检索结果-内蒙古大学图书馆

中国免疫学杂志 2008年第7期24卷 612-614,617页

作者：黄俊琼孙万邦张海峰杨吉成遵义医学院珠海校区免疫学教研室珠海519041 苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室苏州215123

目的:研究人ING4对人胃癌细胞SGC-7901的影响,探讨其作用机制。方法:将重组腺病毒质粒pAd-ING4用PacI线性化,经脂质体转染QBI-293A细胞,获得重组病毒Ad-ING4。Ad-ING4感染人SGC-7901细胞,RT-PCR及Western blot分析ING4和p21表达,MTT法检测Ad-ING4对细胞生长的影响,激光共聚焦显微镜检测细胞凋亡。结果:Ad-ING4感染后,SGC-7901细胞中有ING4 mRNA和蛋白质表达,细胞生长受到明显抑制,与野生型SGC-7901细胞相比,p21表达水平增高,细胞凋亡率明显增高,P<0.05。结论:ING4可通过上调p21表达发挥抑制SGC-7901细胞生长、诱导细胞凋亡的作用。

关键词： ING4 Ad-ING4 人SGC-7901细胞 p21

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人IL-31的克隆表达及对表皮角化细胞的影响

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中国免疫学杂志 2007年第4期23卷 369-373页

作者：黄俊琼孙万邦谢宇锋盛伟华缪竞诚杜联峰杨吉成苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室苏州215123 遵义医学院珠海校区免疫学教研室珠海519000

目的克隆人IL-31基因,构建真核表达载体,研究人IL-31对表皮角化细胞HaCaT的影响及其作用机制。方法PMA、PHA刺激正常人外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,采用RT-PCR克隆人IL-31基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)A,进行PC... 详细信息

目的克隆人IL-31基因,构建真核表达载体,研究人IL-31对表皮角化细胞HaCaT的影响及其作用机制。方法PMA、PHA刺激正常人外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,采用RT-PCR克隆人IL-31基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)A,进行PCR和双酶切鉴定,并进行序列测定。将重组质粒转染CHO细胞,用RT-PCR和Western blot分析rhIL-31在CHO细胞中的表达。用Ni2+树脂纯化his融合蛋白,用不同剂量rhIL-31刺激HaCaT细胞,利用Transwell穿孔板检测HaCaT细胞培养上清对外周血单个核细胞的趋化作用,荧光定量PCR检测rhIL-31对HaCaT表达趋化因子的影响,Western blot检测STAT3磷酸化。结果成功获得全长人IL-31基因,测序正确,经双酶切、PCR和序列测定鉴定,真核表达质粒构建正确,可在CHO细胞中表达;该目的蛋白刺激人表皮角化细胞HaCaT,细胞培养上清对外周血单个核细胞有趋化作用,HaCaT细胞表达趋化因子MDC、TARC、I-309;细胞STAT3磷酸化增加。结论IL-31作用于正常人表皮角化细胞,细胞培养上清对外周血单个核细胞有趋化作用,HaCaT细胞趋化因子表达增加,细胞STAT3磷酸化增加,提示IL-31可通过STAT3发挥作用。

关键词：人IL-31 表皮角化细胞趋化因子趋化作用 STAT3

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人IL-31基因克隆、表达及在皮肤炎症中的作用

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免疫学杂志 2007年第3期23卷 306-310页

作者：黄俊琼谢宇锋盛伟华缪竞诚孙万邦余妍杨吉成苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室江苏苏州215123 遵义医学院珠海校区免疫学教研室广东珠海519041

目的克隆人IL-31基因,构建原核表达载体,并诱导其在大肠杆菌中表达,研究hIL-31蛋白与皮肤炎症的关系。方法采用RT-PCR克隆人IL-31基因,将其克隆到原核表达载体pET28a(+),并通过IPTG诱导目的基因在大肠杆菌中表达,用该目的蛋白刺激人表... 详细信息

目的克隆人IL-31基因,构建原核表达载体,并诱导其在大肠杆菌中表达,研究hIL-31蛋白与皮肤炎症的关系。方法采用RT-PCR克隆人IL-31基因,将其克隆到原核表达载体pET28a(+),并通过IPTG诱导目的基因在大肠杆菌中表达,用该目的蛋白刺激人表皮角质细胞HaCaT,RT-PCR检测趋化因子MIP-3β、TARC及TCA-3(I-309)mRNA的表达;小鼠皮内注射该目的蛋白,观察局部炎症表现,皮肤标本HE染色观察皮肤炎性特征,采血进行白细胞计数及分类,ELISA法检测血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平,流式细胞仪分析胸腺及脾脏T细胞亚群。结果成功获得495bp的人IL-31基因,原核表达质粒构建正确,IPTG诱导目的基因在大肠杆菌中大量表达;该目的蛋白可刺激HaCaT表达趋化因子MIP-3β、TARCI、-309;小鼠皮肤注射部位有脱毛,HE染色可见炎性细胞浸润,外周血白细胞总数增加,中性粒细胞比例增高,血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平增高,脾脏CD4+T细胞百分比增高,CD8+T细胞百分比减少。结论人IL-31基因克隆及原核表达已获成功,hIL-31蛋白可刺激HaCaT细胞表达MIP-3β、TARC、I-309,诱导小鼠皮肤炎症反应。

关键词：人IL-31 克隆表达皮肤炎症

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人白介素-12植物表达载体的构建

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第四军医大学学报 2007年第10期28卷 868-870页

作者：邵敏周鹤峰葛正龙遵义医学院珠海校区生物化学教研室广东珠海519041 遵义医学院珠海校区生物工程教研室广东珠海519041 遵义医学院生物化学与分子生物学教研室贵州遵义563003

目的构建人白介素-12(hIL-12)基因的植物表达载体.方法采用PCR技术从质粒pCA13-hIL-12中扩增hIL-12基因,SmaI,SacI分别酶切hIL-12基因和植物表达载体pBI121,回收,T4DNA连接酶连接得到重组质粒pBI121-hIL-12,双酶切和DNA测序鉴定后,通过... 详细信息

目的构建人白介素-12(hIL-12)基因的植物表达载体.方法采用PCR技术从质粒pCA13-hIL-12中扩增hIL-12基因,SmaI,SacI分别酶切hIL-12基因和植物表达载体pBI121,回收,T4DNA连接酶连接得到重组质粒pBI121-hIL-12,双酶切和DNA测序鉴定后,通过三亲杂交法将表达载体pBI121-hIL-12分别导入根癌农杆菌EHA105和GV3101,用PCR法进行鉴定.结果双酶切及DNA序列测定证实hIL-12已插入到表达载体pBI121中,PCR扩增表明构建的重组表达载体pBI121-hIL-12成功转入根癌农杆菌EHA105和GV3101中.结论成功构建了植物表达载体pBI121-hIL-12,为进一步利用转基因植物生产hIL-12奠定了实验基础.

关键词：人白细胞介素-12 植物表达载体载体构建根瘤菌属

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灵芝浸出液在香蕉组织培养中的抑菌作用

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热带亚热带植物学报 2006年第3期14卷 229-232页

作者：唐历波遵义医学院珠海校区生物化学及细胞分子生物学教研室广东珠海519000

设计不同浓度的灵芝浸出液培养基,以香蕉(Musa sapientumL.)作为培养材料,通过定量接种不同种类的细菌及真菌以观察灵芝浸出液的抑菌效果。结果表明,采用野生灵芝10 g于1 000 ml蒸馏水中煮2 h的浸出液配制的培养基,不仅能使香蕉正常生长... 详细信息

设计不同浓度的灵芝浸出液培养基,以香蕉(Musa sapientumL.)作为培养材料,通过定量接种不同种类的细菌及真菌以观察灵芝浸出液的抑菌效果。结果表明,采用野生灵芝10 g于1 000 ml蒸馏水中煮2 h的浸出液配制的培养基,不仅能使香蕉正常生长,而且已感染细菌的材料经一段时间培养后,细菌污染消失,恢复正常。研究结果对于香蕉转基因操作以及完善组织培养技术具有重要的参考意义。

关键词：真菌灵芝香蕉组织培养抑菌作用

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细胞内DNA和RNA显色反应的改进

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实验室研究与探索 2006年第11期25卷 1358-1359页

作者：唐历波张青峰姬可平王磊遵义医学院(珠海校区)生化与细胞分子生物学教研室广东珠海519002 遵义医学院(珠海校区)

利用经典的细胞生物学染色方法显示细胞内DNA与RNA,在实际教学过程中出现与理论上有较大的偏差,经对染色方法进行改进并进行了多次比较实验,获得了较为理想的结果,该实验结果将为医学细胞生物学实验课教学提供一个良好的方法。加深学生... 详细信息

利用经典的细胞生物学染色方法显示细胞内DNA与RNA,在实际教学过程中出现与理论上有较大的偏差,经对染色方法进行改进并进行了多次比较实验,获得了较为理想的结果,该实验结果将为医学细胞生物学实验课教学提供一个良好的方法。加深学生对细胞内DNA与RNA分布的理解。

关键词： DNA RNA 染色方法改进

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关于医学细胞生物实验课程改革的思索与建议

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遵义医学院学报 2005年第5期28卷 500-501页

作者：唐历波遵义医学院珠海校区生物及细胞分子生物学教研室广东珠海519000

医学细胞生物学是医学专业重要的专业基础课.深入理解该学科的基本理论,对于我们从细胞水平解释生命现象,阐述机体发病机理以及选择相应治疗方案提供理论依据.同时,又是一门实验操作性极强的学科,需要掌握相应的实验技巧和实验方法,以... 详细信息

医学细胞生物学是医学专业重要的专业基础课.深入理解该学科的基本理论,对于我们从细胞水平解释生命现象,阐述机体发病机理以及选择相应治疗方案提供理论依据.同时,又是一门实验操作性极强的学科,需要掌握相应的实验技巧和实验方法,以加深对相关理论知识的理解.

关键词：细胞生物学实验改革

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