检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医药指南 2012年第32期10卷 672-673页

作者：王燕钟世军邵敏遵义医学院珠海校区生物化学与细胞分子生物学教研室广东珠海519041

生物化学是一门重要的医学基础课程,与多种学科有密切关系,越来越成为生命学科的共同语言,在医学及生物类专业的学生培养中具有十分重要的地位。由于其内在知识结构系统性强、内容抽象、缺乏直观性,教学过程又受到其他基础学科的制约,... 详细信息

生物化学是一门重要的医学基础课程,与多种学科有密切关系,越来越成为生命学科的共同语言,在医学及生物类专业的学生培养中具有十分重要的地位。由于其内在知识结构系统性强、内容抽象、缺乏直观性,教学过程又受到其他基础学科的制约,严重影响了学生的学习兴趣和教学效果。同时,生物化学教学中普遍存在着教学时间有限性和知识增长无限性的矛盾。要解决好这一矛盾,保证知识、能力、素质的协调发展,关键是深化教学内容和教学方式的改革,充分利用有限的授课时间最大限度的提高教学效率和效果;我们在以往的生化课程教学中注重丰富多种教学方式的实践,激发了学生的学习兴趣、调动学生学习的积极主动性,获得了较为明显的教学效果。

关键词：生物化学教学改革

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动物性中药材地龙DNA条形码初步研究

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广东农业科学 2011年第17期38卷 114-116页

作者：吕国庆牛宪立姬可平遵义医学院珠海校区广东珠海519041 遵义医学院珠海校区生化与细胞分子生物学教研室广东珠海519041

利用通用引物对中药材地龙的COⅠ、16S rDNA片断进行PCR扩增、测序、分析,并构建系统进化树,将获得的中药材地龙COⅠ、16S rDNA片断序列提交到GenBank中的DNA Barcoding数据库进行分析。结果显示:(1)中药材地龙COⅠ片断的长度为682 bp,... 详细信息

利用通用引物对中药材地龙的COⅠ、16S rDNA片断进行PCR扩增、测序、分析,并构建系统进化树,将获得的中药材地龙COⅠ、16S rDNA片断序列提交到GenBank中的DNA Barcoding数据库进行分析。结果显示:(1)中药材地龙COⅠ片断的长度为682 bp,其中变异位点(SNP多态位点)有179个,多态位点约占片断总长的26%,碱基A+T的含量为58.8%、G+C的含量为41.2%。16S rDNA片断的长度为503 bp,其中变异位点有70个,多态位点约占片断总长的14%,碱基A+T的含量为62.4%、G+C的含量为37.6%;(2)获得COⅠ序列的登录号为HQ405769-HQ405776,16S rDNA序列的登录号为HQ405777-HQ405783;(3)中药材地龙DNA中COⅠ序列的基因多态性比16S rDNA序列更显著,适合做为中药材地龙的DNA条形码。

关键词：中药材地龙 DNA条形码线粒体细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ基因(COⅠ) 16SrRNA基因(16SrDNA)

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中药材地龙DNA提取方法的比较分析

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安徽农业科学 2011年第5期39卷 2629-2630页

作者：吕国庆姬可平牛宪立梅露露遵义医学院广东珠海519041 遵义医学院珠海校区生化与细胞分子生物学教研室广东珠海519041

以地龙为例,对中药材DNA的几种常用提取方法进行了比较分析,为中药的鉴定提供参考。

关键词：中药材地龙 DNA提取比较

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3种药用红树植物rDNA ITS序列初步研究

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广东农业科学 2011年第17期38卷 109-110,116页

作者：牛宪立吴群姬可平遵义医学院珠海校区生化与细胞分子生物学教研室广东珠海519041 武汉市第二中西医结合医院检验科湖北武汉201319

应用改良CTAB法分别提取生长于珠海和海南的3种药用红树植物秋茄、老鼠簕和桐花树的基因组DNA,以真核生物rDNA ITS区的通用引物分别对其rDNA ITS区进行nPCR扩增及测序,并对测序结果进行对位排列。结果表明,不同来源的药用红树植物的rDNA... 详细信息

应用改良CTAB法分别提取生长于珠海和海南的3种药用红树植物秋茄、老鼠簕和桐花树的基因组DNA,以真核生物rDNA ITS区的通用引物分别对其rDNA ITS区进行nPCR扩增及测序,并对测序结果进行对位排列。结果表明,不同来源的药用红树植物的rDNA ITS序列上存在扩增碱基差异,rDNA ITS测序结果可作为鉴定药用红树植物种质资源的分子标记之一。

关键词： rDNA 红树植物 nPCR 测序种质资源

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建立我国中药材DNA条形码数据库方法的探讨和前景展望

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新乡医学院学报 2010年第4期27卷 416-418页

作者：吕国庆姬可平牛宪立吴群梅露露遵义医学院珠海校区 2008级研究生广东珠海519041 遵义医学院珠海校区生化与细胞分子生物学教研室广东珠海519041

中药鉴定是中药学的核心。我国的中药材种类繁多,资源丰富,由于来源复杂,真伪难辨,传统的中药鉴定技术有各种不足。近些年出现的DNA条形码可以很好地应用于中药材的鉴定。建立一个中药材的DNA条形码数据库对我国中药材鉴定是非常有益的... 详细信息

中药鉴定是中药学的核心。我国的中药材种类繁多,资源丰富,由于来源复杂,真伪难辨,传统的中药鉴定技术有各种不足。近些年出现的DNA条形码可以很好地应用于中药材的鉴定。建立一个中药材的DNA条形码数据库对我国中药材鉴定是非常有益的,可以极大地提高中药材的鉴定水平,促进中药的现代化。DNA条形码在动物中采用线粒体基因已经确定,但是植物中还没有广泛认同的条形码标准片段。由于中药材绝大多数是植物,目前植物类中药材条形码的研究倾向于用一种或多种条形码联合应用。

关键词：中药鉴定 DNA条形码 DNA分子鉴定技术细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ 叶绿体基因

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抑制消减杂交筛选乳腺癌相关基因

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中国民族民间医药 2009年第10期18卷 21-22页

作者：王燕钟世军邵敏张青峰遵义医学院珠海校区生化与细胞生物学教研室广东珠海519041

目的:为了研究乳腺癌发生的分子遗传学机理,分离克隆模型鼠乳腺癌组织中特异表达的基因。方法:利用抑制消减杂交技术,结合反向cDNA斑点杂交试验,小鼠乳腺癌组织中分离出与正常乳腺组织差异表达的EST,应用生物信息学方法鉴定所得EST的小... 详细信息

目的:为了研究乳腺癌发生的分子遗传学机理,分离克隆模型鼠乳腺癌组织中特异表达的基因。方法:利用抑制消减杂交技术,结合反向cDNA斑点杂交试验,小鼠乳腺癌组织中分离出与正常乳腺组织差异表达的EST,应用生物信息学方法鉴定所得EST的小鼠同源基因,并分析其与乳腺癌发生的相关性。结果:获得20个在小鼠乳腺癌组织中高表达的,与已知的小鼠基因片段高度同源的基因,及2个与数据库中提交的假想蛋白基因高度同源的基因。结论:利用抑制消减杂交技术,可以高效高通量分析在乳腺癌中特异表达的基因,探讨乳腺癌发生的分子机制。

关键词：抑制消减杂交技术乳腺癌基因

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ING4基因对人胃癌细胞SGC-7901生物行为的影响

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中国免疫学杂志 2008年第7期24卷 612-614,617页

作者：黄俊琼孙万邦张海峰杨吉成遵义医学院珠海校区免疫学教研室珠海519041 苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室苏州215123

目的:研究人ING4对人胃癌细胞SGC-7901的影响,探讨其作用机制。方法:将重组腺病毒质粒pAd-ING4用PacI线性化,经脂质体转染QBI-293A细胞,获得重组病毒Ad-ING4。Ad-ING4感染人SGC-7901细胞,RT-PCR及Western blot分析ING4和p21表达,MTT法检测Ad-ING4对细胞生长的影响,激光共聚焦显微镜检测细胞凋亡。结果:Ad-ING4感染后,SGC-7901细胞中有ING4 mRNA和蛋白质表达,细胞生长受到明显抑制,与野生型SGC-7901细胞相比,p21表达水平增高,细胞凋亡率明显增高,P<0.05。结论:ING4可通过上调p21表达发挥抑制SGC-7901细胞生长、诱导细胞凋亡的作用。

关键词： ING4 Ad-ING4 人SGC-7901细胞 p21

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人IL-31的克隆表达及对表皮角化细胞的影响

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中国免疫学杂志 2007年第4期23卷 369-373页

作者：黄俊琼孙万邦谢宇锋盛伟华缪竞诚杜联峰杨吉成苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室苏州215123 遵义医学院珠海校区免疫学教研室珠海519000

目的克隆人IL-31基因,构建真核表达载体,研究人IL-31对表皮角化细胞HaCaT的影响及其作用机制。方法PMA、PHA刺激正常人外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,采用RT-PCR克隆人IL-31基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)A,进行PC... 详细信息

目的克隆人IL-31基因,构建真核表达载体,研究人IL-31对表皮角化细胞HaCaT的影响及其作用机制。方法PMA、PHA刺激正常人外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,采用RT-PCR克隆人IL-31基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)A,进行PCR和双酶切鉴定,并进行序列测定。将重组质粒转染CHO细胞,用RT-PCR和Western blot分析rhIL-31在CHO细胞中的表达。用Ni2+树脂纯化his融合蛋白,用不同剂量rhIL-31刺激HaCaT细胞,利用Transwell穿孔板检测HaCaT细胞培养上清对外周血单个核细胞的趋化作用,荧光定量PCR检测rhIL-31对HaCaT表达趋化因子的影响,Western blot检测STAT3磷酸化。结果成功获得全长人IL-31基因,测序正确,经双酶切、PCR和序列测定鉴定,真核表达质粒构建正确,可在CHO细胞中表达;该目的蛋白刺激人表皮角化细胞HaCaT,细胞培养上清对外周血单个核细胞有趋化作用,HaCaT细胞表达趋化因子MDC、TARC、I-309;细胞STAT3磷酸化增加。结论IL-31作用于正常人表皮角化细胞,细胞培养上清对外周血单个核细胞有趋化作用,HaCaT细胞趋化因子表达增加,细胞STAT3磷酸化增加,提示IL-31可通过STAT3发挥作用。

关键词：人IL-31 表皮角化细胞趋化因子趋化作用 STAT3

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人IL-31基因克隆、表达及在皮肤炎症中的作用

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免疫学杂志 2007年第3期23卷 306-310页

作者：黄俊琼谢宇锋盛伟华缪竞诚孙万邦余妍杨吉成苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室江苏苏州215123 遵义医学院珠海校区免疫学教研室广东珠海519041

目的克隆人IL-31基因,构建原核表达载体,并诱导其在大肠杆菌中表达,研究hIL-31蛋白与皮肤炎症的关系。方法采用RT-PCR克隆人IL-31基因,将其克隆到原核表达载体pET28a(+),并通过IPTG诱导目的基因在大肠杆菌中表达,用该目的蛋白刺激人表... 详细信息

目的克隆人IL-31基因,构建原核表达载体,并诱导其在大肠杆菌中表达,研究hIL-31蛋白与皮肤炎症的关系。方法采用RT-PCR克隆人IL-31基因,将其克隆到原核表达载体pET28a(+),并通过IPTG诱导目的基因在大肠杆菌中表达,用该目的蛋白刺激人表皮角质细胞HaCaT,RT-PCR检测趋化因子MIP-3β、TARC及TCA-3(I-309)mRNA的表达;小鼠皮内注射该目的蛋白,观察局部炎症表现,皮肤标本HE染色观察皮肤炎性特征,采血进行白细胞计数及分类,ELISA法检测血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平,流式细胞仪分析胸腺及脾脏T细胞亚群。结果成功获得495bp的人IL-31基因,原核表达质粒构建正确,IPTG诱导目的基因在大肠杆菌中大量表达;该目的蛋白可刺激HaCaT表达趋化因子MIP-3β、TARCI、-309;小鼠皮肤注射部位有脱毛,HE染色可见炎性细胞浸润,外周血白细胞总数增加,中性粒细胞比例增高,血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平增高,脾脏CD4+T细胞百分比增高,CD8+T细胞百分比减少。结论人IL-31基因克隆及原核表达已获成功,hIL-31蛋白可刺激HaCaT细胞表达MIP-3β、TARC、I-309,诱导小鼠皮肤炎症反应。

关键词：人IL-31 克隆表达皮肤炎症

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灵芝浸出液在香蕉组织培养中的抑菌作用

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热带亚热带植物学报 2006年第3期14卷 229-232页

作者：唐历波遵义医学院珠海校区生物化学及细胞分子生物学教研室广东珠海519000

设计不同浓度的灵芝浸出液培养基,以香蕉(Musa sapientumL.)作为培养材料,通过定量接种不同种类的细菌及真菌以观察灵芝浸出液的抑菌效果。结果表明,采用野生灵芝10 g于1 000 ml蒸馏水中煮2 h的浸出液配制的培养基,不仅能使香蕉正常生长... 详细信息

设计不同浓度的灵芝浸出液培养基,以香蕉(Musa sapientumL.)作为培养材料,通过定量接种不同种类的细菌及真菌以观察灵芝浸出液的抑菌效果。结果表明,采用野生灵芝10 g于1 000 ml蒸馏水中煮2 h的浸出液配制的培养基,不仅能使香蕉正常生长,而且已感染细菌的材料经一段时间培养后,细菌污染消失,恢复正常。研究结果对于香蕉转基因操作以及完善组织培养技术具有重要的参考意义。

关键词：真菌灵芝香蕉组织培养抑菌作用

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