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中国人兽共患病学报 2025年

作者：董梦娟常宇骁宁唤唤路延之康健徐铭泽代婷李嘉玲郝乐冉张琳娜柏银兰宁夏医科大学基础医学院生理学和神经生物学系空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室空军军医大学军事医学创新中心延安大学生命科学学院

目的研究c-di-AMP为佐剂的重组卡介苗（rBCG）调节小鼠附睾白色脂肪（eWAT）代谢及免疫的作用及机制。方法SPF级雄性C57BL/6小鼠经静脉免疫卡介苗（BCG）和重组卡介苗（rBCG），监测小鼠体重变化。分离并称重小鼠eWAT重量，血球仪计血... 详细信息

目的研究c-di-AMP为佐剂的重组卡介苗（rBCG）调节小鼠附睾白色脂肪（eWAT）代谢及免疫的作用及机制。方法SPF级雄性C57BL/6小鼠经静脉免疫卡介苗（BCG）和重组卡介苗（rBCG），监测小鼠体重变化。分离并称重小鼠eWAT重量，血球仪计血管基质成分（SVFs）数量。制备小鼠脂肪组织切片，HE染色后显微镜下观察和比较各组小鼠eWAT脂肪细胞大小、数量和形态以及冠状结构（CLS）形成等变化。qRT-PCR检测各组小鼠脂肪代谢相关因子、细胞因子和衰老相关基因的转录水平。结果BCG和rBCG免疫小鼠体重随时间逐渐增加，rBCG免疫诱导eWAT比重增加，SVFs数量降低。HE染色结果显示，BCG免疫促进eWAT脂肪细胞增生和rBCG免疫促进脂肪细胞肥大，BCG和rBCG免疫均可诱导eWAT中CLS形成。qRT-PCR检测结果显示，rBCG免疫可抑制eWAT脂肪分解和能量消耗相关基因表达。BCG免疫对细胞因子转录作用影响不大，而rBCG显著诱导IFN-γ和IL-1Ra，抑制IL-15和IL-2的转录，但不诱导衰老相关基因的表达。结论 rBCG免疫可诱导eWAT脂肪细胞肥大，其机制与抑制eWAT脂肪分解及调节细胞因子表达有关。

关键词：卡介苗重组卡介苗环二腺苷酸白色脂肪脂肪代谢细胞因子

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结核分枝杆菌c-di-AMP磷酸二酯酶的重组腺病毒的构建及其诱导的体液免疫应答

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中国人兽共患病学报 2025年

作者：胡家豪宁唤唤董梦娟路延之代婷张从玥徐子晴王姝予周正言柏银兰空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室空军军医大学基础医学院学员队空军军医大学军事医学创新中心宁夏医科大学基础医学院生理学和神经生物学系延安大学生命科学学院

目的构建表达结核分枝杆菌（Mtb）c-di-AMP磷酸二酯酶CnpB的重组腺病毒（rAd）并检测其诱导的体液免疫应答。方法经密码子优化的MtbCnpB编码基因克隆入质粒pcADV，获得的重组质粒pcADV-CnpB转染HEK293T细胞，并用Westernblot鉴定表达... 详细信息

目的构建表达结核分枝杆菌（Mtb）c-di-AMP磷酸二酯酶CnpB的重组腺病毒（rAd）并检测其诱导的体液免疫应答。方法经密码子优化的MtbCnpB编码基因克隆入质粒pcADV，获得的重组质粒pcADV-CnpB转染HEK293T细胞，并用Westernblot鉴定表达。重组pcADV-CnpB与骨架质粒共转染HEK293T细胞包装获得重组腺病毒rAd-CnpB，以HEK293T细胞扩增rAd-CnpB，Westernblot和免疫荧光检测rAd-CnpB表达目的蛋白。以rAd-CnpB滴鼻免疫小鼠，收集小鼠血清与肺泡灌洗液（BALF），ELISA检测抗原特异性抗体水平。结果酶切和测序鉴定表明重组质粒pcADV-CnpB构建成功，该质粒能够在真核细胞中表达。在HEK293T细胞内包装并获得rAd-CnpB，大量扩增并纯化获得滴度为5.53×1010PFU/mL的rAd-CnpB。rAd-CnpB可在HEK293T细胞中表达目的蛋白CnpB。rAd-CnpB滴鼻免疫小鼠，可诱导BALF中CnpB特异性IgG与分泌型IgA水平的增加，同时诱导血清中产生高水平的CnpB特异性IgG。结论成功构建表达Mtb c-di-AMP磷酸二酯酶CnpB的重组腺病毒rAd-CnpB，并且rAd-CnpB经黏膜免疫可诱导抗原特异性体液免疫与黏膜免疫应答，可用于结核病新疫苗策略的研究。

关键词：结核分枝杆菌重组腺病毒 c-di-AMP 磷酸二酯酶黏膜免疫

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结核分枝杆菌磷酸二酯酶重组腺病毒黏膜免疫诱导的免疫应答特点

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细胞与分子免疫学杂志 2025年第1期41卷 1-8页

作者：代婷路延之赵瑞华宁唤唤康健郝乐冉李嘉玲常宇骁柏银兰延安大学生命科学学院陕西延安716000 空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室陕西西安710032 空军军医大学军事医学创新中心陕西西安710032 宁夏医科大学基础医学院生理学和神经生物学系宁夏银川750001

目的结核分枝杆菌(Mtb)耐药菌株的流行加剧了结核病(TB)的全球负担,凸显了对新的TB治疗策略的需求。方法表达环二腺苷酸(c-di-AMP)分解酶磷酸二酯酶B(CnpB)的重组腺病毒疫苗(rAd-CnpB)经黏膜免疫正常小鼠,单独或联合药物免疫治疗Mtb呼... 详细信息

目的结核分枝杆菌(Mtb)耐药菌株的流行加剧了结核病(TB)的全球负担,凸显了对新的TB治疗策略的需求。方法表达环二腺苷酸(c-di-AMP)分解酶磷酸二酯酶B(CnpB)的重组腺病毒疫苗(rAd-CnpB)经黏膜免疫正常小鼠,单独或联合药物免疫治疗Mtb呼吸道感染小鼠。ELISA检测小鼠血清及肺泡灌洗液(BALF)抗体水平,实时定量PCR检测小鼠肺组织中细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)转录水平,流式细胞术检测肺、脾CD4^(+)、CD8^(+)T细胞亚群细胞比例,ELISA检测脾细胞抗原刺激后的细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-10、炎症因子IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)分泌水平,平板计数法计数Mtb感染小鼠肺、脾的荷菌数。结果rAd-CnpB滴鼻免疫可诱导小鼠血清高滴度的IgG,以及BALF中IgG和IgA产生,肺、脾T淋巴细胞亚群改变。rAd-CnpB单独或联合药物治疗Mtb感染小鼠可诱导血清IgG水平、BALF中IgA和IgG水平显著增高,rAd-CnpB免疫促进Mtb感染小鼠的脾细胞CnpB抗原特异性的细胞因子和炎症因子分泌。rAd-CnpB单独或联合药物免疫治疗并不显著影响Mtb呼吸道感染小鼠肺、脾荷菌数。结论rAd-CnpB经黏膜免疫可诱导小鼠显著的黏膜、体液免疫反应,并显著增强Mtb感染小鼠中CnpB特异性细胞免疫应答。

关键词：结核分枝杆菌(Mtb) 环核苷酸磷酸二酯酶B(CnpB) 重组腺病毒免疫治疗

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右美托咪啶对胸腹腔镜下食管癌根治术患者围手术期应激和术后疼痛的影响

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中华医学杂志 2018年第46期98卷 3778-3783页

作者：李长生刘素芳周一卢锡华郑州大学附属肿瘤医院麻醉科 450003 郑州大学基础医学院生理学和神经生物学教研室

目的探讨右美托咪啶对胸腹腔镜下食管癌根治术患者围手术期应激和术后疼痛的影响.方法本研究为前瞻性研究.选取2016年1月至2017年10月在郑州大学附属肿瘤医院行胸腹腔镜下食管癌根治术患者100例,随机数字表法分为对照组(C组)、右美托... 详细信息

目的探讨右美托咪啶对胸腹腔镜下食管癌根治术患者围手术期应激和术后疼痛的影响.方法本研究为前瞻性研究.选取2016年1月至2017年10月在郑州大学附属肿瘤医院行胸腹腔镜下食管癌根治术患者100例,随机数字表法分为对照组(C组)、右美托咪啶组(D组).两组患者均进行静脉靶控输注丙泊酚和瑞芬太尼、静脉推注苯磺酸阿曲库铵进行麻醉诱导和维持,脑电双频指数(BIS)监测麻醉深度,术中维持BIS值45~60,术毕前30 min单次静脉注射舒芬太尼(0.3μg/kg)后接静脉镇痛泵进行术后患者自控镇痛(PCA).D组患者诱导前20 min静脉滴注右美托咪啶(1μg/kg)、术中静脉泵注右美托咪啶(0.2μg·kg-1·h-1),PCA舒芬太尼0.025μg·kg-1·h-1+右美托咪啶0.1μg·kg-1·h-1,单次按压给予舒芬太尼0.025μg/kg+右美托咪啶0.1μg/kg.C组PCA舒芬太尼0.04μg·kg-1·h-1,单次按压给予舒芬太尼0.04μg/kg.记录患者手术时间、液体出入量、术后PCA按压次数,并于术前1 d(T0)、麻醉诱导前即刻(T1)、麻醉苏醒后1 h(T2)、术后24 h(T3)、术后3 d(T4)、术后7 d(T5)、术后1个月(T6)、术后3个月(T7)、术后6个月(T8)采集静脉血检测血清去甲肾上腺素、肾上腺素、皮质酮水平;并于T2、T3、T4、T5、T6、T7、T8时间点对患者进行疼痛模拟评分.结果 2组患者年龄、性别、体质指数(BMI)、美国麻醉医师协会(ASA)分级差异均无统计学意义(均P>0.05).2组患者手术时间、术中补液量、术中出血量差异均无统计学意义(均P>0.05).D组术后24 h内舒芬太尼用量为(35.86±8.65)μg,明显少于C组的(59.53±15.26)μg,差异有统计学意义(t=7.061,P<0.05).D组术后24 h内PCA按压次数为(2.15±1.38)次,明显少于C组[(5.85±2.16)次,t=4.971,P<0.05].D组血清去甲肾上腺素水平在T1、T2、T3、T4、T5时间点均明显低于C组(t=13.276、16.027、14.319、12.771、12.296,均P<0.05);其余时间点两组差异均无统计学意义(均P>0.05).D组血清肾上腺素水平在T2、T3、T4、T5时间点均明显低于C组(t=6.153、8.774、9.127、8.409,均P<0.05);其余时间点两组差异均无统计学意义(均P>0.05).D组血清皮质酮水平在T2、T3、T4、T5时间点明显低于C组(t=16.364、15.306、12.153、12.592,均P<0.05);其余时间点两组差异均无统计学意义(均P>0.05).2组术后疼痛VAS评分在T2、T3、T4、T5时间点差异均无统计学意义(均P>0.05);D组在T6、T7、T8时间点疼痛患者(VAS评分≥4分)分别为10例(20%)、4例(8%)、3例(6%),均明显低于C组20例(40%)、12例(24%)、10例(20%),差异均有统计学意义(χ2=4.762、4.762、4.332,均P<0.05).结论围手术期应用右美托咪啶可以有效减轻胸外科胸腹腔镜联合食管癌根治术患者围手术期应激水平,减少围手术期阿片类药物应用,并减少患者术后慢性疼痛的发生率.

关键词：围手术期右美托咪啶食管肿瘤疼痛,手术后

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人脐血单个核细胞移植对大鼠脊髓损伤的修复作用

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郑州大学学报(医学版) 2009年第2期44卷 309-312页

作者：王亚莉许燕韩雪飞郭思鄢文海邢莹新乡医学院生理学与神经生物学教研室郑州大学医学院干细胞研究中心郑州大学基础医学院病理生理学教研室

目的:观察人脐血单个核细胞移植入大鼠脊髓损伤部位后的分化、迁移情况和损伤后功能的修复。方法:建立SD大鼠T10脊髓节段损伤模型,随机分为移植组和对照组,每组20只。分离人脐血单个核细胞,Ho-echst33258标记后移植入脊髓损伤部位,观察... 详细信息

目的:观察人脐血单个核细胞移植入大鼠脊髓损伤部位后的分化、迁移情况和损伤后功能的修复。方法:建立SD大鼠T10脊髓节段损伤模型,随机分为移植组和对照组,每组20只。分离人脐血单个核细胞,Ho-echst33258标记后移植入脊髓损伤部位,观察迁移情况,并用免疫荧光双标法观察移植细胞是否可以表达神经元特异性烯醇化酶(NSE)和神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP),同时采用BBB运动功能评分观察脊髓功能的修复情况。结果:人脐血单个核细胞在移植区脊髓内存活,并有GFAP和NSE阳性表达的移植细胞,移植细胞沿脊髓长轴发生迁移,10周时最多可向脊髓头尾两侧迁移7mm。BBB评分结果显示,移植组4周后与对照组相比[(11.55±1.05)vs(5.93±0.80)]、10周后与对照组相比[(13.50±0.88)vs(8.07±0.82)],差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:人脐血单个核细胞对脊髓损伤的功能修复有促进作用,可能是一种治疗脊髓损伤的新的种子细胞。

关键词：脐血单个核细胞脊髓损伤分化迁移大鼠

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salusins通过减轻内质网应激保护缺血心肌

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中国科学：生命科学 2012年第4期42卷 480-488页

作者：王键飞王茵单世富胡甜甜陈虎艳田晶任安经周旭袁文俊林丽宁夏医科大学基础医学院生理学和神经生物学教研室银川750004 上海浦南医院妇产科上海200125 长海医院超声科上海200433 第二军医大学生理学教研室教育部分子神经生物重点实验室上海200433

salusins是影响心血管功能的多肽,salusin-α和-β能调节内质网应激的标志分子GRP78,从而减轻血清剥夺所致的培养心肌细胞损伤.本研究探讨了salusin-α和-β能否减轻心肌缺血所致的内质网应激.在整体大鼠冠状动脉左前降支(LAD)结扎2h所... 详细信息

salusins是影响心血管功能的多肽,salusin-α和-β能调节内质网应激的标志分子GRP78,从而减轻血清剥夺所致的培养心肌细胞损伤.本研究探讨了salusin-α和-β能否减轻心肌缺血所致的内质网应激.在整体大鼠冠状动脉左前降支(LAD)结扎2h所致心肌缺血模型上,于结扎前15min静脉注射salusin-α或-β(5或15nmol/kg),观察到高剂量组心功能和血流动力学的显著改善,缺血性心律失常尤其是室性心动过速显著减少.salusins抑制了缺血引起的GRP78以及内质网应激相关促凋亡因子caspase-12和CHOP的高表达,改善了抑凋亡因子Bcl-2的低表达.此外,在培养的大鼠H9c2心肌细胞中,salusin-α和-β均能抑制tunicamycin所诱导的内质网应激.结果表明,salusins能抑制内质网应激以及内质网应激相关的凋亡,从而保护缺血心肌.

关键词： salusin 心肌缺血内质网应激大鼠

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低氧预适应对大鼠脑缺血再灌注神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响

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郑州大学学报（医学版） 2004年第5期39卷 810-813页

作者：高晓群段东晓邢莹茹立强华中科技大学同济医学院神经生物学教研室武汉430030 郑州大学基础医学院生理学教研室郑州450052

目的 :探讨低氧预适应对大鼠大脑中动脉 (MCA)缺血再灌注神经细胞凋亡 ,Bcl 2、Bax的表达及行为学计分的影响。方法 :成年Wistar大鼠 75只 ,随机分为 3组 :假手术组 ,缺血再灌注组 (对照组 )和低氧预适应组。采用动脉线栓法制作大鼠脑... 详细信息

目的 :探讨低氧预适应对大鼠大脑中动脉 (MCA)缺血再灌注神经细胞凋亡 ,Bcl 2、Bax的表达及行为学计分的影响。方法 :成年Wistar大鼠 75只 ,随机分为 3组 :假手术组 ,缺血再灌注组 (对照组 )和低氧预适应组。采用动脉线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型 ,假手术组除不插线外 ,其余同缺血再灌注组 ,低氧预适应组在低氧预适应后 12h制作脑缺血再灌注模型 ,低氧预适应后在大鼠MCA缺血 3h再灌注 1h、6h、12h、2 4h、4 8h不同时间点 ,进行脑切片的TUNEL染色 ,Bcl 2、Bax的免疫组化检测及大鼠的行为学计分。结果 :低氧预适应大鼠的神经细胞凋亡、Bax的表达和行为学计分均较对照大鼠减少 ,Bcl 2的表达较对照组增高 ,差异均有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论 :低氧预适应的脑保护及改善神经功能的作用与其抑制神经细胞的凋亡有关 ;而增加Bcl 2及减少Bax的表达 ,可能是实现保护作用、改善大鼠神经功能的机制之一。

关键词：低氧预适应脑缺血再灌注细胞凋亡 Bcl-2 Bax

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重症肌无力患者胸腺细胞凋亡障碍与Fas表达异常的关系

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细胞与分子免疫学杂志 2003年第5期19卷 450-453页

作者：杜英张清勇阮丽荣梁长春李倩如何炜郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室河南郑州450052 郑州大学第二附属医院胸外科河南郑州450003 安阳市人民医院神经内科河南安阳455000 郑州大学基础医学院生理学教研室河南郑州450052

目的 :探讨重症肌无力 (MG)胸腺细胞凋亡异常、Fas表达异常在自身免疫应答形成中的作用。方法 :用手术切除的MG患者的胸腺 ,制备胸腺提取液和胸腺细胞悬液 ,用MTT比色法测定胸腺细胞的增殖 ;用DNA电泳及细胞形态学观察细胞凋亡 ;用流式... 详细信息

目的 :探讨重症肌无力 (MG)胸腺细胞凋亡异常、Fas表达异常在自身免疫应答形成中的作用。方法 :用手术切除的MG患者的胸腺 ,制备胸腺提取液和胸腺细胞悬液 ,用MTT比色法测定胸腺细胞的增殖 ;用DNA电泳及细胞形态学观察细胞凋亡 ;用流式细胞仪检测细胞表面Fas的表达 ,用RT PCR结合单链多态构象性分析 (SSCP) ,探讨Fas基因的转录及可能存在的Fas基因突变。结果 :MG患者的胸腺提取液 ,能抑制正常胸腺细胞增殖 ,但不能抑制MG患者胸腺细胞增殖。在地塞米松作用下 ,正常人及患者胸腺细胞的增殖均可被抑制 ,细胞增殖抑制率分别为 5 8.33%和 5 4 .2 6 %。MG患者胸腺细胞的DNA电泳可见梯状条带 ,并且胸腺细胞上Fas的表达百分率增加 [(2 0 .38± 6 .0 7) % ],与空白对照组 [(12 .4 3±4 .32 ) % ]相比较P <0 .0 5。对MG患者胸腺细胞FasmRNA进行RT PCR SSCP分析 ,部分MG患者出现异常电泳条带。结论 :MG患者胸腺细胞的凋亡及Fas分子表达均异常 ,而且存在Fas基因突变 ,提示与本病的发生发展有关。

关键词：重症肌无力胸腺细胞细胞凋亡 Fas表达异常

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树突状细胞及exosomes体外诱导抗脑胶质瘤细胞毒活性的研究

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免疫学杂志 2006年第6期22卷 664-667页

作者：杜英陈绍倩黄玉敏孙蕾王鑫顾巧丽杨波董子明郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450052 郑州大学第一附属医院血液科郑州450052 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450052 郑州大学第一附属医院神经外科郑州450052

目的探讨负载肿瘤抗原的树突状细胞(DCs)及其衍生exosomes诱导T细胞活化和特异性肿瘤杀伤的作用。方法将患者静脉血单个核细胞经GM-CSF、IL-4诱导产生DCs,收集培养上清液,超速离心法制备exosomes。流式细胞术检测DCs表面标志表达,用SDS-... 详细信息

目的探讨负载肿瘤抗原的树突状细胞(DCs)及其衍生exosomes诱导T细胞活化和特异性肿瘤杀伤的作用。方法将患者静脉血单个核细胞经GM-CSF、IL-4诱导产生DCs,收集培养上清液,超速离心法制备exosomes。流式细胞术检测DCs表面标志表达,用SDS-PAGE和western-blot检测exosomes携带MHC和共刺激分子的情况。MTT法观察DCs及exosomes对T细胞促增殖作用和CTL体外杀伤活性。结果肿瘤抗原致敏的DC高表达MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、CD54、CD80和CD86,与抗原致敏前相比有显著差异,P<0.05。DC衍生的exosomes表达MHC-Ⅱ、CD54和CD86,并显著引起T细胞扩增和细胞毒效应,与对照组相比有显著差异,P<0.01。结论从脑胶质瘤患者静脉血诱导出高表达MHC和共刺激分子的DCs以及exosomes,具有活化T细胞并产生特异性细胞毒活性的功能,有望成为临床治疗脑胶质瘤有效的新疫苗。

关键词：树突状细胞 Exosomes 脑胶质瘤细胞毒活性

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靶向阻断LRP提高肺腺癌细胞对紫杉醇的敏感性

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基础医学与临床 2016年第3期36卷 370-374页

作者：张善锋王志举崔景彬张艳杰张文瑾郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学系河南郑州450001 郑州大学基础医学院生理学与神经生物学系河南郑州450001 郑州大学基础医学院基础肿瘤教研室河南郑州450001

目的利用小干扰RNA(siRNA)技术沉默肺腺癌细胞肺耐药相关蛋白基因(LRP),探讨其对肺腺癌紫杉醇耐药株(A549/TXL20)紫杉醇(TXL)敏感性的影响。方法逐步增加药物浓度法建立A549紫杉醇耐药细胞株(A549/TXL20),用小干扰RNA技术沉默LRP在A549/... 详细信息

目的利用小干扰RNA(siRNA)技术沉默肺腺癌细胞肺耐药相关蛋白基因(LRP),探讨其对肺腺癌紫杉醇耐药株(A549/TXL20)紫杉醇(TXL)敏感性的影响。方法逐步增加药物浓度法建立A549紫杉醇耐药细胞株(A549/TXL20),用小干扰RNA技术沉默LRP在A549/TXL20细胞中的表达,以MTT法检测紫杉醇对A549/TXL20细胞的半数抑制浓度(IC50);以q PCR检测细胞中LRP mRNA的表达,Western blot检测细胞中LRP蛋白的水平,裸鼠腋窝皮下注射转染后的A549/TXL20细胞,建立裸鼠移植瘤模型,观察LRP靶向siRNA对人肺腺癌耐药细胞株A549/TXL20移植瘤耐药的影响。结果肺腺癌紫杉醇耐药株(A549/TXL20)对紫杉醇的敏感性明显增强(P<0.01),A549/TXL20细胞中LRP mRNA及蛋白表达显著增加(P<0.01);siRNA沉默A549/TXL20细胞LRP基因后,与空白组和空质粒组比较,LRP mRNA及蛋白表达均被抑制(P<0.01);小干扰RNA可提高荷瘤裸鼠对紫杉醇的敏感性。结论 siRNA可有效沉默A549/TXL20肺腺癌耐药细胞株LRP基因的表达,提高耐药的肺腺癌细胞对紫杉醇的敏感性。

关键词：人肺腺癌细胞株紫杉醇肺耐药相关蛋白 RNA干扰

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