检索结果-内蒙古大学图书馆

郑州大学学报（医学版） 2008年第6期43卷 1085-1090页

作者：郑乃刚高涵昌吴景兰裴迎新王一菱董子明郑州大学基础医学院基础肿瘤学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院分子细胞生物学研究中心郑州450052 郑州大学公共卫生学院营养卫生学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450001

目的:探讨野生型DNA聚合酶β(polbeta)转染人食管癌Eca-109细胞后对其增变基因表型的效应。方法:将经过鉴定的重组pcDNA3.1质粒(插入野生型,wt)-polbeta转染培养的人食管癌Eca-109细胞。将Eca-109细胞分为3组:转染实验组(E)、空质粒转... 详细信息

目的:探讨野生型DNA聚合酶β(polbeta)转染人食管癌Eca-109细胞后对其增变基因表型的效应。方法:将经过鉴定的重组pcDNA3.1质粒(插入野生型,wt)-polbeta转染培养的人食管癌Eca-109细胞。将Eca-109细胞分为3组:转染实验组(E)、空质粒转染对照组(C1)和未转染对照组(C2)。应用原位杂交技术显示wt-polbeta和wt-p53的杂交信号,免疫细胞化学染色显示POLB-免疫反应性(IR)和多药耐受(MDR1)-IR,免疫印迹显示wt-polbeta和突变(mt)-polbeta的带型,细胞化学技术检测各组细胞的增殖与分化细胞的比率。结果:polbeta免疫印迹结果显示E组呈现增强的wt-polbeta主带,C1、C2组呈现很弱wt-polbeta主带和显著突变的(mt)-polbeta主带(P<0.01);polbeta免疫细胞化学结果显示E组的强信号定位于细胞核内,C1、C2组信号皆很弱(P<0.01)。E组的wt-polbeta及wt-p53原位杂交的信号强于C1、C2组(P<0.01)。E组MDR1的免疫反应性和增殖与分化细胞的比率低于C1、C2组(P<0.01)。结论:wt-polbeta转染的Eca-109细胞呈现wt-polbeta及wt-p53表达上调而mt-polbeta及MDR1表达下调的增变基因表型减弱。

关键词：野生型DNA聚合酶β 转染 DNA聚合酶β-p53-MDR1表达亚群增变基因表型 Eca-109细胞

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小檗胺对K562细胞增殖和凋亡的影响

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郑州大学学报（医学版） 2008年第6期43卷 1154-1156页

作者：申琦赵攀付春景黄幼田张艳艳李继成郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室郑州450001 北京大学医学部病理生理学教研室北京100083 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450001 郑州大学药学院郑州450001

目的:探讨小檗胺(BBM)对K562细胞增殖及凋亡的影响及其可能机制。方法:K562细胞分为5组,前4组为实验组,分别加入终浓度为0.8、8.0、40.0、80.0 mg/L的BBM,对照组加入等量RPMI 1640,分别作用不同时间后,采用MTT法检测BBM对K562细胞增殖... 详细信息

目的:探讨小檗胺(BBM)对K562细胞增殖及凋亡的影响及其可能机制。方法:K562细胞分为5组,前4组为实验组,分别加入终浓度为0.8、8.0、40.0、80.0 mg/L的BBM,对照组加入等量RPMI 1640,分别作用不同时间后,采用MTT法检测BBM对K562细胞增殖的抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫细胞化学检测各组Caspase-3蛋白和Survivin蛋白的表达。结果:BBM能呈时间剂量依赖性地抑制K562细胞增殖和诱导其凋亡;免疫细胞化学结果显示BBM作用24 h后K562细胞Caspase-3蛋白表达升高,Survivin蛋白表达降低(P均<0.05)。结论:BBM能抑制K562细胞增殖和诱导其凋亡,其机制可能与Caspase-3蛋白的表达增高及Survivin蛋白的表达降低有关。

关键词：白血病 K562细胞小檗胺 Survivin Caspase-3

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姜黄素阻断NF-κB信号通路促进食管鳞癌细胞凋亡的体外研究

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癌症 2008年第6期27卷 566-570页

作者：田芳宋敏许培荣刘红涛薛乐勋郑州大学基础医学院病理生理学教研室河南郑州450052 郑州大学第一附属医院肿瘤科河南郑州450052 郑州大学细胞生物学研究室河南郑州450052

背景与目的:活化的核转录因子-kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路参与调控多种与炎症、抗凋亡、肿瘤形成和转化有关的基因表达。但在食管鳞癌中的作用尚不清楚。姜黄素具有抗感染、抗氧化等多种药理作用。本研究将探讨姜... 详细信息

背景与目的:活化的核转录因子-kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路参与调控多种与炎症、抗凋亡、肿瘤形成和转化有关的基因表达。但在食管鳞癌中的作用尚不清楚。姜黄素具有抗感染、抗氧化等多种药理作用。本研究将探讨姜黄素是否能够通过阻断NF-κB信号通路对食管鳞癌细胞增殖、抗凋亡产生影响。方法:Western blot法检测EC9706和Eca109细胞中加入姜黄素(50μmol/L)培养不同时间后,pIκBα和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达情况。在EC9706和Eca109细胞中加入姜黄素培养72h,流式细胞仪检测凋亡细胞情况。MTT法检测姜黄素单独或与5-FU联合对细胞增殖的影响。结果:Western blot的结果显示,在姜黄素作用下EC9706和Eca109细胞中pIκBα和Bcl-2蛋白的表达水平随着时间的延长逐渐下降。在单独使用姜黄素后,就可促进EC9706和Eca109细胞的凋亡(P<0.05);当与5-FU联合使用时,可明显提高EC9706和Eca109细胞对化疗药物的敏感性,凋亡细胞显著增加(P<0.05)。姜黄素与5-FU联合应用48h和72h,可明显抑制EC9706和Eca109细胞的增殖,与单独使用姜黄素或5-FU组相比,细胞存活率显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:姜黄素可以通过抑制IκBα的磷酸化阻断NF-κB信号通路,促进细胞凋亡,抑制细胞增殖,增加细胞对5-FU的敏感性。

关键词：食管肿瘤 EC9706细胞 Eca109细胞姜黄素 NF-κB 信号通路 IκBα Bcl-2 凋亡

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血小板膜糖蛋白Ibα基因VNTR多态性与冠心病相关性的研究

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中国现代医学杂志 2008年第1期18卷 90-92页

作者：赵洛沙张静华郑红毋淑珍杨文薛国华杨帆王培郑州大学第一附属医院心内科河南郑州450052 郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室河南郑州450052

目的探讨我国河南汉族人群血小板GPIbα基因巨糖肽区串联重复序列(VNTR)多态性与冠心病的关系。方法选择404例确诊冠心病的患者和500例无心脏病史的健康体检者作对照,应用PCR方法进行VNTR多态性检测。结果扩增产物电泳显示,在中国河南... 详细信息

目的探讨我国河南汉族人群血小板GPIbα基因巨糖肽区串联重复序列(VNTR)多态性与冠心病的关系。方法选择404例确诊冠心病的患者和500例无心脏病史的健康体检者作对照,应用PCR方法进行VNTR多态性检测。结果扩增产物电泳显示,在中国河南汉族人群中,发现VNTR的6种基因型:AC、BC、BD、CC、CD、DD。本研究未发现VNTR各基因型及等位基因与冠心病的发生间存在明显相关性。P值均大于0.05。与其他基因型相比,在CD基因型中,Gensini冠状动脉评分≥40组与评分<40组间的差异具有显著性,P<0.05,OR=2.3(95%可信区间1.2～4.4)。结论血小板膜GPIbα基因巨糖肽区VNTR的CD基因型与冠心病的严重程度有关。

关键词：血小板膜糖蛋白类冠心病基因

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杜氏盐藻光系统Ⅱ反应中心蛋白D1基因的克隆及序列分析

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郑州大学学报（医学版） 2008年第6期43卷 1123-1126页

作者：刘红涛范天黎鲁照明王鹏举陈涛薛乐勋郑州大学生物工程系细胞生物学研究室郑州450052 郑州大学基础医学院药理学教研室郑州450051

目的:克隆杜氏盐藻光系统Ⅱ反应中心蛋白D1(psbA)基因cDNA片段。方法:根据莱茵衣藻、稻以及普通小球藻等真核生物psbA基因的氨基酸高度保守序列,设计一对简并引物,利用Trizol试剂提取杜氏盐藻细胞总RNA,通过RT-PCR获得杜氏盐藻psbA cDNA... 详细信息

目的:克隆杜氏盐藻光系统Ⅱ反应中心蛋白D1(psbA)基因cDNA片段。方法:根据莱茵衣藻、稻以及普通小球藻等真核生物psbA基因的氨基酸高度保守序列,设计一对简并引物,利用Trizol试剂提取杜氏盐藻细胞总RNA,通过RT-PCR获得杜氏盐藻psbA cDNA,PCR产物连接T载体转化大肠杆菌JM109,随机挑取数个菌落,筛选鉴定并测序,测序结果进行Blast比对分析和密码子偏爱性分析。结果:获得的cDNA片段长度为999 bp,编码333个氨基酸。其氨基酸序列与其他物种进行Blast比对,同源性分别为:衣藻89%、椭圆小球藻89%、莱茵衣藻89%、普通小球藻88%和玉米87%。psbA基因存在明显的密码子偏爱性,其(A+T)含量明显高于(G+C)含量。另外,所克隆的psbA序列编码赖氨酸残基的数量为1个。结论:所克隆的序列为杜氏盐藻psbA基因cDNA片段。

关键词：杜氏盐藻光系统Ⅱ反应中心蛋白D1基因简并引物密码子偏爱性

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近交系豫医无毛小鼠微卫星DNA多态性分析

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郑州大学学报（医学版） 2008年第6期43卷 1146-1149页

作者：杨卫红王纯耀宋国英李效阳刘海郭利红郑州大学基础医学院法医学教研室郑州450001 河南省实验动物中心郑州450052 郑州大学基础医学院生物与遗传学教研室郑州450001 河南省公安厅刑事科学技术研究所郑州450003

目的:研究微卫星DNA多态性在豫医无毛小鼠等近交系小鼠遗传监测中的应用。方法:选取小鼠不同染色体上的18个微卫星位点(D3Mit17、D3Mit18、D3Mit15、D3Mit21、D3Mit22、D6Mit192、D6Mit81、D6Mit36、D6Mit149、D16Mit4、D7Nds1、D2Nds3、D3Mit16、D3Mit85、D3Mit41、D4Mit2、D5Mit66、D7Mit164),应用PCR技术对7个近交系小鼠(豫医无毛小鼠、BALB/C、C57、CBA、DBA/2、C3H/HeJ、FVB/NJ)进行了微卫星多态性分析。结果:18个微卫星DNA具有稳定扩增效果。不同品系个体之间11个位点(D3Mit17、D3Mit18、D3Mit15、D3Mit21、D3Mit22、D6Mit192、D6Mit81、D6Mit36、D6Mit149、D16Mit4、D7Nds1)具有多态性,其中5个位点(D6Mit36、D6Mit81、D16Mit4、D6Mit149、D7Nds1)具有显著多态性;同一品系不同个体之间表现为单态性。结论:所检测的小鼠符合近交要求,运用筛选出的11个位点(D3Mit17、D3Mit18、D3Mit15、D3Mit21、D3Mit22、D6Mit192、D6Mit81、D6Mit36、D6Mit149、D16Mit4、D7Nds1)进行微卫星多态性分析,能够快速、经济地对近交系小鼠进行品系鉴别和遗传背景监测。同时也反映了近交系豫医无毛小鼠与其他品系小鼠之间亲缘关系的远近。

关键词：微卫星DNA 豫医无毛小鼠遗传监测近交系小鼠

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siRNA阻断NF-κB信号通路抑制宫颈癌HeLa229细胞的增殖及侵袭

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基础医学与临床 2008年第10期28卷 1044-1047页

作者：田卫红田芳许培荣刘红涛薛乐勋河南省安阳市肿瘤医院妇科肿瘤河南安阳455000 郑州大学基础医学院病理生理学教研室河南郑州450052 郑州大学基础医学院细胞生物学研究室河南郑州450052

目的通过RNA干扰阻断宫颈癌HeLa229细胞中NF-κB信号通路,研究其与肿瘤细胞增殖、耐药和侵袭力的关系。方法利用RNAi技术,将HeLa229分为转染组和对照组,MTT法检测细胞增殖,Boyden chamber体外侵袭实验检测细胞体外侵袭力。结果MTT实验表... 详细信息

目的通过RNA干扰阻断宫颈癌HeLa229细胞中NF-κB信号通路,研究其与肿瘤细胞增殖、耐药和侵袭力的关系。方法利用RNAi技术,将HeLa229分为转染组和对照组,MTT法检测细胞增殖,Boyden chamber体外侵袭实验检测细胞体外侵袭力。结果MTT实验表明,转染组细胞存活率比对照组明显下降,联合应用化疗药,转染组和对照组细胞的存活率均随着5-Fu浓度的增加而下降,但在同一浓度,siRNA与5-Fu联合应用可明显提高HeLa229细胞对化疗药的敏感性。体外侵袭实验结果表明,和对照组相比,转染P65siRNA组穿越Matrigel胶的细胞数明显减少(P<0.05)。结论应用RNAi技术可有效阻断NF-κB信号通路,抑制宫颈癌细胞的增殖和体外侵袭力,增强对5-Fu的敏感性。因此,可将NF-κB信号通路作为宫颈癌基因治疗的靶点。

关键词：宫颈癌 NF-kappaB RNA干扰 siRNA

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河南汉族人群7个Y染色体短串联重复序列基因座的遗传多态性

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郑州大学学报（医学版） 2008年第6期43卷 1149-1153页

作者：李杨孙莉黄文君郑明陈辉李晓文郑州大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室郑州450001 郑州大学第一附属医院检验科郑州450052 郑州大学教育技术中心郑州450001

目的:调查7个Y染色体短串联重复序列(Y-STR)基因座及其单倍型在河南汉族人群中的遗传多态性。方法:采集102名河南汉族无关男性个体静脉血样,提取DNA,PCR扩增DYS19、DYS385、DYS389Ⅰ/Ⅱ、DYS390、A7.1、H4等7个Y-STR基因座,变性聚丙烯... 详细信息

目的:调查7个Y染色体短串联重复序列(Y-STR)基因座及其单倍型在河南汉族人群中的遗传多态性。方法:采集102名河南汉族无关男性个体静脉血样,提取DNA,PCR扩增DYS19、DYS385、DYS389Ⅰ/Ⅱ、DYS390、A7.1、H4等7个Y-STR基因座,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染检测,进行基因分型统计分析并计算等位基因频率GD值。结果:7个Y-STR基因座共检出99种单倍型,1种出现3次,1种出现2次,其余均出现1次。积累GD值为0.999 235。发现1个国内群体中的新等位基因。结论:7个Y-STR基因座具有较强的个体识别能力。

关键词： Y染色体短串联重复系列遗传多态性等位基因汉族河南省

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杜氏盐藻高纯度叶绿体DNA的提取

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郑州大学学报（医学版） 2008年第6期43卷 1127-1129页

作者：曲东京李杰潘卫东贾彦龙薛乐勋郑州大学生物工程系细胞生物学研究室郑州450052 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450051

目的:分离大量完整的杜氏盐藻叶绿体,提取高纯度的叶绿体DNA(cpDNA)。方法:取对数生长后期的杜氏盐藻细胞进行高压破碎,利用差速离心和蔗糖密度梯度离心得到完整的叶绿体。采用优化的SDS-蛋白酶K-酚/氯仿/异戊醇方案抽提cpDNA,并经10 g/... 详细信息

目的:分离大量完整的杜氏盐藻叶绿体,提取高纯度的叶绿体DNA(cpDNA)。方法:取对数生长后期的杜氏盐藻细胞进行高压破碎,利用差速离心和蔗糖密度梯度离心得到完整的叶绿体。采用优化的SDS-蛋白酶K-酚/氯仿/异戊醇方案抽提cpDNA,并经10 g/L琼脂糖凝胶电泳鉴定。结果:蔗糖密度梯度离心结果表明分离到了大量的叶绿体,相差显微镜及电镜观察证实所得叶绿体的完整性。紫外分光光度仪检测3个批次cpDNA的浓度蛋白酶为(2.21±0.02)mg/L,A(260 nm)/A(280 nm)为(1.772±0.012)。结论:获得了高纯度的杜氏盐藻cpDNA,为进行叶绿体的转化研究奠定了实验基础。

关键词：杜氏盐藻叶绿体 DNA提取

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siRNA阻断NF-κB信号通路联合5-FU对食管鳞癌细胞凋亡的促进作用

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世界华人消化杂志 2008年第16期16卷 1716-1721页

作者：田芳宋敏许培荣刘红涛薛乐勋郑州大学基础医学院病理生理学教研室河南省郑州市450052 郑州大学第一附属医院肿瘤科河南省郑州市450052 郑州大学细胞生物学研究室河南省郑州市450052

目的:利用RNAi技术特异性的抑制NF-κB亚单位p65的表达,观察其对p65表达的抑制作用及联合5-FU对食管鳞癌细胞Eca109和EC9706的影响.方法:将终浓度为50nmol/L的p65 siRNA转染到食管鳞癌细胞EC9706和Eca109中,通过RT-PCR检测0、24、48和72... 详细信息

目的:利用RNAi技术特异性的抑制NF-κB亚单位p65的表达,观察其对p65表达的抑制作用及联合5-FU对食管鳞癌细胞Eca109和EC9706的影响.方法:将终浓度为50nmol/L的p65 siRNA转染到食管鳞癌细胞EC9706和Eca109中,通过RT-PCR检测0、24、48和72h时段p65 mRNA的表达水平.Western blotting法检测p65和Bcl-2蛋白表达,AnnexinV/PI复染结合流式细胞仪检测细胞凋亡,显微镜下观察p65siRNA与5-FU单独或联合应用对食管鳞癌细胞形态学特性的影响.结果:EC9706和Eca109细胞转染p65 siRNA24、48和72h后,p65 mRNA的表达水平随时间的延长逐渐下调,在72h的阻断效率最为明显,与0h相比,差异有显著性(0.12±0.01vs0.28±0.05,0.1±0.01vs0.38±0.04,均P<0.05),转染72h后,p65和Bcl-2蛋白表达水平下调.EC9706和Eca109转染p65 siRNA后,细胞凋亡指数明显升高(6.65%±0.27%vs2.03%±0.08%,8.03%±0.06%vs2.66%±0.25%,均P<0.05);p65siRNA转染72h后,EC9706和Eca109细胞增殖较慢;当p65 siRNA与5-FU联合作用,细胞增殖明显受到抑制.结论:p65 siRNA可阻断NF-κB信号通路,下调NF-κB下游基因中抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,表明活化的NF-κB信号通路可成为食管鳞癌基因治疗中一个重要的分子靶点.

关键词：食管鳞癌核因子-κB RNA干扰 5-FU Bcl-2

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