检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2016年第1期36卷 58-61页

作者：王晓玲陈艳玲黄霜枝唐剑涛靳俊峰吴秀香遵义医学院珠海校区病理学与病理生理学教研室广东珠海519090 遵义医学院珠海校区计算机教研室广东珠海519090

目的观察葡萄籽原花青素(GSP)对自发性高血压大鼠(SHR)肾脏功能和结构的影响及其可能机制。方法8周龄雄性SHR 24只随机分成4组,每组6只:SHR组、GSP低剂量(50 mg/kg)和高剂量治疗组(200 mg/kg)、卡托普利阳性对照治疗组(30 mg/kg)。6只... 详细信息

目的观察葡萄籽原花青素(GSP)对自发性高血压大鼠(SHR)肾脏功能和结构的影响及其可能机制。方法8周龄雄性SHR 24只随机分成4组,每组6只:SHR组、GSP低剂量(50 mg/kg)和高剂量治疗组(200 mg/kg)、卡托普利阳性对照治疗组(30 mg/kg)。6只同龄雄性Wistar-Kyoto大鼠设为对照组。治疗6周后,测定尾动脉收缩压(SBP);生化法检测血清尿素氮(BUN)和血肌酐(SCr)含量、肾皮质中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性;ELISA法检测血清胱抑素C(Cys C)含量;HE染色观察肾脏组织结构;Western blot法检测肾皮质中ERK1/2蛋白表达。结果 GSP能显著降低SHR SBP(P<0.01),改善肾功能参数、减少肾皮质中MDA含量及ERK1/2蛋白的表达(P<0.05),提高SOD和CAT活性(P<0.05),减轻肾脏结构损伤。GSP高剂量治疗组的作用尤为显著(P<0.01)。结论 GSP对SHR肾脏功能和结构损伤有缓解作用,可能与其降低SBP、抑制氧化应激和下调ERK1/2蛋白表达有关。

关键词：葡萄籽原花青素自发性高血压大鼠肾脏氧化应激 ERK1/2

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hISO基因原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达及鉴定

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吉林大学学报（医学版） 2016年第1期42卷 59-63页

作者：邵敏王新颖刘星王燕周鹤峰葛正龙遵义医学院珠海校区生物化学教研室广东珠海519041 遵义医学院生物化学教研室贵州遵义563003

目的:构建原核表达载体pET-28a(+)-hISO,探讨其融合蛋白在大肠杆菌中的稳定表达情况,为后续实验研究奠定基础。方法:以Caco-2细胞的总RNA为模版,采用RT-PCR方法扩增出大小为1 770bp的人异麦芽糖酶(hISO)基因片段,将其插入到pET-28a(+)中... 详细信息

目的:构建原核表达载体pET-28a(+)-hISO,探讨其融合蛋白在大肠杆菌中的稳定表达情况,为后续实验研究奠定基础。方法:以Caco-2细胞的总RNA为模版,采用RT-PCR方法扩增出大小为1 770bp的人异麦芽糖酶(hISO)基因片段,将其插入到pET-28a(+)中,构建重组载体pET-28a(+)-hISO。经PCR、酶切及测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,亲和层析纯化重组蛋白,利用SDS-PAGE电泳、Western blotting对重组蛋白进行分析和鉴定。结果:经PCR、酶切及测序鉴定后,重组质粒pET-28a(+)-hISO构建正确,表达重组蛋白相对分子质量为68 860,将融合蛋白进行纯化,经40和60mmol·L-1咪唑缓冲液洗脱后能够得到浓度和纯度相对较高的蛋白。结论:成功地构建了hISO基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得了融合蛋白表达。

关键词：异麦芽糖酶原核表达 α-葡萄糖苷酶大肠杆菌

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淫羊藿苷对氧糖剥夺PC12细胞活力和细胞形态的影响

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中华中医药学刊 2016年第9期34卷 2198-2200,I0010页

作者：莫镇涛李文娜翟玉荣遵义医学院珠海校区药理学教研室广东珠海519041

目的:观察淫羊藿苷对PC12细胞的毒性作用以及不同给药方法、给药剂量对氧糖剥夺PC12细胞活力的影响。方法:将不同浓度的淫羊藿苷与PC12细胞作用24 h后,用MTT法检测细胞活力。用预给药1 h,氧糖剥夺期间给药2 h,预给药1 h+氧糖剥夺期间给... 详细信息

目的:观察淫羊藿苷对PC12细胞的毒性作用以及不同给药方法、给药剂量对氧糖剥夺PC12细胞活力的影响。方法:将不同浓度的淫羊藿苷与PC12细胞作用24 h后,用MTT法检测细胞活力。用预给药1 h,氧糖剥夺期间给药2 h,预给药1 h+氧糖剥夺期间给药2 h方法给药,细胞复氧复糖24 h后,用MTT法检测细胞活力,预给药1 h+氧糖剥夺期间给药2 h组在造模结束后用倒置显微镜观察细胞形态。结果:PC12细胞用10^(-8)~10^(-4)mol/L淫羊藿苷孵育24 h后,细胞活力与正常组比较均显著下降(P<0.01);10^(-8)~10^(-5)mol/L淫羊藿苷预给药1 h均使模型细胞的活力显著升高(P<0.01);10^(-8)~10^(-4)mol/L淫羊藿苷氧糖剥夺期间给药2 h均使模型细胞的活力显著下降(P<0.01);10^(-8)~10^(-5)mol/L预给药1 h+氧糖剥夺期间给药2 h均使模型细胞的活力显著升高(P<0.01),使模型细胞数量增加,细胞形态改善。结论:淫羊藿苷与细胞的作用时间不宜过长,预给药1h+氧糖剥夺期间给药2 h对氧糖剥夺-复氧PC12细胞能起到较好的保护作用。

关键词：淫羊藿苷浓度给药方法氧糖剥夺-复氧细胞活力

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儿童麻疹疫苗接种后远期抗体水平及Th1/Th2细胞因子分泌特征

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中国当代医药 2017年第11期24卷 4-8页

作者：汪培勤汤菊妹王健容唐艳丽郭锦锦孙万邦深圳市龙岗区妇幼保健院儿科广东深圳518172 遵义医学院珠海校区免疫学教研室广东珠海519041

目的通过检测儿童接种后远期血清抗体水平和T细胞亚群分泌细胞因子,评价其体液免疫持久性及其对细胞免疫功能的影响。方法 2013年1月~2015年7月在深圳市龙岗区妇幼保健院儿童保健科体检的儿童,筛选麻疹疫苗接种的儿童32名,接种时间为3~1... 详细信息

目的通过检测儿童接种后远期血清抗体水平和T细胞亚群分泌细胞因子,评价其体液免疫持久性及其对细胞免疫功能的影响。方法 2013年1月~2015年7月在深圳市龙岗区妇幼保健院儿童保健科体检的儿童,筛选麻疹疫苗接种的儿童32名,接种时间为3~10年,取外周血2 ml分离血清,用ELISA法检测麻疹抗体;根据麻疹抗体水平检测结果将所有受试者分组,即低应答组(9.00~19.99 IU/L)、中应答组(20.00~199.99 IU/L)和高应答组(200.00~320.00 IU/L);将麻疹疫苗接种的32例儿童血液标本分离的外周血单个核细胞(PBMC)进行培养,培养中设计不加麻疹疫苗的对照组、加疫苗刺激的实验组。用细胞因子微球检测技术检测细胞培养上清液中Th1细胞因子TNF-α和Th2细胞因子IL-10。结果抗体阳性率为81.2%,抗体水平为(115.03±95.20)IU/L;高应答组抗体水平显著高于中应答组和低应答组(P<0.05);实验组和对照组因子水平的中位数分别2021.81 pg/ml(TNF-α)、2566.93 pg/ml(IL-10)和1481.72 pg/ml(TNF-α)、1861.89 pg/ml(IL-10),实验组的TNF-α和IL-10水平显著高于对照组(P<0.05)。结论儿童麻疹疫苗接种后抗体阳性率较高,且接种后体内存在免疫记忆性T细胞,在接触抗原刺激后可介导细胞免疫应答。

关键词：麻疹疫苗抗体细胞因子远期免疫免疫记忆

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沉默ClC-3氯通道基因对PC-12细胞凋亡的影响

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郑州大学学报（医学版） 2016年第1期51卷 59-63页

作者：吴琼张淑玲李曦林玲常全忠漯河医学高等专科学校基础部生理学教研室漯河462002 遵义医学院珠海校区生理学教研室珠海519041

目的:观察氯离子通道蛋白3(ClC-3)基因沉默对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞PC-12凋亡的影响。方法:取处于对数生长期的PC-12细胞,随机分为4组:对照组(用正常培养基培养)、H_2O_2组(用300nmol/LH_2O_2诱导12h)、H_2O_2+空质粒组(细胞转染pGPU... 详细信息

目的:观察氯离子通道蛋白3(ClC-3)基因沉默对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞PC-12凋亡的影响。方法:取处于对数生长期的PC-12细胞,随机分为4组:对照组(用正常培养基培养)、H_2O_2组(用300nmol/LH_2O_2诱导12h)、H_2O_2+空质粒组(细胞转染pGPU6/GFP24h后用H_2O_2诱导12h)、H_2O_2+siRNA组(细胞转染pGPU6/GFP-ClC-3-siRNA24h后用H_2O_2诱导12h)。通过CCK-8检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Westernblot法检测Caspase-3以及ClC-3蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测ClC-3mRNA的表达。结果:与对照组比较,H_2O_2组、H_2O_2+空质粒组和H_2O_2+siRNA组均表现为细胞存活率下降,细胞凋亡增加,ClC-3mRNA和Caspase-3、ClC-3蛋白表达增加(P<0.05);H_2O_2组和H_2O_2+空质粒组比较,各指标差异无统计学意义(P>0.05);但与H_2O_2组、H_2O_2+空质粒组比较,H_2O_2+siRNA组细胞存活率较高,细胞凋亡率较低,ClC-3mRNA和Caspase-3、ClC-3蛋白表达较弱(P<0.05)。结论:ClC-3氯离子通道参与了H_2O_2诱导的PC-12细胞凋亡。

关键词： siRNA ClC-3 大鼠细胞凋亡

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ADAM15、MMP-2和MMP-9在不同转移能力乳腺癌细胞系中的表达差异

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基础医学与临床 2016年第2期36卷 227-231页

作者：欧小波周密遵义医学院珠海校区病理学教研室广东珠海519041 遵义医学院珠海校区临床医学系广东珠海519041

目的分析ADAM15、MMP-2和MMP-9在不同转移能力乳腺癌细胞系中的表达,探讨其与乳腺癌细胞转移的相关性。方法 Transwell小室实验检测两种乳腺癌细胞系的转移能力,免疫细胞化学法对ADAM15、MMP-2及MMP-9在两种细胞中的表达进行定性、定位... 详细信息

目的分析ADAM15、MMP-2和MMP-9在不同转移能力乳腺癌细胞系中的表达,探讨其与乳腺癌细胞转移的相关性。方法 Transwell小室实验检测两种乳腺癌细胞系的转移能力,免疫细胞化学法对ADAM15、MMP-2及MMP-9在两种细胞中的表达进行定性、定位及半定量检测,Western blot对其进行定量检测。结果 MDA-MB-231乳腺癌细胞系的运动和侵袭能力均强于MCF-7乳腺癌细胞系。ADAM15、MMP-2及MMP-9在MDA-MB-231细胞系中的表达分别高于MCF-7细胞系(免疫细胞化学:P<0.001,P<0.05,P<0.001;Western blot:P<0.01,P<0.05,P<0.01),且三者在两系乳腺癌细胞表达的差异中,ADAM15表达的差异性最大,其次为MMP-9,MMP-2的差异性最小。结论 ADAM15、MMP-2及MMP-9均促进乳腺癌转移,且ADAM15与转移相关性最强而可能成为判断乳腺癌恶性生物学行为的指标。

关键词： ADAM15 MMP-2 MMP-9 乳腺癌细胞转移

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成年大鼠吻侧迁移流的神经发生

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中国组织化学与细胞化学杂志 2017年第4期26卷 315-320页

作者：贺旭严小新潘爱华刘英飞李建平益阳医学高等专科学校解剖教研室益阳413000 中南大学基础医学院人体解剖与神经生物学系长沙410013 益阳医学高等专科学校附属医院第一内科益阳413000 遵义医学院珠海校区解剖教研室珠海519041

目的探讨成年SD大鼠吻侧迁移流(rostral migratory stream,RMS)的神经发生。方法成年6周龄SD大鼠被处死。矢状位切片,免疫组织化学染色观察RMS区微管相关蛋白双皮质素(doublecortin,DCX)及胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic pro... 详细信息

目的探讨成年SD大鼠吻侧迁移流(rostral migratory stream,RMS)的神经发生。方法成年6周龄SD大鼠被处死。矢状位切片,免疫组织化学染色观察RMS区微管相关蛋白双皮质素(doublecortin,DCX)及胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的表达及DCX/GFAP、DCX/p-CREB的共表达情况。结果在RMS区的垂直臂、肘部、水平臂均有DCX阳性细胞和GFAP阳性细胞,RMS区有GFAP/DCX和p-CREB/DCX共表达细胞。结论吻侧迁移流有广泛的神经元前体细胞及星形胶质细胞标记物表达;迁移神经元标记物可表达于星形胶质细胞,且神经元的迁移受到CREB信号通路的调控。

关键词：吻侧迁移流双皮质素胶质纤维酸性蛋白神经发生

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刚地弓形虫感染致雄性小鼠血睾屏障及生精细胞损伤的研究

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中国病原生物学杂志 2016年第7期11卷 634-637,642页

作者：杨瑞夏嫱岳续鹏杜联峰廖业郭锦锦遵义医学院珠海校区免疫与病原生物学教研室广东珠海519041

目的探讨弓形虫感染对小鼠血睾屏障及生精过程的影响。方法选取9~10周龄雄性BALB/C小鼠45只,随机分为正常对照组和弓形虫速殖子感染低剂量组及高剂量组两感染组,分别腹腔注射1×10^2和1×10^3个弓形虫速殖子/只。感染后第6d,EL... 详细信息

目的探讨弓形虫感染对小鼠血睾屏障及生精过程的影响。方法选取9~10周龄雄性BALB/C小鼠45只,随机分为正常对照组和弓形虫速殖子感染低剂量组及高剂量组两感染组,分别腹腔注射1×10^2和1×10^3个弓形虫速殖子/只。感染后第6d,ELISA检测血清IFN-γ及抗精子抗体（AsAb）水平,硝酸还原法测定睾丸组织一氧化氮（NO）含量,病理切片及硝酸镧示踪透射电镜观察血睾屏障和生精细胞损伤情况。结果正常组小鼠血清IFN-γ维持在低水平[（32.88±5.68）pg/ml],低、高剂量组分别升高至（105.03±11.80）pg/ml和（312.61±44.86）pg/ml,差异具有统计学意义（P〈0.01）;同时低剂量组[（37.29±4.40）μmol/L]和高剂量组[（40.13±3.25）μmol/L]睾丸NO水平也较正常组[（29.48±4.22）μmol/L]显著增高（P〈0.01）。感染组小鼠睾丸组织结构混乱、生精细胞减少,电镜观察显示低剂量组硝酸镧渗入血睾屏障,生精细胞结构尚清晰;高剂量组血睾屏障隔离功能降低并伴有细胞凋亡。正常组小鼠血清AsAb为（50.49±14.59）UI/ml,低、高剂量组分别为（105.28±34.90）UI/ml和（193.55±74.8）UI/ml,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论弓形虫感染导致小鼠血睾屏障损伤,可能与NO、IFN-γ等调节因子异常有关,进而引起AsAb升高及生精细胞损伤,导致生精障碍。

关键词：刚地弓形虫血睾屏障抗精子抗体一氧化氮

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两种植骨方式治疗L_1椎体爆裂骨折的有限元研究

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中国临床解剖学杂志 2016年第1期34卷 91-95页

作者：兰美兵敖俊张美超遵义医学院珠海校区解剖学教研室广东珠海519041 遵义医学院附属医院脊柱外科贵州遵义563003 南方医科大学解剖学教研室广州510515

目的建立L1椎体爆裂骨折的有限元模型,分析比较经椎弓根椎体内植骨和经椎管椎体内植骨的应力分布。方法通过CT扫描、Mimics三维重建、ANSYS前处理等方法建立胸腰段T12-L2有限元模型,据此建立L1椎体爆裂骨折后经椎弓根椎体内植骨和经... 详细信息

目的建立L1椎体爆裂骨折的有限元模型,分析比较经椎弓根椎体内植骨和经椎管椎体内植骨的应力分布。方法通过CT扫描、Mimics三维重建、ANSYS前处理等方法建立胸腰段T12-L2有限元模型,据此建立L1椎体爆裂骨折后经椎弓根椎体内植骨和经椎管椎体内植骨加椎弓根钉棒后路固定模型。并对模型在前屈、后伸、侧弯和旋转下加载350N/8Nm,观察分析应力分布情况。结果正常胸腰段、L1椎体爆裂骨折、经椎弓根植骨和经椎管植骨模型的等效应力峰值如下,前屈：6.89、54.10、8.03、5.92MPa;后伸：56.70、109.00、12.50、8.61 MPa;侧弯：6.83、47.50、11.30、3.60 MPa;旋转：23.80、112.00、13.10、7.65 MPa。未植骨时应力主要集中于螺钉的尾部和连接棒,植骨后应力明显降低,并向螺钉中部分散分布。结论两种植骨方式的模型均重建了伤椎的强度,增加即时稳定性,但经椎管椎体内植骨更充分、更有效减小内固定应力,增加其力学安全性,从生物力学角度是一种植得推广的术式。

关键词：胸腰段爆裂骨折植骨有限元

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儿童新甲型(H1N1)流感疫苗接种后远期抗体水平分析

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职业卫生与应急救援 2017年第3期35卷 255-256页

作者：夏洪波陈珺汝郭锦锦唐艳丽孙万邦深圳市龙岗区妇幼保健院儿童保健科广东深圳518172 遵义医学院珠海校区免疫学教研室广东珠海519041

[目的]检测儿童接种新甲型H1N1流感疫苗后远期血清抗体水平,评价其体液免疫持久性。[方法]用ELISA法对2009年12月—2010年1月新甲型H1N1流感疫苗接种儿童进行新甲型H1N1流感抗体检测。[结果]2013年12月21日采集样本,32名儿童血清新甲型H... 详细信息

[目的]检测儿童接种新甲型H1N1流感疫苗后远期血清抗体水平,评价其体液免疫持久性。[方法]用ELISA法对2009年12月—2010年1月新甲型H1N1流感疫苗接种儿童进行新甲型H1N1流感抗体检测。[结果]2013年12月21日采集样本,32名儿童血清新甲型H1N1流感抗体平均水平仅为69.75 ng/L,阳性保护率为15.63%,男女性别间及7~8、9~10岁年龄组间抗体阳性率差异均无统计学意义(P>0.05)。[结论]新甲型H1N1流感疫苗远期体液免疫保护较差,7~10岁儿童如需取得较好抗体保护,需再次接种。

关键词：儿童新甲型H1N1流感抗体 ELISA检测

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