检索结果-内蒙古大学图书馆

中华传染病杂志 2009年第2期27卷 69-73页

作者：伊正君付玉荣李俊明杨春何永林李娜朱道银潍坊医学院临床学院检验专业山东省潍坊市261031 潍坊医学院基础医学教学部病原生物学教研室重庆医科大学微生物学与免疫学教研室

目的构建携带人颗粒溶素（GLS）的真核表达质粒并探讨其表达后对巨噬细胞RAW264．7内结核分枝杆菌的杀菌能力。方法利用套式PCR从同种异型抗原激活的人CTL中扩增出GLS基因，并克隆入pBudCE4．1载体，构建重组质粒。将其转染至感染结核... 详细信息

目的构建携带人颗粒溶素（GLS）的真核表达质粒并探讨其表达后对巨噬细胞RAW264．7内结核分枝杆菌的杀菌能力。方法利用套式PCR从同种异型抗原激活的人CTL中扩增出GLS基因，并克隆入pBudCE4．1载体，构建重组质粒。将其转染至感染结核分枝杆菌H37Rv的巨噬细胞株RAW264．7中，套式PCR、免疫荧光检测GLS表达；转染96h后裂解细胞作抗酸染色及菌落计数，检测GLS细胞内直接杀菌活性。数据行t或t＇检验。结果成功构建携带GLS的真核表达质粒pBudCE4．1／GLS；在转染的已感染H37Rv巨噬细胞株RAW264．7中，从转录和翻译水平都检测到目标基因GLS的表达产物；转染96h，佛波酯＋pBudCE4．1／GLS组、佛波酯＋pBudCE4．1组与未激活初始巨噬细胞荷菌量分别为（1．44±1．25）、（3．16±0．20）和（3．59±0．21）个，两两比较，差异均有统计学意义（t=2．403，t=2．854，均P〈0．05）。结论携带人GLS的真核表达质粒在巨噬细胞表达后具有明显的杀菌活性，为进一步作为结核基因治疗疫苗的应用提供了实验依据。

关键词：蛋白质类杀伤细胞,天然巨噬细胞分枝杆菌,结核基因疗法

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尼美舒利抑制肺腺癌细胞增殖机制研究

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河北医药 2009年第13期31卷 1560-1563页

作者：温士旺李军霞张少为李勇刘磊张月峰高立平河北医科大学第四医院胸外科石家庄市050011 河北医科大学基础医学部药理学教研室

目的探讨尼美舒利对肺腺癌细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法用噻唑蓝比色法(MTT)法观察尼美舒利对肺腺癌细胞生长的影响;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,RT-PCR测定suvivin mRNA的表达变化,Western blot检测suvivin和caspase-3蛋... 详细信息

目的探讨尼美舒利对肺腺癌细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法用噻唑蓝比色法(MTT)法观察尼美舒利对肺腺癌细胞生长的影响;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,RT-PCR测定suvivin mRNA的表达变化,Western blot检测suvivin和caspase-3蛋白的表达变化。结果各浓度尼美舒利可抑制A549细胞的生长,其半数抑制量(IC50)为162.25μmol/L。尼美舒利可诱导肺腺癌细胞凋亡,最高凋亡率为(21.4±3.1)%。细胞周期分析表明,尼美舒利能使肺腺癌细胞G0/G1期比例增高,S期比例降低。尼美舒利作用后,环氧合酶2(COX-2)和survivin mRNA及蛋白的表达较对照组降低(P<0.05),而caspase-3蛋白的表达则较对照组明显增高(P<0.05)。结论选择性COX-2抑制剂尼美舒利通过抑制COX-2和survivin的表达,导致caspase-3上调,抑制肺腺癌细胞增殖,诱导细胞凋亡。

关键词：尼美舒利肺腺癌环氧合酶2 survivin caspase-3

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非甾体类抗炎药尼美舒利对肺腺癌的抑制作用

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国际呼吸杂志 2009年第12期29卷 705-708页

作者：温士旺李军霞张少为李勇刘磊张月峰高立平河北医科大学第四医院胸外科石家庄050011 河北医科大学基础医学部药理学教研室石家庄050017

目的探讨非甾体类抗炎药尼美舒利对肺腺癌患者癌组织中环氧化酶2（COX-2）和血管内皮生长因子（VEGF）mRNA与蛋白表达的影响及其抗凋亡作用。方法选取手术治疗的肺腺癌患者60例，随机分为实验组（口服尼美舒利）（29例）和对照组（31例... 详细信息

目的探讨非甾体类抗炎药尼美舒利对肺腺癌患者癌组织中环氧化酶2（COX-2）和血管内皮生长因子（VEGF）mRNA与蛋白表达的影响及其抗凋亡作用。方法选取手术治疗的肺腺癌患者60例，随机分为实验组（口服尼美舒利）（29例）和对照组（31例）。分别用RT-PCR、Western blot测定两组标本中COX-2和VEGFmRNA和蛋白的表达，用流式细胞仪检测其凋亡率。结果实验组COX-2和VEGFmRNA的表达较对照组减弱（P〈0．05），蛋白的表达也有同样的趋势；且实验组细胞凋亡率高于对照组，（13．47±1．54）％VS（4．26±0．87）%（P〈0．05）。结论术前服用尼美舒利可抑制肺腺癌患者肿瘤组织中COX-2和VEGF的表达，并可诱导其凋亡。

关键词：肺腺癌环氧化酶2 血管内皮生长因子尼美舒利人

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稳定过表达p50基因细胞株的构建及鉴定

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局解手术学杂志 2009年第2期18卷 78-80页

作者：陈炜高娜王嘉丽张俊磊田衍平安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆400038 首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

目的筛选出稳定过表达p50基因的细胞克隆株ECV-p50,为研究dynei-n-dynactin复合体在登革病毒逆行性运输中的作用奠定基础。方法将构建的pRe-p50质粒稳定转染至ECV304细胞,通过间接免疫荧光染色和免疫印迹实验进行鉴定。结果经间接免疫... 详细信息

目的筛选出稳定过表达p50基因的细胞克隆株ECV-p50,为研究dynei-n-dynactin复合体在登革病毒逆行性运输中的作用奠定基础。方法将构建的pRe-p50质粒稳定转染至ECV304细胞,通过间接免疫荧光染色和免疫印迹实验进行鉴定。结果经间接免疫荧光染色和免疫印迹实验验证,稳定过表达p50基因的细胞克隆株命名为ECV-p50。结论成功建立了稳定过表达p50基因的细胞克隆株ECV-p50,为后续研究积累了有价值的实验资料。

关键词：病毒微管骨架逆行性运输过表达 p50

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RNAi抑制CYP3A4基因表达的实验研究

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南方医科大学学报 2008年第12期28卷 2227-2229页

作者：杨贵忠余华荣袁野周岐新刘颖菊重庆医科大学基础医学院药理教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院生理教研室重庆400016

目的探讨质粒表达型短发夹RNA(shRNA)对CHL-3A4转基因细胞的细胞色素P4503A4(CYP3A4)基因表达的影响。方法构建3条shRNA真核表达载体(CYP3A4Ⅰ、CYP3A4Ⅱ、CYP3A4Ⅲ),脂质体转染CHL-3A4转基因细胞。转染48h后,RT-PCR和Westernblotting分别观察3条shRNA对CYP3A4mRNA和蛋白表达的影响;噻唑蓝观察shRNA抑制环磷酰胺对CHL-3A4转基因细胞毒性作用。结果CYP3A4Ⅲ表达载体的shRNA分别能抑制CHL-3A4细胞的CYP3A4mRNA表达(75%)及蛋白表达(80%),抑制环磷酰胺对CHL-3A4细胞(75%)细胞毒作用。结论RNA干扰能显著抑制CYP3A4基因的表达,RNA干扰技术为肝细胞色素P450的研究提供了新的实验室方法。

关键词： RNA干扰细胞色素P450 基因表达环磷酰胺

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酮康唑对健康成人肝细胞微粒体细胞色素P450同工酶3A4、1A2活性的作用

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南方医科大学学报 2008年第9期28卷 1634-1635,1639页

作者：杨贵忠袁野周岐新杨俊卿刘颖菊重庆医科大学基础医学院药理教研室重庆400016

目的观察酮康唑对健康成人肝细胞微粒体细胞色素P450同工酶3A4、1A2活性的作用,为临床上安全有效地联合用药提供实验依据。方法采用健康成人肝细胞微粒体,分为对照组和处理组。酮康唑处理组分别加入不同浓度的酮康唑1 ml,对照组仅加入... 详细信息

目的观察酮康唑对健康成人肝细胞微粒体细胞色素P450同工酶3A4、1A2活性的作用,为临床上安全有效地联合用药提供实验依据。方法采用健康成人肝细胞微粒体,分为对照组和处理组。酮康唑处理组分别加入不同浓度的酮康唑1 ml,对照组仅加入培养液,孵育15 min后再加入CYP450同工酶3A4和1A2的相应底物(分别为睾酮和非那西丁)再孵育20 min。反应终止后用高效液相色谱仪测量代谢产物(分别为6β-羟基睾酮与对乙酰氨基酚)的生成量,分别代表3A4和1A2的活性。结果细胞色素P450同工酶3A4的相对活性百分比减小到对照组50%时(IC50)酮康唑的质量浓度为0.16 mg/L。而同工酶3A4的相对活性百分比随质量浓度酮康唑增加逐渐减小,各处理组与对照组比较差异均有显著性意义(P<0.05)。低剂量细胞色素P450同工酶1A2的相对活性百分比处理组与对照组比较明显降低(P<0.05),高剂量细胞色素P450同工酶1A2的相对活性百分比处理组与对照组比较则明显升高(P<0.05)。结论酮康唑对健康成人肝细胞微粒体细胞色素P450同工酶3A4的活性有抑制作用,然而对细胞色素P450同工酶1A2的活性则是低剂量有抑制作用,而高剂量有诱导作用。

关键词：酮康唑健康成人肝细胞微粒体 CYP3A4 CYP1A2 细胞色素P450

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黄连总生物碱对铝致神经元退变的保护作用

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中国药理学通报 2008年第6期24卷 800-804页

作者：何百成滕永真杨俊卿蒋青松周岐新重庆医科大学药理学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学研究所重庆400016

目的采用铝负荷致小鼠脑损伤模型,探讨黄连总生物碱对铝致神经元退行性变的防治作用。方法以侧脑室注射0.25%Al溶液3μl(AlCl3.6H2O配制),以Al计算浓度,每日1次,连续5d;同时通过灌胃每日给予1次黄连总生物碱,直到实验结束(共29d)。用行... 详细信息

目的采用铝负荷致小鼠脑损伤模型,探讨黄连总生物碱对铝致神经元退行性变的防治作用。方法以侧脑室注射0.25%Al溶液3μl(AlCl3.6H2O配制),以Al计算浓度,每日1次,连续5d;同时通过灌胃每日给予1次黄连总生物碱,直到实验结束(共29d)。用行为学、生物化学、免疫组织化学、等离子体原子发射光谱法和病理形态学评价小鼠的学习记忆能力、单胺氧化酶活性、线粒体铁蛋白水平、脑铁和铝水平及海马病理形态学变化。结果模型组小鼠学习记忆能力明显下降,大脑皮层、海马和纹状体MAO-B活力增加,脑铁水平明显升高,线粒体铁蛋白水平下降,而海马CA1区神经元核固缩和神经细胞丢失。黄连总生物碱(TCA)呈剂量依赖性阻遏铝负荷小鼠上述指标的改变;小檗碱和尼莫地平类也显示类似黄连总生物碱的作用。结论黄连总生物碱对铝过负荷致小鼠神经元退行性变有明显防治作用;其作用可能主要与其主要成分小檗碱有关。

关键词：铝神经元退行性变黄连总生物碱小檗碱

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维生素C对蟾蜍腓肠肌连续等长收缩期间松弛能力的影响

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南方医科大学学报 2008年第9期28卷 1554-1557页

作者：李生兵郭睿廖飞左渝萍陆杰孙安平重庆医科大学药学院/重庆市生物化学与分子药理学重点实验室重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆400016

目的考察维生素C(VC)对离体蟾蜍腓肠肌连续等长收缩期间松弛能力的影响。方法药物处理30 min后,记录恒压电刺激蟾蜍腓肠肌等长收缩7.0 min内的张力变化,单指数函数加权拟合90%峰张力后的松弛过程,用对应松弛速度和静息张力表征松弛能力... 详细信息

目的考察维生素C(VC)对离体蟾蜍腓肠肌连续等长收缩期间松弛能力的影响。方法药物处理30 min后,记录恒压电刺激蟾蜍腓肠肌等长收缩7.0 min内的张力变化,单指数函数加权拟合90%峰张力后的松弛过程,用对应松弛速度和静息张力表征松弛能力。结果抑制内源性抗氧化酶或用2.0 mmol/L VC单独处理对肌肉松弛能力影响很小。抑制超氧化物歧化酶(SOD)后VC可显著升高静息张力并大幅降低松弛速度,但抑制谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶后VC效应很弱。同时抑制SOD、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶后,VC的效应同只抑制SOD相当。结论高浓度VC对富含过渡金属离子复合物而抗氧化能力低的生物体系有氧化毒性,此毒性可能涉及超氧阴离子介导的氧化损伤。

关键词：维生素C 蟾蜍腓肠肌等长收缩能力静息张力松弛速度氧化损伤

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羟基积雪草苷对小鼠急性肝损伤的保护作用

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中草药 2008年第10期39卷 1525-1527页

作者：李洪忠万敬员张力罗福玲章卓周岐新重庆医科大学重庆市生物化学与分子药理学重点实验室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理生理教研室重庆400016

目的研究羟基积雪草苷对小鼠急性肝损伤的保护作用及其初步机制。方法建立四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠急性肝损伤模型,检测羟基积雪草苷(3、10、30 mg/kg)对血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)以及肝组织一氧化氮(NO)的... 详细信息

目的研究羟基积雪草苷对小鼠急性肝损伤的保护作用及其初步机制。方法建立四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠急性肝损伤模型,检测羟基积雪草苷(3、10、30 mg/kg)对血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)以及肝组织一氧化氮(NO)的影响;Western-blotting检测肝组织中诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、环氧合酶-2(COX-2)蛋白的表达,并取部分肝组织进行HE染色,观察病理学改变。结果羟基积雪草苷明显降低急性肝损伤小鼠血清中ALT、AST活性及肝组织中NO的量,抑制肝组织中iNOS、COX-2蛋白的表达,病理切片显示羟基积雪草苷组病变程度远较模型组为轻。结论羟基积雪草苷具有一定的肝保护作用,其机制可能与其抗炎作用有关。

关键词：羟基积雪草苷急性肝损伤一氧化氮环氧合酶2

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用静息张力表征离体蟾蜍腓肠肌等长收缩能力

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南方医科大学学报 2008年第8期28卷 1412-1414,1418页

作者：廖飞郭睿李生兵左渝萍陆杰孙安平重庆医科大学药学院重庆市生物化学与分子药理学重点实验室生物信息学与分子工程研究室重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆400016

目的考察用静息张力表征离体蟾蜍腓肠肌等长收缩能力的有效性。方法SOD抑制剂和维生素C联合作用蟾蜍腓肠肌,记录电刺激(12VDC,2ms波宽,2s间隔)下等长收缩张力变化,单指数函数加权拟合90%峰张力后的松弛过程测定松弛速度和静息张力表征... 详细信息

目的考察用静息张力表征离体蟾蜍腓肠肌等长收缩能力的有效性。方法SOD抑制剂和维生素C联合作用蟾蜍腓肠肌,记录电刺激(12VDC,2ms波宽,2s间隔)下等长收缩张力变化,单指数函数加权拟合90%峰张力后的松弛过程测定松弛速度和静息张力表征收缩能力。结果收缩1.0min后对照静息张力在7.0min内单调下降而药物处理后静息张力先降后升,7.0min后处理组静息张力相对初始值的增加值显著高于对照组。同时,对照松弛速度大多单调下降,药物处理后松弛速度多数先升后降,且10.0min内其松弛速度总低于相同时刻的对照组。结论静息张力可反映肌肉收缩能力。

关键词：蟾蜍腓肠肌等长收缩能力肌肉损伤静息张力松弛速度

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