检索结果-内蒙古大学图书馆

基因组学与应用生物学 2017年第9期36卷 3511-3515页

作者：汪涛刘慧雷蕾徐曼重庆医科大学基础医学院病理学教研室重庆400016

本研究旨在构建携带小鼠nlrp3蛋白的过表达真核载体。首先从高脂饮食喂养3个月的C57BL/6J小鼠上剪取肝脏组织,液氮冻存。快速剪取适量肝脏组织,冰上研磨,Trizol法提取总RNA,逆转录获得c DNA,然后PCR扩增nlrp3基因的编码区。PCR产物电泳... 详细信息

本研究旨在构建携带小鼠nlrp3蛋白的过表达真核载体。首先从高脂饮食喂养3个月的C57BL/6J小鼠上剪取肝脏组织,液氮冻存。快速剪取适量肝脏组织,冰上研磨,Trizol法提取总RNA,逆转录获得c DNA,然后PCR扩增nlrp3基因的编码区。PCR产物电泳回收,经过NotⅠ及NheⅠ双酶切后,将其克隆到真核表达载体p CDH-CMV-MCS-EF1-cop GFP-T2A-Puro中。重组质粒电转进入感受态DH5α,过夜培养后挑取单个菌落过夜扩大培养。然后提取质粒,酶切鉴定后测序。将克隆成功的重组质粒转染HEK293T细胞,培养3 d后收集细胞蛋白,用Western blotting检测nlrp3的表达水平,研究显示,重组质粒p CDH-NLRP3较空白质粒p CDH-NULL的nlrp3蛋白表达水平明显增加(p<0.01)。本研究成功构建了nlrp3过表达载体,为进一步研究其作用机制提供了基础工具。

关键词： Nlrp3 过表达非酒精性脂肪肝

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我国新时期卫生与健康发展战略的内涵与理论创新

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中国健康教育 2018年第10期34卷 936-938,959页

作者：王中灿唐贵忠何中臣程雪莲冯显东杨淋淋重庆医科大学公共卫生学院社会医学与卫生事业管理教研室重庆400016 重庆市卫生计生监督执法局重庆401147 重庆市卫生和计划生育委员会重庆401147

当前,我国已进入决胜全面建成小康社会新时期,党和政府高度重视医疗卫生与健康工作,提出了一系列新思想,作出了一系列新部署,形成了系统的新时期卫生与健康发展战略。其主要内容为:坚持"以人民为中心"的利益观,以"改革... 详细信息

当前,我国已进入决胜全面建成小康社会新时期,党和政府高度重视医疗卫生与健康工作,提出了一系列新思想,作出了一系列新部署,形成了系统的新时期卫生与健康发展战略。其主要内容为:坚持"以人民为中心"的利益观,以"改革创新为动力"的发展观,"将健康融入所有政策"的战略观,"共建共享,全民健康"的治理观。创造性地继承和升华了我国传统医学健康养生智慧和马克思主义健康观,探索和拓展了新的执政理念,是对人民期盼美好生活的现实回应,更是实现民族昌盛和国家富强的健康保障。

关键词：卫生与健康健康中国治理发展战略

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重庆医科大学学报 2017年第5期42卷 481-486页

作者：康清梅梁洁张雄周凡琳李丹高敏娜李昱重庆医科大学基础医学院病理学教研室重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016

目的:全面研究姜黄素(curcumin)对N2a/APP695swe细胞自噬作用的影响,进一步探讨姜黄素调节N2a/APP695swe细胞自噬的可能机制。方法:将细胞分为4组:野生型对照组(WT组)、空白对照组(Control组)、溶剂对照组(Sham组)、姜黄素处理组(Curcu... 详细信息

目的:全面研究姜黄素(curcumin)对N2a/APP695swe细胞自噬作用的影响,进一步探讨姜黄素调节N2a/APP695swe细胞自噬的可能机制。方法:将细胞分为4组:野生型对照组(WT组)、空白对照组(Control组)、溶剂对照组(Sham组)、姜黄素处理组(Curcumin组,5μmol/L)。Western blot分别检测自噬标志性蛋白LC3Ⅱ和底物蛋白SQSTM1的表达,以及Atg蛋白Beclin1、Atg5、Atg7、Atg12、Atg16L1的表达;免疫荧光法进一步验证SQSTM1蛋白的表达。各组分别转染细胞自噬体指示探针(GFPLC3)和溶酶体红色探针(Lyso Red)后,激光共聚焦显微镜观察自噬体和自噬溶酶体的数量检测自噬流。结果:Western blot结果表明,Curcumin组LC3Ⅱ蛋白表达量较对照组明显增高(0.59±0.03 vs.0.11±0.01,P=0.000);同时,Curcumin组SQSTM1蛋白表达量较对照组明显降低(0.19±0.04 vs.0.66±0.05,P=0.000)。免疫荧光实验再次验证了SQSTM1蛋白的这个表达趋势。共聚焦显微镜观察发现,与对照组相比,Curcumin组细胞内自噬体数量增加(154.67±7.37 vs.89.00±7.21,P=0.000),同时自噬溶酶体数量也显著增加(84.67±12.50 vs.42.33±6.51,P=0.000)。Western blot进一步检测发现,与对照组相比,Curcumin组Atg蛋白Beclin1、Atg7、Atg16L1的表达均明显增加(0.55±0.09 vs.0.10±0.02,P=0.000;0.89±0.12 vs.0.39±0.07,P=0.000;0.36±0.07vs.0.13±0.02,P=0.003),而Atg5和Atg12改变差异无统计学意义(0.79±0.12 vs.0.79±0.10,P=0.470;0.94±0.13 vs.0.87±0.16,P=0.587)。结论:姜黄素增强N2a/APP695swe细胞的自噬水平,其机制可能与提高自噬体形成相关蛋白Beclin1、Atg7、Atg16L1的表达有关。

关键词：姜黄素自噬阿尔茨海默病 Beclin1 Atg7 Atg16L1

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缺氧诱导血管内皮细胞中Runx1表达及其功能的初步研究

缺氧诱导血管内皮细胞中Runx1表达及其功能的初步研究

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第七届全国呼吸系统重大疾病转化医学学术论坛

作者：罗羽莎李满满杨诚忠谭小玲杨戎重庆医科大学干细胞与细胞工程研究室陆军军医大学高原军事医学系高原生理学与病理学教研室湖北省妇幼保健院生殖中心

目的:探讨缺氧条件下人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcell,HUVEC)中Runx1 (Runt-related transcription factor 1)的表达及其在细胞损伤和炎症分子表达调控中的作用。方法:采用缺氧工作站模拟缺氧环境(1%O2),常氧组细胞于普通培养箱(21%O2)中常规培养。采用qRT-PCR和Western blot技术检测目的基因表达水平;采用乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒检测培养上清LDH活性;以葡萄糖转运体-1 (glucose transporter 1,Glut1)的转录水平反映缺氧诱导因子1(hypoxia induced factor 1,HIF-1)的转录活性,以Bcl-2/Bax蛋白比值反应细胞凋亡通路的活性。结果:qRT-PCR和Western blot的结果显示,与常氧组相比,缺氧组HUVEC细胞中Runx1持续高表达(P<0.05);经脯氨酸羟化酶抑制剂(dimethyloxalylglycine,DMOG)和去铁酰胺(desferrioxamine,DFX)处理后,常氧组HUVEC中缺氧诱导因子1亚基α(HIF-1α)蛋白和Glut1的mRNA水平增加,Runx1的mRNA也显著增加;分别干扰缺氧组HUVEC细胞和DFX处理组细胞中HIF-1α表达后,Runx1的mRNA显著下降,与各组干扰序列对照组相比,差异均有显著意义(P<0.05)。缺氧24h时细胞培养上清的LDH活性显著升高,Bcl-2/Bax蛋白水平的比值显著下调,同时,缺氧组HUVEC中炎症分子TNF-α、IL-1β、ICAM的mRNA水平显著增加,与常氧组相比,差异均具有显著意义(P<0.05)。干扰Runx1表达后,缺氧组细胞培养上清中LDH活性显著降低,Bcl-2/Bax蛋白水平的比值显著上调,炎症分子mRNA水平显著下调,与各组对照组相比,差异均具有显著意义(P<0.05)。结论:缺氧以HIF-1依赖的方式诱导血管内皮细胞中Runx1表达;Runx1通过介导血管内皮细胞损伤和炎症因子的表达,参与缺氧内皮细胞功能紊乱。

关键词： Runx1 缺氧诱导因子-1 细胞损伤炎症分子缺氧

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藏药桃儿七可促进慢性粒细胞白血病K562细胞的凋亡

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南方医科大学学报 2017年第2期37卷 226-231页

作者：周芳竹王欣代安亚黄峥兰李会黄宁姝冯文莉重庆医科大学检验医学院临床血液学教研室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院血液科重庆400016

目的探讨藏药桃儿七对慢性粒细胞白血病K562细胞凋亡的影响及相关机制。方法用不同浓度的桃儿七对K562细胞株进行不同时间梯度的处理,应用CCK8试验筛选桃儿七的最佳作用浓度及时间;流式细胞术检测细胞凋亡;瑞氏染色观察细胞形态学改变,D... 详细信息

目的探讨藏药桃儿七对慢性粒细胞白血病K562细胞凋亡的影响及相关机制。方法用不同浓度的桃儿七对K562细胞株进行不同时间梯度的处理,应用CCK8试验筛选桃儿七的最佳作用浓度及时间;流式细胞术检测细胞凋亡;瑞氏染色观察细胞形态学改变,DAPI染色观察细胞核形态变化;Western blotting分别检测凋亡相关蛋白PARP、caspase-3、Cleaved-caspase3的活化情况以及BCR/ABL、p-BCR/ABL、STAT5、p-STAT5蛋白表达变化。结果分别以1、2、3μg/m L浓度的桃儿七处理细胞12、24、36、48、72、96 h,K562细胞增殖呈浓度时间依赖性抑制,并筛选出2μg/m L,48 h为最佳处理方式。流式细胞术检测结果显示凋亡细胞数量呈时间依赖性增加,并在48 h凋亡最为显著;凋亡相关蛋白PARP、caspase-3以及Cleaved-caspase-3均呈时间依赖性活化。以2μg/m L桃儿七处理细胞48 h后,K562细胞形态发生不规则改变,出现核碎裂、溶解等凋亡特征;BCR/ABL、pBCR/ABL、STAT5、p-STAT5表达显著降低。结论藏药桃儿七能够促进慢性粒细胞白血病K562细胞凋亡,其机制可能通过抑制BCR/ABL-STAT5信号通路并激活线粒体凋亡途径来实现。

关键词：藏药桃儿七慢性粒细胞白血病 BCR/ABL STAT5信号通路凋亡

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新媒介环境下重庆市大学生阅读行为研究

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中华医学教育探索杂志 2018年第1期17卷 96-100页

作者：叶孟良罗业涛欧荣重庆医科大学公共卫生与管理学院卫生统计与信息管理教研室 400016 重庆医科大学公共卫生与管理学院图书馆 400016

目的通过调查新媒介环境下重庆市大学生阅读行为，了解重庆市大学生阅读行为现状及其对大学生生活学习的影响，为引导大学生良好阅读行为提供科学依据。方法以重庆市大学城三所高校577名学生为调查对象，利用调查问卷，对大学生的新媒... 详细信息

目的通过调查新媒介环境下重庆市大学生阅读行为，了解重庆市大学生阅读行为现状及其对大学生生活学习的影响，为引导大学生良好阅读行为提供科学依据。方法以重庆市大学城三所高校577名学生为调查对象，利用调查问卷，对大学生的新媒体使用情况、阅读行为以及数字化阅读对生活学习的影响等进行调查。计数资料用例数和构成比表示，运用卡方检验、卡方趋势检验、非参数检验进行分析。结果92．5％（534／577）的大学生把手机作为自己获取信息的首选工具，娱乐与休闲是大学生数字化阅读的主要动因，学习时侧重选择纸质资料。97．6％（563／577）的学生睡前进行数字化阅读影响了其睡眠，53．6％（309／577）的学生认为新媒体阅读对生活学习利大于弊。结论大学生生活和学习具有明显的数字化特征，但传统纸质阅读仍然被保留和延续。数字化阅读对多数学生身心状况造成了不良影响，同时部分大学生存在不良上网习惯及信息素养教育缺乏等问题。

关键词：新媒体阅读行为数字化阅读纸质阅读

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GRASP65的表达对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

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重庆医科大学学报 2017年第12期42卷 1614-1619页

作者：易永芬张婉玉彭豆豆罗祎重庆医科大学基础医学院病理学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学附属第一医院妇产科重庆400016

目的:探讨高尔基体堆叠蛋白65(Golgi reassembly stacking protein 65,GRASP65)在体外对人胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。方法:首先,通过Western blot和RT-qRCR鉴别低分化胃癌细胞MKN-45、中分化胃癌细胞SGC-7901、高分化... 详细信息

目的:探讨高尔基体堆叠蛋白65(Golgi reassembly stacking protein 65,GRASP65)在体外对人胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。方法:首先,通过Western blot和RT-qRCR鉴别低分化胃癌细胞MKN-45、中分化胃癌细胞SGC-7901、高分化胃癌细胞MKN-28和正常胃黏膜细胞GES-1中GRASP65蛋白和mRNA的表达量。然后,用si RNA干扰技术通过Lipofectamine 2000瞬时转染下调和MKN-45细胞中GRASP65的表达量。用qRT-PCR和Western blot检测转染后各组细胞中GRASP65的蛋白和mRNA表达量以证实转染成功。最后,用CCK-8、流式细胞术、Transwell迁移和侵袭实验检测转染后的各组胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的改变。结果:Western blot和qRT-RCR结果显示MKN-45细胞和SGC-7901细胞中GRASP65的蛋白和mRNA表达量明显高于MKN-28细胞和GES-1细胞中GRASP65蛋白和mRNA表达量(P<0.05),故选择低分化胃癌细胞MKN-45作为实验细胞株来下调GRASP65的表达量。qRT-PCR和Western blot结果证明转染成功,转染组GRASP65的mRNA和蛋白表达量与阴性对照组和空白对照组对比有统计学意义(P<0.05)。CCK-8、流式细胞术、Transwell迁移和侵袭实验均证明,下调MKN-45细胞的GRASP65的表达量可抑制胃癌细胞MKN-45体外增殖、迁移和侵袭能力,并促进细胞凋亡。结论:下调GRASP65的表达可明显减弱胃癌细胞的体外增殖能力,同时促进胃癌细胞的凋亡、体外侵袭和迁移。

关键词： GRASP65 siRNA 增殖凋亡迁移侵袭

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死亡时间推断最新研究与展望

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法医学杂志 2018年第5期34卷 459-467页

作者：王琪林汉成徐纪茹黄平王振原重庆医科大学基础医学院法医学教研室重庆400016 西安交通大学医学部法医学院陕西西安710061 西安交通大学医学部基础医学院陕西西安710061 司法鉴定科学研究院上海市法医学重点实验室上海市司法鉴定专业技术服务平台上海200063

死亡时间推断相关研究在法医学领域中有着极为重要的地位和意义,一直是法医病理学实践中亟待解决的重大问题之一。传统的方法与手段存在许多缺陷,新方法的引入势在必行。随着各种新技术的涌现,关于死亡时间推断的研究有着从简单到复杂... 详细信息

死亡时间推断相关研究在法医学领域中有着极为重要的地位和意义,一直是法医病理学实践中亟待解决的重大问题之一。传统的方法与手段存在许多缺陷,新方法的引入势在必行。随着各种新技术的涌现,关于死亡时间推断的研究有着从简单到复杂的趋势,数据量也随之不断增长。本文首先总结了既往死亡时间推断的方法,最后对基于大数据人工智能算法在法医学死亡时间推断研究中的应用进行了展望。

关键词：法医病理学死亡时间大数据人工智能综述

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热休克因子1表达与宫颈癌临床病理特征及生存的关系

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第三军医大学学报 2017年第6期39卷 560-563页

作者：余少敏成敏侯靓思张文君刘斌令狐华重庆医科大学附属第一医院妇产科重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理学教研室重庆400016

目的分析宫颈癌组织中热休克因子1(heat-shock factor 1,HSF1)表达与临床病理特征及生存的相关性。方法收集2009年11月至2013年12月于重庆医科大学附属第一医院妇科直接行手术治疗的FIGO分期为ⅠA~ⅡA期的宫颈癌病例,检测并分析癌组织中... 详细信息

目的分析宫颈癌组织中热休克因子1(heat-shock factor 1,HSF1)表达与临床病理特征及生存的相关性。方法收集2009年11月至2013年12月于重庆医科大学附属第一医院妇科直接行手术治疗的FIGO分期为ⅠA~ⅡA期的宫颈癌病例,检测并分析癌组织中HSF1的表达与临床病理特征及无进展生存时间(progress free survival,PFS)的相关性。结果癌组织中HSF1表达强度与癌细胞肌层浸润深度呈显著正相关(P=0.02);在高级别病变、脉管癌栓阳性及淋巴结阳性患者组织中HSF1表达高于低级别病变、无脉管癌栓及淋巴结转移患者,但差异无统计学意义(P=0.45、0.80、0.13)。HSF1表达的高、低对早期宫颈癌的PFS没有显著影响(P=0.33),但癌症基因组图谱(the Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中320例宫颈癌患者的基因数据分析显示:HSF1基因表达越强,患者的预后越差(P=0.02)。结论癌组织中HSF1高强度表达与宫颈癌进展程度直接相关,并可能直接影响生存。

关键词：宫颈癌热休克因子1 临床病理特征无进展生存时间

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内质网应激在心脏疾病中的研究进展

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中国临床药理学与治疗学 2019年第11期24卷 1310-1314页

作者：王楷扬李小丽蔡永青中国人民解放军联勤保障部队第九二七医院药械科云南普洱665000 重庆医科大学药学院药理学教研室重庆400016 重庆市高校生物化学与分子药理学重点实验室重庆400016 陆军特色医学中心药剂科重庆400042

内质网是胞内蛋白加工和修饰的重要细胞器,其为维持细胞内稳态和蛋白质质量控制会产生一系列反应,包含未折叠蛋白反应。内质网中未折叠或错误折叠蛋白大量累积,将进一步导致内质网应激,引起细胞和机体功能紊乱。近年研究发现,内质网应... 详细信息

内质网是胞内蛋白加工和修饰的重要细胞器,其为维持细胞内稳态和蛋白质质量控制会产生一系列反应,包含未折叠蛋白反应。内质网中未折叠或错误折叠蛋白大量累积,将进一步导致内质网应激,引起细胞和机体功能紊乱。近年研究发现,内质网应激相关信号通路与多种心脏疾病的发生发展高度相关。本文对内质网应激在缺血性心脏病、原发性心肌病、心肌肥大和心力衰竭的发生发展中的作用进行了综述。基于内质网应激在心脏疾病中的作用机制,可为通过靶向内质网应激治疗心脏疾病提供理论依据和应用手段。

关键词：内质网应激心脏疾病靶向作用

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