检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2011年第22期33卷 2349-2352页

作者：李莹刘淑丹杨彦春董世武熊剑李方周继祥第三军医大学西南医院口腔科重庆400038 宁夏医科大学总医院干细胞研究所银川750004 第三军医大学基础医学部人体解剖学教研室重庆400038

目的构建去甲基化酶(methyl-CpG binding domain 2,MBD2)基因腺病毒载体,并观测其在人颌下腺(human submandibular gland,HSG)细胞中的表达。方法以HSG细胞总RNA为模板,RT-PCR法扩增MBD2基因全长编码序列,克隆入载体pMD18-T后,亚克隆入pAdTrack-CMV腺病毒穿梭载体,构建pAdTrack-MBD2重组体。该重组体与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1于BJ5183菌中同源重组,产生重组腺病毒质粒Ad-MBD2,该质粒经293细胞包装,获得具有感染力的Ad/MBD2重组腺病毒颗粒,将该病毒颗粒感染HSG细胞,倒置显微镜检测转染后HSG细胞生长变化及MBD2在其中的表达等情况。图像分析法计算感染效率。RT-PCR法检测MBD2基因在该细胞中的表达变化。结果成功克隆到909 bp大小的MBD2基因,构建了其腺病毒载体Ad/MBD2,该腺病毒载体经293细胞成功包装,并获具感染力的Ad/MBD2重组腺病毒颗粒,其感染效率约70%。感染的HSG高表达MBD2。结论成功克隆到MBD2基因,构建了其重组腺病毒载体Ad/MBD2,并证实了其感染HSG细胞的有效表达。

关键词：去甲基化酶基因重组腺病毒颗粒人颌下腺细胞

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复合黄芹合剂对实验性牙周炎大鼠牙龈上皮中CD14表达的影响

复合黄芹合剂对实验性牙周炎大鼠牙龈上皮中CD14表达的影响

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2011第九次全国牙周病学学术会议

作者：邓赟张浩杨恒周黎明肖晓蓉丁一成都市第五人民医院 611130 重庆医科大学附属口腔医院 400015 口腔疾病研究国家重点实验室(四川大学) 610041 四川大学华西口腔医院牙周科 610041 四川大学基础医学与法医学院药理学教研室 610041 口腔疾病研究国家重点实验室(四川大学) 610041 四川大学华西口腔医院牙周科 610041

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研究生药理学教学改革初探

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中华医学教育杂志 2010年第2期30卷 285-286,289页

作者：黄家君刘颖菊蒋青松李少林重庆医科大学药学院药理学教研室 400016 重庆医科大学药学院基础医学院核医学教研室 400016

时代赋予高等医药院校的使命和责任是培养高素质的医药专门人才，而研究生教育则是高素质人才培养的重要途径。药理学是医药教育的一门主干课程。本文从教学目标、教学实施过程、评价体系三个方面探讨了研究生药理学课程的教学改革，以... 详细信息

时代赋予高等医药院校的使命和责任是培养高素质的医药专门人才，而研究生教育则是高素质人才培养的重要途径。药理学是医药教育的一门主干课程。本文从教学目标、教学实施过程、评价体系三个方面探讨了研究生药理学课程的教学改革，以实现培养具有创新思维和创造能力的高素质医药专门人才的目的。

关键词：研究生药理学教学改革人才培养

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利用DNA免疫技术制备抗登革2型病毒NS2B蛋白多克隆抗体

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第三军医大学学报 2010年第4期32卷 327-330页

作者：刘丽梅陈宗涛高娜田衍平陈炜张俊磊王嘉丽安静第三军医大学西南医院病理学研究所重庆400038 第三军医大学基础医学部微生物学教研室、重庆市微生物工程实验室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室、重庆市神经科学研究所重庆400038 首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

目的构建登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。方法PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染... 详细信息

目的构建登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。方法PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染Vero细胞,检测目标蛋白的表达。用该表达质粒免疫BALB/c小鼠,制备抗NS2B抗血清。结果成功构建真核表达重组质粒pCAGGS-P7/NS2B,该重组质粒具有良好的免疫原性,免疫小鼠后所获的抗血清,抗体效价达1∶3200,Western blot和间接免疫荧光证实抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。结论通过DNA免疫所制备小鼠抗DV2-NS2B抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。

关键词：登革热病毒病毒非结构蛋白质类 NS2B 小鼠近交BALBC

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屎肠球菌类毒力基因hyl的致病性研究

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生物医学工程学杂志 2009年第3期26卷 601-605页

作者：吴利先黄文祥王国富孙小平大理学院基础医学部微生物学教研室大理671000 重庆医科大学附属第一医院重庆400016

采用菌落杂交法检测364株不同脉冲场电泳(PFGE)型的屎肠球菌中透明质酸酶(hyl)基因的分布。用自杀质粒pTX4577通过体内同源重组,筛选获得hyl基因的突变株,体外研究hyl基因缺失对突变株生长能力的影响。采用小鼠腹膜炎模型体内研究hyl基... 详细信息

采用菌落杂交法检测364株不同脉冲场电泳(PFGE)型的屎肠球菌中透明质酸酶(hyl)基因的分布。用自杀质粒pTX4577通过体内同源重组,筛选获得hyl基因的突变株,体外研究hyl基因缺失对突变株生长能力的影响。采用小鼠腹膜炎模型体内研究hyl基因突变株的毒力下降情况。结果显示,在临床分离菌株中hyl基因阳性率为32.76%,明显高于非临床分离菌株(5.30%)。经同源重组,利用卡那霉素抗性筛选,PCR、PFGE和Southern印迹进行鉴定获得hyl基因突变株,命名为*hyl。突变株在体外的生长能力低于野生株。小鼠腹膜炎模型中,在相同细菌感染浓度(3.7×109cfu)下,野生株TX2466组小鼠的存活率为0,而*hyl组小鼠的存活率为50%,差异有显著性。hyl基因主要出现于临床感染的屎肠球菌中,在屎肠球菌致病中起着重要的作用,可能是屎肠球菌的毒力因子之一。

关键词：屎肠球菌毒力基因透明质酸酶致病性

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短期丰富生存环境对中老年大鼠空间学习能力的作用及性别差异

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重庆医科大学学报 2009年第5期34卷 521-524页

作者：黄春霞杨俊卿卢伟杨姝李琛唐勇重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆医科大学基础医学院药理学教研室重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆400016

目的:探讨短期丰富生存环境对中老年大鼠空间学习能力的作用及性别差异。方法:将14月龄的Sprague-Dawle(ySD)大鼠分雌、雄性后再随机分为丰富生存环境组与空白对照组,前者在丰富生存环境条件下饲养,后者在普通环境下饲养,4个月后分别测... 详细信息

目的:探讨短期丰富生存环境对中老年大鼠空间学习能力的作用及性别差异。方法:将14月龄的Sprague-Dawle(ySD)大鼠分雌、雄性后再随机分为丰富生存环境组与空白对照组,前者在丰富生存环境条件下饲养,后者在普通环境下饲养,4个月后分别测试在Morris水迷宫中的成绩。结果:短期丰富生存环境下,雌性大鼠的空间学习能力显著强于空白对照组,而同样条件干预的雄性大鼠空间学习能力与空白对照组相比无显著性差异。另外,在普通环境中饲养4个月的雄性大鼠空间学习能力明显强于雌性大鼠,而丰富生存环境条件下雌、雄性大鼠空间学习能力相比无显著性差异。结论:中老年雄性大鼠空间学习能力强于雌性大鼠,但中老年雌性大鼠大脑功能的可塑性可能要强于雄性大鼠,短期丰富生存环境的干预对于中老年雌性大鼠空间学习能力有显著性影响。本研究结果为将来寻找延缓大脑衰老过程的行为学手段提供了重要的理论依据。

关键词：大鼠空间学习能力丰富生存环境性别差异 Morris水迷宫

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CHO细胞中稳定表达人整合素β3对登革2型病毒感染的影响

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第三军医大学学报 2009年第2期31卷 98-100页

作者：张俊磊高娜陈炜陈宗涛徐小峰安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 首都医科大学微生物学教研室北京100069

目的检测CHO细胞中稳定表达人整合素β3对登革2型病毒(Dengue virus serotype 2,DV2)感染的影响。方法将表达人整合素β3的质粒转染CHO细胞,通过G418筛选、流式细胞学检测和间接免疫荧光实验,建立稳定表达整合素β3的CHO细胞株;利用该... 详细信息

目的检测CHO细胞中稳定表达人整合素β3对登革2型病毒(Dengue virus serotype 2,DV2)感染的影响。方法将表达人整合素β3的质粒转染CHO细胞,通过G418筛选、流式细胞学检测和间接免疫荧光实验,建立稳定表达整合素β3的CHO细胞株;利用该细胞株进行感染实验,检测人整合素β3稳定表达对DV2易感性的影响。结果共获得了C9、C10、F8和H6 4个高表达整合素β3的细胞克隆,其中克隆F8中整合素β3的表达水平最高,是对照组的1.89倍。感染实验结果显示,进入整合素β3高表达细胞株的病毒数量均有所增高,增高的比例与整合素β3的表达增高趋势基本一致,进入F8细胞株的病毒量最高,是对照细胞的2.63倍,说明整合素β3有助于DV2进入细胞。结论在CHO细胞中外源性表达整合素β3可以提高DV2的感染率。

关键词：登革病毒整合素β3 CHO细胞

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2007-2008年北京地区CA16VP1区系统进化分析

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第三军医大学学报 2009年第23期31卷 2342-2346页

作者：王娟罗珍范东瀛高娜朱俊萍安静首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069 首都医科大学附属北京儿童医院皮肤科北京100045 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的了解2007-2008年北京地区柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)流行情况及其种系进化规律和基因分型。方法收集北京地区2007-2008年133例手足口病病例临床标本,从中筛选CA16毒株,扩增部分毒株VP1区并进行序列测定和分析。结... 详细信息

目的了解2007-2008年北京地区柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)流行情况及其种系进化规律和基因分型。方法收集北京地区2007-2008年133例手足口病病例临床标本,从中筛选CA16毒株,扩增部分毒株VP1区并进行序列测定和分析。结果共筛选得到39例45份CA16阳性标本,测定其中16株病毒的VP1区核苷酸序列,其同源性为91.43%～98.65%,氨基酸同源性为97.98%～100%。该16株病毒与GenBank中选取的24株CA16参考株的核苷酸同源性为78.13%～98.65%,氨基酸同源性为89.9%～100%。16株北京分离株中的9株与近年多数中国大陆分离株形成进化树上亲缘关系较近的一群,其余7株与我国台湾及周边国家的一系列分离株亲缘关系较近。结论CA16为北京地区手足口病的主要致病原之一,本地区毒株同源性较高,同GenBank中24株CA16参比毒株序列进行系统进化分析显示其属于B基因群,16株北京分离株在系统进化树上有分别归属于两支的趋势。

关键词：柯萨奇病毒A组16型手足口病系统进化分析

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登革2型病毒NS1-NS2a基因真核表达载体的构建及鉴定

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第三军医大学学报 2009年第6期31卷 557-559页

作者：陈炜王嘉丽高娜田衍平陈宗涛徐小峰张俊磊刘丽梅江雯安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

目的构建登革2型病毒NS1-NS2a基因真核表达质粒。方法RT-PCR扩增NS1-NS2a基因片段后,将其克隆入真核表达载体pReceiver-M01a;通过PCR、酶切、测序和间接免疫荧光染色鉴定重组质粒。结果经PCR扩增、酶切和测序验证,重组质粒构建正确,命名... 详细信息

目的构建登革2型病毒NS1-NS2a基因真核表达质粒。方法RT-PCR扩增NS1-NS2a基因片段后,将其克隆入真核表达载体pReceiver-M01a;通过PCR、酶切、测序和间接免疫荧光染色鉴定重组质粒。结果经PCR扩增、酶切和测序验证,重组质粒构建正确,命名为pRe-NS1-NS2a;重组质粒转染Vero细胞后,间接免疫荧光染色显示细胞质中有登革2型病毒特异性蛋白的表达。结论成功构建了真核表达质粒pRe-NS1-NS2a。

关键词：登革2型病毒 NS1-NS2a基因真核表达

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CYP3A22稳定表达HepG_2细胞株的建立及其探针药物代谢活性鉴定

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第三军医大学学报 2009年第16期31卷 1552-1555页

作者：薛正楷魏泓商海涛杨根庆叶彬重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 第三军医大学基础医学部实验动物学教研室重庆400038 河南省新乡医学院第三附属医学院检验科河南新乡543003

目的建立稳定表达Bama小型猪细胞色素CYP3A22的HepG2细胞株。方法通过从Bama小型猪肝组织中提取tRNA、经RT-PCR得到Bama小型猪CYP3A22的基因,并将此基因克隆至亚克隆载体pMD18-T上得到重组质粒pMD-3A22;以测序确定的重组质粒pMD-3A22为... 详细信息

目的建立稳定表达Bama小型猪细胞色素CYP3A22的HepG2细胞株。方法通过从Bama小型猪肝组织中提取tRNA、经RT-PCR得到Bama小型猪CYP3A22的基因,并将此基因克隆至亚克隆载体pMD18-T上得到重组质粒pMD-3A22;以测序确定的重组质粒pMD-3A22为模板,采用PCR扩增CYP3A22基因并在其3′添加组氨酸标签,扩增产物经BamHⅠ/XhoⅠ双酶切,将带有组氨酸标签的CYP3A22基因定向克隆至pcDNA3.1(+)中,测序表明,CYP3A22基因真核表达载体正确构建;将测序正确的CYP3A22基因通过脂质体转染至HepG2细胞,G418筛选10代,RT-PCR及Western blot分析,并用探针药物硝苯地平对重组细胞进行进行活性鉴定。结果与HepG2相比,HepG2-CYP3A22细胞株具有极显著的硝苯地平氧化活性。结论成功建立了稳定表达CYP3A22的HepG2细胞株,可用于相关的药物代谢研究。

关键词： Bama小型猪 Sus scrofa CYP3A22 HepG2 RT—PCR Western blot 探针药物

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