检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学通报 2018年第11期45卷 2409-2417页

作者：乐尧金郭众阳小燕遵义医学院珠海校区生物工程系珠海市中药基础及应用研究重点实验室广东珠海519041

【背景】肺炎链球菌是社区获得性肺炎最常见的致病菌之一,它也会引起脑膜炎、鼻窦炎、中耳炎、菌血症等一系列疾病,对人类(特别是儿童、老人、免疫缺陷患者)健康造成重大威胁。铁是肺炎链球菌生存和感染所必需的元素之一,其中血红素转... 详细信息

【背景】肺炎链球菌是社区获得性肺炎最常见的致病菌之一,它也会引起脑膜炎、鼻窦炎、中耳炎、菌血症等一系列疾病,对人类(特别是儿童、老人、免疫缺陷患者)健康造成重大威胁。铁是肺炎链球菌生存和感染所必需的元素之一,其中血红素转运系统PiuABCD是肺炎链球菌最重要的铁转运系统。【目的】克隆、表达和纯化肺炎链球菌血红素转运系统脂蛋白PiuA,并在体外表征PiuA蛋白的血红素结合特性。【方法】将肺炎链球菌D39菌株中的piuA(spd_1652)基因连接到载体pBAD-HisA上,在大肠杆菌Top10菌株中进行异源表达,然后运用Ni-NTA亲和层析纯化PiuA-His蛋白,并用肠激酶切掉His标签获得不含标签的PiuA蛋白,最后运用圆二色谱、紫外光谱和荧光光谱表征PiuA蛋白的血红素结合特性。【结果】构建了pBAD/HisA-PiuA重组表达载体,获得了纯度大于95%的PiuA蛋白,圆二色谱显示PiuA蛋白与Hemin结合后,其二级结构不发生改变;紫外光谱结果显示PiuA蛋白具有血红素结合能力;荧光光谱结果显示apo-PiuA蛋白与Hemin结合常数K=3.4×10~5 L/mol。【结论】肺炎链球菌血红素转运系统脂蛋白PiuA能够特异地结合血红素,为肺炎链球菌的生存和感染提供必需的铁源,PiuA蛋白的体外表征结果为针对PiuABCD血红素转运系统设计抗菌药物奠定了基础。

关键词：肺炎链球菌血红素结合脂蛋白PiuA 圆二色谱紫外光谱荧光光谱

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黄连浸出液对脑缺血大鼠海马区BDNF mRNA表达的影响

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基因组学与应用生物学 2019年第11期38卷 5244-5249页

作者：牛宪立张青峰姬可平魏妮娜王润发彭冬冬曾婷婷遵义医学院药理学教研室暨贵州省基础药理重点实验室遵义563000 遵义医学院珠海校区生物工程系珠海519041 珠海市中药基础与应用研究重点实验室珠海519040

为了探究黄连浸出液对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马区脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA表达的影响,本研究随机将50只雄性SD大鼠(240±20)g分为假手术组、模型组、黄连浸出液低剂量(2.5 g/kg)、中剂量(5.0 g/kg)和高剂量(10.0 g/kg)治疗... 详细信息

为了探究黄连浸出液对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马区脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA表达的影响,本研究随机将50只雄性SD大鼠(240±20)g分为假手术组、模型组、黄连浸出液低剂量(2.5 g/kg)、中剂量(5.0 g/kg)和高剂量(10.0 g/kg)治疗组,采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血(MCAO)模型,假手术组不予线栓处理,术后对大鼠进行神经功能评分。对各治疗组给予灌胃治疗,按照人和大鼠等效剂量关系换算,每只大鼠1d灌胃两次,每次2.5 mL,连续灌胃3d。模型组、假手术组用等量生理盐水灌胃。应用RT-PCR测定了黄连浸出液对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马区BDNF表达的影响。与假手术组(BDNF mRNA相对表达量为(0.386±0.011)比较),模型组大鼠海马区BDNF mRNA表达显著增加,相对表达量为(0.458±0.029),差异具有统计学意义(p<0.05);与模型组比较,黄连中剂量和高剂量治疗组BDNF mRNA的表达均显著增加,相对表达量分别为(0.622±0.040)和(0.518±0.033),差异均有统计学意义(p<0.05);与黄连高剂量组相比,中剂量治疗组差异更为显著(p<0.05)。本研究表明,黄连浸出液可促进脑缺血再灌注损伤大鼠海马区BDNF mRNA的表达,改善脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能,保护神经元,黄连浸出液中剂量(5.0 g/kg)作用更为明显。

关键词：黄连脑缺血再灌注脑源性神经营养因子

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乌头碱致斑马鱼和人心肌细胞心率失常模型的研究

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中国临床药理学杂志 2018年第12期34卷 1454-1456页

作者：崔国祯李婷英师伟王亮李铭源遵义医学院珠海校区生物工程系珠海市中药基础及应用研究重点实验室澳门大学中华医药研究院中药质量研究国家重点实验室

目的研究天然产物乌头碱致斑马鱼和人心肌细胞心率失常模型建立的可行性。方法将2 d大的心脏表达绿色荧光的斑马鱼幼鱼随机分为4组:对照组（0.1%DMSO）和低、中、高3个剂量实验组(1,3,10μmol·L-1乌头碱),每组12条。作用1 d后,用... 详细信息

目的研究天然产物乌头碱致斑马鱼和人心肌细胞心率失常模型建立的可行性。方法将2 d大的心脏表达绿色荧光的斑马鱼幼鱼随机分为4组:对照组（0.1%DMSO）和低、中、高3个剂量实验组(1,3,10μmol·L-1乌头碱),每组12条。作用1 d后,用活细胞工作站系统成像并分析斑马鱼心室跳动相对荧光的强度和心室的心搏量。将人胚胎干细胞诱导成具有跳动功能的心肌细胞,经1μmol·L-1乌头碱作用后,分析其自动跳动时钙离子的闪烁情况。结果经乌头碱作用1 d后的斑马鱼幼鱼,对照组心博量为（233.89±30.09）p L,低、中、高剂量实验组的心博量分别为（177.23±29.05）,（136.32±43.34）,（42.63±23.34）p L,其中,高剂量实验组心搏量显著减少（P<0.05）。作用10min后的人心肌细胞,对照组钙离子振荡频率和振荡幅度分别为21.67±2.86,102.20±7.35,低剂量实验组钙离子振荡频率和振荡幅度分别为46.66±6.66,57.06±6.63,药物处理后,钙离子振荡频率显著增加（P<0.05）,振幅显著降低（P<0.05）。结论经乌头碱作用后,斑马鱼幼鱼和人心肌细胞均表现出心率失常的特征,为抗心律失常药物开发提供了体内外药物筛选模型。

关键词：心律失常乌头碱斑马鱼人心肌细胞

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天然产物小分子抑制剂筛选方法的研究进展

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中药药理与临床 2016年第2期32卷 243-247页

作者：邹佳陈阳蔡仕宁王雅溶李铭源崔国祯遵义医学院珠海校区生物工程系珠海市中药基础及应用研究重点实验室珠海519041 澳门大学中华医药研究院中药质量研究国家重点实验室澳门999078

天然产物是小分子抑制剂的重要来源之一。然而由于天然产物种类繁多,结构多样,运用传统方法筛选效率低,工作量大。因此,寻找操作简单、效率高、成本低的抑制剂筛选方法一直是相关研究人员探索的课题。本文综述了近十年报道的从天然产物... 详细信息

天然产物是小分子抑制剂的重要来源之一。然而由于天然产物种类繁多,结构多样,运用传统方法筛选效率低,工作量大。因此,寻找操作简单、效率高、成本低的抑制剂筛选方法一直是相关研究人员探索的课题。本文综述了近十年报道的从天然产物中筛选小分子抑制剂的方法,其中重点阐述了色谱质谱检测系统,并对筛选方法的运用前景进行讨论和展望,以供同行参考。

关键词：小分子抑制剂筛选方法天然产物鉴定

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丹参素衍生物对斑马鱼促血管新生作用的研究

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中国药理学通报 2016年第6期32卷 795-800页

作者：崔国祯徐燕玲孙安露单璐琛王玉强李铭源遵义医学院珠海校区生物工程系珠海市中药基础及应用研究重点实验室广东珠海519041 澳门大学中华医药研究院中药质量研究国家重点实验室澳门999078 暨南大学药学院新药研究所广东广州510632

目的观察丹参素衍生物(ADTM)对斑马鱼胚胎血管新生的影响,并探讨其可能作用的信号通路。方法选择正常血管转基因斑马鱼和血管生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(VRI)诱导血管损伤转基因斑马鱼两种模型,分别给予50、100、200μmol·L^(-1... 详细信息

目的观察丹参素衍生物(ADTM)对斑马鱼胚胎血管新生的影响,并探讨其可能作用的信号通路。方法选择正常血管转基因斑马鱼和血管生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(VRI)诱导血管损伤转基因斑马鱼两种模型,分别给予50、100、200μmol·L^(-1)的ADTM干预处理,以0.1%的DMSO为空白对照,分别观察不同浓度的ADTM对斑马鱼肠下静脉血管(SIVs)的直径和内皮细胞数以及节间血管(ISVs)生长的影响,并对VRI和ADTM处理后的斑马鱼做转录组学研究。用荧光定量PCR的方法对转录组测序的4个基因进行验证。结果对于正常转基因斑马鱼模型,ADTM处理后,斑马鱼的SIVs血管直径明显增加,内皮细胞的数目轻微增加;在VRI损伤模型中,ADTM表现出修复ISVs损伤的效果。转录组分析表明,19个明显变化的基因富集在胰岛素信号通路。荧光定量PCR的结果与转录组中获得的序列吻合。结论对于正常和血管损伤的斑马鱼模型,ADTM均有促血管新生的效果,其作用机制可能与胰岛素信号通路的激活有关。

关键词：丹参素衍生物血管新生血管修复斑马鱼转录组胰岛素信号通路

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铝对斑马鱼幼鱼的神经毒性作用及其转录组学研究

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广东医学 2017年第6期38卷 830-833页

作者：崔国祯张莹龙紫苇毛皓李铭源遵义医学院珠海校区生物工程系珠海市中药基础及应用研究重点实验室广东珠海519041 澳门大学中华医药研究院中药质量研究国家重点实验室澳门999078

目的探讨铝对斑马鱼的神经毒性作用及其在转录水平的机制。方法选取受精1 d后发育良好的斑马鱼胚胎,随机分为2组,分别给予单纯培养基(对照组)和50μg/L浓度的AlCl_3处理6 d(AlCl_3处理组)。检测幼鱼自主运动行为、活性氧(ROS)释放及转... 详细信息

目的探讨铝对斑马鱼的神经毒性作用及其在转录水平的机制。方法选取受精1 d后发育良好的斑马鱼胚胎,随机分为2组,分别给予单纯培养基(对照组)和50μg/L浓度的AlCl_3处理6 d(AlCl_3处理组)。检测幼鱼自主运动行为、活性氧(ROS)释放及转录组学变化。结果与空白对照组相比,经AlCl_3处理后的斑马鱼,表现出运动轨迹明显无规律,游泳速度减慢,差异有统计学意义(P<0.05);AlCl_3增加斑马鱼幼鱼的活性氧释放(P<0.05);转录组学数据显示,AlCl_3处理组与对照组相比,Neurogenin 1等19个与退行性神经疾病相关的基因表达发生显著变化(P<0.0001),22个显著变化的基因富集在MAPK信号通路。结论铝对斑马鱼具有神经毒性作用,其分子机制可能与Neurogenin 1等19个基因表达的变化及MAPK信号通路的调控有关。

关键词：氯化铝神经毒性斑马鱼行为学转录组

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丹酚酸B对阿霉素诱导H9c2细胞毒性的保护作用及其作用靶点

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广东医学 2015年第24期36卷 3750-3753页

作者：卓贤进申慧芳方志潮丁云岗王滔崔国祯广东省潮州市潮州医院心内科 521011 遵义医学院珠海校区生物工程系广东省珠海市中药基础及应用研究重点实验室 519041

目的探讨丹酚酸B对阿霉素诱导心肌细胞毒性的保护作用及其可能的作用靶标蛋白。方法用MTT法检测丹酚酸B对阿霉素诱导H9c2细胞毒性的保护作用,用反向分子对接在线服务器Pharm Mapper预测丹酚酸B保护心肌细胞的相关作用靶点,用Autodock做... 详细信息

目的探讨丹酚酸B对阿霉素诱导心肌细胞毒性的保护作用及其可能的作用靶标蛋白。方法用MTT法检测丹酚酸B对阿霉素诱导H9c2细胞毒性的保护作用,用反向分子对接在线服务器Pharm Mapper预测丹酚酸B保护心肌细胞的相关作用靶点,用Autodock做正向分子对接对其反向对接的方法进行验证。结果 100μmol/L和300μmol/L丹酚酸B对阿霉素诱导的H9c2细胞毒性有显著的保护作用,丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶12和DNA拓扑异构酶2可能是丹酚酸B心肌保护作用的靶标蛋白。结论丹酚酸B对阿霉素诱导H9c2细胞毒性有一定的保护作用,其作用机制可能与调控丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶12和DNA拓扑异构酶2有关。

关键词：丹酚酸B 心脏保护分子对接丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶12 DNA拓扑异构酶2

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从活血化瘀中药中虚拟筛选P2Y12受体拮抗剂及其抗血小板聚集作用的评价

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世界中西医结合杂志 2018年第8期13卷 1082-1085页

作者：崔国祯李惠民李纳邹佳申慧芳刘银花刘振勇遵义医学院珠海校区生物工程系珠海市中药基础及应用研究重点实验室广东珠海519041

目的建立从活血化瘀中药中虚拟筛选P2Y12受体拮抗剂的模型,并验证候选化合物抗血小板聚集的药理活性。方法根据《中国药典》中的活血化瘀药种类,找出了32种具有抗血栓作用的中药,建立中药成分的虚拟化合物库,以P2Y12受体为靶标蛋白进行... 详细信息

目的建立从活血化瘀中药中虚拟筛选P2Y12受体拮抗剂的模型,并验证候选化合物抗血小板聚集的药理活性。方法根据《中国药典》中的活血化瘀药种类,找出了32种具有抗血栓作用的中药,建立中药成分的虚拟化合物库,以P2Y12受体为靶标蛋白进行虚拟筛选,获得结合自由能最低的化合物,然后进行体外抗血小板凝集实验以验证其活性。结果通过虚拟筛选,得到了结合自由能最低的化合物紫丁香苷,计算其结合自由能力为-14.3 kcal/mol。进一步的实验验证结果表明,该化合物有显著的抗二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板凝集作用。结论从32种活血化瘀的中药中,基于P2Y12受体三维蛋白结构,利用虚拟筛选的方法,筛选出紫丁香苷对ADP诱导的血小板聚集有显著的抑制作用,该模型可用来后续的进一步虚拟筛选P2Y12受体拮抗剂。

关键词： P2Y12受体抗血小板聚集虚拟筛选紫丁香苷

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丹参素抗血小板凝聚作用的靶点研究

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中药新药与临床药理 2017年第4期28卷 450-453页

作者：崔国祯陈言郭琳李纳单璐琛李铭源许贝文遵义医学院珠海校区生物工程系珠海市中药基础及应用研究重点实验室广东珠海519041 澳门大学中华医药研究院中药质量研究国家重点实验室澳门999078 暨南大学药学院新药研究所广东广州510632 珠海澳大科技研究院广东珠海519041

目的探讨丹参素(Danshensu,DSS)抗血小板聚集的分子作用机理及其可能的作用靶点,为丹参素及含有丹参素的中药在临床心脑血管疾病的防治提供科学依据。方法用凝血酶(thrombin)诱导血小板聚集,用血小板聚集仪检测丹参素对血小板聚集率的影... 详细信息

目的探讨丹参素(Danshensu,DSS)抗血小板聚集的分子作用机理及其可能的作用靶点,为丹参素及含有丹参素的中药在临床心脑血管疾病的防治提供科学依据。方法用凝血酶(thrombin)诱导血小板聚集,用血小板聚集仪检测丹参素对血小板聚集率的影响;采用免疫共沉淀的方法,研究丹参素对血小板蛋白质二硫键异构酶ERp57和整合素αⅡbβ3的相互作用;用反向分子对接服务器PharmMapper预测丹参素抗血小板聚集的相关作用靶点;用MOE-Dock的方法,对反向对接的结果进行验证。结果 10μmol·L^(-1)和100μmol·L^(-1)丹参素显著抑制凝血酶诱导的血小板聚集,并呈时间剂量依赖关系(P<0.05)。丹参素抑制血小板ERp57和αⅡbβ3蛋白质的相互作用,凝血因子7(Coagulation factor Ⅶ)可能是其作用靶点之一。结论丹参素具有抗凝血酶诱导血小板聚集的作用,其作用机制与调控血小板ERp57和αⅡbβ3蛋白质的相互作用,以及凝血因子7有关。

关键词：丹参素抗血小板聚集靶点 ERp57/αⅡbβ 3 凝血因子7

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富锌硒绿茶中PDI蛋白酶抑制剂的筛选及其抗血小板聚集的作用

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实用医学杂志 2017年第18期33卷 2987-2990页

作者：李惠琼杨静纯李玲玲王滔崔国祯黎奔广州中医药大第二临床医学院广州市510120 广州中医药大学第二临床医学院珠海分院药剂科广东省珠海市510000 遵义医学院珠海校区生物工程系珠海市中药基础及应用研究重点实验室广东省珠海市519041

目的从富锌硒绿茶中筛选蛋白质二硫异构酶(PDI)的抑制剂,探讨抑制剂对血小板聚集的抑制作用。方法从PDB(protein data bank)下载PDI的晶体结构(PDB ID:4EKZ);建立绿茶的化合物数据库;通过分子模拟软件MOE对化合物库进行PDI抑制剂的虚拟... 详细信息

目的从富锌硒绿茶中筛选蛋白质二硫异构酶(PDI)的抑制剂,探讨抑制剂对血小板聚集的抑制作用。方法从PDB(protein data bank)下载PDI的晶体结构(PDB ID:4EKZ);建立绿茶的化合物数据库;通过分子模拟软件MOE对化合物库进行PDI抑制剂的虚拟筛选,挑选出6个命中的化合物进行对PDI酶活性抑制作用的测试,然后对有抑制活性的化合物进行抗血小板聚集作用的测定。结果 6个虚拟筛选命中的化合物中,表儿茶素没食子酸酯(ECG)和表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对PDI蛋白酶具有抑制作用。其次,两个化合物对ADP诱导的血小板聚集也有抑制作用。结论绿茶活血化瘀的作用,与抑制PDI酶活性有关,ECG和EGCG是有效活性成分。

关键词：富锌硒绿茶蛋白质二硫键异构酶抑制剂抗血小板聚集

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