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急性肝片形吸虫病1例

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中国血吸虫病防治杂志(中英文) 2025年第1期37卷 104-106页

作者：汪平帮黄竹英王宏刘年猛张珂瓅肖怀忠湖南省浏阳市人民医院湖南浏阳410300 湖南省长沙市中医医院(长沙市第八医院) 湖南长沙410100 湖南师范大学医学院寄生虫学教研室

肝片形吸虫病是一种危害严重的人兽共患寄生虫病,肝片形吸虫主要感染反刍动物,偶可感染人类。本文报道了1例以“腹胀伴皮肤、巩膜黄染1 d”为主诉的急性肝片形吸虫病患者的诊治过程,旨在为该病临床诊疗提供参考,避免误诊误治。

关键词：肝片形吸虫病黄疸胆管炎浏阳市

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华支睾吸虫一氧化氮合酶相互作用蛋白的组织定位及免疫学功能的初步研究

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热带医学杂志 2025年第1期25卷 19-23,I0003页

作者：边萌余新炳许青霞郑州大学附属肿瘤医院(河南省肿瘤医院)检验科河南郑州450008 中山大学中山医学院寄生虫学教研室广东广州510080 中山大学热带病防治研究教育部重点实验室广东广州510080

目的诱导表达华支睾吸虫一氧化氮合酶相互作用蛋白(CsNOSIP)的重组质粒并进行组织定位研究,初步了解重组产物免疫小鼠后细胞因子的变化及诱发宿主免疫应答类型。方法应用生物信息学分析软件,分析CsNOSIP的序列特征;将重组质粒pET-30a(+)... 详细信息

目的诱导表达华支睾吸虫一氧化氮合酶相互作用蛋白(CsNOSIP)的重组质粒并进行组织定位研究,初步了解重组产物免疫小鼠后细胞因子的变化及诱发宿主免疫应答类型。方法应用生物信息学分析软件,分析CsNOSIP的序列特征;将重组质粒pET-30a(+)-CsNOSIP诱导表达并用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,用纯化的CsNOSIP蛋白免疫BABL/c小鼠获得免疫血清;应用免疫荧光方法观察CsNOSIP在华支睾吸虫成虫的定位;应用ELISA检测实验组(重组蛋白皮下免疫小鼠)和对照组(磷酸盐缓冲液免疫小鼠)细胞因子水平的变化。应用qPCR检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导性一氧化氮合酶(iNOS)转录水平的变化。结果CsNOSIP编码288个氨基酸,SecP分值为0.955097,无信号肽;理论分子量为35000;免疫组化结果显示,该蛋白定位于虫体的肠支和虫卵。与对照组相比,rCsNOSIP免疫组用5μg/mL ConA刺激后白细胞介素4、白细胞介素6水平均升高,差异均有统计学意义(t=12.16、8.91,P均<0.05);与对照组相比,eNOS转录水平降低,iNOS转录水平增高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论CsNOSIP可在原核表达系统中呈现高效的可溶性表达,是华支睾吸虫分泌排泄抗原之一,具有良好的免疫学活性。

关键词：华支睾吸虫一氧化氮合酶相互作用蛋白组织定位免疫反应

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旋毛虫DNA疫苗在中国仓鼠卵巢细胞中的表达(英文)

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2004年第5期22卷 266-270,F003页

作者：崔晶王中全韩化敏卫海燕张红卫李雍龙郑州大学医学院寄生虫学教研室郑州450052

目的　观察编码旋毛虫相对分子质量 (Mr) 3 10 0 0抗原的DNA疫苗 (重组真核表达质粒pcDNA3 TspE1)在中国仓鼠卵巢 (CHO)细胞中的体外表达 ,并分析其表达产物的抗原性。　方法　通过用阳离子脂质体Lipofectamine 2 0 0 0将重组质粒pcDNA... 详细信息

目的　观察编码旋毛虫相对分子质量 (Mr) 3 10 0 0抗原的DNA疫苗 (重组真核表达质粒pcDNA3 TspE1)在中国仓鼠卵巢 (CHO)细胞中的体外表达 ,并分析其表达产物的抗原性。　方法　通过用阳离子脂质体Lipofectamine 2 0 0 0将重组质粒pcDNA3 TspE1转染CHO细胞 ,G418筛选阳性克隆 ,用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)、间接荧光抗体试验 (I FAT)、十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和蛋白质印迹法 (Westernblotting)对表达产物进行鉴定。　结果　RT PCR结果显示 ,pcDNA3 TspE1转染的CHO细胞在 876bp处有一条带 ,而用空质粒pcDNA3转染的CHO细胞未出现条带 ,表明pcDNA3 TspE1转染细胞中有TspE1基因转录。IFAT结果显示 ,pcDNA3 TspE1转染的CHO细胞与重组融合蛋白免疫小鼠血清反应呈现亮绿色荧光 ,而pcDNA3转染的CHO细胞及未转染细胞呈现橘黄色。Westernblotting显示在pcDNA3 TspE1转染的CHO细胞培养液中存在有一Mr约 3 10 0 0的蛋白带 ,且该条带能被重组融合蛋白免疫小鼠血清、旋毛虫肌幼虫可溶性抗原免疫兔血清、感染旋毛虫的小鼠及旋毛虫病患者血清识别。　结论　重组质粒pcDNA3 TspE1可转染CHO细胞 ,旋毛虫TspE1基因可在转染的CHO细胞中表达 ,表达蛋白能分泌到细胞培养上清中且具有旋毛虫?

关键词： pcDNA3 转染 CHO细胞旋毛虫表达血清 DNA疫苗 E1基因中国仓鼠卵巢细胞重组融合蛋白

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旋毛虫在小鼠先天性传播的初步研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2005年第2期23卷 73-77页

作者：王中全韩化敏崔晶郑州大学医学院寄生虫学教研室郑州450052

目的研究旋毛虫在小鼠的先天性传播并观察母鼠抗旋毛虫抗体对攻击感染的保护作用。方法将昆明小鼠分为受孕后感染组和感染后受孕组,子鼠出生后1d内剖杀,检查旋毛虫幼虫;将正常母鼠所产子鼠由感染旋毛虫的母鼠喂养,21d后宰杀,检查旋毛虫... 详细信息

目的研究旋毛虫在小鼠的先天性传播并观察母鼠抗旋毛虫抗体对攻击感染的保护作用。方法将昆明小鼠分为受孕后感染组和感染后受孕组,子鼠出生后1d内剖杀,检查旋毛虫幼虫;将正常母鼠所产子鼠由感染旋毛虫的母鼠喂养,21d后宰杀,检查旋毛虫幼虫。用间接ELISA检测感染母鼠所产子鼠出生后不同时间的血清抗旋毛虫抗体,观察母鼠抗旋毛虫抗体对攻击感染的免疫保护。结果受孕后7d感染旋毛虫的母鼠所产的6只子鼠中有2只感染旋毛虫;感染旋毛虫后8d和22d受孕雌鼠所产子鼠的感染率分别为20%(2/10)和25%(2/8),从子鼠检获的旋毛虫均是未成囊的幼虫。交叉哺乳实验表明正常母鼠所产的30只子鼠未见旋毛虫感染。感染母鼠所产27只子鼠出生后1、7、24及40d的血清抗体阳性率分别为100%、100%、77.8%及14.8%,子鼠出生后40d攻击感染的减虫率为62.0%;感染母鼠所产子鼠血清被动转移小鼠的减虫率55.7%,与对照组比较差异有显著性(P<0.01)。结论旋毛虫在小鼠可经胎盘传播,母鼠的抗旋毛虫抗体对子鼠抗攻击感染可能具有部分保护作用。

关键词：先天性传播抗旋毛虫抗体步研究间接ELISA检测旋毛虫幼虫攻击感染血清被动转移部分保护作用旋毛虫感染抗体阳性率经胎盘传播出生后昆明小鼠不同时间免疫保护减虫率母鼠子鼠感染后感染率显著性对照组

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旋毛虫Ts21重组蛋白的免疫诊断价值及免疫保护作用的研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2009年第1期27卷 17-21页

作者：王睿王中全崔晶郑州大学医学院寄生虫学教研室郑州450052

目的探讨旋毛虫Ts21重组蛋白的免疫诊断价值及免疫保护作用。方法应用旋毛虫Ts21重组蛋白ELISA(Ts21-ELISA)与肌幼虫ES抗原ELISA(ES-ELISA)对旋毛虫病与其他寄生虫病患者血清及5种旋毛虫(T1、T2、T3、T4和T7)感染小鼠血清进行检测,并观... 详细信息

目的探讨旋毛虫Ts21重组蛋白的免疫诊断价值及免疫保护作用。方法应用旋毛虫Ts21重组蛋白ELISA(Ts21-ELISA)与肌幼虫ES抗原ELISA(ES-ELISA)对旋毛虫病与其他寄生虫病患者血清及5种旋毛虫(T1、T2、T3、T4和T7)感染小鼠血清进行检测,并观察不同剂量旋毛虫感染小鼠后不同时间的血清抗体水平。将Ts21重组蛋白皮下注射免疫小鼠(20μg/只,免疫3次,每次间隔10d),末次免疫后10d,每只小鼠用300条旋毛虫肌幼虫经口攻击感染,3.5d和42d后剖杀,观察肠道成虫与肌幼虫数并计算减虫率。结果Ts21-ELISA检测旋毛虫病、并殖吸虫病、囊尾蚴病及棘球蚴病患者血清的抗体阳性率分别为94.7%(18/19)、15.8%(3/19)、9.1%(1/11)和7.7%(1/13),与血吸虫病、华支睾吸虫病患者血清及健康人血清无交叉反应;Ts21重组蛋白与ES抗原ELISA检测旋毛虫病患者血清抗体的敏感性与特异性差异均无统计学意义(χ2=0,P>0.05;χ2=0.358,P>0.05)。Ts21重组蛋白与ES抗原检测T1感染小鼠血清的敏感性差异无统计学意义(χ2=0.104,P>0.05),与T2、T3、T4、T7感染小鼠血清的交叉反应率明显低于ES抗原(χ2=17.069,P<0.05)。小鼠感染300条旋毛虫后4周,应用Ts21-ELISA检测的血清抗体阳性率为100%(10/10);小鼠感染5条旋毛虫后6周,血清抗体阳性率为100%(10/10)。Ts21重组蛋白免疫小鼠用旋毛虫攻击感染后3.5d和42d,肠道成虫与肌幼虫减虫率分别为42.71%和49.8%。结论Ts21重组蛋白可用于旋毛虫病的血清学检测,但不能忽视与并殖吸虫病、囊尾蚴病及棘球蚴病患者血清的交叉反应。

关键词：旋毛虫 Ts21重组蛋白 ELISA 血清学诊断免疫保护小鼠

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食用醋或酱油对旋毛虫肌幼虫感染性和生殖力的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第1期28卷 34-37页

作者：张玺王中全王书伟李灵招王明明姜鹏崔晶郑州大学医学院寄生虫学教研室郑州450052

目的观察食用醋或酱油对旋毛虫肌幼虫感染性和生殖力的影响。方法140只雄性昆明小鼠随机均分为14组,分别喂饲经食用醋(总酸浓度4.5%,pH3.05)、食用酱油(含19.3%NaCl)和生理盐水浸泡不同时间的含有300条旋毛虫肌幼虫的小鼠肌肉(重约0.02... 详细信息

目的观察食用醋或酱油对旋毛虫肌幼虫感染性和生殖力的影响。方法140只雄性昆明小鼠随机均分为14组,分别喂饲经食用醋(总酸浓度4.5%,pH3.05)、食用酱油(含19.3%NaCl)和生理盐水浸泡不同时间的含有300条旋毛虫肌幼虫的小鼠肌肉(重约0.02g),于喂饲后第7天和第42天每组各剖杀5只小鼠,分别观察肠道成虫、肌幼虫的数量和生殖力指数(RCI)。结果小鼠喂饲经食用醋处理3、6、12和24h的旋毛虫肌幼虫后,其肠道成虫数分别为77、41、0和0条,RCI分别为52.48、18.45、0和0,均显著低于生理盐水对照组肠道成虫数(分别为121、121、116和101条)和RCI(分别为159.10、124.56、73.63和42.17)(P<0.05)。小鼠喂饲经食用酱油处理12、24、36和48h的旋毛虫肌幼虫后,肠道成虫数(分别为79、39、3和0条)和RCI(分别为48.75、20.80、1.87和0)亦均明显低于对照组(116、101、95和89条,73.63、42.17、21.53和4.13)(P<0.05)。感染小鼠的肠道成虫数和RCI均随醋或酱油处理时间的延长而降低(P<0.05)。结论含旋毛虫肌幼虫的肌肉经食用醋或酱油处理后,肌幼虫的感染力和生殖力均明显下降。

关键词：旋毛虫肌幼虫感染性生殖力食用醋食用酱油

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旋毛虫对昆明小鼠最小感染剂量的实验研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2008年第1期26卷 73-74页

作者：崔晶王洁王中全牛洪涛郑州大学医学院寄生虫学教研室郑州450052

为观察旋毛虫感染昆明小鼠的最小剂量,将70只雄性昆明小鼠随机均分7组,每只鼠分别经口感染旋毛虫肌幼虫30、25、20、15、10、5及3条,感染后6周剖杀。取完整膈肌,压片、镜检、计数虫荷。小鼠全身肌肉经人工胃液消化后计数肌肉虫荷。结果... 详细信息

为观察旋毛虫感染昆明小鼠的最小剂量,将70只雄性昆明小鼠随机均分7组,每只鼠分别经口感染旋毛虫肌幼虫30、25、20、15、10、5及3条,感染后6周剖杀。取完整膈肌,压片、镜检、计数虫荷。小鼠全身肌肉经人工胃液消化后计数肌肉虫荷。结果,压片镜检法和人工消化法的幼虫检出率,感染30、25、20、15及10条旋毛虫肌幼虫的小鼠均为100%(10/10);感染5条旋毛虫肌幼虫的小鼠,两种方法幼虫检出率分别为70%(7/10)和100%(10/10);感染3条旋毛虫肌幼虫的小鼠,两种方法均未检出幼虫。感染旋毛虫的小鼠膈肌和肌肉虫荷与感染剂量均呈正相关(r=0.759,P<0.05;r=0.638,P<0.05)。旋毛虫经口成功感染昆明小鼠的最小剂量为5条幼虫。

关键词：旋毛虫感染剂量昆明小鼠

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一些寄生虫与寄生虫病专业名词用法的商榷

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2006年第2期24卷 133-135页

作者：王中全崔晶郑州大学医学院寄生虫学教研室郑州450052

根据国际动物命名法则和动物寄生虫病的标准命名法,结合寄生虫学的最新研究成果,本文对一些寄生虫和寄生虫病(如旋毛虫与旋毛虫病、丝虫与丝虫病、棘球绦虫与棘球蚴病等)专业名词的用法进行了讨论。

关键词：寄生虫寄生虫病术语命名法

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免疫血清对旋毛虫感染性幼虫侵入肠上皮细胞及其发育的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第5期28卷 348-352页

作者：王书伟崔晶王中全王莉郑州大学医学院寄生虫学教研室郑州450052

目的观察旋毛虫感染性幼虫排泄分泌(ES)抗原与旋毛虫感染性幼虫表面抗原免疫鼠血清对幼虫侵入HCT-8肠上皮细胞及其发育的影响。方法将旋毛虫感染性幼虫接种至半固体培养基(RPMI1640培养基+1.75%琼脂糖)+HCT-8细胞中,37℃5%CO2培养12、24... 详细信息

目的观察旋毛虫感染性幼虫排泄分泌(ES)抗原与旋毛虫感染性幼虫表面抗原免疫鼠血清对幼虫侵入HCT-8肠上皮细胞及其发育的影响。方法将旋毛虫感染性幼虫接种至半固体培养基(RPMI1640培养基+1.75%琼脂糖)+HCT-8细胞中,37℃5%CO2培养12、24、36、72和96h后镜下观察幼虫发育情况;将幼虫接种至含免疫血清的半固体培养基+HCT-8细胞中,培养15min后镜下观察幼虫形态及其对肠上皮细胞的侵入情况,36h后应用间接荧光抗体试验(IFAT)观察幼虫蜕皮,并计数Ⅰ期和Ⅱ～Ⅳ期幼虫。结果幼虫在半固体培养基培养12h可侵入HCT-8细胞单层,36～72h幼虫可蜕皮1～2次,培养96h可见早期成虫。在含ES抗原免疫血清与感染鼠血清条件下培养15min,幼虫头端可见免疫复合物形成的帽样结构,但在含表面抗原免疫血清、正常鼠血清或不含免疫血清条件下培养的幼虫头端则无帽样结构,头端带有帽样结构的幼虫不能侵入HCT-8细胞单层。在含ES抗原与表面抗原免疫血清条件下发育至Ⅱ～Ⅳ期幼虫的百分比(2.25%、2.2%)均明显低于含正常鼠血清条件下培养的幼虫(24.7%)(P<0.05)。结论旋毛虫ES抗原免疫血清可阻止幼虫对肠上皮细胞的侵入,ES抗原及表面抗原免疫血清均可阻止部分幼虫的发育(蜕皮)。

关键词：旋毛虫排泄分泌抗原表面抗原免疫血清肠上皮细胞

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旋毛虫抗原基因Ts21的原核表达与重组蛋白鉴定

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2007年第6期25卷 442-446页

作者：王中全逯莉崔晶王来王睿郑州大学医学院寄生虫学教研室郑州450052

目的原核表达旋毛虫相对分子质量(Mr)21000抗原基因(Ts21)并对重组蛋白进行纯化和抗原性鉴定。方法将旋毛虫抗原基因Ts21亚克隆入原核表达载体pMAL-c2X,构建重组表达质粒pMAL-c2X-Ts21,经酶切鉴定正确后转化大肠埃希菌TB1,以异丙基-β-... 详细信息

目的原核表达旋毛虫相对分子质量(Mr)21000抗原基因(Ts21)并对重组蛋白进行纯化和抗原性鉴定。方法将旋毛虫抗原基因Ts21亚克隆入原核表达载体pMAL-c2X,构建重组表达质粒pMAL-c2X-Ts21,经酶切鉴定正确后转化大肠埃希菌TB1,以异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。亲和层析法纯化表达产物。应用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)分析鉴定重组蛋白的抗原性。将重组蛋白免疫小鼠制备免疫血清,ELISA检测抗体滴度,免疫荧光检测(IFA)确定Ts21蛋白在肌幼虫体内的分布。结果SDS-PAGE结果显示,表达产物为Mr63500的重组融合蛋白,IPTG诱导4h后表达量最大,薄层凝胶光密度扫描显示表达的融合蛋白占菌体蛋白总量的18.2%。Western blotting结果显示该重组蛋白可被旋毛虫、纳氏旋毛虫感染小鼠血清及旋毛虫病患者血清识别,但不能被乡土旋毛虫、布氏旋毛虫及伪旋毛虫感染小鼠血清识别;与钩虫病、囊尾蚴病、日本血吸虫病患者血清无交叉反应,但与并殖吸虫病、华支睾吸虫病及棘球蚴病患者血清有交叉反应。重组蛋白免疫小鼠可产生高滴度的血清抗体,IFA显示Ts21蛋白主要分布于肌幼虫体壁。结论成功制备了旋毛虫Ts21基因的重组蛋白,该蛋白具有较好的抗原性。

关键词：旋毛虫原核表达重组蛋白抗原性鉴定

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