检索结果-内蒙古大学图书馆

中国肿瘤生物治疗杂志 2019年第1期26卷 29-35页

作者：雷悦野庆松卫金岐李文娜莫镇涛张青峰高书颖遵义医学院珠海校区生物化学与分子生物学教研室广东珠海519041 中山大学附属第五医院消化内科广东珠海519000 遵义医学院珠海校区

目的:探讨ezrin增强子敲除对食管癌Eca-109细胞ezrin基因表达、细胞增殖和迁移的影响。方法:将靶向ezrin增强子上、下游的CRISPR/Cas9重组质粒共转染食管癌Eca-109细胞,经嘌呤霉素筛选,获得敲除ezrin增强子的细胞株Eca-C2。用qPCR和West... 详细信息

目的:探讨ezrin增强子敲除对食管癌Eca-109细胞ezrin基因表达、细胞增殖和迁移的影响。方法:将靶向ezrin增强子上、下游的CRISPR/Cas9重组质粒共转染食管癌Eca-109细胞,经嘌呤霉素筛选,获得敲除ezrin增强子的细胞株Eca-C2。用qPCR和Western blotting分别检测敲除ezrin增强子的Eca-C2细胞中ezrin mRNA和蛋白的表达,用蛋白芯片技术检测MAPK通路相关蛋白的表达,用WST-1法和细胞划痕愈合实验分别检测ezrin增强子敲除对Eca-C2细胞增殖和迁移能力的影响。结果:成功构建稳定敲除ezrin增强子的食管癌细胞株Eca-C2;与对照细胞相比,ezrin增强子敲除细胞ezrin mRNA和蛋白的表达水平均明显降低(均P<0.05)。Eca-C2细胞中17种被检测的MAPK通路相关蛋白中有9种(AKT、CREB、GSK3b、MKK6、m TOR、P38、P53、P70S6K和RSK1)表达下调,ezrin增强子敲除后细胞的增殖和迁移能力受到明显抑制(均P<0.05)。结论:在人食管癌Eca-109细胞中,敲除ezrin增强子可明显抑制细胞的增殖和迁移。

关键词： ezrin增强子基因敲除食管癌 Eca-109细胞增殖迁移

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黄连浸出液对脑缺血大鼠海马区BDNF mRNA表达的影响

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基因组学与应用生物学 2019年第11期38卷 5244-5249页

作者：牛宪立张青峰姬可平魏妮娜王润发彭冬冬曾婷婷遵义医学院药理学教研室暨贵州省基础药理重点实验室遵义563000 遵义医学院珠海校区生物工程系珠海519041 珠海市中药基础与应用研究重点实验室珠海519040

为了探究黄连浸出液对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马区脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA表达的影响,本研究随机将50只雄性SD大鼠(240±20)g分为假手术组、模型组、黄连浸出液低剂量(2.5 g/kg)、中剂量(5.0 g/kg)和高剂量(10.0 g/kg)治疗... 详细信息

为了探究黄连浸出液对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马区脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA表达的影响,本研究随机将50只雄性SD大鼠(240±20)g分为假手术组、模型组、黄连浸出液低剂量(2.5 g/kg)、中剂量(5.0 g/kg)和高剂量(10.0 g/kg)治疗组,采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血(MCAO)模型,假手术组不予线栓处理,术后对大鼠进行神经功能评分。对各治疗组给予灌胃治疗,按照人和大鼠等效剂量关系换算,每只大鼠1d灌胃两次,每次2.5 mL,连续灌胃3d。模型组、假手术组用等量生理盐水灌胃。应用RT-PCR测定了黄连浸出液对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马区BDNF表达的影响。与假手术组(BDNF mRNA相对表达量为(0.386±0.011)比较),模型组大鼠海马区BDNF mRNA表达显著增加,相对表达量为(0.458±0.029),差异具有统计学意义(p<0.05);与模型组比较,黄连中剂量和高剂量治疗组BDNF mRNA的表达均显著增加,相对表达量分别为(0.622±0.040)和(0.518±0.033),差异均有统计学意义(p<0.05);与黄连高剂量组相比,中剂量治疗组差异更为显著(p<0.05)。本研究表明,黄连浸出液可促进脑缺血再灌注损伤大鼠海马区BDNF mRNA的表达,改善脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能,保护神经元,黄连浸出液中剂量(5.0 g/kg)作用更为明显。

关键词：黄连脑缺血再灌注脑源性神经营养因子

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抗人异麦芽糖酶卵黄抗体的研制及活性测定

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医学研究生学报 2018年第2期31卷 137-141页

作者：王新颖王丹冯昆葛正龙周鹤峰邵敏遵义医学院珠海校区生物工程系珠海理学硕士研究生519041 遵义医学院生物化学教研室遵义563003

目的抗体药物是目前生物医药的研究热点问题之一。文章旨在研制抗人异麦芽糖酶(hISO)卵黄抗体(IIgY)并检测其生物学活性。方法将hISO重组蛋白作为抗原与弗式佐剂充分乳化后免疫蛋鸡,水稀释-硫酸钠提取法提取抗人I-IgY,分别通过SDS-PAGE... 详细信息

目的抗体药物是目前生物医药的研究热点问题之一。文章旨在研制抗人异麦芽糖酶(hISO)卵黄抗体(IIgY)并检测其生物学活性。方法将hISO重组蛋白作为抗原与弗式佐剂充分乳化后免疫蛋鸡,水稀释-硫酸钠提取法提取抗人I-IgY,分别通过SDS-PAGE、Western blot和ELISA等实验技术分析该抗体的纯度、特异性、效价和稳定性,PNPG法测定该抗体对α-葡萄糖苷酶的体外抑制效果。结果获得了抗人I-IgY,其效价最高可以达1∶12 800,该抗体可特异性结合hISO重组蛋白,且具有较好的热稳定性、酸碱稳定性及胃蛋白酶抗性。结论成功制备了抗人I-IgY,为后续对2型糖尿病口服降糖药物的研制奠定实验基础。

关键词：异麦芽糖酶卵黄抗体效价稳定性特异性

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刚地弓形虫侵入相关蛋白疫苗研究进展

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中国病原生物学杂志 2018年第12期13卷 1420-1423页

作者：郭珊珊杨瑞岳续鹏廖业郭锦锦遵义医学院珠海校区免疫与病原生物学教研室广东珠海519041

刚地弓形虫病作为一种人畜共患病严重影响人体健康和畜牧业发展,但目前仍无有效的治疗药物,因而疫苗的研制尤为重要。弓形虫侵入宿主细胞是其繁殖、致病的重要环节。在这个过程中微线体蛋白先形成复合体对宿主细胞进行粘附,然后与棒状... 详细信息

刚地弓形虫病作为一种人畜共患病严重影响人体健康和畜牧业发展,但目前仍无有效的治疗药物,因而疫苗的研制尤为重要。弓形虫侵入宿主细胞是其繁殖、致病的重要环节。在这个过程中微线体蛋白先形成复合体对宿主细胞进行粘附,然后与棒状体颈部蛋白形成移动连接,在Ca2+以及相关激酶、蛋白的调节下虫体依赖肌动-肌球蛋白马达驱动其侵入宿主细胞,这不仅是虫体增殖所必需,也是虫体免疫逃避及慢性感染的重要手段,因而如何阻止/减缓弓形虫侵入宿主细胞成为疫苗研制的重要切入点。本文将从弓形虫侵入过程涉及到的相关蛋白入手,对其疫苗的研究进展进行综述。

关键词：刚地弓形虫微线体棒状体疫苗综述

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肺炎链球菌血红素结合脂蛋白PiuA的表达、纯化和表征

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微生物学通报 2018年第11期45卷 2409-2417页

作者：乐尧金郭众阳小燕遵义医学院珠海校区生物工程系珠海市中药基础及应用研究重点实验室广东珠海519041

【背景】肺炎链球菌是社区获得性肺炎最常见的致病菌之一,它也会引起脑膜炎、鼻窦炎、中耳炎、菌血症等一系列疾病,对人类(特别是儿童、老人、免疫缺陷患者)健康造成重大威胁。铁是肺炎链球菌生存和感染所必需的元素之一,其中血红素转... 详细信息

【背景】肺炎链球菌是社区获得性肺炎最常见的致病菌之一,它也会引起脑膜炎、鼻窦炎、中耳炎、菌血症等一系列疾病,对人类(特别是儿童、老人、免疫缺陷患者)健康造成重大威胁。铁是肺炎链球菌生存和感染所必需的元素之一,其中血红素转运系统PiuABCD是肺炎链球菌最重要的铁转运系统。【目的】克隆、表达和纯化肺炎链球菌血红素转运系统脂蛋白PiuA,并在体外表征PiuA蛋白的血红素结合特性。【方法】将肺炎链球菌D39菌株中的piuA(spd_1652)基因连接到载体pBAD-HisA上,在大肠杆菌Top10菌株中进行异源表达,然后运用Ni-NTA亲和层析纯化PiuA-His蛋白,并用肠激酶切掉His标签获得不含标签的PiuA蛋白,最后运用圆二色谱、紫外光谱和荧光光谱表征PiuA蛋白的血红素结合特性。【结果】构建了pBAD/HisA-PiuA重组表达载体,获得了纯度大于95%的PiuA蛋白,圆二色谱显示PiuA蛋白与Hemin结合后,其二级结构不发生改变;紫外光谱结果显示PiuA蛋白具有血红素结合能力;荧光光谱结果显示apo-PiuA蛋白与Hemin结合常数K=3.4×10~5 L/mol。【结论】肺炎链球菌血红素转运系统脂蛋白PiuA能够特异地结合血红素,为肺炎链球菌的生存和感染提供必需的铁源,PiuA蛋白的体外表征结果为针对PiuABCD血红素转运系统设计抗菌药物奠定了基础。

关键词：肺炎链球菌血红素结合脂蛋白PiuA 圆二色谱紫外光谱荧光光谱

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人用狂犬病疫苗和被动免疫制剂研发进展

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中国人兽共患病学报 2018年第6期34卷 563-569,573页

作者：赖永洁李靖遵义医学院珠海校区免疫学与病原生物学教研室珠海519041 珠海联邦制药股份有限公司珠海519041

狂犬病(Rabies)是由狂犬病毒(Rabies virus)引起的一种人兽共患病。人一旦发病致死率几乎100%。目前预防狂犬病的人用疫苗为狂犬病毒灭活疫苗。随着基因工程技术的进步,新一代以狂犬病毒G蛋白(Glycoprotein)为免疫原的疫苗在开发中,包... 详细信息

狂犬病(Rabies)是由狂犬病毒(Rabies virus)引起的一种人兽共患病。人一旦发病致死率几乎100%。目前预防狂犬病的人用疫苗为狂犬病毒灭活疫苗。随着基因工程技术的进步,新一代以狂犬病毒G蛋白(Glycoprotein)为免疫原的疫苗在开发中,包括不同表达系统的G蛋白亚单位疫苗,G蛋白DNA疫苗,G蛋白病毒载体疫苗等。同时本文还探讨了未来可能取代狂犬病免疫球蛋白的被动免疫制剂(单克隆抗体)的研发进展。

关键词：狂犬病狂犬病毒疫苗 G蛋白单克隆抗体

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双shRNA表达载体对HSV-2复制的干扰作用

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遵义医学院学报 2018年第6期41卷 690-694页

作者：向红英兰小松吕延成遵义医学院珠海校区生物化学教研室广东珠海519040

目的利用带有多个启动子的质粒p Genesil10-3p,构建针对HSV-2靶基因UL27和UL54的双短发卡RNA(Duo-shRNA)表达载体,探讨双shRNA表达载体对双靶基因的干扰作用以及对HSV-2病毒增殖的影响。方法 DuoshRNA通过脂质体转染HEK293细胞后接种HSV... 详细信息

目的利用带有多个启动子的质粒p Genesil10-3p,构建针对HSV-2靶基因UL27和UL54的双短发卡RNA(Duo-shRNA)表达载体,探讨双shRNA表达载体对双靶基因的干扰作用以及对HSV-2病毒增殖的影响。方法 DuoshRNA通过脂质体转染HEK293细胞后接种HSV-2,采用四唑盐(MTT)比色法检测细胞存活率,终点滴定法检测细胞上清液中病毒滴度,QPCR(Quantitative Real-time PCR,QPCR)检测对靶基因mRNA的抑制率,蛋白质印迹(Western blot,WB)检测靶蛋白的表达量。结果结果表明Duo-shRNA对于细胞存活率、抑制HSV-2复制以及干扰靶基因表达方面都优于单-shRNA,可以达到多个单基因-shRNA联合作用的干扰效果。结论利用双启动子的方法构建了针对HSV-2的UL27和UL54的shRNA质粒表达载体,更好的抑制HSV-2病毒靶基因mRNA表达水平以及病毒在HEK293细胞中增殖,实现了多个单基因的shRNA干扰效应的相互作用。

关键词： Ⅱ型单纯疱疹病毒 RNA干扰 UL27基因 UL54基因短发卡RNA

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B群链球菌鉴别培养基的研究

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遵义医学院学报 2018年第3期41卷 277-281页

作者：金明哲吴湘玉遵义医学院珠海校区病原生物学教研室广东珠海519041

目的研究B群链球菌(group B streptococcus,GBS)鉴别培养基的最佳配方和鉴别培养效果。方法通过观察GBS在不同配方培养基上的生长状况及显色反应,筛选确定GBS鉴别培养基的最佳配方;在最佳配方条件下引入直肠和生殖道中常见的其他杂菌进... 详细信息

目的研究B群链球菌(group B streptococcus,GBS)鉴别培养基的最佳配方和鉴别培养效果。方法通过观察GBS在不同配方培养基上的生长状况及显色反应,筛选确定GBS鉴别培养基的最佳配方;在最佳配方条件下引入直肠和生殖道中常见的其他杂菌进行干扰试验,进一步检测GBS鉴别培养基的鉴别作用。结果当可溶性淀粉浓度为1.0%~2.5%,血清浓度≥7.0%,p H为7.2~7.7时,GBS鉴别培养基上的B群链球菌显色反应最明显,且其鉴别作用不受其他杂菌影响。结论 GBS鉴别培养基适用于GBS的鉴别培养。

关键词： GBS 鉴别培养基最佳配方干扰试验

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混合式教学模式在发酵工程教学中的应用

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食品工程 2018年第4期 1-4页

作者：肖美燕遵义医学院珠海校区免疫与病原生物学教研室广东珠海519041

为提升《发酵工程》课程的教学质量,从混合式教学模式的应用、思维导图的制作、综合考核评价方式的应用3个方面进行了改革,以提高学生的学习效率。

关键词：发酵工程混合式教学思维导图翻转课堂网络教学

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医学微生物学教学改革的探索与体会

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教育教学论坛 2018年第23期 123-124页

作者：赖永洁金明哲遵义医学院珠海校区免疫与病原生物学教研室广东珠海519041

医学微生物学在医学专业课中占有重要地位,是基础医学与临床医学之间的桥梁课程。为不断提高本课程的教学质量,培养具有全面素质的医学人才,结合本教研室的多年教学实践,我们从授课内容、教学模式以及人才培养理念这三个方面进行了探讨。

关键词：医学微生物学教学改革医学生

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