两个激酶在T细胞发育的整个过程中的作用机制进行了论述。

关键词： Lck Fyn TCR 细胞发育信号转导

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临床诊断与治疗的新工具——可变淋巴细胞受体

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遗传 2013年第1期35卷 55-61页

作者：于涛韩英伦肖蓉刘欣李庆伟辽宁师范大学生命科学学院大连116081 辽宁师范大学海洋生物功能基因及蛋白质组学研究所大连116081

单克隆抗体(Monoclonal antibody,mAb)在癌症以及自身免疫等疾病的诊断与治疗中得到广泛应用,并且取得了重大进展。当今应用于临床的单克隆抗体是在免疫球蛋白的基础上进行改造研发而得。然而近期发现的无颌类脊椎动物的特异性抗原受体... 详细信息

单克隆抗体(Monoclonal antibody,mAb)在癌症以及自身免疫等疾病的诊断与治疗中得到广泛应用,并且取得了重大进展。当今应用于临床的单克隆抗体是在免疫球蛋白的基础上进行改造研发而得。然而近期发现的无颌类脊椎动物的特异性抗原受体一可变淋巴细胞受体(Variable lymphocyte receptor,VLR),为抗体类试剂或药物的研发提供了新的视角。与免疫球蛋白(Immunoglobulins,Ig)相比,VLR与抗原结合的特异性、亲和力及稳定性都优于Ig类抗体,并且抗原特异性单克隆VLR的制备技术日趋成熟。因此,VLR在临床诊断和治疗中具有更高的应用价值,并可能成为新一代的抗体药物。文章就VLR的基本特征、制备方法及其应用前景进行综述,为实现VLR在临床诊断与治疗等领域中的应用提供有益参考。

关键词：可变淋巴细胞受体单克隆抗体药物临床诊断工程蛋白支架

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日本七鳃鳗(Lampetra japonica)VLRB的克隆表达及单克隆抗体制备

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遗传 2012年第4期34卷 465-471页

作者：吴芬芳马宁陈立勇苏鹏李庆伟辽宁师范大学生命科学学院大连116029 辽宁师范大学海洋生物功能基因及蛋白质组学研究所大连116029

七鳃鳗(Lampetra japonica)和盲鳗(Hyperotreti)作为现存的无颌类脊椎动物的代表,其适应性免疫系统中的受体分子与哺乳动物的抗原受体分子不同,这种独特的受体分子称为可变淋巴细胞受体VLRs(Variable lym-phocyte receptors)。目前VLRs... 详细信息

七鳃鳗(Lampetra japonica)和盲鳗(Hyperotreti)作为现存的无颌类脊椎动物的代表,其适应性免疫系统中的受体分子与哺乳动物的抗原受体分子不同,这种独特的受体分子称为可变淋巴细胞受体VLRs(Variable lym-phocyte receptors)。目前VLRs分为3类,分别是VLRA、VLRB、VLRC,而VLRB由七鳃鳗类B淋巴细胞产生,是其体液免疫中主要成分,与IgM结构和功能类似。文章对日本七鳃鳗VLRB基因保守的C末端进行克隆、原核表达和重组蛋白纯化后,免疫Balb/c小鼠,通过细胞融合及间接酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immu-nosorbent assay,ELISA)筛选技术得到针对VLRB保守区的单克隆抗体细胞株。将杂交瘤细胞接种小鼠腹腔得到大量的单抗腹水,经Protein G亲和纯化后的单抗进行ELISA与Western blotting检测。经ELISA检测抗体效价为1:40000。Western blotting结果显示该单克隆抗体能够特异的检测重组VLRB蛋白及七鳃鳗血清中分泌型VLRB。流式细胞实验证明该单抗能特异识别七鳃鳗类淋巴细胞表面表达的膜型VLRB。VLRB单克隆抗体的成功制备和建株,为研究日本七鳃鳗基于VLR的适应性免疫系统提供了重要的工具。

关键词：七鳃鳗可变淋巴细胞受体(VLR) VLRB 单克隆抗体

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日本七鳃鳗(Lampetra japonica)Lyb基因的克隆与分析

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遗传 2008年第12期30卷 1597-1602页

作者：金萍张玮玮黄惠芳马飞辽宁师范大学海洋生物功能基因与蛋白质组学研究所大连116029 山西生物应用职业技术学院太原030001

采用RT-PCR和RACE技术,从日本七鳃鳗(Lampetra japonica)口腔腺、肝脏中分离获得了3条Y-box基因序列,分别命名为Lyb1、Lyb2和Lyb3,生物信息学分析其编码的蛋白质序列长度分别为331、181和171个氨基酸残基。采用DNAMAN软件,将七鳃鳗的3个... 详细信息

采用RT-PCR和RACE技术,从日本七鳃鳗(Lampetra japonica)口腔腺、肝脏中分离获得了3条Y-box基因序列,分别命名为Lyb1、Lyb2和Lyb3,生物信息学分析其编码的蛋白质序列长度分别为331、181和171个氨基酸残基。采用DNAMAN软件,将七鳃鳗的3个Y-box蛋白氨基酸序列蛋蛋蛋、蛋马蛋、蛋蛋、蛋蛋蛋和小鼠Y-box蛋白进行同源性分析,结果显示他们共有一个保守的冷休克结构域,其中包含两个RNA结合基序RNP-1和RNP-2,表明获得的Lyb基因属于Y-box基因家族成员。此外,从Swiss-Prot下载了经实验验证过的Y-box蛋白序列数据,结合实验克隆得到的Lyb基因所编码的氨基酸序列构建系统发育树,发现Y-box基因在有颌类出现以前只有一种类型,有颌类出现以后,Y-box基因分化成YB1、YB2和CSDA三种类型。

关键词：日本七鳃鳗 Y-box基因 cDNA末端快速扩增(RACE) 序列分析系统发育分析

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Kv1.3通道阻滞剂与T、B淋巴细胞介导的自身免疫疾病

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免疫学杂志 2010年第4期26卷 356-361页

作者：胡明逄越刘欣李庆伟辽宁师范大学海洋生物功能基因及蛋白质组学研究所大连410629 辽宁师范大学城市与环境学院大连110629

T、B淋巴细胞在免疫调节过程中扮演重要作用。当免疫系统调控出现紊乱时则会导致自身免疫等疾病的发生,已证实Kv1.3通道在T、B淋巴细胞亚型中表达数量的变化与此类疾病的发生一定的联系。特异性的Kv1.3通道阻滞剂是以Kv1.3通道为靶点并... 详细信息

T、B淋巴细胞在免疫调节过程中扮演重要作用。当免疫系统调控出现紊乱时则会导致自身免疫等疾病的发生,已证实Kv1.3通道在T、B淋巴细胞亚型中表达数量的变化与此类疾病的发生一定的联系。特异性的Kv1.3通道阻滞剂是以Kv1.3通道为靶点并与Kv1.3通道结合,调节在淋巴细胞增殖中的细胞因子及相关的信号通路来遏制自身免疫疾病的发展。与传统的治疗此类疾病的方法相比有着其独特的优势,如较强特异性,较少的副作用等。这些发现对于深入研究自身免疫疾病的病理机制、早期诊断及新型药物的发现具有深远的意义。

关键词： Kv1.3通道通道阻滞剂自身免疫疾病

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