检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 2019年第7期46卷 719-726页

作者：杨传辉卢荣锐杨愈丰遵义医科大学珠海校区珠海519040 珠海市中药基础与应用研究重点实验室珠海519040

无限制克隆(restriction-free cloning,RFC)是近年来建立起来的一种简单通用的DNA克隆技术,它可以精确地将目的片段插入到质粒内任意位置,是一种不受酶切位点、连接酶效率、目的基因长度或载体序列等条件限制的新型DNA重组技术.与其他... 详细信息

无限制克隆(restriction-free cloning,RFC)是近年来建立起来的一种简单通用的DNA克隆技术,它可以精确地将目的片段插入到质粒内任意位置,是一种不受酶切位点、连接酶效率、目的基因长度或载体序列等条件限制的新型DNA重组技术.与其他多种克隆方法相比,RFC技术拥有不可替代的优势.本文在总结国内外RFC技术研究的基础上,系统阐述了RFC技术的原理、特点和在克隆方面的研究进展,并探讨其在分子生物学和合成生物学等领域的应用价值.

关键词：无限制克隆无缝克隆 DNA重组同源重组合成生物学

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丹参酮ⅡA配伍DAPT对TGF-β;诱导的HK-2细胞Notch1/Jagged1信号通路的影响

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中国中西医结合杂志 2021年

作者：李均陈莎莎遵义医科大学珠海校区中药应用与基础研究重点实验室

目的观察丹参酮ⅡA配伍γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨酸-t-丁酯（DAPT）对转化生长因子-β;（TGF-β;）诱导的人源性肾小管上皮细胞HK-2细胞中纤维化标志物fibronectin（FN）、N-cadherin及Notch1/Jagged1信号通... 详细信息

目的观察丹参酮ⅡA配伍γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨酸-t-丁酯（DAPT）对转化生长因子-β;（TGF-β;）诱导的人源性肾小管上皮细胞HK-2细胞中纤维化标志物fibronectin（FN）、N-cadherin及Notch1/Jagged1信号通路分子Notch1、Jagged1表达的影响，探讨其防治肾纤维化的机制。方法 HK-2细胞分为5组：正常组（无特殊处理）、模型组（TGF-β;10 ng/mL）、丹参酮ⅡA组（TGF-β;10ng/mL+丹参酮ⅡA5μmol/L）、DAPT组（TGF-β;10ng/mL+DAPT10μmol/L）、丹参酮ⅡA+DAPT组（TGF-β;10 ng/mL+丹参酮ⅡA 5μmol/L+DAPT 10μmol/L）。采用RT-q PCR、Western Bolt及免疫荧光技术检测各组细胞间质纤维化指标FN、N-cadherin及Notch1、Jagged1m RNA及蛋白的表达。结果正常组HK-2细胞FN、N-cadherin、Notch1、Jagged1 mRNA及蛋白呈低表达，模型组HK-2细胞FN、N-cadherin、Notch1、Jagged1 mRNA及蛋白表达较正常组升高（P<0.05），各干预组HK-2细胞FN、N-cadherin、Notch1、Jagged1 mRNA及蛋白表达较模型组降低（P<0.05）。丹参酮ⅡA+DAPT组HK-2细胞FN、N-cadherin、Jagged1 mRNA及蛋白表达低于丹参酮ⅡA组及DAPT组（P<0.05）；丹参酮ⅡA+DAPT组HK-2细胞Notch1 mRNA及蛋白表达低于丹参酮ⅡA组（P<0.05）。结论丹参酮ⅡA配伍DAPT用药可抑制TGF-β;诱导的HK-2细胞FN、N-cadherin的表达缓解肾间质纤维化，其机制可能与其协同干预Notch1/Jagged1信号通路传导有关。

关键词：丹参酮ⅡA 3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨酸-t-丁酯肾间质纤维化 Notch1信号通路

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丹参酮ⅡA联合DAPT对UUO模型大鼠肾组织 Notch/Jagged通路相关蛋白表达的影响

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中国中西医结合杂志 2019年第7期39卷 826-831页

作者：冯定浩李均徐静雅张力之遵义医科大学珠海校区中药应用与基础研究重点实验室

目的观察丹参酮ⅡA配伍γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨酸-t-丁酯(DAPT)对单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠肾组织Notch/Jagged通路相关蛋白NICD、Hey1、Rbp-Jk及ColⅠ表达的影响,探讨其防治肾纤维化的分子机制。方法取2... 详细信息

目的观察丹参酮ⅡA配伍γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨酸-t-丁酯(DAPT)对单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠肾组织Notch/Jagged通路相关蛋白NICD、Hey1、Rbp-Jk及ColⅠ表达的影响,探讨其防治肾纤维化的分子机制。方法取24只大鼠结扎右侧输尿管建立UUO模型,随机分为模型组、丹参酮ⅡA组、DAPT组、配伍组,每组6只。另取6只大鼠设为正常组。正常组及模型组给予羧甲基纤维素钠(CMC-Na)灌胃,其余各给药组分别给予丹参酮ⅡA(25 mg/kg)、DAPT(12 mg/kg)、丹参酮ⅡA(25 mg/kg)+DAPT(12 mg/kg)灌胃,2周后处死大鼠取右肾组织。采用Masson染色观察肾组织胶原纤维,免疫组织化学法检测各组大鼠肾组织NICD、Hey1表达,Western Blot技术检测各组大鼠肾组织Rbp-Jk、ColⅠ表达。结果与正常组比较,模型组Masson染色评分升高(P<0.05),NICD、Hey1、Rbp-Jk、ColⅠ蛋白表达均升高(P<0.05)。与模型组比较,各给药组Masson染色评分、NICD、Hey1、Rbp-Jk、ColⅠ蛋白表达均降低(P<0.05)。与丹参酮ⅡA组及DAPT组比较,配伍组Masson评分、NICD、Hey1、Rbp-Jk、ColⅠ蛋白表达均降低(P<0.05)。结论丹参酮ⅡA配伍DAPT可改善UUO模型肾间质病理损害,减轻肾纤维化过程中胶原纤维合成沉积,其机制可能与抑制NICD、Rbp-Jk、Hey1及ColⅠ在肾组织中的表达,影响Notch/Jagged信号途径转导相关。

关键词：丹参酮ⅡA γ-分泌酶抑制剂配伍肾间质纤维化

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链球菌脂蛋白的功能作用及其作为疫苗候选蛋白和抗菌药物靶标的研究进展

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生物化学与生物物理进展 2020年第9期47卷 956-967页

作者：阳小燕朱可欣郭众邓一丹李莎乐尧金遵义医科大学珠海校区生物工程系珠海市中药基础及应用研究重点实验室珠海519041

脂蛋白是一类广泛存在于革兰氏阴性细菌和革兰氏阳性细菌中的细胞膜锚定蛋白,具有多种生物学功能.脂蛋白不仅作为细菌的毒力因子,而且能够识别和激活宿主的免疫系统,是当前预防和治疗细菌感染的热门靶点之一,本文对链球菌中脂蛋白的主... 详细信息

脂蛋白是一类广泛存在于革兰氏阴性细菌和革兰氏阳性细菌中的细胞膜锚定蛋白,具有多种生物学功能.脂蛋白不仅作为细菌的毒力因子,而且能够识别和激活宿主的免疫系统,是当前预防和治疗细菌感染的热门靶点之一,本文对链球菌中脂蛋白的主要功能及其在疫苗和抗菌药物研究中的进展进行了综述和展望,为今后链球菌中脂蛋白的深入研究拓宽了思路.

关键词：脂蛋白肺炎链球菌 A族链球菌 B族链球菌变异链球菌疫苗抗菌药物靶标

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丹参酮ⅡA逆转TGF-β1诱导的HK-2细胞转分化及其机制研究

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中国免疫学杂志 2019年第17期35卷 2079-2083页

作者：陈莎莎李均遵义医科大学珠海校区中药应用与基础研究重点实验室

目的:探讨丹参酮ⅡA对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化的影响及其机制。方法:实验随机分为三组:不予特殊处理的为正常组,TGF-β1处理的为模型组,丹参酮ⅡA、TGF-β1处理的为丹参酮ⅡA组。采用CCK-8法检测丹参酮ⅡA对细胞活... 详细信息

目的:探讨丹参酮ⅡA对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化的影响及其机制。方法:实验随机分为三组:不予特殊处理的为正常组,TGF-β1处理的为模型组,丹参酮ⅡA、TGF-β1处理的为丹参酮ⅡA组。采用CCK-8法检测丹参酮ⅡA对细胞活性的影响,筛选最佳药物浓度。显微镜观察各组细胞形态变化;RT-qPCR及Westernblot技术检测三组细胞中Fibronectin、E-cadherin、Snail的表达;免疫荧光检测三组细胞中Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达。结果:CCK-8法筛选出丹参酮ⅡA最佳浓度为5μmol/L;镜下模型组细胞形态呈长梭形,与纤维细胞形态相似,丹参酮ⅡA组长梭形细胞减少,接近正常组;模型组与正常组相比,上皮标记物E-CadherinmRNA及蛋白的表达均降低(P<0.01),间质标记物Fibronectin、SnailmRNA及蛋白的表达均升高(P<0.01),促凋亡蛋白Bax、Caspase-3的表达升高(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2的表达下降(P<0.01);丹参酮ⅡA组与模型组相比,E-CadherinmRNA及蛋白的表达均升高(P<0.05),Fibronectin、SnailmRNA及蛋白的表达均降低(P<0.05),Bax、Caspase-3的表达均下调(P<0.05),Bcl-2的表达上调(P<0.05)。结论:丹参酮ⅡA逆转TGF-β1诱导的HK-2细胞转分化,其机制可能与抗细胞凋亡有关。

关键词：丹参酮ⅡA 上皮细胞间质转化 TGF-β1 凋亡

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丹参酮ⅡA 配伍DAPT对TGF-β_(1)诱导的HK-2细胞Notch1/Jagged1信号通路的影响

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中国中西医结合杂志 2021年第9期41卷 1087-1092页

作者：李均陈莎莎遵义医科大学珠海校区中药应用与基础研究重点实验室广东519000

目的观察丹参酮ⅡA配伍γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨酸-t-丁酯(DAPT)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人源性肾小管上皮细胞HK-2细胞中纤维化标志物fibronectin(FN)、N-cadherin及Notch1/Jagged1信号通路分子No... 详细信息

目的观察丹参酮ⅡA配伍γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨酸-t-丁酯(DAPT)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人源性肾小管上皮细胞HK-2细胞中纤维化标志物fibronectin(FN)、N-cadherin及Notch1/Jagged1信号通路分子Notch1、Jagged1表达的影响,探讨其防治肾纤维化的机制。方法?HK-2细胞分为5组:正常组(无特殊处理)、模型组(TGF-β110 ng/mL)、丹参酮ⅡA组(TGF-β110 ng/mL+丹参酮ⅡA 5μmol/L)、DAPT组(TGF-β110 ng/mL+DAPT 10μmol/L)、丹参酮ⅡA+DAPT组(TGF-β110 ng/mL+丹参酮ⅡA 5μmol/L+DAPT 10μmol/L)。采用RT-qPCR、Western Bolt及免疫荧光技术检测各组细胞间质纤维化指标FN、N-cadherin及Notch1、Jagged1mRNA及蛋白的表达。结果?正常组HK-2细胞FN、N-cadherin、Notch1、Jagged1 mRNA及蛋白呈低表达,模型组HK-2细胞FN、N-cadherin、Notch1、Jagged1 mRNA及蛋白表达较正常组升高(P<0.05),各干预组HK-2细胞FN、N-cadherin、Notch1、Jagged1 mRNA及蛋白表达较模型组降低(P<0.05)。丹参酮ⅡA+DAPT组HK-2细胞FN、N-cadherin、Jagged1 mRNA及蛋白表达低于丹参酮ⅡA组及DAPT组(P<0.05);丹参酮ⅡA+DAPT组HK-2细胞Notch1 mRNA及蛋白表达低于丹参酮ⅡA组(P<0.05)。结论?丹参酮ⅡA配伍DAPT用药可抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞FN、N-cadherin的表达缓解肾间质纤维化,其机制可能与其协同干预Notch1/Jagged1信号通路传导有关。

关键词：丹参酮ⅡA 3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨酸-t-丁酯肾间质纤维化 Notch1信号通路

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面包树果实凝集素的提取纯化及理化性质分析

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天然产物研究与开发 2019年第2期31卷 332-337页

作者：张晓青施青杨愈丰遵义医科大学珠海校区珠海市中药基础与应用研究重点实验室珠海519040

建立面包树果实凝集素(frutalin,FTL)的提取纯化方案,并对FTL纯品进行部分理化性质分析。本试验以新鲜的面包树果实籽为材料,经Tris-HCl缓冲液浸提、过滤、硫酸铵沉淀和阳离子交换层析后超滤浓缩得FTL纯品,最后用纯品开展了糖抑制,热稳... 详细信息

建立面包树果实凝集素(frutalin,FTL)的提取纯化方案,并对FTL纯品进行部分理化性质分析。本试验以新鲜的面包树果实籽为材料,经Tris-HCl缓冲液浸提、过滤、硫酸铵沉淀和阳离子交换层析后超滤浓缩得FTL纯品,最后用纯品开展了糖抑制,热稳定性,pH稳定性和金属离子耐受性等试验。提取优化得到的最佳条件为:料液比1∶2(g:m L),浸提时间2 h,浸提温度50℃,硫酸铵饱和度70%,沉淀时间4 h。经阳离子交换层析后FTL回收率为22%。研究结果表明,FTL是一种热稳定性凝集素,在温度不超过60℃时,其凝血活性不受影响,并且不依赖于金属离子来发挥其凝血活性。本研究建立了一个简单高效的FTL分离纯化方案,并对FTL纯品做了部分理化性质研究,为FTL可能的生物医学应用提供研究基础。

关键词：面包树果实凝集素分离纯化凝血活性理化性质

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Hippo通路效应因子YAP/TAZ对肾纤维化影响的研究进展

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医学研究生学报 2022年第12期35卷 1323-1328页

作者：樊尚珩(综述) 李均(审校) 遵义医科大学珠海校区中药应用与基础研究重点实验室珠海519000

肾纤维化是肾损伤异常修复的结果,涉及复杂的病理机制。Hippo信号通路对肾发育、代谢、稳态及肾疾病发展方面具有调控作用。Hippo通路核心效应因子YAP/TAZ的激活在肾纤维化中起重要作用,其通过促进肾炎症反应、参与细胞机械转导、串扰... 详细信息

肾纤维化是肾损伤异常修复的结果,涉及复杂的病理机制。Hippo信号通路对肾发育、代谢、稳态及肾疾病发展方面具有调控作用。Hippo通路核心效应因子YAP/TAZ的激活在肾纤维化中起重要作用,其通过促进肾炎症反应、参与细胞机械转导、串扰其他致纤维化通路等机制影响肾纤维化。文章就近年Hippo信号通路对肾纤维化及相关疾病影响的研究现状以及现有的抑制剂干预YAP/TAZ延缓肾纤维化的研究成果予以综述,为临床上延缓肾纤维化提供新的思路与理论依据。

关键词：肾纤维化 Hippo信号通路 YAP/TAZ

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西红花苷和西红花酸的药动学及制剂学研究进展

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中草药 2019年第1期50卷 234-242页

作者：张彩凤刘银花王雅溶汪泽陈燕玲陈阳遵义医科大学珠海校区珠海市中药基础及应用研究重点实验室广东珠海519041

西红花苷来源于西红花Crocus sativus柱头和栀子Gardenia jasminoides果实,是一类具长共轭独特水溶性类胡萝卜素,具有显著神经保护、心血管保护及抗肿瘤等药理活性。西红花苷口服不能以原型吸收入血,而是在胃肠道水解为西红花酸后吸收... 详细信息

西红花苷来源于西红花Crocus sativus柱头和栀子Gardenia jasminoides果实,是一类具长共轭独特水溶性类胡萝卜素,具有显著神经保护、心血管保护及抗肿瘤等药理活性。西红花苷口服不能以原型吸收入血,而是在胃肠道水解为西红花酸后吸收进入血液循环,之后转变为葡萄糖醛酸缀合物,而代谢产物西红花酸主要分布到心、肝、脾、肺等血液充盈组织中。由于西红花苷及代谢物西红花酸体内生物利用度较低、稳定性差,可采用新型递药系统应用于西红花苷(酸),提高其稳定性、生物利用度及药理活性。综述近年西红花苷和西红花酸的体内代谢及制剂学相关研究进展,为该类天然产物进一步深入研究与开发利用提供参考。

关键词：西红花苷西红花酸药动学剂型生物利用度

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三个C19-二萜生物碱的NMR数据全归属（英文）

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波谱学杂志 2019年第3期36卷 331-340页

作者：尹田鹏王雅溶王敏石文智张正茜何莎莎遵义医科大学珠海校区珠海市中药基础及应用研究重点实验室

C19-二萜生物碱结构复杂多样,核磁共振(NMR)结构鉴定困难.本文从独龙乌头中分离得到三个C19-二萜生物碱:taronenine E(1)、chasmaconitine(2)和vilmorisine(3),综合运用多种NMR技术(包括1H NMR、13C NMR、DEPT、1H-1H COSY、HSQC和HMBC)... 详细信息

关键词： C19-二萜生物碱独龙乌头(Aconitum taronense Fletcher et Lauener) 核磁共振(NMR) 归属

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