检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验血液学杂志 2008年第4期16卷 750-754页

作者：何鹏张伶骆展鹏杨松钟晓明蔡晓钟重庆医科大学医学检验系临床血液教研室临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室重庆市重点实验室重庆400016

本研究建立PCR技术检测白血病细胞核仁磷酸蛋白(nucleophosm in,NPM)基因及突变的方法。以白血病细胞系和白血病临床标本为研究对象,首先采用RT-PCR检测NPM mRNA表达水平,其次应用PCR方法检测NPM第12外显子,并对扩增产物进行测序分析,... 详细信息

本研究建立PCR技术检测白血病细胞核仁磷酸蛋白(nucleophosm in,NPM)基因及突变的方法。以白血病细胞系和白血病临床标本为研究对象,首先采用RT-PCR检测NPM mRNA表达水平,其次应用PCR方法检测NPM第12外显子,并对扩增产物进行测序分析,最后以插入NPM A型突变cDNA的质粒作为阳性模板,建立PCR检测NPM突变的方法并进行方法学评价,并采用此方法直接检测白血病细胞中是否存在NPM基因突变。结果表明:白血病细胞系NPM mRNA表达水平较正常单个核细胞对照组高,23例急性髓系白血病标本均不同程度地高表达NPM mRNA;采用PCR扩增联合测序分析发现,髓系白血病细胞系(THP1和K562)NPM基因组第12外显子无突变,但K562细胞NPM基因3′非编码区存在1个T碱基缺失;建立直接针对NPM A型突变cDNA的PCR方法,能特异扩增NPM A型突变基因;该方法重复性好,批内、批间变异系数分别为1.6%和3.1%,灵敏度为100pg cDNA;采用此方法从23例白血病临床标本中检出2例NPM突变阳性。结论:建立了检测NPM mRNA水平和A型突变的实验方法,发现白血病细胞高表达NPM mRNA水平,部分白血病患者NPM基因发生A型突变。

关键词：急性髓系白血病核仁磷酸蛋白基因基因突变基因检测聚合酶链反应

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼对K562细胞的DNA损伤修复功能的影响

引用

中华检验医学杂志 2008年第9期31卷 1034-1038页

作者：史梦冯文莉黄世峰曾建明王小中温健萍张文萍陶昆陈新敏曹唯希黄宗千重庆医科大学医学检验系临床血液学教研室临床检验诊断学教育部重点实验室 400016 Canadian Blood Services 重庆医科大学附属第一医院血液科

目的建立人类慢性粒细胞白血病（CML）细胞系K562细胞在伊马替尼（Imatinib mesylate）处理前、后的DNA损伤模型，探讨伊马替尼对K562细胞的DNA损伤修复功能的影响。方法用噻唑蓝（MTT）法确定伊马替尼预处理K562细胞的浓度；用免疫印... 详细信息

目的建立人类慢性粒细胞白血病（CML）细胞系K562细胞在伊马替尼（Imatinib mesylate）处理前、后的DNA损伤模型，探讨伊马替尼对K562细胞的DNA损伤修复功能的影响。方法用噻唑蓝（MTT）法确定伊马替尼预处理K562细胞的浓度；用免疫印迹法（Western blot）检测伊马替尼处理后K562细胞BCR／ABL的磷酸化状态，以反映BCR-ABL酪氨酸激酶活性受抑制情况；用彗星实验检测不同浓度过氧化氢（H2O2）诱导的K562细胞、伊马替尼预处理K562细胞的DNA损伤模型；用彗星实验对各组细胞在DNA损伤后的修复进行动态观测。结果MTT实验结果显示，伊马替尼预处理K562细胞的最佳终浓度为1μmol／L，作用时间24h；Westernblot实验结果显示，该浓度的伊马替尼可有效抑制BCR／ABL融合蛋白第177位酪氨酸激酶磷酸化，密度比为0．100±0．018，与对照组（0．425±0．039）相比，降低了（77．11±5．59）％，差异有统计学意义（t=4．57，P〈0．05）；彗星实验确定了各组细胞DNA损伤模型的建立条件，采用10μmol／L终浓度的H2O2对K562细胞和伊马替尼预处理后K562细胞进行染毒，H2O2作用温度和时间为4℃、10min。修复结果显示，经伊马替尼预处理的K562细胞修复时间为120min，与未处理组修复时间60min相比，前者DNA损伤修复时间明显延长（F=97．79，P〈0．05）。结论本研究建立了伊马替尼处理前、后的白血病K562细胞的DNA损伤模型，BCR／ABL融合蛋白的酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼能减弱K562细胞的DNA损伤后修复能力。

关键词：白血病,髓样,慢性 K562细胞哌嗪类嘧啶类 DNA修复

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

抗菌肽PR39真核表达载体的构建及其在巨噬细胞中的表达和抗菌作用

引用

第三军医大学学报 2008年第21期30卷 2044-2046页

作者：文阳安郭金英余晓林岑东陈彦张键罗淼涂植光重庆医科大学医学检验系生物化学教研室临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室重庆市重点实验室重庆400016 西南大学医院重庆400715 重庆医科大学附属第一医院骨科重庆400016

目的构建抗菌肽PR39的真核表达载体,转染后观察PR39在小鼠巨噬细胞RAW264.7中的表达及抗菌作用。方法采用拼接PCR法合成抗菌肽PR39基因,克隆到真核表达载体pIRES2-GFP中,经鉴定后用阳离子脂质体转染小鼠巨噬细胞RAW264.7,通过RT-PCR和... 详细信息

目的构建抗菌肽PR39的真核表达载体,转染后观察PR39在小鼠巨噬细胞RAW264.7中的表达及抗菌作用。方法采用拼接PCR法合成抗菌肽PR39基因,克隆到真核表达载体pIRES2-GFP中,经鉴定后用阳离子脂质体转染小鼠巨噬细胞RAW264.7,通过RT-PCR和免疫荧光法检测目的基因的表达,并对其抗菌活性进行初步检测。结果成功构建了抗菌肽PR39的真核表达载体pIRES2-GFP/PR39,并能在小鼠巨噬细胞RAW264.7中表达抗菌肽PR39。表达抗菌肽PR39的巨噬细胞杀灭和清除胞内菌的能力明显增强。结论抗菌肽PR39基因能够在小鼠巨噬细胞RAW264.7中表达并发挥抗菌作用。

关键词：抗菌肽 PR39 真核表达载体巨噬细胞胞内菌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

稳定表达BCR／ABL的小鼠BaF3-P210细胞株的建立及其生物学特性的研究

引用

第三军医大学学报 2008年第19期30卷 1791-1794页

作者：史梦冯文莉张文萍王小中黄世锋曾建明温健萍陶昆陈新敏曹唯希黄宗干重庆医科大学医学检验系临床血液学教研室临床检验诊断学教育部重点实验室重庆市重点实验室重庆400016 Canadian Blood Services Hamilton ON LSS 1H8 Canada 重庆医科大学附属第一医院血液科重庆400016

目的构建能稳定表达BCR/ABL的小鼠转化细胞株BaF3-P210,并初步探讨BCR/ABL对BaF3细胞生物学特性的影响。方法将含有bcr/abl基因的逆转录病毒载体转染到包装细胞,收集病毒感染BaF3细胞,经筛选和亚克隆,获得稳定表达BCR/ABL的转基因BaF3-P... 详细信息

目的构建能稳定表达BCR/ABL的小鼠转化细胞株BaF3-P210,并初步探讨BCR/ABL对BaF3细胞生物学特性的影响。方法将含有bcr/abl基因的逆转录病毒载体转染到包装细胞,收集病毒感染BaF3细胞,经筛选和亚克隆,获得稳定表达BCR/ABL的转基因BaF3-P210细胞。用PCR、DNA测序、RT-PCR和Westernblot检测bcr/abl基因在靶细胞中的整合和表达;用台盼蓝细胞计数法、流式细胞仪(FCM)和MTT法研究BCR/ABL对BaF3细胞生物学特性的影响。结果bcr/abl基因整合在BaF3细胞基因组中,BaF3-P210细胞能稳定表达bcr/abl基因及其蛋白。与对照组相比,BaF3-P210细胞增殖速度增快(P<0.05);G0/G1期细胞比例下降,S期和G2/M期细胞比例增高(P<0.05);经STI571处理后的细胞增殖抑制率为(54.08±1.90)%(P<0.05),早期凋亡率为(12.35±2.04)%(P<0.05)。结论成功构建的能稳定表达BCR/ABL的小鼠BaF3-P210转化细胞株具有增殖能力增强、细胞周期进程加速和对STI571敏感的恶性表型特征。

关键词：慢性粒细胞白血病 bcr/abl融合基因逆转录病毒载体 BaF3细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

糖皮质激素受体结合域诱饵表达载体的构建及鉴定

引用

第三军医大学学报 2008年第3期30卷 216-219页

作者：郝坡刘北忠欧阳峰王东生刘畅钟梁金丹婷王翀重庆医科大学医学检验系临床生物化学教研室临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室重庆400016 广东省人民医院皮肤性病科实验室广州510000

目的构建糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)结合域的诱饵表达载体。方法RT-PCR扩增GR结合域,克隆入pMD18-T,测序正确后,再亚克隆入诱饵载体pGBKT7中,再把构建好的诱饵载体pGBKT7-GR转化到酵母AH109细胞中,并用Western blot分... 详细信息

目的构建糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)结合域的诱饵表达载体。方法RT-PCR扩增GR结合域,克隆入pMD18-T,测序正确后,再亚克隆入诱饵载体pGBKT7中,再把构建好的诱饵载体pGBKT7-GR转化到酵母AH109细胞中,并用Western blot分析诱饵蛋白的表达情况,同时检测诱饵蛋白的毒性和自激活作用。结果成功扩增了GR结合域,并分别成功克隆到pMD18-T和pGBKT7中,测序结果正确。诱饵载体成功转化到酵母AH109细胞中,无毒性和自激活作用,Western blot分析结果也证实了酵母细胞高表达诱饵蛋白。结论成功构建了GR结合域的酵母诱饵表达载体。

关键词：糖皮质激素受体结合域诱饵载体诱饵蛋白

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

bcr-abl逆转录病毒介导的小鼠慢性粒细胞白血病样模型的建立

引用

第四军医大学学报 2008年第15期29卷 1377-1381页

作者：张文萍冯文莉黄世峰史梦王雅珍曾建明李惠温健萍陈新敏曹唯希黄宗干重庆医科大学医学检验系临床血液学教研室临床检验诊断学教育部重点实验室重庆400016 Canadian Blood Services HamiltonON L8S 1H8 Canada 重庆医科大学临床学院血液科重庆400016

目的：构建bcr-abl逆转录病毒介导的小鼠慢性粒细胞白血病（CML）样模型,为深入研究CML发病机制和治疗奠定基础.方法：bcr-abl逆转录病毒Mig210载体经Phoenix-Ampo细胞包装后,取上清液感染5-FU处理后的BALB/c雄性小鼠骨髓细胞,再经尾静... 详细信息

目的：构建bcr-abl逆转录病毒介导的小鼠慢性粒细胞白血病（CML）样模型,为深入研究CML发病机制和治疗奠定基础.方法：bcr-abl逆转录病毒Mig210载体经Phoenix-Ampo细胞包装后,取上清液感染5-FU处理后的BALB/c雄性小鼠骨髓细胞,再经尾静脉移植入经致死剂量γ射线（900cGy）照射的同种雌性受体鼠中.用形态学、RT-PCR和Western Blot鉴定小鼠成模情况.结果：小鼠移植8-9 wk后,外周血白细胞达2×10^10-3×10^10/L（为对照鼠的5-8倍）,外周血涂片幼稚细胞达到0.10-0.20;骨髓粒系细胞显著增高,易见幼稚细胞,肝脾也可见白血病细胞浸润;移植4-5 wk后在受体鼠骨髓和脾脏检出bcr-abl融合基因,8-9 wk后在肝脏亦检测出bcr-abl融合基因,同时在骨髓和脾脏也检测到bcr-abl融合蛋白.建模成功的小鼠3-5 mo后相继死亡.结论：成功建立bcr-abl逆转录病毒介导的小鼠CML模型,可用于后续CML信号通路和治疗机制的研究.

关键词：慢性粒细胞白血病 BCR/ABL融合蛋白逆转录病毒载体动物模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

靶向干扰CGI-100基因对白血病K562细胞增殖与分化影响的研究

靶向干扰CGI-100基因对白血病K562细胞增殖与分化影响的研究

引用

第九届西南三省一市生物化学与分子生物学学术交流会

作者：汪永强张彦雷燕重庆医科大学医学检验系临床生化教研室临床检验诊断学教育部重点实验室

CGI-100是一个功能未知的基因,位于染色体1p22.1,基因序列全长3635bp,蛋白编码区位于 113bp 至802bp 之间,编码的 CGI-100蛋白位于人类跨膜蛋白 emp24第五转运区域,也称作 TMED5 (Homo sapiens transmembrane emp24 protein transport d... 详细信息

关键词： RNA 干扰 CGI-100基因苦参碱敏感性增殖与分化 K562细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

γ-干扰素、腺苷脱氨酶和新喋呤对结核性胸膜炎的诊断价值

引用

重庆医科大学学报 2008年第8期33卷 987-989页

作者：汪先桃曾照芳重庆医科大学医学检验系检验仪器学教研室临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室重庆400016

目的:研究胸水中γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)、腺苷脱氨酶(Adenosine deaminase,ADA)活性和新喋呤(Neopterin,Npt)水平对结核性胸膜炎的诊断价值。方法:分别用酶联免疫吸附试验(ELISA)和偶联速率法检测43例结核性和38例恶性胸膜炎... 详细信息

目的:研究胸水中γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)、腺苷脱氨酶(Adenosine deaminase,ADA)活性和新喋呤(Neopterin,Npt)水平对结核性胸膜炎的诊断价值。方法:分别用酶联免疫吸附试验(ELISA)和偶联速率法检测43例结核性和38例恶性胸膜炎患者胸水中γ-干扰素、腺苷脱氨酶活性和新喋呤水平,并绘制受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic curve,ROC曲线)评价3项指标检测结核性胸膜炎的敏感性和特异性。结果:结核性胸膜炎组胸水中γ-干扰素、腺苷脱氨酶活性和新喋呤水平均显著高于非结核性胸膜炎组(P<0.05)。结论:胸水中γ-干扰素、腺苷脱氨酶活性和新喋呤水平测定有助于结核性胸膜炎的诊断。

关键词：结核性胸膜炎 γ-干扰素腺苷脱氨酶新喋呤

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

双歧杆菌脂磷壁酸与5-氟尿嘧啶联用的抗肿瘤研究

引用

中国微生态学杂志 2008年第6期20卷 550-552,557页

作者：谢宁王跃刘明方李芙蓉重庆医科大学临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室重庆医科大学医学检验系重庆400016 成都医学院医学检验系四川成都610083 重庆医科大学病原生物学教研室重庆400016

目的探讨双歧杆菌脂磷壁酸与5-氟尿嘧啶(5-FU)联用对H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及免疫功能的影响。方法双歧杆菌脂磷壁酸单独或联合5-FU处理H22荷瘤Balb/c小鼠,定期测量肿瘤大小,观察小鼠一般状况;计算抑瘤率、血红细胞数和白细胞数,取脾... 详细信息

目的探讨双歧杆菌脂磷壁酸与5-氟尿嘧啶(5-FU)联用对H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及免疫功能的影响。方法双歧杆菌脂磷壁酸单独或联合5-FU处理H22荷瘤Balb/c小鼠,定期测量肿瘤大小,观察小鼠一般状况;计算抑瘤率、血红细胞数和白细胞数,取脾和胸腺计算脏器指数;HE染色分析肿瘤组织变化;MTT法检测小鼠脾T淋巴细胞增殖转化功能以及ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞分泌IFN-γ含量。结果双歧杆菌脂磷壁酸及5-FU单独应用均可抑制肿瘤生长,但单独5-FU处理组小鼠一般状况差,毒性反应重;双歧杆菌脂磷壁酸与5-FU联合应用,与单独5-FU处理组比较,不仅抑瘤率明显提高(P<0.01),且荷瘤小鼠一般状况改善,白细胞数升高,脏器指数增加,小鼠脾T淋巴细胞增殖能力强,脾淋巴细胞分泌IFN-γ水平提高;光镜观察HE染色瘤体组织,双歧杆菌脂磷壁酸处理组可见大量炎症细胞浸润。结论双歧杆菌脂磷壁酸联合5-FU能增强化疗的抑瘤作用,并能扭转化疗引起的免疫低下现象,起到增效减毒作用。

关键词：双歧杆菌脂磷壁酸 5-氟尿嘧啶免疫功能

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

直接脑-机接口生物相容性研究进展

引用

生物医学工程学杂志 2007年第6期24卷 1416-1418页

作者：罗鹏谢国明江正重庆医科大学医学检验系临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室重庆400016 重庆医科大学基础医学院计算机教研室重庆400016

脑-机接口的用途是为严重瘫痪病人提供一个与外部世界进行通信的出口。根据检测电极的不同,分为间接型和直接型脑-机接口。直接型脑-机接口是将检测电极植入大脑皮质内,可反映较小范围内神经元细胞的电活动,避免信号传递引起的衰减和其... 详细信息

脑-机接口的用途是为严重瘫痪病人提供一个与外部世界进行通信的出口。根据检测电极的不同,分为间接型和直接型脑-机接口。直接型脑-机接口是将检测电极植入大脑皮质内,可反映较小范围内神经元细胞的电活动,避免信号传递引起的衰减和其它信号的干扰,从而满足精细控制所要求的时空分辨率和信噪比。直接型脑-机接口研究的关键问题是提高直接脑-机接口电极的生物相容性。本文介绍了具有较高生物相容性的直接脑-机接口电极的技术特点。

关键词：脑-机接口微电极生物相容性表面改性电释放加工化学蚀刻

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：