检索结果-内蒙古大学图书馆

医用基因工程教学实践与体会

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基础医学教育 2012年第6期14卷 425-427页

作者：周鹤峰李官成苏良辰遵义医学院珠海校区生物工程教研室珠海519041

医用基因工程作为生物工程专业必修课程,其理论内容复杂且实践性强,从教材配置与内容规划、教学手段和教学方法、考核方式等方面阐述了教学实践过程的体会,以期不断提高教学质量,培养具有综合素质的实用型和创新型人才。

关键词：医用基因工程教学方法教学实践

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皮肤病理性瘢痕和瘢痕癌中Ras基因家族12/13位密码子突变的检测

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实用医学杂志 2012年第4期28卷 576-578页

作者：胡成久郭瑞珍王燕遵义医学院珠海校区病理学教研室广东省珠海市519041 遵义医学院珠海校区分子生物学教研室广东省珠海市519041

目的:探讨皮肤病理性瘢痕和瘢痕癌中Ras基因家族(H-ras/N-ras/K-ras)12/13位密码子的突变情况。方法:从14例皮肤病理性瘢痕,14例瘢痕癌石蜡包埋组织中提取DNA,进行PCR扩增及测序,分析H-ras、N-ras、K-ras基因第12、13位密码子突变情况... 详细信息

目的:探讨皮肤病理性瘢痕和瘢痕癌中Ras基因家族(H-ras/N-ras/K-ras)12/13位密码子的突变情况。方法:从14例皮肤病理性瘢痕,14例瘢痕癌石蜡包埋组织中提取DNA,进行PCR扩增及测序,分析H-ras、N-ras、K-ras基因第12、13位密码子突变情况。结果:28个样本均成功提取DNA,扩增出基因片段,经测序均未发现H-ras、N-ras、K-ras基因第12、13位密码子的点突变。结论:皮肤病理性瘢痕和瘢痕癌中Ras基因家族的突变位点有待进一步探讨。

关键词：突变 Ras基因皮肤病理性瘢痕瘢痕癌

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超表达AhNCED1拟南芥植株在渗透胁迫下抗氧化能力和抗旱相关下游基因表达变化

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植物生理学报 2012年第12期48卷 1167-1172页

作者：李嘉怡苏良辰何月容李玲唐慧玲吴嘉莉华南师范大学生命科学学院广东省植物发育生物工程重点实验室广州510631 遵义医学院珠海校区生物工程系广东珠海519041

利用纯系超表达AhNCED1拟南芥植株,在添加300mmol·L-1山梨醇的MS培养基上胁迫培养,分析其表型及抗氧化能力。结果表明,在正常情况及300mmol·L-1山梨醇处理10d条件下,与129B08/nced3突变体和野生型比较,超表达AhNCED1植株生长... 详细信息

利用纯系超表达AhNCED1拟南芥植株,在添加300mmol·L-1山梨醇的MS培养基上胁迫培养,分析其表型及抗氧化能力。结果表明,在正常情况及300mmol·L-1山梨醇处理10d条件下,与129B08/nced3突变体和野生型比较,超表达AhNCED1植株生长状况好,主根长度增加,幼苗体内O2ˉ含量水平较低,POD和SOD酶活性较高。说明NCED1基因对于拟南芥体内抗氧化酶系统的维持有重要意义。用sqRT-PCR方法检测结果表明,野生型和超表达AhNCED1拟南芥植物体内KIN1、COR47和RAB18基因表达随脱水延长而明显增强,且在超表达AhNCED1拟南芥中增强幅度大。

关键词：超表达AhNCED1 拟南芥渗透胁迫抗氧化水平基因表达

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硕士研究生分子生物学实验技术教学改革初探

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基础医学教育 2012年第4期14卷 284-286页

作者：邵敏王燕吕延成钟世军牛宪立遵义医学院珠海校区生物化学与分子生物学教研室珠海519041

为提高硕士研究生分子生物学实验技术的教学质量,在教学内容的选择、教学方法的改进、实验设施的分配与利用、考核体制的建立等方面进行改革,取得了较好效果,为研究生今后的科学研究和实际应用奠定基础。

关键词：分子生物学实验教学教学改革硕士研究生

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CD_(58)分子研究概况

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中国医药指南 2012年第2期10卷 50-52页

作者：何玉林邓玲遵义医学院珠海校区免疫学与病原生物学教研室广东珠海519041

抗原递呈（antigen presenting）即抗原肽与MHC分子结合成抗原肽-MHC分子复合物,表达在细胞表面,供T细胞识别。体外研究表明,CD2与CD58结合,可引起淋巴细胞增殖与活化,促进T细胞分泌IL-2和B细胞分泌免疫球蛋白,这种作用不需要巨噬细胞... 详细信息

抗原递呈（antigen presenting）即抗原肽与MHC分子结合成抗原肽-MHC分子复合物,表达在细胞表面,供T细胞识别。体外研究表明,CD2与CD58结合,可引起淋巴细胞增殖与活化,促进T细胞分泌IL-2和B细胞分泌免疫球蛋白,这种作用不需要巨噬细胞等辅助细胞的参与,具抗原非特异性,为T细胞激活的旁路系统。

关键词： CD58分子研究

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多种教学方式在生物化学教学中的实践与收获

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中国医药指南 2012年第32期10卷 672-673页

作者：王燕钟世军邵敏遵义医学院珠海校区生物化学与细胞分子生物学教研室广东珠海519041

生物化学是一门重要的医学基础课程,与多种学科有密切关系,越来越成为生命学科的共同语言,在医学及生物类专业的学生培养中具有十分重要的地位。由于其内在知识结构系统性强、内容抽象、缺乏直观性,教学过程又受到其他基础学科的制约,... 详细信息

生物化学是一门重要的医学基础课程,与多种学科有密切关系,越来越成为生命学科的共同语言,在医学及生物类专业的学生培养中具有十分重要的地位。由于其内在知识结构系统性强、内容抽象、缺乏直观性,教学过程又受到其他基础学科的制约,严重影响了学生的学习兴趣和教学效果。同时,生物化学教学中普遍存在着教学时间有限性和知识增长无限性的矛盾。要解决好这一矛盾,保证知识、能力、素质的协调发展,关键是深化教学内容和教学方式的改革,充分利用有限的授课时间最大限度的提高教学效率和效果;我们在以往的生化课程教学中注重丰富多种教学方式的实践,激发了学生的学习兴趣、调动学生学习的积极主动性,获得了较为明显的教学效果。

关键词：生物化学教学改革

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琼脂糖电泳中核酸染料Goldview最佳使用方案的建立

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遵义医学院学报 2012年第4期35卷 276-278页

作者：王燕彭莉萍罗镇明遵义医学院珠海校区生物化学与细胞分子生物学教研室广东珠海519041

目的确定琼脂糖凝胶电泳中使用核酸染料Goldview的最佳浓度和方法,尽可能减少实验中Goldview用量,控制其对实验室环境的污染。方法配置含不同浓度Goldview的上样缓冲液,混合不同浓度DNA溶液的琼脂糖凝胶电泳,然后对比预染样品法、前染... 详细信息

目的确定琼脂糖凝胶电泳中使用核酸染料Goldview的最佳浓度和方法,尽可能减少实验中Goldview用量,控制其对实验室环境的污染。方法配置含不同浓度Goldview的上样缓冲液,混合不同浓度DNA溶液的琼脂糖凝胶电泳,然后对比预染样品法、前染法及后染法的染色效果。结果实验结果显示上样缓冲液中含0.4%Goldview的预染样品法电泳检测核酸的效果最佳且能检测的核酸样品浓度在16.5ng或以上为最佳。结论核酸染料Goldview在核酸的琼脂糖凝胶电泳中使用的最佳方案为预染样品法,实验中推荐浓度达到普通实验要求,并且最易控制对周围环境的污染。

关键词：琼脂糖凝胶电泳核酸染料 Goldview

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刚地弓形虫感染对大鼠细胞因子和生精细胞的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2011年第4期29卷 274-278页

作者：杨瑞遵义医学院珠海校区免疫与病原生物学教研室珠海519041

目的研究弓形虫感染对雄性大鼠血清1型T辅助细胞（Th1）和2型T辅助细胞（Th2）细胞因子水平，以及睾丸的病理损伤和各级生精细胞凋亡的影响。方法将9～10周龄雄性SD大鼠88只随机分为感染组和健康对照组（每组44只）。感染组腹腔注射弓... 详细信息

目的研究弓形虫感染对雄性大鼠血清1型T辅助细胞（Th1）和2型T辅助细胞（Th2）细胞因子水平，以及睾丸的病理损伤和各级生精细胞凋亡的影响。方法将9～10周龄雄性SD大鼠88只随机分为感染组和健康对照组（每组44只）。感染组腹腔注射弓形虫速殖子1×10^4个／只，健康对照组注射等量PBS，于感染前和感染后第3、6、9、12、……和30天取两组大鼠各4只，分离血清及取睾丸，EUSA检测血清1干扰素（IFN-γ）和白细胞介素-4（IL-4）水平变化．对睾丸进行病理学检查和免疫组化检测生精小管凋亡蛋白Bel-2和Bax的表达改变。结果感染组大鼠感染速殖子后血清IFN-γ迅速升高，在感染后第6天出现峰值[（518．3±83．6）pg/ml]后迅速降低；血清114升高缓慢，于第12天达到峰值[（325．0±38．6）pg/ml]后逐渐降低。两者在感染后30d内均显著高于健康对照组（P〈0．01）。病理学检查发现，感染组大鼠感染后第6天睾丸生精小管细胞层次紊乱，初级精母细胞和次级精母细胞明显减少，管腔内精子稀少甚至管腔闭合，感染后30d内未见明显改善。感染组大鼠于感染后第3天睾丸细胞的Bax表达即显著增加（P〈0．01），第6天达到峰值（0．547±0．037）后逐渐减少，15d后恢复至正常水平。感染组大鼠睾丸细胞Bel-2表达无明显变化。结论弓形虫可导致生精细胞严重的病理损伤，在急性期出现Th1细胞因子极化，伴有精母细胞凋亡蛋白Bax的高表达；Th1／Th2重新平衡后，Bax蛋白表达减少。但生精过程无明显恢复。

关键词：刚地弓形虫 Th1/Th2 Bcl-2/Bax 生精细胞

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人单链白细胞介素12的原核表达和生物学活性鉴定

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重庆医学 2011年第31期40卷 3124-3126页

作者：周鹤峰邵敏姬可平葛正龙遵义医学院珠海校区生物工程系广东珠海519041 遵义医学院生物化学教研室贵州遵义563003

目的构建含人单链白细胞介素12(hscIL-12)基因的原核表达载体,在大肠杆菌中表达具有活性的hscIL-12。方法 PCR法从质粒pCA13-hscIL-12中扩增hscIL-12基因,经酶切、连接构建原核表达载体pET28a(+)-hscIL-12,转入到大肠杆菌BL21(DE3)中,... 详细信息

目的构建含人单链白细胞介素12(hscIL-12)基因的原核表达载体,在大肠杆菌中表达具有活性的hscIL-12。方法 PCR法从质粒pCA13-hscIL-12中扩增hscIL-12基因,经酶切、连接构建原核表达载体pET28a(+)-hscIL-12,转入到大肠杆菌BL21(DE3)中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,收集菌液进行蛋白质印迹分析,经镍柱亲和层析(Ni2+-NTA)纯化,体外增殖实验检测其生物学活性。结果 PCR扩增、双酶切及DNA序列测定证实pET28a(+)载体上成功插入了hscIL-12基因片段。表达产物经SDS-PAGE电泳分析,证明其相对分子质量为70×103;蛋白质印记表明重组蛋白具有hscIL-12抗原活性;表达产物纯化、复性后进行体外生物学活性实验表明,该重组蛋白能刺激外周血单核细胞(PBMC)产生IFN-γ。结论 pET28a(+)-hscIL-12原核表达载体的构建和重组hscIL-12蛋白的制备为进一步研究hscIL-12生物学功能和临床应用奠定了基础。

关键词：人单链白细胞介素12 大肠杆菌生物学活性表达

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CyclinA、C-myc在皮肤瘢痕及瘢痕癌组织中的表达及意义

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肿瘤防治研究 2011年第10期38卷 1147-1150页

作者：郭瑞珍周开梅王燕遵义医学院珠海校区病理学教研室广东珠海519041 遵义医学院珠海校区分子生物学教研室广东珠海519041

目的探讨CyclinA、C-myc在皮肤病理性瘢痕和瘢痕癌组织中的表达及意义。方法以病理性皮肤瘢痕、皮肤瘢痕癌组织为研究对象,以正常皮肤组织为对照。采用免疫组织化学(SP法)分别检测CyclinA、C-myc蛋白的表达,采用核酸分子原位杂交法检测C... 详细信息

目的探讨CyclinA、C-myc在皮肤病理性瘢痕和瘢痕癌组织中的表达及意义。方法以病理性皮肤瘢痕、皮肤瘢痕癌组织为研究对象,以正常皮肤组织为对照。采用免疫组织化学(SP法)分别检测CyclinA、C-myc蛋白的表达,采用核酸分子原位杂交法检测CyclinA mRNA的表达,所有数据输入计算机后运用SPSS16.0软件包进行统计学分析。结果 (1)CyclinA、CyclinA mRNA在正常皮肤和皮肤瘢痕上皮中的表达呈阴性或弱阳性,在瘢痕癌组织中呈强阳性。瘢痕癌组的表达(平均吸光度和阳性面积)与正常皮肤组及皮肤瘢痕组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);但正常皮肤组与瘢痕组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)C-myc蛋白在正常皮肤中的表达呈弱阳性,在皮肤瘢痕上皮中呈阳性,在瘢痕癌组织中呈强阳性。且两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)相关分析显示,在皮肤瘢痕癌中,CyclinA与CyclinA mRNA(r=0.766,P<0.01)、CyclinA与C-myc蛋白(r=0.804,P<0.01)的表达均呈正相关。结论 (1)CyclinA及其mRNA、C-myc的高表达,可能与皮肤瘢痕癌的发生有关;(2)C-myc蛋白的高表达与皮肤瘢痕上皮癌变有相关性。(3)在瘢痕癌中CyclinA同时存在蛋白水平和基因水平的异常表达。

关键词： CyclinA C-myc 皮肤瘢痕瘢痕癌癌变

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