检索结果-内蒙古大学图书馆

2014年河南省医学会感染暨肝病学术年会

作者：郑鹏远郑州大学第二附属医院消化内科郑州大学医学微生态及临床营养研究所

肠道正常菌群1原籍菌(固有菌):在正常菌群中数量最多,居于肠道正常菌群最里层,在肠粘膜上皮细胞表面形成菌膜结构,主要为双歧杆菌、类杆菌等,对维持菌群平衡作用最重要.

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益生菌对消化系统疾病的治疗作用及安全性问题

益生菌对消化系统疾病的治疗作用及安全性问题

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第六届中国医师协会感染科医师大会暨传染病诊治高峰论坛、第十四届中华预防医学会微生态学学术会议

作者：郑鹏远郑州大学第二附属医院消化内科郑州大学医学微生态及临床营养研究所 450014

郑鹏远郑州大学第二附属医院副院长医学博士、博士生导师二级教授、主任医师郑州大学医学微生态学及临床营养研究所所长享受国务院特殊津贴专家人事部"百千万人才工程"国家级人选中华学会消化病分会委员中华预防医学会微生态...

郑鹏远郑州大学第二附属医院副院长医学博士、博士生导师二级教授、主任医师郑州大学医学微生态学及临床营养研究所所长享受国务院特殊津贴专家人事部"百千万人才工程"国家级人选中华学会消化病分会委员中华预防医学会微生态学分会常委兼消化营养学组组长中国临床营养联盟副秘书长中国医药生物技术协会组织生物样本库分会常委

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益生菌对肠易激综合征小鼠肠道黏膜CRF-R1表达及肠道屏障功能的影响

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中国微生态学杂志 2014年第9期26卷 993-997,1001页

作者：刘思濛于泳黄煌丁一芮白利梅李付广郑鹏远郑州大学第二附属医院消化内科郑州大学医学微生态及临床营养研究所河南郑州450014 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室河南郑州450001

目的通过观察肠易激综合征（IBS）小鼠模型结肠黏膜肥大细胞上CRF-R1及结肠黏膜PAR-2、Claudin1~4等的表达变化,探讨IBS中应激通过肥大细胞引起肠道屏障功能障碍的可能机制并观察婴儿双歧杆菌的治疗作用。方法 30只雄性Balb/c小鼠随机... 详细信息

目的通过观察肠易激综合征（IBS）小鼠模型结肠黏膜肥大细胞上CRF-R1及结肠黏膜PAR-2、Claudin1~4等的表达变化,探讨IBS中应激通过肥大细胞引起肠道屏障功能障碍的可能机制并观察婴儿双歧杆菌的治疗作用。方法 30只雄性Balb/c小鼠随机分为对照组、模型组及婴儿双歧杆菌组。以束缚应激法建立IBS小鼠模型。婴儿双歧杆菌组给予婴儿双歧杆菌灌胃,而对照组及模型组给予等体积生理盐水灌胃。观测腹肌收缩反射（AWR）后处死小鼠。ELISA检测外周血中类胰蛋白酶的表达变化。免疫组织化学分析结肠黏膜CRF、PAR-2、Claudin1、Claudin2、Claudin3、Claudin4的表达情况。免疫荧光双标分析结肠黏膜CRF-R1在肥大细胞的表达情况。RT-PCR检测结肠CRF-R1mRNA的表达情况。结果与对照组相比,模型组小鼠外周血类胰蛋白酶表达量增加;结肠黏膜中CRF、PAR-2、Claudin2表达量、CRF-R1＋肥大细胞数目及CRF-R1 mRNA表达量增加,结肠黏膜Claudin1、Claudin3、Claudin4表达量降低,差异均有统计学意义（P〈0.05）。婴儿双歧杆菌干预后,该组小鼠外周血中类胰蛋白酶表达量降低;结肠黏膜中CRF、PAR-2、Claudin2表达量、CRF-R1＋肥大细胞数目及CRF-R1 mRNA表达量降低,结肠黏膜Claudin1、Claudin3、Claudin4表达量增高,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 IBS小鼠模型中,婴儿双歧杆菌可以减轻肠道屏障功能障碍,其机制可能与抑制结肠黏膜肥大细胞上CRF-R1的表达而抑制肥大细胞的激活及其免疫因子的释放,从而降低结肠黏膜PAR-2的表达有关。

关键词：肠易激综合征益生菌肥大细胞肠道屏障功能

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肠上皮细胞来源的整合素αVβ6对肠道树突状细胞TGF-β1表达的影响

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世界华人消化杂志 2013年第17期21卷 1642-1648页

作者：李凯郑鹏远刘志强陈东晖郑州大学第二附属医院消化内科郑州大学医学微生态学研究所河南省郑州市450014

目的:肠上皮细胞(intestinal epithelial cells,IEC)来源的整合素V6在肠道耐受性树突状细胞(tolerance dendritic cell,TolDC)生成中的机制研究.方法:Balb/c♂小鼠30只,随机分为3组:空白对照组、卵清蛋白(ovalbumin,OVA)组、OVA+抗V6抗体组.取空肠分离固有层单核细胞(lamia propria mononuclear cells,LPMC)流式细胞仪测定CD11c+与转化生长因子1+(transforming growth factor-1+,TGF-1+)的比率变化.免疫荧光双染(immunofluorescence double staining,IF)检测空肠CD11c+与TGF-1+分布情况.Western bolt法测定TGF-1蛋白水平变化.结果:流式细胞仪测定结果显示:与空白对照组相比,OVA组肠道LPMC中的TGF-1+明显增加(P<0.05),而OVA+抗V6抗体组TGF-1+明显降低(P<0.05).与OVA组相比,OVA+抗V6抗体组TGF-1+明显降低(P<0.05).免疫荧光双染法显示:O VA组中TolDC细胞计数为(13.0±1.76),较空白对照组(4.9±1.66)显著增加(P<0.01),该组中CD11c+DC细胞计数(5.0±1.83),较空白对照组(8.1±1.91)显著减少(P<0.01);OVA+抗V6抗体组中TolDC细胞计数为(3.2±1.37),较空白对照组(4.9±1.66)无明显变化(P>0.01),该组中CD11c+DC细胞计数(11.0±2.16),较空白对照组(8.1±1.91)无明显变化(P>0.01).Western bolt结果显示:与空白对照组相比(0.129±0.069),OVA组(0.236±0.049)TGF-1表达显著增高,差异有统计学意义(P<0.05);OVA+抗V6抗体组(0.174±0.075)表达也降低,差异有统计学意义(P<0.05).与OVA组相比,OVA+抗V6抗体组(0.174±0.075)TGF-1表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论:肠上皮来源整合素V6能够增加树突状细胞(dendritic cell,DC)中TGF-1的表达,并使其转变为TolDC,从而在肠道免疫耐受中起重要作用.

关键词： CD11c 转化生长因子β 树突状细胞整合素αVβ6

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CRF通过CRF2受体介导肠上皮细胞中TLR4的表达

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世界华人消化杂志 2012年第19期20卷 1763-1767页

作者：杨丽郑鹏远刘志强郑州大学第二附属医院消化内科郑州大学医学微生态学研究所河南省郑州市450014

目的:研究促肾上腺皮质释放因子(CRF)介导肠上皮细胞中Toll样受体4(toll-like receptor4,TLR4)的表达,并探讨其可能通过的受体途径.方法:常规培养人结肠上皮细胞株HT-29细胞,将HT-29细胞分为正常对照组(不加刺激剂),脂多糖(lipopolysacc... 详细信息

目的:研究促肾上腺皮质释放因子(CRF)介导肠上皮细胞中Toll样受体4(toll-like receptor4,TLR4)的表达,并探讨其可能通过的受体途径.方法:常规培养人结肠上皮细胞株HT-29细胞,将HT-29细胞分为正常对照组(不加刺激剂),脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激组(LPS20g/L刺激24h),促肾上腺皮质释放因子(corticotrophin-releasing factor,CRF)刺激组(CRF20g/L刺激24h),CRF+LPS刺激组(预先CRF20g/L刺激12h,更换细胞液后再与LPS20g/L刺激12h),CRF+Antalarmin 组(CRF与Antalarmin20g/L共刺激24h),CRF+LPS+Antalarmin组(CRF与Antalarmin20g/L共刺激12h后再以LPS刺激12h),CRF+Astressin2B组(CRF与Astressin2B20g/L共刺激24h),CRF+LPS+Astressin2B组(CRF与Astressin2B20g/L共刺激12h后再以LPS刺激12h).刺激结束后,收取各组HT-29细胞,RT-PCR法和免疫印迹法检测各组上皮细胞中TLR4mRNA和蛋白的表达.ELISA法检测各组细胞上清液中IL-8的表达.结果:CRF可以诱导人结肠上皮细胞株HT-29细胞中TLR4表达导致IL-8分泌增多(P<0.05),C R F1受体拮抗剂不能有效地阻滞C R F对TLR4的诱导(P>0.05,CRF+LPS组vs CRF组),CRF2受体拮抗剂可阻滞CRF对TLR4的诱导(P<0.05,CRF+LPS组vs CRF组).结论:CRF通过CRF2受体通路介导肠上皮细胞中TLR4的表达.

关键词：促肾上腺皮质释放因子 Toll样受体肠上皮细胞

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肠上皮细胞来源整合素αVβ6对树突状细胞功能的影响

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世界华人消化杂志 2012年第17期20卷 1553-1558页

作者：李晓蕾郑鹏远李付广刘志强郑州大学第二附属医院消化内科郑州大学医学微生态学研究所河南省郑州市450014 郑州大学基础医学院微生物与免疫教研室河南省郑州市450052

目的:研究肠上皮细胞(intestinal epithelial cells,IEC)来源的整合素αVβ6对骨髓来源树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells,BMDCs)功能的影响.方法:分离、培养小鼠IEC和DC,IEC经卵清蛋白(ovalbumin,OVA)刺激后,多步离心法制备外泌体(exosome).应用免疫胶体金对外泌体中的整合素αVβ6进行定性,通过免疫磁珠技术,分离获取DC,流式细胞仪检测分离后DC纯度.然后将分离后的DC分5组,分别为空白组、OVA组、外泌体组、外泌体+抗整合素αVβ6抗体组、外泌体+羊抗小鼠IgG组,观察各组对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的反应.ELISA法检测DC在LPS刺激前后IL-12p70的表达.LPS刺激前活性转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)以及总TGF-β1的表达.结果:OVA组与空白组相比,总TGF-β1表达明显增高(226.636±40.355vs176.947±23.072,P<0.05),但活化TGF-β1表达无明显变化(P>0.05).空白组与外泌体+抗整合素αVβ6抗体组相比,活化TGF-β1表达无明显变化(P>0.05),但总TGF-β1表达明显增高(P<0.05).外泌体组和外泌体+羊抗小鼠IgG组与空白组相比,活化TGF-β1和总TGF-β1表达均明显增高(P<0.05).相比空白对照组,LPS刺激48h后外泌体组和外泌体+羊抗小鼠IgG组IL-12p70表达明显降低(P<0.05),OVA组及外泌体+抗整合素αVβ6抗体组IL-12p70表达无明显差异(P>0.05).结论:IEC来源整合素αVβ6能增加DC活性,以及TGF-β1和总TGF-β1的表达量,并拮抗LPS对BMDC的促成熟作用.

关键词：外泌体整合素αVβ6 树突状细胞转化生长因子β1

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婴儿双歧杆菌对花生过敏小鼠模型肠道Th2反应的调节

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中国微生态学杂志 2012年第8期24卷 677-681页

作者：杨丽刘志强郑鹏远郑州大学第二附属医院消化内科郑州大学医学微生态学研究所河南郑州450000 Department of Pathology and Molecular Medicine McMaster UniversityHamiltonOntario L8N 4A6Canada

目的研究婴儿型双歧杆菌对花生过敏小鼠肠道Th2型反应的调节作用。方法通过应用花生蛋白诱导肠道的Th2型反应,建立食物过敏小鼠模型。过敏小鼠灌胃给予婴儿型双歧杆菌(ATCC菌或CGMCC0313-2)或不做处理。然后分离小鼠小肠黏膜CD4+T细胞或... 详细信息

目的研究婴儿型双歧杆菌对花生过敏小鼠肠道Th2型反应的调节作用。方法通过应用花生蛋白诱导肠道的Th2型反应,建立食物过敏小鼠模型。过敏小鼠灌胃给予婴儿型双歧杆菌(ATCC菌或CGMCC0313-2)或不做处理。然后分离小鼠小肠黏膜CD4+T细胞或DC,另取肠黏膜组织进行石蜡包埋甲苯胺蓝染色肥大细胞计数,HE染色进行嗜酸细胞和单个核细胞计数,流式细胞检测CD4+T中Th2(CD4+IL-4+T)细胞和Treg(CD4+CD25+Foxp3+T)比例,另取CD4+T进行CFSE标记,与DC共培养4 d后流式细胞检测CD4+T增殖反应,收集细胞培养液ELISA检测IL-4、IL-5和IL-13分泌水平。结果过敏组小鼠Th2型细胞数,CD4+T细胞增殖反应,IL-4、IL-5和IL-13水平,肠黏膜中肥大细胞、嗜酸性细胞和单个核细胞数均明显高于对照组(P<0.01),而Treg数目低于对照组(P<0.01),婴儿双歧杆菌干预后,婴儿双歧杆菌组Th2型细胞数,IL-4、IL-5和IL-13水平,肠黏膜中肥大细胞、嗜酸性细胞和单个核细胞数均明显低于过敏组(P<0.01),而Treg数目高于过敏组(P<0.01)。结论口服婴儿型双歧杆菌可以抑制花生过敏导致的肠道Th2型反应。

关键词：食物过敏双歧杆菌变应原

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TIM4对小鼠食物过敏模型中抗原特异性Th2细胞分化的影响

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世界华人消化杂志 2011年第9期19卷 940-945页

作者：杨慧敏郑鹏远刘志强李付广王新亭郑州大学第二附属医院消化内科郑州大学医学微生态学研究所河南省郑州市450014 郑州大学基础医学院微生物与免疫教研室河南省郑州市450052

目的:研究微生物产物对树突状细胞(dendriticcell,DC)和TIM4的作用,探讨在微生物产物参与的食物过敏(foodallergy,FA)中TIM4对CD4+T淋巴细胞分化的影响.方法:培养Balb/c小鼠骨髓来源的树突状细胞(bonemarrow-derived DC,BMDC),培养的DC分为两组:金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)刺激组和空白对照组,RT-PCR检测不同组DC的TIM4 mRNA表达;流式细胞仪检测DC表面CD11c、MHC-Ⅱ、CD86的表达.在DC和CD4+T淋巴细胞共同培养中将培养的DC分为5组:空白对照组、SEB+卵清蛋白(OVA)组、SEB组、OVA组及TIM4组,同时取过敏模型小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞,不同组的DC与CD4+T淋巴细胞共同培养,ELISA法测定混合培养细胞上清液IL-4与IFN-γ的表达.结果:与空白对照组相比,SEB组DCTIM4 mRNA表达明显增高(0.941±0.018vs0.422±0.083,P<0.05),并具有剂量依从性.SEB组DC表面分子MHC-Ⅱ、CD86表达明显高于空白对照组(MHC-Ⅱ:76.684%±3.1803%vs52.984%±3.6026%;CD86:89.746%±2.113%vs67.558%±0.4341%,均P=0.000).DC和CD4+T淋巴细胞共同培养中,相比空白对照组,SEB+OVA组IL-4表达显著增高(295.834±20.408vs78.335±13.109,P<0.05),而IFN-γ的表达明显减少(362.109±92.271vs761.897±102.967,P<0.05);单独的SEB组或OVA组IL-4和IFN-γ与空白对照组无明显差异;TIM4组中IL-4的表达水平较SEB+OVA组明显降低,而IFN-γ的表达明显增高(90.511±15.500vs295.834±20.408;807.734±95.436vs362.109±92.271,均P<0.05).结论:微生物产物和食物抗原共同作用导致FA,TIM4参与FA的发生.消除TIM4的表达可明显抑制Th2细胞分化,有效纠正Th1/Th2细胞失衡,可阻止过敏性免疫反应.

关键词： TIM蛋白树突状细胞 Th2细胞食物过敏金黄色葡萄球菌肠毒素B 卵清蛋白

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益生菌对消化系统疾病的治疗作用

益生菌对消化系统疾病的治疗作用

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