检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 2019年第7期46卷 719-726页

作者：杨传辉卢荣锐杨愈丰遵义医科大学珠海校区珠海519040 珠海市中药基础与应用研究重点实验室珠海519040

无限制克隆(restriction-free cloning,RFC)是近年来建立起来的一种简单通用的DNA克隆技术,它可以精确地将目的片段插入到质粒内任意位置,是一种不受酶切位点、连接酶效率、目的基因长度或载体序列等条件限制的新型DNA重组技术.与其他... 详细信息

无限制克隆(restriction-free cloning,RFC)是近年来建立起来的一种简单通用的DNA克隆技术,它可以精确地将目的片段插入到质粒内任意位置,是一种不受酶切位点、连接酶效率、目的基因长度或载体序列等条件限制的新型DNA重组技术.与其他多种克隆方法相比,RFC技术拥有不可替代的优势.本文在总结国内外RFC技术研究的基础上,系统阐述了RFC技术的原理、特点和在克隆方面的研究进展,并探讨其在分子生物学和合成生物学等领域的应用价值.

关键词：无限制克隆无缝克隆 DNA重组同源重组合成生物学

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链球菌脂蛋白的功能作用及其作为疫苗候选蛋白和抗菌药物靶标的研究进展

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生物化学与生物物理进展 2020年第9期47卷 956-967页

作者：阳小燕朱可欣郭众邓一丹李莎乐尧金遵义医科大学珠海校区生物工程系珠海市中药基础及应用研究重点实验室珠海519041

脂蛋白是一类广泛存在于革兰氏阴性细菌和革兰氏阳性细菌中的细胞膜锚定蛋白,具有多种生物学功能.脂蛋白不仅作为细菌的毒力因子,而且能够识别和激活宿主的免疫系统,是当前预防和治疗细菌感染的热门靶点之一,本文对链球菌中脂蛋白的主... 详细信息

脂蛋白是一类广泛存在于革兰氏阴性细菌和革兰氏阳性细菌中的细胞膜锚定蛋白,具有多种生物学功能.脂蛋白不仅作为细菌的毒力因子,而且能够识别和激活宿主的免疫系统,是当前预防和治疗细菌感染的热门靶点之一,本文对链球菌中脂蛋白的主要功能及其在疫苗和抗菌药物研究中的进展进行了综述和展望,为今后链球菌中脂蛋白的深入研究拓宽了思路.

关键词：脂蛋白肺炎链球菌 A族链球菌 B族链球菌变异链球菌疫苗抗菌药物靶标

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面包树果实凝集素的提取纯化及理化性质分析

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天然产物研究与开发 2019年第2期31卷 332-337页

作者：张晓青施青杨愈丰遵义医科大学珠海校区珠海市中药基础与应用研究重点实验室珠海519040

建立面包树果实凝集素(frutalin,FTL)的提取纯化方案,并对FTL纯品进行部分理化性质分析。本试验以新鲜的面包树果实籽为材料,经Tris-HCl缓冲液浸提、过滤、硫酸铵沉淀和阳离子交换层析后超滤浓缩得FTL纯品,最后用纯品开展了糖抑制,热稳... 详细信息

建立面包树果实凝集素(frutalin,FTL)的提取纯化方案,并对FTL纯品进行部分理化性质分析。本试验以新鲜的面包树果实籽为材料,经Tris-HCl缓冲液浸提、过滤、硫酸铵沉淀和阳离子交换层析后超滤浓缩得FTL纯品,最后用纯品开展了糖抑制,热稳定性,pH稳定性和金属离子耐受性等试验。提取优化得到的最佳条件为:料液比1∶2(g:m L),浸提时间2 h,浸提温度50℃,硫酸铵饱和度70%,沉淀时间4 h。经阳离子交换层析后FTL回收率为22%。研究结果表明,FTL是一种热稳定性凝集素,在温度不超过60℃时,其凝血活性不受影响,并且不依赖于金属离子来发挥其凝血活性。本研究建立了一个简单高效的FTL分离纯化方案,并对FTL纯品做了部分理化性质研究,为FTL可能的生物医学应用提供研究基础。

关键词：面包树果实凝集素分离纯化凝血活性理化性质

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西红花苷和西红花酸的药动学及制剂学研究进展

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中草药 2019年第1期50卷 234-242页

作者：张彩凤刘银花王雅溶汪泽陈燕玲陈阳遵义医科大学珠海校区珠海市中药基础及应用研究重点实验室广东珠海519041

西红花苷来源于西红花Crocus sativus柱头和栀子Gardenia jasminoides果实,是一类具长共轭独特水溶性类胡萝卜素,具有显著神经保护、心血管保护及抗肿瘤等药理活性。西红花苷口服不能以原型吸收入血,而是在胃肠道水解为西红花酸后吸收... 详细信息

西红花苷来源于西红花Crocus sativus柱头和栀子Gardenia jasminoides果实,是一类具长共轭独特水溶性类胡萝卜素,具有显著神经保护、心血管保护及抗肿瘤等药理活性。西红花苷口服不能以原型吸收入血,而是在胃肠道水解为西红花酸后吸收进入血液循环,之后转变为葡萄糖醛酸缀合物,而代谢产物西红花酸主要分布到心、肝、脾、肺等血液充盈组织中。由于西红花苷及代谢物西红花酸体内生物利用度较低、稳定性差,可采用新型递药系统应用于西红花苷(酸),提高其稳定性、生物利用度及药理活性。综述近年西红花苷和西红花酸的体内代谢及制剂学相关研究进展,为该类天然产物进一步深入研究与开发利用提供参考。

关键词：西红花苷西红花酸药动学剂型生物利用度

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三个C19-二萜生物碱的NMR数据全归属（英文）

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波谱学杂志 2019年第3期36卷 331-340页

作者：尹田鹏王雅溶王敏石文智张正茜何莎莎遵义医科大学珠海校区珠海市中药基础及应用研究重点实验室

C19-二萜生物碱结构复杂多样,核磁共振(NMR)结构鉴定困难.本文从独龙乌头中分离得到三个C19-二萜生物碱:taronenine E(1)、chasmaconitine(2)和vilmorisine(3),综合运用多种NMR技术(包括1H NMR、13C NMR、DEPT、1H-1H COSY、HSQC和HMBC)... 详细信息

关键词： C19-二萜生物碱独龙乌头(Aconitum taronense Fletcher et Lauener) 核磁共振(NMR) 归属

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黔产乌头的二萜生物碱类成分研究

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中国药房 2019年第22期30卷 3096-3100页

作者：尹田鹏罗智慧王敏汪泽遵义医科大学珠海校区/珠海市中药基础及应用研究重点实验室

目的:研究贵州地区产乌头中的二萜生物碱类成分,为进一步丰富乌头属植物的化学成分以及开发利用该药用植物提供参考。方法:取贵州产乌头块根,采用酸提碱沉法提取总生物碱浸膏,并采用硅胶柱层析对总生物碱浸膏进行分离纯化,获得二萜生物... 详细信息

目的:研究贵州地区产乌头中的二萜生物碱类成分,为进一步丰富乌头属植物的化学成分以及开发利用该药用植物提供参考。方法:取贵州产乌头块根,采用酸提碱沉法提取总生物碱浸膏,并采用硅胶柱层析对总生物碱浸膏进行分离纯化,获得二萜生物碱类成分。结合核磁共振和高分辨质谱分析技术对所获化合物进行结构鉴定。结果与结论:从贵州产乌头中分离鉴定出15个二萜类生物碱,分别为12-epi-15-O-acetyl-17-benzoyl-16-hydroxy-16,17-dihydronapelline(Ⅰ)、宋果灵(Ⅱ)、Songoramine(Ⅲ)、10-羟基乌头碱(Ⅳ)、次乌头碱(Ⅴ)、去氧乌头碱(Ⅵ)、乌头碱(Ⅶ)、新乌头碱(Ⅷ)、14-benzoyltalasamine(Ⅸ)、塔拉萨敏(Ⅹ)、尼奥宁(Ⅺ)、6-表查斯曼宁(Ⅻ)、异塔拉定(ⅩⅢ)、萨卡可尼亭(ⅩⅣ)和多根乌头碱(ⅩⅤ)。其中化合物Ⅸ、Ⅻ均为首次从乌头中分离得到。

关键词：乌头成分二萜生物碱核磁共振质谱鉴定

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石斛属植物中石斛碱类成分的波谱学特征

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波谱学杂志 2020年第3期37卷 381-389页

作者：尹田鹏李幸汪泽王雅溶王敏遵义医科大学珠海校区珠海市中药基础及应用研究重点实验室广东珠海519041

石斛属(Dendrobium Sw.)植物中的石斛碱类(dendrobines)倍半萜生物碱(sesquiterpenoid alkaloids)以其独特的结构和显著的生理活性而受到广泛关注.本文对石斛碱类化合物的结构特点及波谱学特征,包括紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)、质谱(MS... 详细信息

石斛属(Dendrobium Sw.)植物中的石斛碱类(dendrobines)倍半萜生物碱(sesquiterpenoid alkaloids)以其独特的结构和显著的生理活性而受到广泛关注.本文对石斛碱类化合物的结构特点及波谱学特征,包括紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)、质谱(MS)、核磁共振(NMR)波谱等进行总结,并归纳石斛碱类成分的结构解析方式,为其深入研究与开发提供参考依据.

关键词：石斛属石斛碱类倍半萜生物碱核磁共振(NMR)

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小鼠肺炎链球菌脂蛋白SPD1609多克隆抗体的制备

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细胞与分子免疫学杂志 2019年第12期35卷 1122-1127页

作者：阳小燕何丽媛韦发昌郭众遵义医科大学珠海校区生物工程系珠海市中药基础及应用研究重点实验室广东珠海519041

目的制备肺炎链球菌脂蛋白SPD1609的小鼠多克隆抗体。方法通过PCR扩增肺炎链球菌D39菌株中的spd1609基因,连接到原核表达载体pGEX-4T-1上,构建重组质粒pGEX-4T-1609。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)... 详细信息

目的制备肺炎链球菌脂蛋白SPD1609的小鼠多克隆抗体。方法通过PCR扩增肺炎链球菌D39菌株中的spd1609基因,连接到原核表达载体pGEX-4T-1上,构建重组质粒pGEX-4T-1609。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶-SPD1609(GST-1609)融合蛋白。利用GST亲和层析柱纯化GST-1609融合蛋白,纯化后的融合蛋白用凝血酶(thrombin)外切酶切掉GST标签,进一步通过GST亲和层析得到SPD1609蛋白。用纯化的不含GST标签的SPD1609蛋白免疫小鼠,制备多克隆抗体,用ELISA检测抗体的效价,Western blot法检测抗体的特异性。结果成功构建了原核表达载体pGEX-4T-1609,经GST亲和层析柱分离纯化后可得到相对分子质量(Mr)35000的SPD1609蛋白,蛋白纯度在95%以上。ELISA检测结果显示纯化后的SPD1609蛋白可诱导小鼠产生特异性免疫应答,免疫小鼠血清抗体的效价达1∶40960,Western blot法检测显示此多克隆抗体可以特异地识别原核表达和肺炎链球菌细胞内表达的SPD1609蛋白。结论成功制备具有较好特异性的SPD1609蛋白的小鼠多克隆抗体。

关键词： SPD1609蛋白肺炎链球菌原核表达多克隆抗体

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细菌表面展示技术研究新进展

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生物化学与生物物理进展 2019年第2期46卷 162-168页

作者：向红英王菊芳杨愈丰吕延成遵义医科大学珠海校区珠海519040 珠海市中药基础与应用研究重点实验室珠海519040 广东省发酵与酶工程重点实验室(华南理工大学生物科学与工程学院) 广州510640

细菌表面展示是将靶标蛋白质表达于细菌表面以更好地实现其功能的一种技术,它在重组细菌疫苗、生物燃料电池、全细胞催化剂和生物修复等多个领域均有广泛的应用.随着相关技术的发展,表面展示系统的各种性能被不断地改良,同时新的表面展... 详细信息

细菌表面展示是将靶标蛋白质表达于细菌表面以更好地实现其功能的一种技术,它在重组细菌疫苗、生物燃料电池、全细胞催化剂和生物修复等多个领域均有广泛的应用.随着相关技术的发展,表面展示系统的各种性能被不断地改良,同时新的表面展示系统也陆续被开发和应用,使该技术得到持续的丰富和发展.本文重点关注近年研究得较多的细菌表面展示系统,主要对各类细菌表面展示系统的开发、改造和修饰,以及该技术在生物修复和生物传感器方面的应用作一综述.

关键词：细菌表面展示系统载体蛋白冰核蛋白生物修复生物传感器

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丹酚酸B抑制碘普罗胺诱导的HK-2细胞凋亡的作用及机制

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中草药 2019年第10期50卷 2398-2404页

作者：高昕乐陈阳罗婷赵晓朵庄晓东吴秀香凡栋陈燕玲何柳桦靳俊峰遵义医科大学珠海校区病理生理学教研室广东珠海519041 遵义医科大学珠海校区珠海市中药基础及应用研究重点实验室广东珠海519041 中山大学中山医学院广东广州510080 中山大学附属第一医院心血管内科广东广州510080

目的研究丹酚酸B抑制碘普罗胺诱导的人肾近端小管上皮细胞HK-2凋亡的作用及机制。方法将HK-2细胞分为对照组、模型(碘普罗胺)组、丹酚酸B各浓度(1、10、50、100、200μmol/L)处理组及丹酚酸B(200μmol/L)对照组。采用CCK-8法检测丹酚酸... 详细信息

目的研究丹酚酸B抑制碘普罗胺诱导的人肾近端小管上皮细胞HK-2凋亡的作用及机制。方法将HK-2细胞分为对照组、模型(碘普罗胺)组、丹酚酸B各浓度(1、10、50、100、200μmol/L)处理组及丹酚酸B(200μmol/L)对照组。采用CCK-8法检测丹酚酸B对碘普罗胺诱导的HK-2细胞增殖的影响,DAPI染色法观察细胞核形态的变化,DCFH-DA染色荧光显微镜观察结合流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)水平,Western blotting法检测细胞Bax、Bcl-2、cleaved Caspase-3、磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化的细胞外调节蛋白激酶(p-ERK1/2)及Klotho蛋白表达量。结果与对照组比较,模型组细胞活力显著降低(P<0.01),部分细胞核出现染色质浓缩及核分裂等凋亡特征,ROS水平及Bax、cleaved Caspase-3、p-ERK1/2蛋白表达水平显著增加(P<0.05、0.01),而Bcl-2、p-Akt及Klotho蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01);丹酚酸B 50、100、200μmol/L可以部分逆转碘普罗胺的上述效应。但低浓度的丹酚酸B(1、10μmol/L)对碘普罗胺诱导的HK-2细胞无明显保护作用。结论丹酚酸B可以抑制碘普罗胺诱导的HK-2细胞凋亡,其机制可能与抗氧化应激,激活Akt信号通路、抑制ERK信号通路及上调Klotho蛋白表达有关。

关键词：丹酚酸B 碘普罗胺 Klotho 凋亡蛋白激酶B 细胞外调节蛋白激酶

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