检索结果-内蒙古大学图书馆

动物营养学报 2025年第2期37卷 1260-1270页

作者：张照杰韩一铭高宇凤任晓丽宋超李志娟李洪政石冬梅贾雨婷姬中豪皇甫和平王金明山西农业大学动物医学学院太谷030801 河南牧业经济学院动物医药学院郑州450046 郑州市动物营养代谢病与中毒病重点实验室郑州450046 商丘美兰生物工程有限公司商丘476299 河南国康检测技术有限公司郑州450001

本试验旨在探究添加不同剂量枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)对黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))致羊人工瘤胃异常发酵的影响。试验以全混合日粮(TMR)为发酵底物,采用单因素试验设计,分为7个组,包括对照组(NC组)、AFB_(1)组和5个试验组,其中N... 详细信息

本试验旨在探究添加不同剂量枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)对黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))致羊人工瘤胃异常发酵的影响。试验以全混合日粮(TMR)为发酵底物,采用单因素试验设计,分为7个组,包括对照组(NC组)、AFB_(1)组和5个试验组,其中NC组添加1 mL甲醇,AFB_(1)组添加1 mL 10μg/mL的AFB_(1),试验组分别同时添加1 mL 10μg/mL的AFB_(1)和0.01%、0.03%、0.06%、0.12%、0.24%的枯草芽孢杆菌制剂,每组3个重复。试验当天随机收集3只屠宰羊的新鲜瘤胃液,按照试验设计在39℃条件下培养4、8、12、24和48 h,记录pH和产气量,测定氨态氮(NH_(3)-N)、微生物蛋白(MCP)和挥发性脂肪酸(VFA)含量,并利用荧光定量PCR检测微生物区系。结果表明:1)发酵24 h时,AFB_(1)组产气量与NC组相比显著降低(P<0.05),0.03%组产气量与AFB_(1)组相比极显著升高(P<0.01)。2)发酵24 h时,各组发酵液pH均无显著差异(P>0.05)。AFB_(1)组NH_(3)-N和MCP含量低于NC组,但无显著差异(P>0.05);0.03%组NH_(3)-N和MCP含量与AFB_(1)组相比极显著升高(P<0.01)。3)发酵24 h时,AFB_(1)组发酵液各VFA含量在数值上均低于NC组,其中异丁酸含量与NC组相比显著降低(P<0.05);0.03%组乙酸、丁酸和总挥发性脂肪酸(TVFA)与AFB_(1)组相比极显著提高(P<0.01),丙酸和异丁酸含量与AFB_(1)组相比显著提高(P<0.05)。4)与NC组相比,AFB_(1)组产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)、嗜淀粉瘤胃杆菌(Ruminobacter amylophilus)和原虫相对丰度极显著降低(P<0.01),溶纤维丁酸弧菌(Butyrivibrio fibrisolvens)和栖瘤胃普雷沃氏菌(Prevotella ruminicola)相对丰度显著降低(P<0.05)。与AFB_(1)组相比,0.03%组白色瘤胃球菌(Ruminococcus albus)、黄色瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens)、栖瘤胃普雷沃氏菌和产甲烷菌相对丰度显著提高(P<0.05),溶纤维丁酸弧菌、嗜淀粉瘤胃杆菌和原虫相对丰度极显著提高(P<0.01)。综上所述,AFB_(1)会降低体外发酵瘤胃产气量以及NH_(3)-N、MCP和VFA含量,同时抑制瘤胃微生物活性;饲粮中添加0.03%枯草芽孢杆菌可以有效缓解AFB_(1)致羊人工瘤胃发酵的抑制作用,促进瘤胃发酵。

关键词：枯草芽孢杆菌黄曲霉毒素B_(1) 瘤胃体外发酵微生物区系

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黄曲霉毒素B1激活核转录因子-κB信号通路引起牛乳腺上皮细胞发生炎性反应

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动物营养学报 2023年第7期35卷 4587-4595页

作者：任晓丽皇甫和平王军靳双星王俊东石冬梅河南牧业经济学院动物医药学院郑州市动物营养代谢病与中毒病重点实验室郑州450046

本试验旨在研究不同浓度黄曲霉毒素B1(AFB1)对牛乳腺上皮细胞(MAC-T细胞)中核转录因子-κB(NF-κB)信号通路介导的炎症反应的影响。向MAC-T细胞中分别加入不同浓度的AFB1处理培养液培养24 h,分析AFB1对MAC-T细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)... 详细信息

本试验旨在研究不同浓度黄曲霉毒素B1(AFB1)对牛乳腺上皮细胞(MAC-T细胞)中核转录因子-κB(NF-κB)信号通路介导的炎症反应的影响。向MAC-T细胞中分别加入不同浓度的AFB1处理培养液培养24 h,分析AFB1对MAC-T细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)活性、促炎细胞因子含量和基因表达以及NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响。结果显示:1)与对照组相比,2.5、5.0、10.0和20.0μmol/L AFB1处理MAC-T细胞均能显著或极显著降低细胞活力(P<0.05或P<0.01),显著或极显著升高培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性(P<0.05或P<0.01),且呈剂量依赖性。2)与对照组(0μmol/L AFB1)相比,5.0、10.0和20.0μmol/L AFB1处理MAC-T细胞使上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01);5.0μmol/L AFB1处理使MAC-T细胞中IL-1β、IL-8和TNF-αmRNA的相对表达量显著或极显著升高(P<0.05),10.0μmol/L AFB1处理使MAC-T细胞中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-αmRNA的相对表达量显著或极显著升高(P<0.01),20.0μmol/L AFB1处理使MAC-T细胞中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-αmRNA的相对表达量极显著升高(P<0.01)。3)与对照组相比,10.0和20.0μmol/L AFB1处理使MAC-T细胞中磷酸化P65(p-P65)、磷酸化核转录因子-κB抑制因子α(p-IκBα)蛋白的相对表达量极显著升高(P<0.01)。上述结果提示,AFB1通过促进炎症相关因子表达和激活NF-κB信号通路,引起MAC-T细胞发生炎性反应。

关键词：黄曲霉毒素B1 牛乳腺上皮细胞 NF-κB信号通路炎性反应

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AFB1抑制NrF2信号通路诱导牛乳腺上皮细胞抗氧化应激

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中国兽医学报 2023年第11期43卷 2287-2292页

作者：任晓丽皇甫和平杨东辉宋予震王俊东石冬梅河南牧业经济学院动物医药学院郑州市动物营养代谢病与中毒病重点实验室河南郑州450046

利用不同浓度的黄曲霉毒素B1(aflatoxinB1,AFB1)作用于牛乳腺上皮细胞(MAC-T)培养24 h后,通过相关检测试剂盒检测细胞内氧化损伤标志物活性氧(reacive oxygen species,ROS)、总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧... 详细信息

利用不同浓度的黄曲霉毒素B1(aflatoxinB1,AFB1)作用于牛乳腺上皮细胞(MAC-T)培养24 h后,通过相关检测试剂盒检测细胞内氧化损伤标志物活性氧(reacive oxygen species,ROS)、总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、总抗氧化能力(total antioxidation capability,T-AOC)的活性;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerasechain reaction,RT-qPCR)方法检测核因子E2相关因子(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,NrF2)、血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)和NAD(P)H醌氧化还原酶(NAD(P)H quinone oxidoreductase 1,NQO-1)的mRNA相对表达水平;利用蛋白免疫印迹(Western blot)试验检测NrF-2、HO-1和NQO-1的蛋白相对表达水平。结果显示,与0μmol/L相比,10,20μmol/L AFB1处理组显著升高MAC-T细胞内ROS和MDA的含量,降低SOD、T-AOC和GSH-Px的活性。RT-qPCR结果显示,与0μmol/L组相比,不同浓度AFB1组显著下调MAC-T细胞中NrF2、HO-1、NQO-1的mRNA表达水平。Western blot结果显示,10μmol/L AFB1组MAC-T细胞中NrF2、HO-1、NQO-1的蛋白表达水平显著低于0μmol/L组。结果表明,AFB1通过抑制NrF2信号通路诱导牛乳腺上皮(MAC-T)细胞发生氧化应激性损伤。

关键词： AFB1 MAC-T 抗氧化功能 NrF-2信号通路

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槲皮素通过Nrf2信号通路缓解LPS诱导的牛乳腺上皮细胞氧化应激

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中国兽医学报 2023年第12期43卷 2590-2596页

作者：任晓丽皇甫和平米俊宪宋予震靳双星王俊东石冬梅河南牧业经济学院动物医药学院郑州市动物营养代谢病与中毒病重点实验室河南郑州450046

旨在探究槲皮素(quercetin,QU)通过Nrf2信号通路对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的牛乳腺上皮细胞氧化应激的作用及其机制。以牛乳腺上皮细胞系MAC-T细胞为研究对象,用2.5、5.0和10.0μmol/L QU预处理MAC-T细胞12 h后加入1 mg/L ... 详细信息

旨在探究槲皮素(quercetin,QU)通过Nrf2信号通路对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的牛乳腺上皮细胞氧化应激的作用及其机制。以牛乳腺上皮细胞系MAC-T细胞为研究对象,用2.5、5.0和10.0μmol/L QU预处理MAC-T细胞12 h后加入1 mg/L LPS处理12 h后;利用试剂盒分别检测LDH活性、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、脂质过氧化物丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性。Western blot和RT-qPCR方法分别检测核转录因子Nrf2相关因子(nuclear factor E2-related factor,Nrf2)、血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)和醌氧化还原酶NADH1(NADPH quinone oxidoreductase 1,NQO1)基因和蛋白表达变化。结果显示,与对照组相比,1 mg/L LPS组中ROS和MDA的含量显著升高(P<0.05),SOD、GSH-Px和CAT活性显著降低(P<0.05),Nrf2、HO-1和NQO1基因和蛋白相对表达水平显著降低(P<0.05);与LPS组相比,QU预处理能显著降低ROS和MDA的含量(P<0.05),而SOD和GSH-px活性显著升高,且呈剂量依赖性;此外,QU+LPS组能显著上调MAC-T细胞内Nrf2、HO-1和NQO1基因和蛋白相对表达水平(P<0.05)。结果表明,QU通过激活Nrf2信号通路缓解LPS诱导的牛乳腺上皮细胞的氧化应激。

关键词：槲皮素 LPS MAC-T细胞氧化应激 Nrf2信号通路

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某奶牛场饲用玉米霉菌毒素的检测及霉菌的分离鉴定

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黑龙江畜牧兽医 2022年第18期 105-110,144页

作者：李新锋郭净邑赵盼盼郭建来常选妞刘昆唐桂芬贾卫军兰尊海向瑞平薛通通杨建平河南牧业经济学院河南省非常规饲料资源创新利用重点实验室/郑州市动物营养代谢病与中毒病重点实验室郑州450046

为了解某奶牛场饲用玉米中霉菌的污染情况,试验多次、多点采集饲用玉米样品5份,采用ELISA法测定样品中黄曲霉毒素B(aflatoxin B, AFB)、呕吐毒素(deoxynivalenol, DON)、玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEN)、赭曲霉毒素A(ochratoxin A, OTA... 详细信息

为了解某奶牛场饲用玉米中霉菌的污染情况,试验多次、多点采集饲用玉米样品5份,采用ELISA法测定样品中黄曲霉毒素B(aflatoxin B, AFB)、呕吐毒素(deoxynivalenol, DON)、玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEN)、赭曲霉毒素A(ochratoxin A, OTA)的含量,并分离样品中的霉菌,通过形态观察、PCR扩增和系统发育分析对其进行鉴定。结果表明:5份样品中AFB、DON、ZEN的检出率均为100%,OTA均未检出,其中1份样品中AFB含量超过国家限量标准,超标率为20%;DON和ZEN在所有样品中均未超标。经形态观察、PCR扩增和系统发育分析,最终从饲用玉米样品中鉴定出三种霉菌,即黄曲霉菌、索状青霉菌和增殖镰刀菌。说明该奶牛场饲用玉米饲料受到了黄曲霉菌、索状青霉菌、增殖镰刀菌所产生的多种霉菌毒素的污染。

关键词：饲用玉米霉菌毒素霉菌分离鉴定

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益母生化散对LPS诱导的小鼠子宫内膜炎血清激素和TLR4/NF-κB信号通路相关因子的影响

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饲料研究 2024年第14期47卷 94-99页

作者：任晓丽孙苗芸王峰周亚楠石冬梅河南牧业经济学院动物医药学院、郑州市动物营养代谢病与中毒病重点实验室河南郑州450046 河南省康星药业股份有限公司河南郑州450046

试验旨在探究益母生化散对子宫内膜炎模型小鼠血清激素水平和Toll样受体4/核转录因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路相关因子表达水平的影响。选取日龄、体型、体重相近的雌性小鼠40只,随机分为4组,每组10个重复,每个重复1只。对照组小鼠子... 详细信息

试验旨在探究益母生化散对子宫内膜炎模型小鼠血清激素水平和Toll样受体4/核转录因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路相关因子表达水平的影响。选取日龄、体型、体重相近的雌性小鼠40只,随机分为4组,每组10个重复,每个重复1只。对照组小鼠子宫灌注20μL生理盐水,模型组子宫灌注25μL脂多糖(LPS,1 g/L),药物组灌胃2.0 g/kg益母生化散,治疗组子宫灌注25μL LPS+2.0 g/kg益母生化散灌胃,连续灌胃3 d,2次/d。利用放射免疫分析法检测血清中雌二醇(E2)、孕酮(Pg)、促黄体生成素(LH)和促卵泡生成素(FSH)含量,ELISA方法检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-α)含量,RT-PCR方法检测TLR4/NF-κB信号通路相关因子Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子(MyD88)、核因子-κB p65(NF-κBp65)、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-αmRNA的表达。结果显示:与对照组相比,模型组血清E2、LH和FSH含量明显降低,而Pg含量升高,IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α的分泌量及其mRNA基因表达量明显升高,TLR4、MyD88、NF-κBp65 mRNA的表达明显上调;与模型组相比,治疗组血清E2、LH和FSH含量明显升高,Pg含量降低,IL-6、IL-8、IL-1β和TNF-α的分泌量及其mRNA基因表达明显降低,TLR4、MyD88、NF-κBp65 mRNA的表达量明显下调。研究表明,益母生化散通过调节激素含量和抑制TLR4/NF-κB信号通路相关因子水平的变化,对LPS诱导的小鼠子宫内膜炎起到缓解作用。

关键词：小鼠益母生化散子宫内膜炎激素 TLR4/NF-κB信号通路

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姜黄素通过抑制内质网应激介导的凋亡和炎症减轻氟化钠引起的大鼠脾脏损伤

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中国兽医学报 2023年第3期43卷 577-583页

作者：宋超张爱国胡佩佩杨昆刘玲玲米俊宪王艳君王俊东石冬梅河南牧业经济学院动物医药学院郑州市动物营养代谢病与中毒病重点实验室河南郑州450000 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司广东肇庆526000

为探究姜黄素对氟化钠(NaF)致大鼠脾脏损伤的保护作用及其可能作用机制,通过饮水方式构建染氟模型,NaF添加量为150 mg/L。将60只雄性健康SD大鼠随机分为对照组和3个处理组(NaF组,Ⅰ组;NaF+50 mg/kg姜黄素组,Ⅱ组;NaF+100 mg/kg姜黄素组... 详细信息

为探究姜黄素对氟化钠(NaF)致大鼠脾脏损伤的保护作用及其可能作用机制,通过饮水方式构建染氟模型,NaF添加量为150 mg/L。将60只雄性健康SD大鼠随机分为对照组和3个处理组(NaF组,Ⅰ组;NaF+50 mg/kg姜黄素组,Ⅱ组;NaF+100 mg/kg姜黄素组,Ⅲ组)。处理3个月后,收集脾脏,通过苏木素伊红染色观察脾脏病理学变化,原位末端转移酶标记(TUNEL)和免疫组化检测细胞凋亡,荧光定量PCR和酶联免疫吸附试验检测炎症因子表达,免疫印迹检测内质网应激相关蛋白表达。结果显示,姜黄素减弱了NaF引起的脾脏损伤;与Ⅰ组相比,Ⅱ、Ⅲ组TUNEL阳性细胞数和活化的胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)水平均明显降低(P<0.05或P<0.01);此外,姜黄素显著降低NaF引起的脾脏白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平升高,与Ⅰ组相比有显著差异(P<0.05或P<0.01);与Ⅰ组相比,Ⅱ、Ⅲ组大鼠组脾脏中葡萄糖调控蛋白78(GRP78)、磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(p-PERK)、磷酸化真核生物起始因子2α(p-eIF2α)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、激活型胱天蛋白酶12(cleaved caspase-12)和核因子κB(NF-κB)水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。结果表明,姜黄素能降低NaF引起的大鼠脾脏损伤,其保护机制可能与抑制内质网应激诱导的凋亡和炎症反应有关。

关键词：姜黄素脾脏氟化钠内质网应激凋亡炎症

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人工瘤胃模拟装置发酵内环境变化规律研究

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家畜生态学报 2023年第5期44卷 52-58页

作者：皇甫和平徐梓明宋超任晓丽石冬梅董青河南牧业经济学院动物医药学院河南郑州450046 上海海洋大学水产与生命学院上海201306 河南省非常规饲料资源创新利用重点实验室河南郑州450046 郑州市动物营养代谢病与中毒病重点实验室河南郑州450046

为了解人工瘤胃模拟装置发酵内环境变化规律,将新鲜采集的牛瘤胃液按比例按比例加入到人工瘤胃模拟装置中,分组发酵培养6 h、12 h、18 h和24 h后,分别测定pH及发酵产气量,并提取不同培养时长瘤胃液样本总DNA,使用Miseq2×300 bp平... 详细信息

为了解人工瘤胃模拟装置发酵内环境变化规律,将新鲜采集的牛瘤胃液按比例按比例加入到人工瘤胃模拟装置中,分组发酵培养6 h、12 h、18 h和24 h后,分别测定pH及发酵产气量,并提取不同培养时长瘤胃液样本总DNA,使用Miseq2×300 bp平台对样本16S rRNA基因V3~V4、18S rRNA基因V4区扩增产物测序,进行微生物宏基因组学分析。结果表明:随着发酵时间延长,瘤胃pH不断下降,发酵总产气量整体呈上升趋势,且12 h内呈现显著性变化(P<0.05);针对瘤胃发酵液中原核型微生物和真核型微生物类群进行的宏基因组测序结果分析表明,发酵培养12 h的样本中微生物物种丰度及群落多样性指数处于较高水平,与0 h发酵样本差异显著(P<0.05),且随培养时间延长,群落多样性整体呈下降趋势,普雷沃菌属的物种丰度最高,均毛属为瘤胃纤毛虫优势种属。值得注意的是,瘤胃液中尚存在许多未被鉴别分类,且相对丰度较高的微生物,需要进一步研究。

关键词：人工瘤胃宏基因组技术瘤胃内环境

来源：评论

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线粒体活性氧在氟化钠诱导PC12细胞NF-κB/NLRP3信号通路活化中的作用

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中国兽医学报 2023年第10期43卷 2116-2122页

作者：陈德良张磊付长其舒适王国文彭巍光山县农业农村局动物检疫监督所河南信阳465450 河南牧业经济学院动物医药学院郑州市动物营养代谢病与中毒病重点实验室河南郑州450000 青海省畜牧兽医科学院青海西宁810000

旨在探究氟化钠(NaF)对PC12细胞NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎性小体的影响以及线粒体活性氧(mtROS)/核因子κB(NF-κB)信号在其中的调节作用。以PC12细胞为研究对象,分别转染NLRP3 siRNA、孵育NF-κB通路抑制剂PDTC(50μmol... 详细信息

旨在探究氟化钠(NaF)对PC12细胞NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎性小体的影响以及线粒体活性氧(mtROS)/核因子κB(NF-κB)信号在其中的调节作用。以PC12细胞为研究对象,分别转染NLRP3 siRNA、孵育NF-κB通路抑制剂PDTC(50μmol/L)或mtROS清除剂Mito-TEMPO(500μmol/L),并给予质量浓度为80 mg/L的NaF刺激24 h。通过CCK-8法检测细胞存活率,mitoSOX荧光探针检测mtROS水平,比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)活性,ELISA法检测白细胞介素(IL)-18和IL-1β分泌,Western blot检测磷酸化NF-κB p65、磷酸化I-κB激酶β(iKKβ)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶1(Caspase-1)p20蛋白表达,免疫荧光测定NF-κB p65的入核。与NaF组比较,NLRP3 siRNA干预显著降低了NaF暴露引起的NLRP3和Caspase-1 p20蛋白表达水平升高(P<0.01),缓解了NaF诱导的细胞存活率降低(P<0.01)、减弱了培养液上清中LDH活性以及IL-1β和IL-18的分泌水平(P<0.01)。与NaF组比较,PDTC+NaF组细胞中p-NF-κB p65和p-iKKβ水平降低(P<0.01),NF-κB p65的入核被阻断。此外,Mito-TEMPO干预后,NaF处理细胞中的mtROS、p-NF-κB p65、p-iKKβ、NLRP3、IL-1β和IL-18水平均降低(P<0.01)。NaF引起的PC12细胞NF-κB/NLRP3信号通路活化与mtROS水平升高有关。

关键词：氟化钠线粒体活性氧核因子-κB NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3

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PINK1敲除对氟化钠处理小鼠肺脏线粒体损伤、氧化应激和炎症反应的影响

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中国兽医学报 2024年第4期44卷 712-718页

作者：宋超张爱国王坤丽宋予震董青靳双星米俊宪王宏魁石冬梅王俊东彭巍罗琴河南牧业经济学院动物医药学院郑州市动物营养代谢病与中毒病重点实验室河南郑州450000 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司广东肇庆526000 青海省畜牧兽医科学院青海西宁810000

以6周龄雄性野生型(WT)C57BL/6J小鼠和磷酸酶与张力蛋白同源物诱导激酶1(PINK1)基因敲除(PINK1^(-/-))小鼠为对象,将小鼠随机分为WT对照组,WT模型组和PINK1^(-/-)模型组。WT模型组和PINK1^(-/-)模型组小鼠饮用含100mg/L氟化钠(NaF)的蒸... 详细信息

以6周龄雄性野生型(WT)C57BL/6J小鼠和磷酸酶与张力蛋白同源物诱导激酶1(PINK1)基因敲除(PINK1^(-/-))小鼠为对象,将小鼠随机分为WT对照组,WT模型组和PINK1^(-/-)模型组。WT模型组和PINK1^(-/-)模型组小鼠饮用含100mg/L氟化钠(NaF)的蒸馏水,WT对照组小鼠饮用蒸馏水,处理时间为12周。通过免疫印迹(Western blot)研究线粒体自噬相关蛋白表达水平;用透射电镜观察肺脏线粒体超微结构损伤;ATP通过检测试剂盒和RT-qPCR分别测定ATP水平和mtDNA拷贝数;DHE染色检测肺脏活性氧(ROS)水平;比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力以及丙二醛(MDA)的含量;TUNEL染色检测肺脏细胞凋亡;酶联免疫吸附法(ELISA)测定肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素6(IL-6)的水平。结果显示,与WT模型组比较,PINK1^(-/-)模型组小鼠肺脏中帕金森病蛋白2(Parkin)和微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)的蛋白表达水平显著降低(P<0.05),p62/SQSTM1和线粒体外膜转运孔蛋白20(TOM20)蛋白表达水平显著增加(P<0.05);与WT模型组比较,PINK1^(-/-)模型组小鼠肺脏受损线粒体百分比增加(P<0.05),ATP水平和mtDNA拷贝数减少(P<0.05)。PINK1^(-/-)模型组小鼠肺脏ROS水平、MDA含量和TUNEL阳性细胞数升高,SOD和CAT活力降低,较WT模型组有显著性差异(P<0.05)。此外,与WT模型组比较,PINK1^(-/-)模型组小鼠肺泡灌洗液中TNF-α和IL-6的水平显著增加(P<0.05)。结果表明,PINK1介导的线粒体自噬可减弱NaF引起的小鼠肺脏损伤。

关键词：氟化钠肺脏磷酸酶与张力蛋白同源物诱导激酶1 线粒体自噬氧化应激炎症

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