目的探讨虎杖苷调节蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(Akt/mTOR)通路对胰腺癌细胞凋亡和自噬的影响。方法将人胰腺癌PANC-1细胞分为对照组、虎杖苷(100、200、300μmol/L)组、SC79组、虎杖苷+SC79组。CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;单丹磺酰尸胺(MDC)染色检测细胞中自噬小体阳性率;免疫荧光染色检测细胞中微管相关蛋白1轻链3(LC3)阳性率;q RT-PCR检测细胞中Bcl-2关联X蛋白(Bax)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Beclin1、p62 m RNA表达;Western blotting检测细胞中LC3、Beclin1、p62、p-Akt、p-mTOR蛋白相对表达量。结果与对照组比较,虎杖苷各剂量组PANC-1细胞活力、p62蛋白和m RNA相对表达水平、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR显著降低,细胞凋亡率、自噬小体阳性率、LC3阳性率、Bax、Caspase-3、Beclin1 mRNA表达及LC3-II/LC3-I、Beclin1蛋白相对表达量显著升高,且呈剂量相关性(P<0.05)。与虎杖苷300μmol/L组比较,虎杖苷+SC79组PANC-1细胞活力、p62蛋白和m RNA相对表达水平、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR显著升高,细胞凋亡率、自噬小体阳性率、LC3阳性率、Bax、Caspase-3、Beclin1 m RNA表达及LC3-II/LC3-I、Beclin1蛋白相对表达水平显著降低(P<0.05)。结论虎杖苷诱导PANC-1细胞自噬与凋亡的机制可能与抑制Akt/mTOR通路有关。
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