检索结果-内蒙古大学图书馆

南方医科大学学报 2016年第2期36卷 238-243页

作者：杨茜李晓愚斯丹杨致邦贺中原张楠晨张钐钐石中全重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016 重庆医科大学重庆400016 重庆三峡医药高等专科学校免疫学与病原生物学教研室重庆404120

目的探讨水环境地塞米松污染对小鼠肠道菌群的影响。方法将20只Balb/c小鼠随机分为对照组和实验组,每组5只。实验低剂量组灌喂含0.035 ng地塞米松磷酸钠的饮用水,中剂量组为0.225 ng、高剂量组为2.25 ng,对照组灌喂不含地塞米松磷酸钠... 详细信息

目的探讨水环境地塞米松污染对小鼠肠道菌群的影响。方法将20只Balb/c小鼠随机分为对照组和实验组,每组5只。实验低剂量组灌喂含0.035 ng地塞米松磷酸钠的饮用水,中剂量组为0.225 ng、高剂量组为2.25 ng,对照组灌喂不含地塞米松磷酸钠的饮用水。每日观察小鼠行为、皮毛、大便等的变化。灌喂第36 d处死小鼠,取回盲部组织提取细菌基因组DNA,扩增16S r DNA V6可变区,扩增产物变性凝胶梯度电泳(DGGE)后分析。切取DGGE图谱上的优势条带,扩增、纯化后克隆测序,其序列BLAST比对分析。结果各实验组小鼠均出现性情暴躁、斗殴打架、咬断尾部等现象。DGGE图谱聚类分析表明各组小鼠回盲部均具有较稳定的菌群;主成分分析表明各组的优势菌群存在一定差异;菌群多样性分析表明,与对照组相比,低剂量组菌群的种类和数量明显增加(P<0.05);中、高剂量组种类和数量显著增加(P<0.01)。16S r DNA V6区序列分析显示实验组和对照组具有共有菌属15种、差异菌属2种,优势菌种类和比例发生了改变。对照组有乳杆菌属的细菌定植,而中、高剂量实验组乳杆菌属的细菌消失,却出现志贺菌属的细菌。结论饮水地塞米松污染可影响小鼠神经系统,使小鼠肠道内细菌的种类、数量及优势菌所占的比例发生改变,菌群多样性增加;抑制肠道益生菌的定植,利于肠道致病菌的入侵。

关键词：地塞米松磷酸钠污染饮水肠道菌群变性凝胶梯度电泳 16S rDNA V6区

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一种产碱假单胞菌产生的地塞米松降解酶的提取纯化和鉴定

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生物医学工程学杂志 2015年第5期32卷 1044-1049页

作者：朱黎黎杨致邦杨茜石中全邓西川重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室重庆400016 重庆三峡医药高等专科学校免疫学与病原生物学教研室重庆404120

将分离到的1株对地塞米松有降解作用的产碱假单胞菌进一步驯化。采用渗透休克法分离该菌各区域蛋白,将分离的具有高酶活性的胞内蛋白用硫酸铵盐析、离子交换层析和葡聚糖凝胶层析提取和纯化。纯化蛋白用HPLC检测其对地塞米松的降解活性... 详细信息

将分离到的1株对地塞米松有降解作用的产碱假单胞菌进一步驯化。采用渗透休克法分离该菌各区域蛋白,将分离的具有高酶活性的胞内蛋白用硫酸铵盐析、离子交换层析和葡聚糖凝胶层析提取和纯化。纯化蛋白用HPLC检测其对地塞米松的降解活性,酶切后质谱鉴定。结果表明驯化后的产碱假单胞菌对地塞米松的降解率从23.63%提高到52.84%,降解地塞米松的酶主要存在于该菌胞质内,分子量约为41kD;纯化后的酶蛋白比活力达到1.02U·mg-1,该蛋白的5条肽段的氨基酸序列与异戊酰辅酶A脱氢酶的部分序列匹配,可能是一种新的甾体类化合物降解酶。本文为用微生物修复技术清除水环境的地塞米松污染提供了新策略。

关键词：产碱假单胞菌地塞米松降解酶提取纯化鉴定

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miR-34a降低人骨肉瘤肿瘤干细胞的自我更新能力并抑制其成瘤和迁移

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细胞与分子免疫学杂志 2017年第6期33卷 778-782,788页

作者：唐静胡玲刘奉李小山赵梓亦李国利重庆三峡医药高等专科学校病原生物学与免疫学教研室重庆404120 重庆三峡医药高等专科学校基础医学部病理学教研室重庆404120 重庆三峡医药高等专科学校临床医学系重庆404120 成都中医药大学附属医院四川成都610041

目的确定从人骨肉瘤U2OS细胞群中分离培养的肿瘤干细胞中微小RNA-34a(miR-34a)的水平变化,并确定其在肿瘤干细胞成瘤性、干性维持中的作用。方法采用无血清培养法从U2OS细胞系中富集具有自我更新能力的肿瘤干细胞亚群,实时定量PCR检测mi... 详细信息

目的确定从人骨肉瘤U2OS细胞群中分离培养的肿瘤干细胞中微小RNA-34a(miR-34a)的水平变化,并确定其在肿瘤干细胞成瘤性、干性维持中的作用。方法采用无血清培养法从U2OS细胞系中富集具有自我更新能力的肿瘤干细胞亚群,实时定量PCR检测miR-34a的水平;转染miR-34a模拟物(miR-34a mimics)或SOX2短发夹RNA(shRNA)后,Western blot法检测miR-34a靶蛋白性别决定区Y盒2(SOX2)蛋白水平,肿瘤干细胞微球形成实验检测自我更新能力,软琼脂成瘤实验检测miR-34a对肿瘤干细胞体外成瘤能力的影响,TranswellTM迁移实验检测miR-34a对肿瘤干细胞迁移能力的影响。结果骨肉瘤肿瘤干细胞中miR-34a水平降低;转染miR-34a mimics和转染SOX2 shRNA(sh SOX2)均降低SOX2蛋白水平,并降低肿瘤干细胞的自我更新能力、体外成瘤活性及迁移能力。结论骨肉瘤肿瘤干细胞中的miR-34a具有降低干细胞自我更新能力、成瘤性和迁移能力的作用。

关键词：骨肉瘤肿瘤干细胞 miR-34a 性别决定区Y盒2(SOX2) 自我更新能力

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"翻转课堂"在医学基础理论教学中的初步研究

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医学信息 2017年第16期30卷 10-11页

作者：唐静重庆三峡医药高等专科学校病原生物学与免疫学教研室重庆404120

"翻转课堂"作为一种新的教学模式在国内外引起了巨大的反响.本文探讨这种新的教学模式在大专非医学专业的基础医学这门课程中的教学效果.通过实验教学对比的方法,肯定这种新的教学模式的优势的同时得出了新的结论:学生在主观... 详细信息

"翻转课堂"作为一种新的教学模式在国内外引起了巨大的反响.本文探讨这种新的教学模式在大专非医学专业的基础医学这门课程中的教学效果.通过实验教学对比的方法,肯定这种新的教学模式的优势的同时得出了新的结论:学生在主观能动性,动手操作能力和学习成绩、教与学的互动等方面明显优于传统教学的学生.

关键词：实践反思法少数民族护生评判性思维护理实习带教

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过表达miR-10b促进肺癌细胞系A549增殖

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基础医学与临床 2017年第8期37卷 1108-1112页

作者：唐静石中全胡玲李国利冯晓灵刘奉重庆三峡医药高等专科学校病原生物学与免疫学教研室重庆404120

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者肺癌及癌旁组织中miR-10b(miR-10b)表达水平及miR-10b是否通过调控锌指转录蛋白基因(KLF4)对肺癌细胞系A549恶性化的影响。方法 40例NSCLC患者病理切片,原位杂交检测肺癌及癌旁组织中miR-10b的表达量;... 详细信息

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者肺癌及癌旁组织中miR-10b(miR-10b)表达水平及miR-10b是否通过调控锌指转录蛋白基因(KLF4)对肺癌细胞系A549恶性化的影响。方法 40例NSCLC患者病理切片,原位杂交检测肺癌及癌旁组织中miR-10b的表达量;对肺癌细胞系A549转染miR-10b mimics后,CCK-8法检测肺癌细胞增殖;real-time PCR及Western blot检测KLF4 mRNA及蛋白水平;软琼脂克隆形成实验检测过表达miR-10b对A549细胞的肿瘤恶性化程度的影响。结果肺癌细胞A549及肺癌组织中miR-10b的表达量分别高于正常肺上皮细胞16HBE及癌旁组织;过表达miR-10b模拟物的A549细胞中,KLF4蛋白水平显著下降(P<0.05);过表达的miR-10b可显著增加A549细胞的增殖速度及在软琼脂内的成瘤性。结论 miR-10b在不同类型细胞及组织中具有分布差异性、可能是通过抑制KLF4的表达促进肺癌细胞增殖及恶性化。

关键词： miR-10b KLF4 非小细胞肺癌增殖恶性化

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如何提高基础医学概论在大专非医学专业中教学效果的几点体会

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课程教育研究 2017年第5期 245-246页

作者：唐静李小山重庆三峡医药高等专科学校病原生物学与免疫学教研室重庆三峡医药高等专科学校病理学教研室

在一所大专医学院校,作为一名专职教师,面对非医学专业的学生,面对基础知识参差不齐,特别是文科升上来的学生,如何提高一门综合性很强的课程——基础医学概论的教学效果,提高学生的知识掌握度和应用度,是一名基础医学概论的专任教师必... 详细信息

在一所大专医学院校,作为一名专职教师,面对非医学专业的学生,面对基础知识参差不齐,特别是文科升上来的学生,如何提高一门综合性很强的课程——基础医学概论的教学效果,提高学生的知识掌握度和应用度,是一名基础医学概论的专任教师必须考虑的问题。笔者结合近几年的教学实践,总结经验并结合学生自身的特点,将从制定教学大纲、改革教学方法、改革评价体系等几个方面着手谈谈在基础医学概论教学中的体会,希望能为同行提供相关的借鉴经验。

关键词：基础医学概论非医学专业教学效果

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毒性分子-抗毒性分子系统的生物学作用研究进展

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微生物学杂志 2015年第1期35卷 101-104页

作者：李国利胡福泉重庆三峡医药高等专科学校病原生物和免疫学教研室重庆404120 第三军医大学微生物学教研室重庆400030

毒性分子-抗毒性分子系统(toxin-antitoxin systems,TA systems)被发现广泛存在于细菌染色体、质粒以及古细菌基因组中。TA系统是由2个基因组成的操纵子,这2个基因分别编码稳定的毒性分子和不稳定的抗毒性分子。毒性分子总是蛋白质,抗... 详细信息

毒性分子-抗毒性分子系统(toxin-antitoxin systems,TA systems)被发现广泛存在于细菌染色体、质粒以及古细菌基因组中。TA系统是由2个基因组成的操纵子,这2个基因分别编码稳定的毒性分子和不稳定的抗毒性分子。毒性分子总是蛋白质,抗毒性分子可能是蛋白质或RNA。因此,根据抗毒性分子的性质和作用方式的不同可将TA系统家族分为5种类型。Ⅰ型和Ⅲ型的抗毒性分子是RNA,能抑制毒性分子的合成或者与其隔离;II、IV和V型的抗毒性分子是蛋白质,能隔离、平衡毒性分子作用或抑制其合成。TA系统具有多种生物学功能。目前研究表明,TA系统可能在细菌应激应答、程序化细胞死亡、多重耐药的形成、防止DNA入侵、稳定大基因组片段等方面有重要的作用。

关键词：毒性分子-抗毒性分子系统应激应答程序化细胞死亡多重耐药

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异氟醚抑制低氧/复氧诱导的肾小管上皮HK-2细胞系内质网应激凋亡

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基础医学与临床 2018年第9期38卷 1258-1262页

作者：唐静胡玲刘奉李小山赵梓亦李国利重庆三峡医药高等专科学校病原生物学与免疫学教研室重庆404120 重庆三峡医药高等专科学校基础医学部病理学教研室重庆404120 重庆三峡医药高等专科学校临床医学系重庆404120 成都中医药大学附属医院四川成都641000

目的研究肾小管上皮细胞系HK-2低氧/复氧诱导的内质网应激(ERS)以及异氟醚对ERS诱导细胞凋亡的调控作用。方法将培养的HK-2肾小管上皮进行低氧/复氧处理,用2.56%异氟醚分别处理1、4和8 h后,检测乳酸脱氢酶(LDH)含量;用MTT法检测HK-2细... 详细信息

目的研究肾小管上皮细胞系HK-2低氧/复氧诱导的内质网应激(ERS)以及异氟醚对ERS诱导细胞凋亡的调控作用。方法将培养的HK-2肾小管上皮进行低氧/复氧处理,用2.56%异氟醚分别处理1、4和8 h后,检测乳酸脱氢酶(LDH)含量;用MTT法检测HK-2细胞增殖;用流式细胞仪检测细胞凋亡率;用RT-q PCR和半定量Western blot检测内质网应激标志蛋白GRP78、CHOP及内质网凋亡蛋白caspase-12。结果 2.56%异氟醚孵育4和8 h,LDH低于对照组,细胞增殖高于对照组(P<0.05);4和8 h时细胞凋亡/坏死率为24.2%±4.6%和13.3%±3.1%显著高于对照组的12.1%±1.3%和7.1%±1.1%(P<0.05)。结论异氟醚对低氧/复氧处理后促进的ERS及细胞凋亡具有抑制作用。

关键词：异氟醚内质网应激低氧/复氧模型细胞凋亡

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高效降解地塞米松的产碱假单胞菌的驯化和筛选

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中国微生态学杂志 2015年第12期27卷 1397-1402页

作者：唐利杨茜杨致邦朱黎黎石中全泸州医学院附属医院医学实验中心四川泸州646000 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016 重庆三峡医药高等专科学校免疫学与病原生物学教研室重庆404120

目的为制备清除水环境地塞米松污染的微生物净化剂提供高效降解地塞米松的菌种。方法将从医院废水分离的可降解地塞米松的降解菌(产碱假单胞菌)接种于地塞米松磷酸钠培养液,常规孵箱37℃反复驯化培养。将驯化培养后的细菌接种于地塞米... 详细信息

目的为制备清除水环境地塞米松污染的微生物净化剂提供高效降解地塞米松的菌种。方法将从医院废水分离的可降解地塞米松的降解菌(产碱假单胞菌)接种于地塞米松磷酸钠培养液,常规孵箱37℃反复驯化培养。将驯化培养后的细菌接种于地塞米松磷酸钠琼脂平板,常规培养后,挑取单菌落,用高效液相色谱法测定其对地塞米松和地塞米松磷酸钠的降解作用并进行筛选,筛选出的菌株再经形态、染色性和16SrDNA鉴定。观察驯化菌生长特性和降解特性,并与降解菌比较。结果降解菌经驯化培养后,筛选到1株对地塞米松降解作用强的驯化菌,该菌在震荡培养下,对地塞米松磷酸钠的降解率从驯化前的50.86%提高到76.12%,将地塞米松降解为其他物质的降解率从23.63%提高到77.05%。在常规培养下,对地塞米松磷酸钠的降解率从驯化前的20.65%提高到73.84%,将地塞米松降解为其他物质的降解率从22.14%提高到43.08%(P=0.01)。驯化菌的生长曲线与降解菌相似,但降解曲线不同。在接种数小时后即出现降解作用,在48h出现降解高峰,比降解菌提前约48h。结论通过对地塞米松降解菌的驯化和筛选,成功地获得1株具有实用价值的高效降解地塞米松的驯化菌。

关键词：产硷假单胞菌地塞米松降解驯化筛选

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病毒介导的P53低表达HepG2细胞株的建立

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免疫学杂志 2012年第6期28卷 493-496页

作者：刘佳张俊磊李庆伟韩俊峰徐小峰王嘉丽陈炜饶贤才李国利重庆医科大学实验教学管理中心 401331 第三军医大学基础部微生物学教研室重庆400038 诸城市人民医院呼吸内一科 262200 第三军医大学全军免疫学研究所重庆400038 第三军医大学医学遗传学教研室重庆400038 第三军医大学生理学教研室重庆400038 重庆三峡医药高等专科学校 404120

目的构建干扰P53的逆转录病毒载体,建立稳定低表达P53的HepG2细胞株。方法合成干扰P53基因的寡核苷酸序列插入pMSCV-hyg-U6质粒,转化受体菌DH5α,经酶切测序鉴定后瞬时转染HepG2细胞,通过半定量RT-PCR方法检测P53 mRNA表达水平评估干扰... 详细信息

目的构建干扰P53的逆转录病毒载体,建立稳定低表达P53的HepG2细胞株。方法合成干扰P53基因的寡核苷酸序列插入pMSCV-hyg-U6质粒,转化受体菌DH5α,经酶切测序鉴定后瞬时转染HepG2细胞,通过半定量RT-PCR方法检测P53 mRNA表达水平评估干扰效果;选择干扰效果最好的重组质粒转染PT67细胞进行病毒包装,获得逆转录病毒颗粒感染HepG2细胞,通过Hygromycin筛选获得多个细胞克隆,Western blot检测P53蛋白的表达情况;选择P53表达水平最低的细胞克隆。通过5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导凋亡实验,检测P53低表达的HepG2细胞p53通路介导的细胞凋亡情况。结果经酶切和测序验证成功构建重组病毒载体;瞬时转染HepG2细胞后P53 mRNA表达下调;病毒颗粒感染HepG2细胞后P53的mRNA、蛋白表达下调;用5-FU处理后P53低表达HepG2细胞凋亡水平明显低于对照。结论成功构建了干扰P53的逆转录病毒载体,建立了P53低表达HepG2细胞株,明显阻断了P53通路依赖的细胞凋亡。

关键词：逆转录病毒 P53 HepG2 RNA干扰细胞凋亡

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