检索结果-内蒙古大学图书馆

广东医学 2015年第24期36卷 3750-3753页

作者：卓贤进申慧芳方志潮丁云岗王滔崔国祯广东省潮州市潮州医院心内科 521011 遵义医学院珠海校区生物工程系广东省珠海市中药基础及应用研究重点实验室 519041

目的探讨丹酚酸B对阿霉素诱导心肌细胞毒性的保护作用及其可能的作用靶标蛋白。方法用MTT法检测丹酚酸B对阿霉素诱导H9c2细胞毒性的保护作用,用反向分子对接在线服务器Pharm Mapper预测丹酚酸B保护心肌细胞的相关作用靶点,用Autodock做... 详细信息

目的探讨丹酚酸B对阿霉素诱导心肌细胞毒性的保护作用及其可能的作用靶标蛋白。方法用MTT法检测丹酚酸B对阿霉素诱导H9c2细胞毒性的保护作用,用反向分子对接在线服务器Pharm Mapper预测丹酚酸B保护心肌细胞的相关作用靶点,用Autodock做正向分子对接对其反向对接的方法进行验证。结果 100μmol/L和300μmol/L丹酚酸B对阿霉素诱导的H9c2细胞毒性有显著的保护作用,丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶12和DNA拓扑异构酶2可能是丹酚酸B心肌保护作用的靶标蛋白。结论丹酚酸B对阿霉素诱导H9c2细胞毒性有一定的保护作用,其作用机制可能与调控丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶12和DNA拓扑异构酶2有关。

关键词：丹酚酸B 心脏保护分子对接丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶12 DNA拓扑异构酶2

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HPLC法研究水溶液中V_C的稳定性

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食品研究与开发 2014年第1期35卷 70-72页

作者：孙智勇吕超治邓镇涛冯丽娟遵义医学院珠海校区化学教研室广东珠海519041 遵义医学院珠海校区生物工程系广东珠海519041

应用HPLC法研究水溶液中VC的稳定性。色谱条件:C18色谱柱;流动相为甲醇∶蒸馏水(3∶7,体积比);流速为1.0 mL/min;进样量:10μL;检测波长为260 nm。VC在20μg/mL^320μg/mL范围内线性关系良好;回归曲线为:y=2 008.3x-5 303.7;相关系数为R... 详细信息

应用HPLC法研究水溶液中VC的稳定性。色谱条件:C18色谱柱;流动相为甲醇∶蒸馏水(3∶7,体积比);流速为1.0 mL/min;进样量:10μL;检测波长为260 nm。VC在20μg/mL^320μg/mL范围内线性关系良好;回归曲线为:y=2 008.3x-5 303.7;相关系数为R2=0.999 4。研究结果显示VC在水溶液中的衰减呈一级反应规律,半衰期为75 min。HPLC法适合研究水溶液中VC的稳定性。

关键词：高效液相色谱法 VC 稳定性

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人α防御素2真核表达载体的构建及表达

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生物技术 2014年第5期24卷 21-25页

作者：邵敏余晓刘星葛正龙王燕周鹤峰遵义医学院珠海校区生物工程系广东珠海519041 遵义医学院生物化学教研室贵州遵义563003

目的:构建人α防御素2(α-HNP2)真核表达载体pc DNA3.1/myc-His(+)/α-HNP2,并实现其在CHO细胞中的表达,初步鉴定表达蛋白的抑菌活性。方法:以PBMC细胞总RNA为模板,利用RT-PCR法,扩增得到α-HNP2基因,构建真核表达载体pc DNA3.1/myc-His... 详细信息

目的:构建人α防御素2(α-HNP2)真核表达载体pc DNA3.1/myc-His(+)/α-HNP2,并实现其在CHO细胞中的表达,初步鉴定表达蛋白的抑菌活性。方法:以PBMC细胞总RNA为模板,利用RT-PCR法,扩增得到α-HNP2基因,构建真核表达载体pc DNA3.1/myc-His(+)/α-HNP2,脂质体法转染CHO细胞,G418筛选稳定表达的阳性克隆。用RT-PCR和Western blot检测α-HNP2蛋白的表达,同时检测表达产物的抑菌活性。结果:经PCR、酶切和DNA测序分析表明重组载体构建成功,并在CHO细胞中表达融合蛋白,琼脂平板扩散实验结果表明融合蛋白在大肠杆菌平板上形成明显抑菌圈。结论:CHO细胞中表达有活性的融合蛋白α-HNP2,为进一步的实验研究奠定了基础。

关键词：防御素 CHO 融合蛋白基因表达

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UL27、UL29基因shRNA表达载体的构建及对HSV-2的干扰效应研究

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生物技术通报 2014年第5期30卷 202-209页

作者：吕延成潘晓瑜黄畅丁娟遵义医学院珠海校区生化与分子细胞生物学教研室珠海519040

探讨Ⅱ型单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus type 2,HSV-2)UL27、UL29基因联合靶向siRNA对HSV-2复制的影响。构建UL27、UL29基因的siRNA的重组表达载体并转染293细胞,通过实时荧光定量PCR技术和蛋白质印迹方法检测UL27、UL29基因的表达... 详细信息

探讨Ⅱ型单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus type 2,HSV-2)UL27、UL29基因联合靶向siRNA对HSV-2复制的影响。构建UL27、UL29基因的siRNA的重组表达载体并转染293细胞,通过实时荧光定量PCR技术和蛋白质印迹方法检测UL27、UL29基因的表达,终点滴定法检测细胞上清液中的各组病毒滴度,MTT法检测细胞的存活率。结果显示:(1)成功构建短发夹RNA(shRNA)重组表达载体。(2)转染后48 h,与空白组(空载体)相比,UL27 shRNA75组对UL27基因mRNA的抑制率为75.17%(P<0.05),UL29 shRNA1461组对UL29基因mRNA抑制率为66.08%,具有显著性差异(P<0.05)。UL27 shRNA75联合UL29 shRNA1461联合干扰组对UL27基因抑制率约为91.28%,UL29基因表达抑制率约为80.40%,与空白组比较具有显著性差异(P<0.05)。(3)终点滴定法结果显示单干扰组和联合干扰组可不同程度降低上清液中的病毒感染滴度,与空白组比较差异性显著(P<0.01)。(4)Western blot检测目的基因蛋白,单干扰组与联合干扰组可不同程度降低目的基因蛋白的表达,其中UL27shRNA75+UL29 shRNA1461联合干扰组能显著抑制相应的蛋白表达水平,蛋白表达量明显减少,与单干扰组相比具有显著差异(P<0.05)。(5)经MTT法检测,UL27 shRNA75、UL29 shRNA1461、UL27 shRNA75+UL29 shRNA1461联合干扰组的细胞存活率明显提高,差异有显著意义(P<0.05)。构建的pGPU6/GFP/Neo-UL27、pGPU6/GFP/Neo-UL29重组表达载体,能在体外细胞水平上不同程度的干扰HSV-2 UL27、UL29基因表达,UL27、UL29联合干扰效率更高,抑制HSV-2在HEK293细胞中复制。

关键词： RNA干扰短发夹RNA Ⅱ型单纯疱疹病毒 UL27基因 UL29基因

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菟丝子含药血清对大鼠肢芽细胞、骨形成蛋白2及Ⅱ型胶原表达的影响

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山东大学学报（医学版） 2014年第7期52卷 37-40页

作者：刘星李啸红王燕邹聪聪遵义医学院珠海校区生物化学与细胞分子生物学教研室广东珠海519041 遵义医学院珠海校区人体解剖与组织胚胎学教研室广东珠海519041

目的探讨菟丝子含药血清对SD大鼠胚胎肢芽细胞增殖与分化、细胞中骨形成蛋白2(BMP-2)mRNA表达、Ⅱ型胶原mRNA和蛋白表达的影响。方法采用中药血清药理学方法制备高、中、低剂量(40、20、10 g/kg)菟丝子含药血清和正常血清。取E15后肢芽... 详细信息

目的探讨菟丝子含药血清对SD大鼠胚胎肢芽细胞增殖与分化、细胞中骨形成蛋白2(BMP-2)mRNA表达、Ⅱ型胶原mRNA和蛋白表达的影响。方法采用中药血清药理学方法制备高、中、低剂量(40、20、10 g/kg)菟丝子含药血清和正常血清。取E15后肢芽制成细胞悬液,接种到细胞培养板中,分别加入高、中、低剂量菟丝子含药血清和正常血清,作为高、中、低剂量组和阴性对照组。体外培养72 h,MTT法检测肢芽细胞的增殖,阿利新蓝染色检测肢芽细胞的分化,RT-PCR法检测肢芽细胞中BMP-2、Ⅱ型胶原mRNA的表达,Western blotting检测Ⅱ型胶原蛋白的表达。结果低、中剂量组细胞增殖较快,吸光度值高于阴性对照组(P<0.05);中剂量组软骨细胞集落数多于阴性对照组(P<0.05),高剂量组软骨细胞集落数低于阴性对照组(P<0.05);低、中剂量组BMP-2 mRNA表达水平高于阴性对照组(P<0.05),高剂量组BMP-2 mRNA低于阴性对照组(P<0.05);各剂量组Ⅱ型胶原mRNA和蛋白的表达水平均高于阴性对照组(P<0.05)。结论不同剂量菟丝子含药血清均可促进肢芽细胞的增殖和Ⅱ型胶原mRNA及蛋白的表达;高剂量菟丝子含药血清可下调BMP-2 mRNA的表达水平,抑制肢芽细胞的分化。

关键词：菟丝子含药血清肢芽细胞骨形成蛋白2 Ⅱ型胶原

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腺病毒介导的IL-24增强紫杉醇对A549肺腺癌细胞生长的抑制作用

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第11期30卷 1150-1153,1158页

作者：徐明菊李敏敏杨吉成郭锦锦孙万邦遵义医学院珠海校区贵州省免疫学研究生教育创新基地广东珠海519041 苏州大学医学部细胞与分子生物学教研室江苏苏州215123

目的探讨腺病毒介导的白细胞介素24(Ad-IL-24)联合紫杉醇对体外培养的人肺腺癌A549细胞生长的影响。方法用Ad-IL-24、紫杉醇、Ad-IL-24联合紫杉醇处理A549细胞,以CCK-8法测定细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡和周期的变化。结果 A... 详细信息

目的探讨腺病毒介导的白细胞介素24(Ad-IL-24)联合紫杉醇对体外培养的人肺腺癌A549细胞生长的影响。方法用Ad-IL-24、紫杉醇、Ad-IL-24联合紫杉醇处理A549细胞,以CCK-8法测定细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡和周期的变化。结果 Ad-IL-24可明显抑制人肺腺癌A549细胞生长并诱导细胞凋亡,与紫杉醇联合处理后,其抑制肺癌细胞生长及诱导细胞凋亡作用明显优于单用紫杉醇组及Ad-IL-24组,并引起G2/M期阻滞。结论 Ad-IL-24感染肺癌A549细胞可增强紫杉醇对肿瘤细胞生长的抑制作用。

关键词：重组腺病毒白细胞介素24 紫杉醇肺癌细胞细胞生长

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几种肿瘤细胞中ezrin基因增强子区转录调控特性的研究

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中国细胞生物学学报 2014年第5期36卷 610-616页

作者：张青峰卫金岐张芳婷邵敏申慧芳高书颖遵义医学院珠海校区生物化学与分子生物学教研室珠海519041 中山大学附属第五医院消化内科珠海519000 北京大学深圳医院中心实验室深圳518036

该文采用Western blot技术检测人食管癌EC109细胞、鼻咽癌CNE2细胞和宫颈癌HeLa细胞中Ezrin蛋白的表达;采用DNA片段定向克隆技术构建一系列携带ezrin基因增强子区–1541/–706序列的报告基因表达载体,将载体瞬时转染EC109、CNE2和HeLa细... 详细信息

该文采用Western blot技术检测人食管癌EC109细胞、鼻咽癌CNE2细胞和宫颈癌HeLa细胞中Ezrin蛋白的表达;采用DNA片段定向克隆技术构建一系列携带ezrin基因增强子区–1541/–706序列的报告基因表达载体,将载体瞬时转染EC109、CNE2和HeLa细胞,检测荧光素酶活性;研究肿瘤细胞中ezrin基因增强子区的转录调控特性。实验结果显示,在被检测的三种肿瘤细胞中,Ezrin蛋白的表达水平没有明显不同。EC109细胞中,当ezrin基因–1541/–706片段正向位于无启动子的报告基因上游时,表现出类似启动子的转录激活作用;当这一片段反向连接时转录激活作用几乎消失。当–1541/–706片段正向位于ezrin启动子或SV40启动子上游时,显著增强荧光素酶表达;然而,当这一片段反向位于启动子上游以及正向或反向位于启动子控制的报告基因下游时,转录增强作用消失。ezrin基因–1541/–706片段在CNE2和HeLa细胞中的转录调控作用,与其在EC109细胞中的转录调控作用部分相似,但不完全相同。结果表明,ezrin基因增强子区具有转录激活和转录增强双重作用,这种作用具有DNA序列位置和方向依赖性以及细胞特异性。

关键词： ezrin基因增强子转录调控肿瘤细胞

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珠海市三灶镇附近凉拌食品的卫生质量调查

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科技信息 2014年第1期 141-141,143页

作者：肖美燕阳雄丽蔡腾遵义医学院〈珠海校区〉免疫与病原生物学教研室广东珠海519041

目的:了解遵义医学院珠海校区附近蔬果类凉拌菜的微生物污染情况,为人们选择食用凉拌菜提供依据。方法:珠海市三灶镇周边随机采集样品共85份,按照《中华人民共和国国家标准食品安全国家标准食品微生物学检验》GB 4789-2010的方法检测。... 详细信息

目的:了解遵义医学院珠海校区附近蔬果类凉拌菜的微生物污染情况,为人们选择食用凉拌菜提供依据。方法:珠海市三灶镇周边随机采集样品共85份,按照《中华人民共和国国家标准食品安全国家标准食品微生物学检验》GB 4789-2010的方法检测。各指标参照GB7099-2003糕点、面包卫生标准和河北省地方标准DB13/889-2007凉拌菜质量安全要求进行评价。结果:共检测85份凉拌菜,菌落总数、大肠菌群、霉菌和酵母菌分别有66、67、55份样品超标,超标率分别为77.6%、78.8%、64.7%,金黄色葡萄球菌均未检出。结论:珠海市三灶镇附近凉拌食品的微生物污染较为严重。

关键词：凉拌菜细菌总数大肠菌群真菌金黄色葡萄球菌

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Cr(Ⅵ)对果蝇S2细胞增殖及氧化应激的影响

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现代预防医学 2014年第15期41卷 2793-2795页

作者：夏嫱朱伟吴启仙方旭杜联峰遵义医学院珠海校区免疫学与病原生物学教研室/贵州省免疫学研究生教育创新基地

目的研究Cr(VI)对果蝇S2细胞增殖及氧化应激相关指标的影响,初步探讨二者的关系,为利用果蝇S2细胞研究Cr(VI)的毒性作用提供一定的理论依据。方法利用含不同浓度Cr(VI)(50、100、200、400、800μmol/L)的培养基培养果蝇S2细胞;CCK-8法... 详细信息

目的研究Cr(VI)对果蝇S2细胞增殖及氧化应激相关指标的影响,初步探讨二者的关系,为利用果蝇S2细胞研究Cr(VI)的毒性作用提供一定的理论依据。方法利用含不同浓度Cr(VI)(50、100、200、400、800μmol/L)的培养基培养果蝇S2细胞;CCK-8法检测培养基中不同浓度Cr(VI)对果蝇S2细胞增殖的影响;分光光度法检测培养基上清中SOD、MDA含量。结果随着Cr(VI)浓度升高,S2细胞的生存率逐渐降低并存在显著的剂量依赖关系,当800μmol/L时Cr(VI)对S2细胞的抑制率已高达(88.51±0.72)%;SOD活力自200μmol/L处理浓度开始即与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),随Cr(VI)处理浓度增加SOD含量逐渐降低;各处理组脂质氧化终产物MDA含量与对照相比差异均有统计学意义(P<0.05),随Cr(VI)处理浓度增加MDA含量逐渐升高。结论 Cr(VI)可显著抑制S2细胞增殖,且呈高度剂量依赖性;Cr(VI)可导致S2细胞氧化应激,氧化应激可能是Cr(VI)抑制S2细胞增殖的重要原因之一。

关键词：六价铬果蝇S2细胞细胞增殖氧化应激

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结肠癌SW480细胞冻存与复苏方法的改进

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肿瘤药学 2014年第2期4卷 117-120页

作者：彭莉萍王燕姬可平张金莉遵义医学院珠海校区生物化学与细胞分子生物学教研室广东珠海519041

目的探索一种程序简洁、易于操作的细胞株冻存与复苏的方法。方法采用常规方法体外培养肠癌细胞株SW480,胰酶消化后,收集细胞悬液,A组细胞采用传统冻存与复苏方法,B组采用改良的冻存与复苏方法,分别于2周、3个月、6个月后立即复苏冻存... 详细信息

目的探索一种程序简洁、易于操作的细胞株冻存与复苏的方法。方法采用常规方法体外培养肠癌细胞株SW480,胰酶消化后,收集细胞悬液,A组细胞采用传统冻存与复苏方法,B组采用改良的冻存与复苏方法,分别于2周、3个月、6个月后立即复苏冻存细胞进行培养,观察细胞的存活情况,并于1周内不同时间点用MTT法检测细胞增殖情况并进行比较。结果采用改良方法冻存与复苏的SW480细胞存活率及生长曲线与传统方法比较无显著差异,细胞贴壁率、形态学特点及增殖能力无明显变化。结论改良的细胞冻存体系以及快速复苏法是细胞株冻存与复苏的一种可行方法,且更加方便快捷。

关键词： SW480 冻存复苏 SW480

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