检索结果-内蒙古大学图书馆

生物医学工程学杂志 2013年第6期30卷 1298-1301页

作者：聂佳莹杨致邦唐磊黄进重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室重庆400016

原核表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)酸适应感应蛋白CrdS,探讨其酸适应的调控机制。提取***26695标准株全基因组DNA作为模版,PCR扩增编码CrdS蛋白的基因hp1364,构建重组克隆质粒pUCm-T-hp1364和原核表达质粒pQE30-hp1364,经PC... 详细信息

原核表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)酸适应感应蛋白CrdS,探讨其酸适应的调控机制。提取***26695标准株全基因组DNA作为模版,PCR扩增编码CrdS蛋白的基因hp1364,构建重组克隆质粒pUCm-T-hp1364和原核表达质粒pQE30-hp1364,经PCR、双酶切和测序鉴定正确后,转化大肠埃希菌XL1blue,IPTG诱导表达CrdS蛋白。结果表明:通过Western blot鉴定和SDS-PAGE分析该重组蛋白的相对分子质量约为46kDa,主要以包涵体形式存在。原核表达并成功获得的*** CrdS蛋白,能够为探讨其酸适应的调控机制和新的抗***感染的途径提供实验材料。

关键词：幽门螺杆菌酸适应感应蛋白原核表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

幽门螺杆菌hp1188基因的原核表达及免疫学鉴定

引用

中国免疫学杂志 2009年第4期25卷 340-345页

作者：韩飞杨致邦郭丽媛范贵荣重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室；神经科学研究中心；基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室重庆400016

目的:构建高效表达Hp1188重组蛋白的基因工程菌pQE30-hp1188-DH5α,提纯重组蛋白,鉴定其抗原性和免疫原性。通过小鼠灌胃试验,验证Hp1188蛋白阻止幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)在胃内定植的作用。方法:构建重组质粒pQE30-hp1188,... 详细信息

目的:构建高效表达Hp1188重组蛋白的基因工程菌pQE30-hp1188-DH5α,提纯重组蛋白,鉴定其抗原性和免疫原性。通过小鼠灌胃试验,验证Hp1188蛋白阻止幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)在胃内定植的作用。方法:构建重组质粒pQE30-hp1188,DNA测序分析正确后,转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达。表达蛋白用Ni2+-NTA树脂纯化,SDS-PAGE分析纯度,Bradford法测定浓度,Western blot鉴定对相应抗原的特异性,双向琼脂扩散实验检测效价。纯化重组蛋白和粘膜佐剂霍乱毒素B亚单位(Cholera toxin subunit B,CTB)的混合液灌胃免疫接种预防组BALB/c小鼠,同时设阴性对照组和阳性对照组,免疫4周后用*** NCTC 11637攻击3次,末次攻击4周后处死小鼠,进行胃组织***培养;***定植半定量、炎症程度及其炎症活动度的评分,以评价重组蛋白对胃组织***感染的免疫保护作用。结果:构建的重组表达质粒pQE30-hp1188经DNA测序证实序列完整,插入的基因片段全长810bp,与基因文库中的hp1188基因同源性达98%,并在大肠杆菌DH5α中表达出分子量约为30kD大小的可溶性目的蛋白,表达量占全菌总量的47%,表达蛋白纯化后纯度达90%,浓度为1.0mg/ml。Western blot证实有良好抗原结合特异性,双向琼脂扩散效价为1∶16。预防组***感染率、定植及炎症程度评分均明显低于阳性对照组(P<0.05)。预防组不仅可以降低***的定植,而且能减轻***造成的小鼠胃组织的局部慢性炎症反应。结论:成功构建了基因工程菌pQE30-hp1188-DH5α,并高效表达了Hp1188重组蛋白,表达蛋白具有良好的抗原性和免疫原性,在小鼠体内能阻止***的定植。

关键词：幽门螺杆菌 hp1188基因表达免疫原性体内试验

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

分枝杆菌噬菌体D29裂解酶gp10的原核表达及抗脓肿分枝杆菌活性

引用

中国生物制品学杂志 2011年第11期24卷 1269-1272页

作者：熊玉霞杨致邦于拽拽戴维蒋任举蒋英重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室重庆400016 重庆医科大学

目的克隆并原核表达分枝杆菌噬菌体D29裂解酶gp10基因,观察重组蛋白对脓肿分枝杆菌的抑菌作用。方法以噬菌体D29基因组DNA为模板,PCR扩增gp10基因片段,克隆至pET-32a(+)载体上,构建重组原核表达质粒pET-32a-gp10,转化*** BL21(DE3),IPT... 详细信息

目的克隆并原核表达分枝杆菌噬菌体D29裂解酶gp10基因,观察重组蛋白对脓肿分枝杆菌的抑菌作用。方法以噬菌体D29基因组DNA为模板,PCR扩增gp10基因片段,克隆至pET-32a(+)载体上,构建重组原核表达质粒pET-32a-gp10,转化*** BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经SDS-PAGE分析,亲和层析纯化后,采用杯碟法检测其抑菌活性。结果 PCR扩增获得长1 454 bp的gp10基因片段,重组表达质粒pET-32a-gp10经PCR、双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为54 800,表达量占菌体总蛋白的97.4%,破菌上清及破菌沉淀中均可见目的蛋白的表达,纯化后纯度可达90%,浓度为0.5 mg/ml;重组蛋白对脓肿分枝杆菌有抑菌作用。结论已成功表达重组分枝杆菌噬菌体D29裂解酶gp10,其对脓肿分枝杆菌具有抑菌作用,为抗脓肿分枝杆菌及其他非结核分枝杆菌感染新药物的研制提供了依据。

关键词：分枝杆菌非典型性细菌噬菌体裂解酶基因表达抗菌活性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

脓肿分枝杆菌非溶血性磷脂酶C的原核表达及活性鉴定

引用

中国生物制品学杂志 2012年第6期25卷 685-688页

作者：王志刚杨致邦杜祎石中全邓西川周雪重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室重庆400016 重庆医科大学

目的原核表达脓肿分枝杆菌非溶血性磷脂酶C,并检测其生物学活性。方法以脓肿分枝杆菌标准株(ATCC19977)基因组DNA为模板,PCR扩增非溶血性磷脂酶C基因,克隆至pQE-30载体,构建重组原核表达质粒pQE-30-MAB_0555,转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱... 详细信息

目的原核表达脓肿分枝杆菌非溶血性磷脂酶C,并检测其生物学活性。方法以脓肿分枝杆菌标准株(ATCC19977)基因组DNA为模板,PCR扩增非溶血性磷脂酶C基因,克隆至pQE-30载体,构建重组原核表达质粒pQE-30-MAB_0555,转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经Ni2+-NTA层析纯化后,采用杯碟法检测其生物学活性。结果重组原核表达质粒pQE-30-MAB_0555经PCR、双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为53 000,纯化后蛋白浓度为0.40 mg/ml,具有溶解蛋黄中卵磷脂的酶活性,无溶血活性。结论成功地在大肠杆菌DH5α中表达了非溶血性磷脂酶C,为进一步研究其生物学功能及其在脓肿分枝杆菌致病机制中的作用提供了材料,也为研制脓肿分枝杆菌临床治疗药物及寻找新的药物作用靶点提供了思路。

关键词：脓肿分枝杆菌非溶血性磷脂酶C 原核细胞基因表达生物活性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

肺炎链球菌pbp1a基因重组原核表达质粒的构建与鉴定

引用

中国生物制品学杂志 2012年第10期25卷 1267-1270页

作者：周侠唐紫薇杨致邦蒋仁举熊玉霞于拽拽重庆医科大学神经科学研究中心重庆医科大学基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室重庆400016 四川大学

目的构建肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,***)pbp1a基因重组的原核表达质粒,并进行鉴定。方法化学合成***含STMK区的pbp1a基因片段,PCR扩增后,与pUC19载体连接,构建重组表达质粒pUC19-pbp1a,转化耐青霉素的pbp1a基因突变的***,测... 详细信息

目的构建肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,***)pbp1a基因重组的原核表达质粒,并进行鉴定。方法化学合成***含STMK区的pbp1a基因片段,PCR扩增后,与pUC19载体连接,构建重组表达质粒pUC19-pbp1a,转化耐青霉素的pbp1a基因突变的***,测定青霉素对转化菌的最低抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC),以鉴定PBP1a的活性;SDS-PAGE和Western blot分析重组PBP1a蛋白的表达。结果 pbp1a基因扩增产物可见约330 bp的特异条带,大小与预期一致,测序表明重组质粒全长360 bp,无碱基的缺失、插入等突变;青霉素对转化菌的MIC从8μg/ml下降为2μg/ml;表达的重组PBP1a蛋白相对分子质量约为11 000,可与抗***青霉素敏感株兔血清特异性结合。结论成功构建了*** pbp1a基因重组原核表达质粒,其能在***中表达有活性的PBP1a蛋白,为进一步研究PBPs在细菌耐药变异中的作用提供了实验材料,也为进一步探讨消除细菌耐药性变异的措施奠定了基础。

关键词：肺炎链球菌 pbp1a基因原核细胞基因表达耐药性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

幽门螺杆菌感应蛋白CrdS的原核表达及生物信息学分析

引用

中国生物制品学杂志 2013年第9期26卷 1228-1231,1236页

作者：聂佳莹杨致邦唐磊黄进蒋英重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室重庆400016

目的原核表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)感应蛋白CrdS,并对其进行生物信息学分析,以探讨其酸适应的调控机制。方法从*** 26695标准株全基因组DNA中PCR扩增编码CrdS蛋白的基因hp1364,插入原核表达载体pQE30,构建重组表达质粒pQ... 详细信息

目的原核表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)感应蛋白CrdS,并对其进行生物信息学分析,以探讨其酸适应的调控机制。方法从*** 26695标准株全基因组DNA中PCR扩增编码CrdS蛋白的基因hp1364,插入原核表达载体pQE30,构建重组表达质粒pQE30-hp1364,转化大肠埃希菌(***)XL1-blue,IPTG诱导表达重组CrdS蛋白。表达的重组蛋白经Western blot鉴定后,进行生物信息学分析。结果重组表达质粒pQE30-hp1364经双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为46 000,表达量占菌体总蛋白的30%,主要以包涵体形式存在,可与Rabbit anti His-Tag Polyclonal Antibody特异性结合;生物信息学分析显示,CrdS的核苷酸序列和氨基酸序列与其他***菌株(HpG27、F30、B38)具有高度同源性,表面有许多亲水性区域,含多种易被磷酸化的氨基酸。结论成功原核表达了*** CrdS蛋白,并进行了生物信息学分析,为进一步探讨CrdS的感应机制及通过阻断信号感应抗***感染的途径提供了实验材料。

关键词：幽门螺杆菌 CrdS蛋白原核细胞基因表达生物信息学

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

幽门螺杆菌CrdR蛋白的原核表达

引用

中国生物制品学杂志 2013年第9期26卷 1260-1263页

作者：唐磊杨致邦聂佳莹黄进重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室重庆400016

目的原核表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)CrdR蛋白(即HP1365),以探讨其在酸适应中的调控机制。方法从*** 26695标准株基因组DNA中PCR扩增hp1365基因,克隆至表达载体pGEX-6P-1中,转化*** JM109,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果重组表达质粒pGEX-hp1365经双酶切、PCR和测序鉴定构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为25 000,主要以包涵体形式表达,可与鼠抗His标签单克隆抗体特异性结合。结论原核表达了*** CrdR蛋白,为进一步探讨其对酸信号的感应机制及其通过阻断酸信号的感应抗***感染的途径奠定物质基础。

关键词：幽门螺杆菌酸适应 CrdR蛋白原核细胞基因表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

IL-1β-31、IL-10-819和TNF-α-1031基因多态性与幽门螺杆菌感染相关性胃溃疡及胃癌易感性的关系

引用

中国生物制品学杂志 2010年第5期23卷 517-520页

作者：苏善平杨致邦田一玲向瑜吴敏马小京重庆医科大学基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室基础医学院病原生物学教研室神经科学研究中心重庆400016 重庆医科大学附属第一医院检验科重庆400016

目的分析人群中IL-1β-31、IL-10-819和TNF-α-1031基因多态性与幽门螺杆菌(***)感染相关性胃溃疡及胃癌易感性之间的关系,为临床诊断及预防该病提供新的思路和方法。方法选取***阳性的51例胃溃疡患者、43例胃癌患者和100例健康对照者,... 详细信息

目的分析人群中IL-1β-31、IL-10-819和TNF-α-1031基因多态性与幽门螺杆菌(***)感染相关性胃溃疡及胃癌易感性之间的关系,为临床诊断及预防该病提供新的思路和方法。方法选取***阳性的51例胃溃疡患者、43例胃癌患者和100例健康对照者,采用PCR-限制性长度片段多态法和多重引物特异PCR法,检测其IL-1β-31、IL-10-819和TNF-α-1031位点,分析其多态性。结果在胃溃疡组中TNF-α-1031各基因型的频率分布与健康对照组比较,差异有统计学意义。在胃癌组中TNF-α-1031各基因型的频率分布与健康对照组比较,差异有统计学意义;Logistic回归分析表明,与携带TNF-α-1031T/T者相比,携带TNF-α-1031C/C者发生胃溃疡的危险性为OR=5.84(95%CI:1.00～33.84),发生胃癌的危险性为OR=6.95(95%CI:1.19～40.63)。在疾病组和健康对照组中,IL-10-819和IL-1β-31各基因型频率的分布差异无统计学意义。结论 TNF-α-1031基因多态性与胃溃疡、胃癌的易感性相关。

关键词： IL-1β IL-10 肿瘤坏死因子-α 基因多态性幽门螺杆菌胃溃疡胃癌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

白细胞介素-1B和肿瘤坏死因子-α基因多态性与胃溃疡、胃癌易感性的相关性

引用

中国生物制品学杂志 2009年第10期22卷 1010-1014页

作者：向瑜杨致邦陈瀑苏善平郭丽媛石海波周汛重庆医科大学基础医学院基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室重庆400016 重庆医科大学基础医学院神经科学研究中心重庆400016 重庆医科大学附属第一医院重庆400016

目的探讨人群中白细胞介素-1B(IL-1B)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因多态性与胃溃疡、胃癌易感性的相关性。方法选取幽门螺杆菌阳性的39例胃溃疡患者、35例胃癌患者和70名健康对照者,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP... 详细信息

目的探讨人群中白细胞介素-1B(IL-1B)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因多态性与胃溃疡、胃癌易感性的相关性。方法选取幽门螺杆菌阳性的39例胃溃疡患者、35例胃癌患者和70名健康对照者,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析法检测该人群中IL-1B-511、TNF-A-308和TNF-A-857基因多态性。结果疾病组与对照组中IL-1B-511各基因型频率的分布差异无统计学意义。与对照组比较,胃溃疡组TNF-A-308各基因型的频率分布、TNF-A-857各基因型的频率分布以及胃癌组TNF-A-308各基因型的频率分布差异均有统计学意义。经Logistic回归分析,与携带TNF-A-308G/G者比较,携带TNF-A-308A/A者发生胃溃疡的危险性为OR=21.62(95%CI:2.07～226.13);与携带TNF-A-857C/C者比较,携带TNF-A-857T/T者发生胃溃疡的危险性为OR=5.37(95%CI:1.28～22.50);与携带TNF-A-308G/G者比较,携带TNF-A-308A/A者发生胃癌的危险性为OR=16.41(95%CI:1.62～116.55)。结论TNF-α基因多态性与胃溃疡、胃癌的易感性相关。

关键词：白细胞介素-1B 肿瘤坏死因子-α 基因多态性胃溃疡胃癌幽门螺杆菌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

硫糖铝对抗幽门螺杆菌重组VacA卵黄抗体的保护作用

引用

中国生物制品学杂志 2009年第5期22卷 457-460,467页

作者：郭丽媛杨致邦田一玲黄伟韩飞范贵荣向瑜重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室神经科学研究中心基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室重庆400016 西南大学荣昌校区动物医学系重庆402460

目的观察硫糖铝对抗幽门螺杆菌重组细胞空泡毒素抗原(VacA)卵黄抗体(IgY)的保护作用,为制备能耐受胃酸和蛋白酶的IgY制剂奠定基础。方法诱导重组菌DH5α-vacA-pQE30,大量表达并纯化VacA重组蛋白,免疫洛曼母鸡,制备VacAIgY,并进行纯化。... 详细信息

目的观察硫糖铝对抗幽门螺杆菌重组细胞空泡毒素抗原(VacA)卵黄抗体(IgY)的保护作用,为制备能耐受胃酸和蛋白酶的IgY制剂奠定基础。方法诱导重组菌DH5α-vacA-pQE30,大量表达并纯化VacA重组蛋白,免疫洛曼母鸡,制备VacAIgY,并进行纯化。在不同pH值的IgY液中加入不同浓度的硫糖铝和不同浓度的胃蛋白酶,将含不同浓度硫糖铝的IgY反复冻融7次,将含30%硫糖铝的IgY室温放置1d～4周,ELISA法测定各实验组IgY的相对抗体活性(AT/AC)。结果在pH1.5、2.0和3.0的条件下,含30%～60%硫糖铝的IgY的相对抗体活性高于不加硫糖铝的IgY;在pH1.5条件下,60%硫糖铝可使IgY的相对抗体活性保持68.7%;在pH2.0和3.0条件下,50%和40%以上的硫糖铝几乎可完全保持IgY的相对抗体活性。在pH值为2.0和3.0时,正常胃蛋白酶浓度(0.02mg/ml)下,30%以上的硫糖铝均可有效保护IgY的相对抗体活性。30%以上的硫糖铝可增强IgY的抗冻融能力。室温放置4周后,含30%硫糖铝的IgY仍能保持80%以上的相对抗体活性。结论30%以上的硫糖铝可增强VacAIgY对低pH和胃蛋白酶的耐受能力及抗冻融能力,是较理想的IgY保护剂。

关键词：幽门螺杆菌细胞空泡毒素抗原卵黄抗体硫糖铝抗体活性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：