检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学通报 2018年第11期45卷 2409-2417页

作者：乐尧金郭众阳小燕遵义医学院珠海校区生物工程系珠海市中药基础及应用研究重点实验室广东珠海519041

【背景】肺炎链球菌是社区获得性肺炎最常见的致病菌之一,它也会引起脑膜炎、鼻窦炎、中耳炎、菌血症等一系列疾病,对人类(特别是儿童、老人、免疫缺陷患者)健康造成重大威胁。铁是肺炎链球菌生存和感染所必需的元素之一,其中血红素转... 详细信息

【背景】肺炎链球菌是社区获得性肺炎最常见的致病菌之一,它也会引起脑膜炎、鼻窦炎、中耳炎、菌血症等一系列疾病,对人类(特别是儿童、老人、免疫缺陷患者)健康造成重大威胁。铁是肺炎链球菌生存和感染所必需的元素之一,其中血红素转运系统PiuABCD是肺炎链球菌最重要的铁转运系统。【目的】克隆、表达和纯化肺炎链球菌血红素转运系统脂蛋白PiuA,并在体外表征PiuA蛋白的血红素结合特性。【方法】将肺炎链球菌D39菌株中的piuA(spd_1652)基因连接到载体pBAD-HisA上,在大肠杆菌Top10菌株中进行异源表达,然后运用Ni-NTA亲和层析纯化PiuA-His蛋白,并用肠激酶切掉His标签获得不含标签的PiuA蛋白,最后运用圆二色谱、紫外光谱和荧光光谱表征PiuA蛋白的血红素结合特性。【结果】构建了pBAD/HisA-PiuA重组表达载体,获得了纯度大于95%的PiuA蛋白,圆二色谱显示PiuA蛋白与Hemin结合后,其二级结构不发生改变;紫外光谱结果显示PiuA蛋白具有血红素结合能力;荧光光谱结果显示apo-PiuA蛋白与Hemin结合常数K=3.4×10~5 L/mol。【结论】肺炎链球菌血红素转运系统脂蛋白PiuA能够特异地结合血红素,为肺炎链球菌的生存和感染提供必需的铁源,PiuA蛋白的体外表征结果为针对PiuABCD血红素转运系统设计抗菌药物奠定了基础。

关键词：肺炎链球菌血红素结合脂蛋白PiuA 圆二色谱紫外光谱荧光光谱

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丹参素衍生物对斑马鱼促血管新生作用的研究

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中国药理学通报 2016年第6期32卷 795-800页

作者：崔国祯徐燕玲孙安露单璐琛王玉强李铭源遵义医学院珠海校区生物工程系珠海市中药基础及应用研究重点实验室广东珠海519041 澳门大学中华医药研究院中药质量研究国家重点实验室澳门999078 暨南大学药学院新药研究所广东广州510632

目的观察丹参素衍生物(ADTM)对斑马鱼胚胎血管新生的影响,并探讨其可能作用的信号通路。方法选择正常血管转基因斑马鱼和血管生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(VRI)诱导血管损伤转基因斑马鱼两种模型,分别给予50、100、200μmol·L^(-1... 详细信息

目的观察丹参素衍生物(ADTM)对斑马鱼胚胎血管新生的影响,并探讨其可能作用的信号通路。方法选择正常血管转基因斑马鱼和血管生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(VRI)诱导血管损伤转基因斑马鱼两种模型,分别给予50、100、200μmol·L^(-1)的ADTM干预处理,以0.1%的DMSO为空白对照,分别观察不同浓度的ADTM对斑马鱼肠下静脉血管(SIVs)的直径和内皮细胞数以及节间血管(ISVs)生长的影响,并对VRI和ADTM处理后的斑马鱼做转录组学研究。用荧光定量PCR的方法对转录组测序的4个基因进行验证。结果对于正常转基因斑马鱼模型,ADTM处理后,斑马鱼的SIVs血管直径明显增加,内皮细胞的数目轻微增加;在VRI损伤模型中,ADTM表现出修复ISVs损伤的效果。转录组分析表明,19个明显变化的基因富集在胰岛素信号通路。荧光定量PCR的结果与转录组中获得的序列吻合。结论对于正常和血管损伤的斑马鱼模型,ADTM均有促血管新生的效果,其作用机制可能与胰岛素信号通路的激活有关。

关键词：丹参素衍生物血管新生血管修复斑马鱼转录组胰岛素信号通路

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丹酚酸B对阿霉素诱导H9c2细胞毒性的保护作用及其作用靶点

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广东医学 2015年第24期36卷 3750-3753页

作者：卓贤进申慧芳方志潮丁云岗王滔崔国祯广东省潮州市潮州医院心内科 521011 遵义医学院珠海校区生物工程系广东省珠海市中药基础及应用研究重点实验室 519041

目的探讨丹酚酸B对阿霉素诱导心肌细胞毒性的保护作用及其可能的作用靶标蛋白。方法用MTT法检测丹酚酸B对阿霉素诱导H9c2细胞毒性的保护作用,用反向分子对接在线服务器Pharm Mapper预测丹酚酸B保护心肌细胞的相关作用靶点,用Autodock做... 详细信息

目的探讨丹酚酸B对阿霉素诱导心肌细胞毒性的保护作用及其可能的作用靶标蛋白。方法用MTT法检测丹酚酸B对阿霉素诱导H9c2细胞毒性的保护作用,用反向分子对接在线服务器Pharm Mapper预测丹酚酸B保护心肌细胞的相关作用靶点,用Autodock做正向分子对接对其反向对接的方法进行验证。结果 100μmol/L和300μmol/L丹酚酸B对阿霉素诱导的H9c2细胞毒性有显著的保护作用,丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶12和DNA拓扑异构酶2可能是丹酚酸B心肌保护作用的靶标蛋白。结论丹酚酸B对阿霉素诱导H9c2细胞毒性有一定的保护作用,其作用机制可能与调控丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶12和DNA拓扑异构酶2有关。

关键词：丹酚酸B 心脏保护分子对接丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶12 DNA拓扑异构酶2

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铝对斑马鱼幼鱼的神经毒性作用及其转录组学研究

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广东医学 2017年第6期38卷 830-833页

作者：崔国祯张莹龙紫苇毛皓李铭源遵义医学院珠海校区生物工程系珠海市中药基础及应用研究重点实验室广东珠海519041 澳门大学中华医药研究院中药质量研究国家重点实验室澳门999078

目的探讨铝对斑马鱼的神经毒性作用及其在转录水平的机制。方法选取受精1 d后发育良好的斑马鱼胚胎,随机分为2组,分别给予单纯培养基(对照组)和50μg/L浓度的AlCl_3处理6 d(AlCl_3处理组)。检测幼鱼自主运动行为、活性氧(ROS)释放及转... 详细信息

目的探讨铝对斑马鱼的神经毒性作用及其在转录水平的机制。方法选取受精1 d后发育良好的斑马鱼胚胎,随机分为2组,分别给予单纯培养基(对照组)和50μg/L浓度的AlCl_3处理6 d(AlCl_3处理组)。检测幼鱼自主运动行为、活性氧(ROS)释放及转录组学变化。结果与空白对照组相比,经AlCl_3处理后的斑马鱼,表现出运动轨迹明显无规律,游泳速度减慢,差异有统计学意义(P<0.05);AlCl_3增加斑马鱼幼鱼的活性氧释放(P<0.05);转录组学数据显示,AlCl_3处理组与对照组相比,Neurogenin 1等19个与退行性神经疾病相关的基因表达发生显著变化(P<0.0001),22个显著变化的基因富集在MAPK信号通路。结论铝对斑马鱼具有神经毒性作用,其分子机制可能与Neurogenin 1等19个基因表达的变化及MAPK信号通路的调控有关。

关键词：氯化铝神经毒性斑马鱼行为学转录组

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富锌硒绿茶中PDI蛋白酶抑制剂的筛选及其抗血小板聚集的作用

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实用医学杂志 2017年第18期33卷 2987-2990页

作者：李惠琼杨静纯李玲玲王滔崔国祯黎奔广州中医药大第二临床医学院广州市510120 广州中医药大学第二临床医学院珠海分院药剂科广东省珠海市510000 遵义医学院珠海校区生物工程系珠海市中药基础及应用研究重点实验室广东省珠海市519041

目的从富锌硒绿茶中筛选蛋白质二硫异构酶(PDI)的抑制剂,探讨抑制剂对血小板聚集的抑制作用。方法从PDB(protein data bank)下载PDI的晶体结构(PDB ID:4EKZ);建立绿茶的化合物数据库;通过分子模拟软件MOE对化合物库进行PDI抑制剂的虚拟... 详细信息

目的从富锌硒绿茶中筛选蛋白质二硫异构酶(PDI)的抑制剂,探讨抑制剂对血小板聚集的抑制作用。方法从PDB(protein data bank)下载PDI的晶体结构(PDB ID:4EKZ);建立绿茶的化合物数据库;通过分子模拟软件MOE对化合物库进行PDI抑制剂的虚拟筛选,挑选出6个命中的化合物进行对PDI酶活性抑制作用的测试,然后对有抑制活性的化合物进行抗血小板聚集作用的测定。结果 6个虚拟筛选命中的化合物中,表儿茶素没食子酸酯(ECG)和表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对PDI蛋白酶具有抑制作用。其次,两个化合物对ADP诱导的血小板聚集也有抑制作用。结论绿茶活血化瘀的作用,与抑制PDI酶活性有关,ECG和EGCG是有效活性成分。

关键词：富锌硒绿茶蛋白质二硫键异构酶抑制剂抗血小板聚集

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丹参素抗血小板凝聚作用的靶点研究

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中药新药与临床药理 2017年第4期28卷 450-453页

作者：崔国祯陈言郭琳李纳单璐琛李铭源许贝文遵义医学院珠海校区生物工程系珠海市中药基础及应用研究重点实验室广东珠海519041 澳门大学中华医药研究院中药质量研究国家重点实验室澳门999078 暨南大学药学院新药研究所广东广州510632 珠海澳大科技研究院广东珠海519041

目的探讨丹参素(Danshensu,DSS)抗血小板聚集的分子作用机理及其可能的作用靶点,为丹参素及含有丹参素的中药在临床心脑血管疾病的防治提供科学依据。方法用凝血酶(thrombin)诱导血小板聚集,用血小板聚集仪检测丹参素对血小板聚集率的影... 详细信息

目的探讨丹参素(Danshensu,DSS)抗血小板聚集的分子作用机理及其可能的作用靶点,为丹参素及含有丹参素的中药在临床心脑血管疾病的防治提供科学依据。方法用凝血酶(thrombin)诱导血小板聚集,用血小板聚集仪检测丹参素对血小板聚集率的影响;采用免疫共沉淀的方法,研究丹参素对血小板蛋白质二硫键异构酶ERp57和整合素αⅡbβ3的相互作用;用反向分子对接服务器PharmMapper预测丹参素抗血小板聚集的相关作用靶点;用MOE-Dock的方法,对反向对接的结果进行验证。结果 10μmol·L^(-1)和100μmol·L^(-1)丹参素显著抑制凝血酶诱导的血小板聚集,并呈时间剂量依赖关系(P<0.05)。丹参素抑制血小板ERp57和αⅡbβ3蛋白质的相互作用,凝血因子7(Coagulation factor Ⅶ)可能是其作用靶点之一。结论丹参素具有抗凝血酶诱导血小板聚集的作用,其作用机制与调控血小板ERp57和αⅡbβ3蛋白质的相互作用,以及凝血因子7有关。

关键词：丹参素抗血小板聚集靶点 ERp57/αⅡbβ 3 凝血因子7

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从活血化瘀中药中虚拟筛选P2Y12受体拮抗剂及其抗血小板聚集作用的评价

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世界中西医结合杂志 2018年第8期13卷 1082-1085页

作者：崔国祯李惠民李纳邹佳申慧芳刘银花刘振勇遵义医学院珠海校区生物工程系珠海市中药基础及应用研究重点实验室广东珠海519041

目的建立从活血化瘀中药中虚拟筛选P2Y12受体拮抗剂的模型,并验证候选化合物抗血小板聚集的药理活性。方法根据《中国药典》中的活血化瘀药种类,找出了32种具有抗血栓作用的中药,建立中药成分的虚拟化合物库,以P2Y12受体为靶标蛋白进行... 详细信息

目的建立从活血化瘀中药中虚拟筛选P2Y12受体拮抗剂的模型,并验证候选化合物抗血小板聚集的药理活性。方法根据《中国药典》中的活血化瘀药种类,找出了32种具有抗血栓作用的中药,建立中药成分的虚拟化合物库,以P2Y12受体为靶标蛋白进行虚拟筛选,获得结合自由能最低的化合物,然后进行体外抗血小板凝集实验以验证其活性。结果通过虚拟筛选,得到了结合自由能最低的化合物紫丁香苷,计算其结合自由能力为-14.3 kcal/mol。进一步的实验验证结果表明,该化合物有显著的抗二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板凝集作用。结论从32种活血化瘀的中药中,基于P2Y12受体三维蛋白结构,利用虚拟筛选的方法,筛选出紫丁香苷对ADP诱导的血小板聚集有显著的抑制作用,该模型可用来后续的进一步虚拟筛选P2Y12受体拮抗剂。

关键词： P2Y12受体抗血小板聚集虚拟筛选紫丁香苷

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凤冈富锌硒茶对ERp57蛋白酶的抑制作用及其有效成分的虚拟筛选

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中国现代医学杂志 2018年第11期28卷 22-26页

作者：张莹李惠琼邹佳王滔李玲玲申慧芳岳续朋崔国祯遵义医学院珠海校区生物工程系(广东省珠海市中药基础及应用研究重点实验室) 广东珠海519041 广州中医药大学第二附属医院广东珠海519015

目的探讨凤冈富锌硒茶水提取物对抗血小板聚集的潜在药物靶点ERp57蛋白酶的抑制作用及其潜在的有效成分。方法利用超高效液相色谱分析凤冈富锌硒茶水提取物的主要成分,采用胰岛素浑浊度分析方法检测提取物对ERp57蛋白酶的抑制作用,采用... 详细信息

目的探讨凤冈富锌硒茶水提取物对抗血小板聚集的潜在药物靶点ERp57蛋白酶的抑制作用及其潜在的有效成分。方法利用超高效液相色谱分析凤冈富锌硒茶水提取物的主要成分,采用胰岛素浑浊度分析方法检测提取物对ERp57蛋白酶的抑制作用,采用体外血小板聚集率实验分析提取物对血小板聚集的干预作用。采用计算机虚拟筛选和实验验证相结合的方法,分析提取物中抑制ERp57蛋白酶的主要活性成分。结果凤冈富锌硒茶水提取物主要存在4种化合物,提取物对ERp57蛋白酶有显著的抑制作用,且表现出一定程度的抗血小板聚集作用,其中表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对ERp57蛋白酶的抑制作用最强。结论长期饮用绿茶有益于降低心血管疾病死亡率,可能与绿茶抑制ERp57蛋白酶活性,从而抗血小板聚集有关,其中EGCG是其主要有效成分之一。

关键词：凤冈富锌硒茶 ERp57 心血管疾病虚拟筛选抗血小板聚集

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胆碱和蛋氨酸缺乏饲料诱导大、小鼠非酒精脂肪性肝炎动物模型的比较研究

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遵义医学院学报 2017年第3期40卷 229-233页

作者：崔国祯余汉濠黄天养王文栋徐义祥程自刚吴彩燕李铭源遵义医学院珠海校区生物工程系暨珠海市中药基础及应用研究重点实验室广东珠海519041 澳门大学中华医药研究院暨中药质量研究国家重点实验室澳门999078 澳门镜湖医院消化内科澳门999078

目的为防治非酒精脂肪性肝炎(NASH)的研究提供理想的动物模型。方法将C57BL/6雄性小鼠和SD大鼠分别随机分成2组,分别喂养蛋氨酸-胆碱充足(MCS)饲料(正常组)和蛋氨酸-胆碱缺乏(MCD)饲料(模型组)。分别在各组中饲养3、5、8周后,取动物血... 详细信息

目的为防治非酒精脂肪性肝炎(NASH)的研究提供理想的动物模型。方法将C57BL/6雄性小鼠和SD大鼠分别随机分成2组,分别喂养蛋氨酸-胆碱充足(MCS)饲料(正常组)和蛋氨酸-胆碱缺乏(MCD)饲料(模型组)。分别在各组中饲养3、5、8周后,取动物血清和肝脏。测定血清的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)和胆固醇(TC)的含量;肝脏切片后经HE染色,观察肝脏的病理形态学变化并对其病变程度进行评分。结果饲喂MCD饲料5周后,SD大鼠血清AST含量无显著变化(P>0.05),但是C57BL/6小鼠AST水平显著升高(P<0.05)。同时,SD大鼠和C57BL/6小鼠模型的血清ALT水平均显著升高(P<0.05),此外,SD大鼠和C57BL/6小鼠血清中TG和TC的水平均显著下降(P<0.05),肝组织的病理评分均出现显著升高(P<0.05)。但是C57BL/6小鼠血清AST、ALT的变化幅度及肝组织病理评分明显高于SD大鼠。结论 C57BL/6小鼠NASH模型优于SD大鼠NASH模型。C57BL/6小鼠NASH模型相对SD大鼠,更适合NASH的分子机制和防治药物的评价。

关键词：非酒精脂肪性肝炎胆碱蛋氨酸缺乏饮食非酒精性脂肪肝病 C57BL/6小鼠 SD大鼠

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