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遵义医科大学学报 2024年第9期47卷 916-925,934页

作者：周雪汪显耀何志旭遵义医科大学基础医学院免疫学教研室贵州遵义563006 遵义医科大学组织损伤修复与再生医学省部共建协同创新中心贵州遵义563000 遵义医科大学附属医院细胞工程实验室贵州遵义563000 遵义医科大学附属医院儿科贵州遵义563000

含三方基序(Trim)蛋白家族是一类具有高度保守结构域和广泛生物活性的蛋白。参与细胞增殖、发育、凋亡等多种重要生物学过程。Trim21作为该蛋白家族中的一员,具有E3泛素连接酶活性,可以通过参与蛋白质的泛素化修饰及降解,调控先天性免... 详细信息

含三方基序(Trim)蛋白家族是一类具有高度保守结构域和广泛生物活性的蛋白。参与细胞增殖、发育、凋亡等多种重要生物学过程。Trim21作为该蛋白家族中的一员,具有E3泛素连接酶活性,可以通过参与蛋白质的泛素化修饰及降解,调控先天性免疫与适应性免疫。越来越多的研究证实Trim21的异常表达,在多种肿瘤中扮演不同的角色,与肿瘤的发生和发展密切相关。为深入了解Trim21在肿瘤发生发展中的作用机制,为未来相关治疗策略的指定提供理论依据。本文就Trim21在调控肿瘤增殖,侵袭、耐药、免疫调节等方面的研究进展进行综述。

关键词： Trim21 肿瘤泛素化修饰细胞增殖免疫调节

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继发性肢体淋巴水肿的外科整合治疗

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中华损伤与修复杂志（电子版） 2024年第3期19卷 185-191页

作者：邓呈亮陈君哲章一新遵义医科大学附属医院烧伤整形外科 563003 遵义医科大学组织损伤修复与再生医学省部共建协同创新中心 563003 上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科 200023

继发性肢体淋巴水肿为一种慢性进展性疾病,发病率逐年增加。外科治疗作为肢体淋巴水肿的主要治疗方式近年受到广泛关注。本文结合当前研究现状,阐述继发性肢体淋巴水肿各种外科治疗方式的特点及适应证,以期为外科整合治疗在继发性肢体... 详细信息

继发性肢体淋巴水肿为一种慢性进展性疾病,发病率逐年增加。外科治疗作为肢体淋巴水肿的主要治疗方式近年受到广泛关注。本文结合当前研究现状,阐述继发性肢体淋巴水肿各种外科治疗方式的特点及适应证,以期为外科整合治疗在继发性肢体淋巴水肿中的应用提供参考。

关键词：淋巴水肿外科治疗

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外泌体来源的环状RNA对肿瘤细胞和免疫细胞的调控作用研究进展

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遵义医科大学学报 2024年第5期47卷 522-530页

作者：张隆泽汪显耀何志旭遵义医科大学基础医学院免疫学教研室贵州遵义563006 遵义医科大学组织损伤修复与再生医学省部共建协同创新中心贵州遵义563003 遵义医科大学附属医院细胞工程实验室贵州遵义563003 遵义医科大学附属医院儿科贵州遵义563003

外泌体(Exo)是由细胞分泌的纳米级囊泡,可通过运载多种物质影响细胞间通讯,在肿瘤微环境(TME)中调控肿瘤的发生发展。环状RNA(circRNA)是一类首尾相连的非编码RNA分子,其独特的结构导致它不易在体内降解。近年来,circRNA在肿瘤进展中的... 详细信息

外泌体(Exo)是由细胞分泌的纳米级囊泡,可通过运载多种物质影响细胞间通讯,在肿瘤微环境(TME)中调控肿瘤的发生发展。环状RNA(circRNA)是一类首尾相连的非编码RNA分子,其独特的结构导致它不易在体内降解。近年来,circRNA在肿瘤进展中的功能逐渐被揭露,且在Exo中检测到大量异常表达的circRNA。较多研究表明,Exo来源的circRNA(Exo-circRNA)在TME中直接或间接参与了肿瘤细胞的增殖、转移、代谢和耐药的调控。同时,TME中的Exo-circRNA也能调控免疫细胞的活化和功能,影响肿瘤免疫治疗。然而,此前的研究主要集中于总结Exo-circRNA对肿瘤细胞调控作用的进展,探讨Exo-circRNA调控免疫细胞的研究较为少见且其中多数都侧重于总结Exo-circRNA调控CD8+T细胞功能的研究进展。本文的创新之处在于不仅对Exo-circRNA在调控肿瘤细胞方面的研究进行了综述,还深入探讨了其对TME中包括CD8+T细胞在内的多种免疫细胞的调控作用及其具体机制。此外,我们也对Exo-circRNA在肿瘤治疗以及免疫治疗方面的潜在临床应用前景进行了展望,为Exo-circRNA作为肿瘤诊断标志物和治疗靶点提供了理论依据。

关键词：外泌体环状RNA 肿瘤细胞免疫细胞肿瘤微环境

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hsa-miR-181a-5p靶基因预测及生物信息学分析

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遵义医科大学学报 2024年第2期47卷 107-120页

作者：王艳阳刘婵周雪张隆泽余丽梅何志旭遵义医科大学附属医院贵州省细胞工程重点实验室贵州遵义563099 遵义医科大学组织损伤修复与再生医学省部共建协同创新中心贵州遵义563099 遵义医科大学基础医学院免疫学教研室贵州遵义563099 贵州省儿童医院遵义医科大学附属医院小儿内科贵州遵义563099

目的对hsa-miR-181a-5p进行系统的生物信息学分析,预测hsa-miR-181a-5p的靶基因、基因功能及信号通路,并对其进行生物学功能注释。方法利用数据库对hsa-miR-181a-5p基因定位,分析其序列保守性和在人类组织器官中的表达情况;利用数据库... 详细信息

目的对hsa-miR-181a-5p进行系统的生物信息学分析,预测hsa-miR-181a-5p的靶基因、基因功能及信号通路,并对其进行生物学功能注释。方法利用数据库对hsa-miR-181a-5p基因定位,分析其序列保守性和在人类组织器官中的表达情况;利用数据库进行靶基因预测分析;并将预测交集靶基因进行GO功能分析及KEGG通路富集分析和蛋白间相互作用(PPI)网络分析;最后利用A549细胞进行hsa-miR-181a-5p转染实验,进行转录组测序同步验证生物信息学预测结果。结果发现基因定位于人类基因组chr1、chr9染色体,成熟序列在物种间具有高度保守性。3个数据库交集靶基因有483个,包含PTEN、MAPK8、AKT3等基因,其分布在胞浆等细胞组分,执行蛋白质结合等生物功能,并参与信号转导等生物学过程。靶基因富集于MAPK、PI3K-Akt、胰岛素抵抗、癌症中的miRNA等信号通路,其编码的蛋白间形成复杂网络图。实验后转录组测序结果验证了生信分析的准确性,对预测及富集结果提供了有力支撑。结论hsa-miR-181a-5p在多种生物学过程发挥重要作用,尤其是在神经系统疾病、血液免疫系统疾病以及癌症的发生发展中其将成为相关疾病发生机制和防治研究的新靶点。

关键词： hsa-miR-181a-5p 生物信息学分析信号通路蛋白质相互作用

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基于CRISPR/Cas9技术验证人T淋巴细胞中单等位突变型UNC13D基因脱颗粒功能

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遵义医科大学学报 2023年第11期46卷 1058-1066页

作者：蔡丽莎邢源黄佩陈艳徐晓军遵义医科大学附属医院小儿内科贵州遵义563099 浙江大学医学院附属儿童医院血液肿瘤内科浙江杭州310003 贵州省儿童医院小儿内科贵州遵义563099 遵义医科大学组织损伤修复与再生医学省部共建协同创新中心贵州遵义563099

目的利用慢病毒介导的CRISPR/Cas9基因编辑技术,敲除人T淋巴细胞中编码Munc13-4蛋白的UNC13D基因;并探讨突变型UNC13D基因(c.1232 G>A,p.R411Q)对人T淋巴细胞Munc13-4蛋白和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)脱颗粒功能的影响。方法设计靶向敲... 详细信息

目的利用慢病毒介导的CRISPR/Cas9基因编辑技术,敲除人T淋巴细胞中编码Munc13-4蛋白的UNC13D基因;并探讨突变型UNC13D基因(c.1232 G>A,p.R411Q)对人T淋巴细胞Munc13-4蛋白和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)脱颗粒功能的影响。方法设计靶向敲除UNC13D基因的sgRNA序列,构建CRISPR/Cas9 UNC13D-sgRNA共表达质粒,筛选出切割效率较高的sgRNA通过第二代慢病毒包装系统包装慢病毒并感染人T淋巴细胞,再将已包装好的野生型以及突变型UNC13D慢病毒感染knockout-UNC13D基因的人T淋巴细胞,以此分为野生型与突变型两组,应用流式细胞术检测两组间的Munc13-4蛋白表达、CTL的脱颗粒功能。结果成功构建出CRISPR/Cas9 UNC13D-sgRNA共表达质粒,CRISPR/Cas9系统成功下调人T淋巴细胞Munc13-4蛋白表达水平;突变型UNC13D基因(c.1232 G>A,p.R411Q)编码的蛋白能够使人CTL脱颗粒功能下降。结论CRISPR/Cas9基因编辑系统成功敲除人T淋巴细胞UNC13D基因,突变型UNC13D基因(c.1232 G>A,p.R411Q)可能为家族性噬血细胞综合征(FHL)的致病性突变位点。

关键词： CRISPR/Cas9系统家族性噬血细胞综合征基因编辑 UNC13D基因 T淋巴细胞

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省级重点实验室细胞工程技术平台产学研用开放共享的实践探索

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中华临床实验室管理电子杂志 2024年第1期12卷 1-6页

作者：何青王钰莹范振海林风琴陈辉刘燕飞刘娟何志旭余丽梅遵义医科大学附属医院贵州省细胞工程重点实验室贵州遵义563003 教育部省部共建组织损伤修复与再生医学省部共建协同创新中心贵州遵义2563003 贵州省生物治疗人才基地贵州遵义3563003 贵州省细胞工程与再生医学研究生教育创新基地贵州遵义4563003

以细胞工程及其治疗学研究为特点的省级重点实验室,在科研、人才培养和社会服务中,形成了3个具有特色和优势的研究方向,拥有科研能力强的管理和专业技术团队,建立了较为完善的先进科研平台和平台开放管理机制。在长期坚持产学研用开放... 详细信息

以细胞工程及其治疗学研究为特点的省级重点实验室,在科研、人才培养和社会服务中,形成了3个具有特色和优势的研究方向,拥有科研能力强的管理和专业技术团队,建立了较为完善的先进科研平台和平台开放管理机制。在长期坚持产学研用开放共享的过程中,实验室不断强化先进平台建设和技术水平提升;在贯彻国家有关细胞制剂研发政策与法规的同时,加强体系建设与规程的落实;通过基础学科与临床学科的融合发展,积极推进产学研用结合,通过科研基本技能培训和学术、技术交流,提升科研效益和科技产出质量,坚持“三级管理”,推进科研“学术带头人负责制”与平台技术“技术负责人负责制”,以临床需求为纽带,促进学科群发展与合作共赢,通过新兴交叉学科建设与研究方向交叉,促进前沿科学研究、临床技术孵化、产业资源存储、干细胞新药研发与高层次人才培养的协调发展。因此,面向创新型国家建设和高质量发展的新形势和新要求,本文旨在分享省级重点实验室细胞工程技术平台开放共享20年的主要管理和运行经验,并结合“产学研用”案例,提供学科交叉、协同创新的服务医疗需求的实践探索与思考。

关键词：重点实验室细胞工程再生医学开放共享

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羊膜间充质干细胞经PGE2/EP2途径调节类风湿关节炎患者T细胞免疫

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遵义医科大学学报 2024年第6期47卷 558-568页

作者：彭淋珅刘娟李林艳陈辉王宇于泓吴雨曈田梅余丽梅遵义医科大学附属医院贵州省细胞工程重点实验室贵州遵义563003 遵义医科大学附属医院风湿病科贵州遵义563003 遵义医科大学教育部组织损伤修复与再生医学协同创新中心贵州遵义563003 遵义医科大学贵州省干细胞临床应用与药物开发工程研究中心贵州遵义563003 贵州茅台医院肾内科贵州仁怀564500

目的探讨人羊膜间充质干细胞(AMSCs)调节类风湿性关节炎(RA)患者T细胞免疫的作用与涉及PGE2/EP2途径的机制。方法含RA患者自体血浆的培养基非接触共培养AMSCs与RA患者外周血来源T细胞,实验分为T细胞组、AMSCs组、共培养组和EP2组,流式... 详细信息

目的探讨人羊膜间充质干细胞(AMSCs)调节类风湿性关节炎(RA)患者T细胞免疫的作用与涉及PGE2/EP2途径的机制。方法含RA患者自体血浆的培养基非接触共培养AMSCs与RA患者外周血来源T细胞,实验分为T细胞组、AMSCs组、共培养组和EP2组,流式细胞术检测T细胞亚群和炎症因子,ELISA法检测PGE2和IL-6,Western blot检测PI3K、Akt及其磷酸化蛋白水平。结果AMSCs降低RA患者T细胞增殖数量和Th17细胞比例,增高Treg细胞比例和Treg/Th17比值,减少共培养上清液IL-17含量,这些效应可被40 nmol/L的EP2受体拮抗剂AH6809所阻断。与AMSC组相比,共培养组细胞培养上清液中IL-1β、IL-6和IL-8的含量明显降低,EP2受体拮抗剂组与共培养组比较无明显差异。AMSCs增加T细胞p-PI3K蛋白水平,降低p-AKT蛋白水平,EP2受体拮抗剂只逆转AMSCs对p-AKT蛋白的下调。结论AMSCs抑制RA患者T细胞增殖、上调Treg/Th17和下调IL-17分泌的作用机制涉及激活PGE2/EP2途径。

关键词：羊膜间充质干细胞类风湿性关节炎 T细胞炎症因子前列腺素E2受体

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基于β-氧化途径探讨Slc22a21调控NOA小鼠精子发生的作用机制研究

基于β-氧化途径探讨Slc22a21调控NOA小鼠精子发生的作用机制研究

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第十三届基础与临床生殖药理毒理学研讨会

作者：刘璐吴威铮刘娟吴雨瞳钟敏徐尚福刘禅范振海余丽梅遵义医科大学贵州省生物制造实验室遵义医科大学附属医院贵州省细胞工程重点实验室贵州茅台医院普外科遵义医科大学省部共建组织损伤修复与再生医学教育部协同创新中心遵义医科大学附属医院贵州省细胞工程中心遵义医科大学附属医院妇产科

目的探讨人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)来源外泌体(Exo)所包含的mi R-29a-3p在hUC-MSCs治疗卵巢功能不全中的作用。方法超滤+超离分离hUC-MSCs来源Exo,Western blot和粒径检测鉴定Exo,慢病毒转染过表达或敲降miR-29a-3p,ZP3蛋白+弗氏佐... 详细信息

目的探讨人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)来源外泌体(Exo)所包含的mi R-29a-3p在hUC-MSCs治疗卵巢功能不全中的作用。方法超滤+超离分离hUC-MSCs来源Exo,Western blot和粒径检测鉴定Exo,慢病毒转染过表达或敲降miR-29a-3p,ZP3蛋白+弗氏佐剂诱导自身免疫性POI,称重法计算卵巢指数,ELISA法检测激素水平,HE染色行阴道涂片和卵巢组织病理学检查。结果与模型组比较,hUC-MSCs组、Exo组和过表达miR-29a-3p hUMSCs来源Exo组(OE-miR-29a-3p/HU-Exo组)不但恢复了POI小鼠动情周期,还显著提高了卵巢指数和血清雌激素E2水平,明显降低血清FSH水平(P<0.05或P<0.01),敲降miR-29a-3p hUMSCs来源Exo组(sh-miR-29a-3p/HU-Exo组)与模型组上述指标无明显差异(P>0.05)。组织病理学检查可见,hUC-MSCs组、Exo组和OE-miR-29a-3p/HU-Exo组卵巢组织病理学变化明显改善,各级发育卵泡数量明显较模型组和sh-miR-29a-3p/HU-Exo组丰富(P<0.05或P<0.01),且三组之间比较未见明显差异(P>0.05)。结论 Exo来源-miR-29a-3p在hUC-MSCs治疗自身免疫性POI恢复卵巢功能中发挥了重要作用。

关键词：卵巢指数免疫性 POI 作用机制研究小鼠精子 NOA Slc22a21 β-氧化

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肠道菌群对溃疡性结肠炎患者Th17/Treg平衡的调节作用

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山东医药 2024年第19期64卷 108-111页

作者：张志霞余丽梅遵义医科大学附属医院贵州省细胞工程重点实验室贵州省干细胞临床应用与新药研发工程研究中心贵州省生物治疗人才基地遵义市干细胞与再生医学工程研究中心贵州遵义563003 遵义医科大学教育部省部共建组织损伤修复与再生医学协同创新中心

溃疡性结肠炎(UC)发病机制涉及遗传、免疫和环境等因素。辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)在UC发展过程中起相互拮抗的作用,二者之间的免疫失衡促进了UC的进展。肠道菌群失调是免疫失调,肠道微生物群作为影响Th17/Treg平衡的重... 详细信息

溃疡性结肠炎(UC)发病机制涉及遗传、免疫和环境等因素。辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)在UC发展过程中起相互拮抗的作用,二者之间的免疫失衡促进了UC的进展。肠道菌群失调是免疫失调,肠道微生物群作为影响Th17/Treg平衡的重要因素受到研究关注,UC患者存在肠道菌群失衡、微生物代谢物的改变、免疫失衡等机体稳态破坏。因此,通过调整肠道微生物群来纠正Th17/Treg失衡可能是治疗UC的新方法。

关键词：溃疡性结肠炎肠道菌群辅助性T细胞17/调节性T细胞

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MSCs治疗早发性卵巢功能不全的免疫调节作用及PGE2/EP潜在机制

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遵义医科大学学报 2023年第8期46卷 731-737页

作者：陈维玉余丽梅黄荷凤遵义医科大学附属医院妇产科贵州遵义563003 遵义医科大学附属医院贵州省细胞工程重点实验室贵州遵义563003 遵义医科大学教育部组织损伤修复与再生医学协同创新中心贵州遵义563003 遵义医科大学附属医院遵义市精准医学检测与出生缺陷防控工程研究中心贵州遵义563003 复旦大学附属妇产科医院、复旦大学生殖与发育研究院上海200001 中国医学科学院胚胎源性疾病研究创新单元上海200001 浙江大学医学院附属妇产科医院生殖遗传教育部重点实验室生殖内分泌科浙江杭州310006

早发性卵巢功能不全(POI)严重影响女性的生殖健康。其发病机制与药物、免疫和遗传等多因素相关,而T细胞免疫失衡是自身免疫性POI和炎症性卵巢损伤的重要致病机制,目前采用的雌激素替代治疗虽能缓解POI部分临床症状,但缺乏有效修复卵巢... 详细信息

早发性卵巢功能不全(POI)严重影响女性的生殖健康。其发病机制与药物、免疫和遗传等多因素相关,而T细胞免疫失衡是自身免疫性POI和炎症性卵巢损伤的重要致病机制,目前采用的雌激素替代治疗虽能缓解POI部分临床症状,但缺乏有效修复卵巢功能的措施。近年的研究表明,间充质干细胞(MSCs)移植已成为改善POI临床症状、恢复卵巢组织结构与功能及垂体-性腺轴激素平衡的新方法,颇具临床应用前景。前列腺素E2(PGE2)通过与其受体(receptor, EP)结合,不但参与多种免疫细胞和炎症反应调节,还可影响血流量、分泌、生殖细胞和MSCs的功能和发育。PGE2可能与其他炎症因子相似,是免疫授权调节MSCs功能活性的关键分子。本文综述了MSCs治疗POI的作用和机制,重点涉及T细胞免疫与PGE2/EP调节机制的研究进展。

关键词：早发性卵巢功能不全 T细胞免疫前列腺素E2 间充质干细胞免疫授权

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