检索结果-内蒙古大学图书馆

安徽医科大学学报 2023年第4期58卷 637-642页

作者：林燕妮吴淑蒙任鑫鑫谢天李玲叶棋浓山西医科大学基础医学院生物学教研室太原030000 军事科学院军事医学研究院生物工程研究所细胞工程研究室北京100850

目的分析核Dbf2相关激酶1(NDR1)在肝癌中的表达和临床预后的意义,探究NDR1在肝癌细胞中的生物学功能及其调控机制。方法利用ENCORI数据库分析NDR1在肝癌组织及正常组织中的表达水平及其与肝癌患者生存率的关系。构建MYC-NDR1真核表达... 详细信息

目的分析核Dbf2相关激酶1(NDR1)在肝癌中的表达和临床预后的意义,探究NDR1在肝癌细胞中的生物学功能及其调控机制。方法利用ENCORI数据库分析NDR1在肝癌组织及正常组织中的表达水平及其与肝癌患者生存率的关系。构建MYC-NDR1真核表达载体,转染肝癌HepG2细胞,通过蛋白质印迹法(Western blot)验证其表达;利用CCK-8法、细胞克隆形成实验和划痕实验分别检测细胞增殖和迁移能力。利用ENCORI数据库分析NDR1与c-Myc表达的相关性,并利用蛋白质合成抑制剂环己酰亚胺(CHX)加药实验研究NDR1与c-Myc蛋白的关系。结果 ENCORI数据库分析显示,NDR1在肝癌组织中的表达高于正常组织且NDR1高表达患者总生存率低于低表达患者,差异有统计学意义(P<0.001);Western blot检测到MYC-NDR1蛋白条带;CCK-8法结果显示,MYC-NDR1组细胞生长速度快于空载体组(P<0.001);细胞克隆形成实验显示,MYC-NDR1组的克隆数高于空载体组(P<0.001);细胞划痕实验显示,MYC-NDR1组平均迁移距离大于空载体组(P<0.001);ENCORI数据库分析显示,NDR1与c-Myc表达有着相关性(R=0.184,P<0.001);CHX加药实验显示,在相同时间内,MYC-NDR1组中c-Myc蛋白的减少量低于空载体组。结论 NDR1在肝癌组织中高表达,与肝癌患者预后不良紧密相关,并与c-Myc基因的表达呈正相关;该研究成功构建了MYC-NDR1真核表达载体,表达产物MYC-NDR1能够增加c-Myc蛋白的稳定性,促进人肝癌细胞增殖和迁移。

关键词： NDR1 真核表达载体肝癌 c-Myc

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真核表达的人Y盒结合蛋白1(YB-1)促进人HepG2肝癌细胞的增殖和迁移

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第11期38卷 986-991页

作者：石烟祝葛祥伟蒋琦炜谢天米月宋松泽张德宇叶棋浓贵州大学医学院贵州贵阳550025 军事医学研究院生物工程研究所细胞工程研究室北京100850 解放军总医院第二医学中心肿瘤内科北京100853 锦州医科大学辽宁锦州121000

目的构建带有FLAG标签的Y盒结合蛋白1(YB-1)真核表达载体,转染至HepG2肝癌细胞探究YB-1对肝癌细胞增殖和迁移的影响。方法以人卵巢文库为模板并采用PCR扩增出YB-1基因片段,经双酶切后与pcDNA3.0-FLAG载体连接,构建pcDNA3.0-FLAG-YB-1真... 详细信息

目的构建带有FLAG标签的Y盒结合蛋白1(YB-1)真核表达载体,转染至HepG2肝癌细胞探究YB-1对肝癌细胞增殖和迁移的影响。方法以人卵巢文库为模板并采用PCR扩增出YB-1基因片段,经双酶切后与pcDNA3.0-FLAG载体连接,构建pcDNA3.0-FLAG-YB-1真核表达载体;将其转染至HepG2细胞,通过Western blot法验证YB-1在HepG2细胞的表达;CCK-8法和集落形成实验验证YB-1对HepG2细胞生长的影响;划痕实验验证YB-1对HepG2细胞迁移的影响。结果成功构建出pcDNA3.0-FLAG-YB-1真核重组表达载体,且能在HepG2细胞中表达YB-1蛋白;YB-1能够促进HepG2细胞的增殖和迁移。结论YB-1促进HepG2细胞的增殖和迁移。

关键词： Y盒结合蛋白1(YB-1) 真核表达载体 HepG2肝癌细胞癌细胞细胞生物学细胞增殖细胞迁移

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纳米SiC基光催化剂研究进展

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物理化学学报 2022年第11期38卷 21-44页

作者：何科林沈荣晨郝磊李佑稷张鹏江吉周李鑫华南农业大学生物质工程研究院农业部能源植物资源与利用重点实验室广州510642 吉首大学化学化工学院湖南吉首416000 郑州大学材料科学与工程学院低碳环保材料智能设计国际联合研究中心郑州450001 武汉工程大学环境生态与生物工程学院武汉430205

工业化无疑促进了经济的发展,提高了生活水平,但也导致了一些问题,包括能源危机、环境污染、全球变暖等,其中这些所产生问题主要是由燃烧煤炭、石油和天然气等化石燃料引起的。光催化技术具有利用太阳能将二氧化碳转化为碳氢化合物燃料... 详细信息

工业化无疑促进了经济的发展,提高了生活水平,但也导致了一些问题,包括能源危机、环境污染、全球变暖等,其中这些所产生问题主要是由燃烧煤炭、石油和天然气等化石燃料引起的。光催化技术具有利用太阳能将二氧化碳转化为碳氢化合物燃料、从水中制氢、降解污染物等优点,从而在解决能源危机的同时避免环境污染,因此被认为是解决这些问题的最有潜力的技术之一。在各种光催化剂中,碳化硅(SiC)由于其优良的电学性能和光电化学性质,在光催化、光电催化、电催化等领域具有广阔的应用前景。本文首先系统地阐述了各种SiC的合成方法,具体包括模板生长法、溶胶凝胶法、有机前驱物热解法、溶剂热合成法、电弧放电法,碳热还原法和静电纺丝等方法。然后详细地总结了提升SiC光催化活性的各种改性策略,如元素掺杂、构建Z型(S型)体系、负载助催化剂、可见光敏化、构建半导体异质结、负载炭材料、构建纳米结构等。最后重点论述了半导体的光催化机理以及SiC复合物在光催化产氢、污染物降解和CO_(2)还原等领域的应用研究进展,并提出了前景展望。

关键词：碳化硅光催化光催化析氢光催化降解光催化CO_(2)还原

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C-myc对Erastin诱导肝癌细胞铁死亡的影响

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军事医学 2022年第7期46卷 524-529页

作者：陈静漪张德宇武建强内蒙古医科大学呼和浩特010059 军事科学院军事医学研究院生物工程研究所细胞工程研究室北京100850

目的通过生物信息学筛选肝癌细胞铁死亡潜在药物靶点,并实验验证和检测靶点抑制剂与铁死亡诱导剂Erastin联合用药的效果。方法利用高通量基因表达数据库(GEO)数据(GSE104462)进行基因富集分析,探索肝癌细胞中Erastin诱导的铁死亡相关通... 详细信息

目的通过生物信息学筛选肝癌细胞铁死亡潜在药物靶点,并实验验证和检测靶点抑制剂与铁死亡诱导剂Erastin联合用药的效果。方法利用高通量基因表达数据库(GEO)数据(GSE104462)进行基因富集分析,探索肝癌细胞中Erastin诱导的铁死亡相关通路。在肝癌细胞系SK-Hep-1中利用验证性CCK-8、细胞凋亡以及划痕实验探究C-myc及其抑制剂10074-G5对肝癌SK-Hep-1细胞铁死亡的影响。结果基因富集分析发现,相比于对照组,Erastin诱导铁死亡时肝癌细胞中C-myc信号通路基因显著下调性富集;验证性CCK-8实验表明,C-myc过表达可减弱肝癌SK-Hep-1细胞对Erastin诱导铁死亡的敏感性,而10074-G5增强其敏感性;细胞凋亡、划痕实验表明,联用抑制剂10074-G5可增强Erastin对肝癌细胞的杀伤和迁移抑制作用;且C-myc过表达可部分消除Erastin诱导升高的二价铁离子,抑制剂10074-G5可增强Erastin诱导升高的二价铁离子。结论C-myc信号对肝癌细胞铁死亡起抑制性作用,联用C-myc抑制剂可显著增强诱导肝癌细胞铁死亡的敏感性。

关键词： C-myc 铁死亡癌,肝细胞 SK-Hep-1细胞细胞凋亡生物信息学

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脊髓小脑性共济失调2两家系致病基因及临床特点

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中国实用神经疾病杂志 2024年第1期27卷 15-19页

作者：周海涛牛宇杰刘德全潘社红任向阳李玉林王云龙郑州大学附属洛阳中心医院河南洛阳471009 郑州大学附属洛阳中心医院中心实验室河南洛阳471009 河南省肿瘤细胞免疫与再生医学国际联合实验室河南洛阳471009 洛阳市第九人民医院河南洛阳471009 河南省生物工程技术研究中心河南郑州450001

目的分析洛阳地区两个脊髓小脑性共济失调(SCAs)家系的致病基因及临床特点。方法收集先证者及其家系成员的临床资料。提取外周静脉血DNA,采用聚合酶链反应(PCR)结合琼脂糖凝胶电泳技术对两个家系先证者进行SCA1、2、3、6、7、12、17和DR... 详细信息

目的分析洛阳地区两个脊髓小脑性共济失调(SCAs)家系的致病基因及临床特点。方法收集先证者及其家系成员的临床资料。提取外周静脉血DNA,采用聚合酶链反应(PCR)结合琼脂糖凝胶电泳技术对两个家系先证者进行SCA1、2、3、6、7、12、17和DRPLA亚型的筛选。亚型初步确定后对目的片段进行Sanger测序,得到确认后对家系其他成员进行验证。结果家系1和家系2先证者经检测均为SCA2亚型,致病等位基因CAG重复次数分别为44和38次,随后的家系验证结果显示家系1中检测到致病基因携带者3人,家系2中检测到致病基因携带者1人。先证者均以行走不稳为主要症状,部分成员伴言语不清、记忆力下降。结论联合应用PCR和Sanger测序方法确诊了洛阳地区两个SCA2家系,家族性的行走不稳是其主要临床特点。

关键词：脊髓小脑性共济失调聚合酶链反应 Sanger测序 SCA2亚型临床特点行走不稳

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癌症中长非编码RNA与RNA结合蛋白相互作用的新见解

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癌症 2024年第12期43卷 563-588页

作者：姚紫婷杨彦铭孙淼淼何妍廖龙陈奎生李斌暨南大学肿瘤分子生物学教育部重点实验室功能蛋白质研究广东普通高校重点实验室生命与健康工程研究院广东广州510632 郑州大学第一附属医院病理学系河南省肿瘤病理重点实验室河南郑州450001 暨南大学肿瘤分子生物学教育部重点实验室广东省生物工程药物重点实验室基因工程药物国家工程研究中心生物医学研究所生命科学与技术学院广东广州510632 广州医科大学附属第五医院广东高校生物靶向诊治与康复重点实验室呼吸疾病全国重点实验室广东广州510700

近年来,随着蛋白质组学和表观遗传学的发展,大量RNA结合蛋白(RNA-binding Proteins,RBPs)被发现,长非编码RNAs(long non-coding RNAs,lncRNAs)和RBPs之间的相互作用也受到越来越多关注。深入开展lncRNA-RBP互作网络研究至关重要,尤其是... 详细信息

近年来,随着蛋白质组学和表观遗传学的发展,大量RNA结合蛋白(RNA-binding Proteins,RBPs)被发现,长非编码RNAs(long non-coding RNAs,lncRNAs)和RBPs之间的相互作用也受到越来越多关注。深入开展lncRNA-RBP互作网络研究至关重要,尤其是考虑到它在癌症发生发展中的作用。越来越多证据表明,lncRNA-RBP相互作用在癌症进展中起到非常重要的作用;因此,靶向这种相互作用可以为抗癌药物发现提供新的见解。本综述中,我们讨论了lncRNAs如何通过与RBPs互作而调节其定位、修饰、稳定性和活性,并讨论了RBPs对lncRNAs稳定性、转运、转录和定位的影响。同时,我们探讨了这种相互作用对lncRNAs、RBPs以及癌症发展相关下游通路的调节和影响,如lncRNA N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰。此外,我们讨论了lncRNA-RBP互作网络如何调节增殖、凋亡、转移、耐药、免疫、肿瘤微环境和代谢等癌症细胞表型。进一步地,我们总结了靶向lncRNA-RBP互作网络治疗策略的进展。虽然这些疗法还在实验阶段,多种理论和过程仍在研究中,但我们相信这些策略可能为癌症治疗提供新的思路。

关键词：癌症表观遗传学癌症相互作用网络 lncRNA-RBP 长非编码RNA RNA结合蛋白治疗策略

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细胞自噬与肿瘤发生发展

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军事医学 2021年第3期45卷 234-240,F0003页

作者：蒋琦炜张德宇石烟祝葛祥伟谢天叶棋浓军事科学院军事医学研究院生物工程研究所细胞工程研究室北京100850 贵州大学医学院贵阳550025 解放军总医院第二医学中心肿瘤内科北京100853

自噬是真核生物中一种高度保守的胞内降解途径。其主要通过溶酶体或液泡进行饥饿状态下的营养动员,清除受损蛋白质、细胞器和胞内病原体。自噬主要包括巨自噬、分子伴侣介导自噬(CMA)和微自噬。自噬已被证实与多种人类疾病相关,其在肿... 详细信息

自噬是真核生物中一种高度保守的胞内降解途径。其主要通过溶酶体或液泡进行饥饿状态下的营养动员,清除受损蛋白质、细胞器和胞内病原体。自噬主要包括巨自噬、分子伴侣介导自噬(CMA)和微自噬。自噬已被证实与多种人类疾病相关,其在肿瘤发生发展中具有重要意义。近年研究中,对于自噬和肿瘤关系有了进一步的认识,该文就自噬分子机制、调控通路以及与肿瘤发生发展关系的研究进展作一综述。

关键词：自噬肿瘤巨自噬分子伴侣介导自噬微自噬

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SLC25A5基因真核表达载体的构建及其功能验证

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军事医学 2020年第12期44卷 926-929,946页

作者：亢小峰霍楠丛瑞马路园初众唐枝孙志佳贾松浩刘含笑徐小洁张萍哈尔滨医科大学大庆校区医学检验与技术学院黑龙江大庆163319 军事科学院军事医学研究院生物工程研究所细胞工程研究室北京100850

目的构建SLC25A5基因的真核表达载体,同时验证该基因与肝癌细胞生长之间的关系。方法以人乳腺文库为模板,采用PCR技术扩增出SLC25A5的CDS区编码序列,应用双酶切将PCR产物插入到带Flag标签的pCMV-Tag2B载体上,酶切和测序验证后转染到人肝... 详细信息

目的构建SLC25A5基因的真核表达载体,同时验证该基因与肝癌细胞生长之间的关系。方法以人乳腺文库为模板,采用PCR技术扩增出SLC25A5的CDS区编码序列,应用双酶切将PCR产物插入到带Flag标签的pCMV-Tag2B载体上,酶切和测序验证后转染到人肝癌HepG2细胞中,通过Western印迹检测其表达情况,CCK-8法、克隆形成实验测定其对肝癌HepG2细胞生长的影响。结果双酶切结果显示,pCMV-Tag2B-Flag-SLC25A5真核表达载体构建成功;提取质粒转染人肝癌HepG2细胞;Western印迹技术验证该基因蛋白成功表达;CCK-8法和克隆形成实验证明过表达pCMV-Tag2B-Flag-SLC25A5促进肝癌HepG2细胞增殖。结论pCMV-Tag2B-Flag-SLC25A5真核表达载体构建成功,并证明其可促进肝癌细胞增殖,为进一步研究SLC25A5在肝癌中的发生发展作用奠定了基础。

关键词： SLC25A5基因癌,肝细胞 HepG2 真核表达细胞增殖

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透明质酸介导运动受体真核表达载体的构建及其对乳腺癌增殖和迁移的影响

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军事医学 2021年第3期45卷 161-165页

作者：石烟祝陈静漪蒋琦炜葛祥伟谢天杨子荣张德宇叶棋浓贵州大学医学院军事科学院军事医学研究院生物工程研究所细胞工程研究室内蒙古医科大学解放军总医院第二医学中心肿瘤内科

目的构建透明质酸介导运动受体(HMMR)真核表达重组质粒并在乳腺癌ZR75-1细胞中转染和鉴定,探究HMMR对乳腺癌细胞生长、增殖和迁移的影响。方法采用PCR技术以人乳腺文库为模板扩增HMMR基因并与pcDNA3.0-FLAG载体在EcoRⅤ和XhoⅠ酶切位点... 详细信息

目的构建透明质酸介导运动受体(HMMR)真核表达重组质粒并在乳腺癌ZR75-1细胞中转染和鉴定,探究HMMR对乳腺癌细胞生长、增殖和迁移的影响。方法采用PCR技术以人乳腺文库为模板扩增HMMR基因并与pcDNA3.0-FLAG载体在EcoRⅤ和XhoⅠ酶切位点进行连接,构建真核表达载体(pcDNA3.0-FLAG-HMMR),并转染乳腺癌ZR75-1细胞;通过Western印迹法、CCK8实验和克隆形成检测HMMR基因表达对ZR75-1生长的影响,划痕实验验证真核表达载体对ZR75-1细胞迁移的影响。结果经酶切鉴定及序列测序验证真核重组表达载体构建成功,并在ZR75-1细胞中表达;并且发现HMMR对ZR75-1细胞的增殖和迁移具有显著的促进作用。结论构建的真核表达载体转染至ZR75-1细胞后,明显促进ZR75-1增殖和迁移,这为研究HMMR基因在乳腺癌发生发展机制奠定了基础。

关键词：透明质酸介导运动受体真核表达载体聚合酶链反应乳腺肿瘤 ZR75-1

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稳定低表达乳酸脱氢酶A对HepG2和ZR-75-1细胞糖代谢、增殖和迁移的影响

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军事医学 2021年第12期45卷 896-902页

作者：蒋琦炜石烟祝陈静漪葛祥伟谢天张德宇叶棋浓军事科学院军事医学研究院生物工程研究所细胞工程研究室北京100850 贵州大学医学院贵阳550025 内蒙古医科大学呼和浩特010059 解放军医学院北京100853

目的通过构建乳酸脱氢酶A(LDHA)稳定低表达的HepG2和ZR-75-1细胞系,观察LDHA表达降低对肝癌细胞HepG2和乳腺癌细胞ZR-75-1糖代谢、增殖、迁移的影响。方法采用慢病毒介导的LDHA-shRNA载体,将新构建质粒转染至HEK293T细胞中检测抑制效果... 详细信息

目的通过构建乳酸脱氢酶A(LDHA)稳定低表达的HepG2和ZR-75-1细胞系,观察LDHA表达降低对肝癌细胞HepG2和乳腺癌细胞ZR-75-1糖代谢、增殖、迁移的影响。方法采用慢病毒介导的LDHA-shRNA载体,将新构建质粒转染至HEK293T细胞中检测抑制效果,实时定量PCR检测LDHA mRNA水平,Western印迹检测蛋白水平。对经嘌呤霉素筛选后感染慢病毒的稳定低表达LDHA的HepG2和ZR-75-1细胞进行功能测定,利用糖代谢相关试剂盒检测敲低后肿瘤细胞中糖摄取、三磷酸腺苷(ATP)、乳酸脱氢酶(LDH)、乳酸水平;利用生长曲线实验和克隆形成实验检测LDHA基因表达降低对细胞增殖的影响;利用划痕实验检测LDHA表达降低对细胞迁移能力的影响。结果实时定量PCR及Western印迹结果显示,LDHA表达在mRNA水平及蛋白水平上均受到了抑制;糖代谢相关试剂盒检测结果表明稳定低表达LDHA的肿瘤细胞中糖摄取、ATP水平、LDH和乳酸水平均明显下降;生长曲线实验(CCK-8法)和克隆形成实验显示,慢病毒介导的LDHA shRNA能明显抑制肿瘤细胞的增殖;划痕实验显示,敲低LDHA后HepG2和ZR-75-1细胞迁移能力受到了明显抑制。结论 LDHA表达降低可明显抑制肿瘤细胞中糖摄取、ATP、LDH和乳酸水平并且抑制肿瘤细胞的增殖和迁移。

关键词：乳酸脱氢酶A shRNA HepG2 ZR-75-1 糖代谢细胞增殖和迁移

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