检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2025年第2期56卷 803-813页

作者：卢娜高钰赵嘉伟苏迪陈家磊罗忠礼重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

本研究旨在设计猫传染性腹膜炎病毒(feline infectious peritonitis virus,FIPV)mRNA疫苗体外转录载体,并评估其转录出的FIPV mRNA疫苗的免疫原性。选取FIPV的核衣壳(nucleocapsid,N)蛋白,通过序列优化,结合CureVac mRNA技术平台,选择... 详细信息

本研究旨在设计猫传染性腹膜炎病毒(feline infectious peritonitis virus,FIPV)mRNA疫苗体外转录载体,并评估其转录出的FIPV mRNA疫苗的免疫原性。选取FIPV的核衣壳(nucleocapsid,N)蛋白,通过序列优化,结合CureVac mRNA技术平台,选择合适的非编码序列、信号肽序列和poly A尾部。将构建完成的目的序列克隆到pBluescript II KS(+)载体上,经过载体的线性化单酶切后,在体外进行转录,合成编码FIPV N基因的mRNA,并经过加帽、纯化和琼脂糖凝胶电泳分析。通过体外转染试验验证抗原蛋白在细胞内的表达情况。在小鼠体内接种FIPV N-mRNA疫苗后,检测其体液免疫和细胞免疫反应。琼脂糖凝胶试验表明,设计的mRNA体外转录载体成功制备出稳定单一的mRNA序列。转染进细胞后,可在12~24 h内稳定表达目标抗原蛋白。ELISA试验结果显示FIPV N-mRNA疫苗在小鼠体内引起了强烈的体液免疫反应,其特异性抗体、IL-4、TNF-α水平明显高于对照组。Elispot试验结果显示FIPV N-mRNA组脾细胞分泌的IFN-γ的含量显著高于对照组。以FIPV N蛋白为抗原的体外转录载体所转录的mRNA疫苗,在细胞内能够高效表达目的蛋白,具有良好的免疫原性,有效引起小鼠的体液免疫和细胞免疫反应。FIPV N-mRNA疫苗有望成为猫传染性腹膜炎的潜在候选疫苗,mRNA体外转录载体的制备为传染性疾病mRNA疫苗的设计与研发提供了重要的参考价值。

关键词：猫传染性腹膜炎猫传染性腹膜炎病毒N蛋白 mRNA疫苗体外转录载体

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高糖抑制蛋白KIAA0753和CCSAP表达并通过钙信号阻断小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1的成骨分化

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中国药理学通报 2025年第3期41卷 456-465页

作者：王吉春钱正霞李梦雪汪长东重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院麻醉科重庆400016

目的探究高糖对蛋白KIAA0753和CCSAP的影响,以及高糖条件下KIAA0753和CCSAP与成骨分化以及钙信号通路三者之间的联系。方法利用5.5和25 mmol·L^(-1)葡萄糖浓度的成骨培养基诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1),通过Western blo... 详细信息

目的探究高糖对蛋白KIAA0753和CCSAP的影响,以及高糖条件下KIAA0753和CCSAP与成骨分化以及钙信号通路三者之间的联系。方法利用5.5和25 mmol·L^(-1)葡萄糖浓度的成骨培养基诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1),通过Western blot检测KIAA0753和CCSAP蛋白表达情况;转染过表达质粒进入人胚肾细胞(HEK-293T),免疫共沉淀检测蛋白KIAA0753和CCSAP相互作用;利用成骨培养基分别在不同葡萄糖浓度和不同诱导时间处理MC3T3-E1细胞,试剂盒检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,Western blot检测KIAA0753、CCSAP、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨钙素(osteocalcin,OCN)等蛋白的表达情况,然后再设置5.5、25 mmol·L^(-1)和25 mmol·L^(-1)+OE-CCSAP组MC3T3-E1细胞,依次检测KIAA0753、OCN、OPN蛋白的表达情况以及ALP活性;利用高通量基因表达数据库(gene expression omnibus,GEO)中糖尿病鼠模型数据集筛选差异基因进行生物信息学分析;对MC3T3-E1细胞分别设置5.5、25 mmol·L^(-1)和25 mmol·L^(-1)+OE-KIAA0753组,Western blot检测钙离子-钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(calcium/calmodulin-dependent protein kinaseⅡbeta,CAMK2B)、受磷蛋白(phospholamban,PLN)蛋白的表达。结果与5.5 mmol·L^(-1)组相比,25 mmol·L^(-1)抑制成骨细胞中KIAA0753和CCSAP蛋白表达,且蛋白KIAA0753和CCSAP存在相互作用。同时25 mmol·L^(-1)也抑制成骨细胞ALP、OPN、OCN蛋白表达,在25 mmol·L^(-1)的条件下过表达CCSAP上调KIAA0753、OCN、OPN、ALP的表达。糖尿病鼠模型的差异基因主要富集在“信号受体、信号调控”等方面。25 mmol·L^(-1)葡萄糖抑制成骨细胞中CAMK2B、PLN蛋白的表达,且在25 mmol·L^(-1)的条件下过表达KIAA0753上调CAMK2B、PLN蛋白的表达。结论高糖抑制KIAA0753和CCSAP蛋白表达,抑制小鼠胚胎成骨细胞前体细胞成骨分化和钙信号传导,过表达CCSAP挽救高糖对成骨分化的抑制作用以及过表达KIAA0753逆转高糖对钙信号通路的抑制作用。

关键词：糖尿病 KIAA0753 CCSAP 蛋白相互作用成骨分化钙信号

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一种智能试管烘干器的设计与教学应用

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实验室科学 2025年第1期28卷 154-159,165页

作者：李吉馥黄驰程董芮洁李镜鸿叶俊宏西南大学蚕桑纺织与生物质科学学院重庆400715 西南大学西塔学院重庆400715 重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

为了解决教学科研中试管清洗后无法迅速干燥并投入使用的问题,研发了一款适用于实验室环境的智能试管烘干器,能够显著缩短操作时间,提高工作效率。采用空气流动的方式,通过微型风机进行气流输送,并利用加热元件提高试管内部温度,使水分... 详细信息

为了解决教学科研中试管清洗后无法迅速干燥并投入使用的问题,研发了一款适用于实验室环境的智能试管烘干器,能够显著缩短操作时间,提高工作效率。采用空气流动的方式,通过微型风机进行气流输送,并利用加热元件提高试管内部温度,使水分快速蒸发,从而达到烘干的目的。这一设备可通过移动终端远程控制温度和时间,实现试管烘干的自动化,已获得实用新型专利。适用于实验室中广泛使用的多种试管型号,可一次性烘干15根试管,且该过程仅需3分钟,具备方便、安全、高效等多重优点。详细介绍了该设备的设计原理以及在实验教学中的应用效果反馈。

关键词：实验室智能试管烘干器工作效率教学仪器创新

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阴囊Paget病1例

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局解手术学杂志 2025年第3期34卷 275-276页

作者：杨钰嫣姚尧夏蕾重庆医科大学附属第二医院肿瘤中心重庆401336 中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所/天津放射医学和分子核医学重点实验室天津300110 天津医科大学肿瘤放疗科/国家癌症研究中心/天津市癌症临床研究中心/肿瘤预防和治疗重点实验室天津300060

乳腺外Paget病(extramammary Paget's disease,EMPD)是一种罕见的皮肤恶性疾病,其患病率约为0.4/1000000,占所有皮肤Paget病的6.5%,好发于中老年人;在所有类型EMPD中,以发生于阴囊的EMPD最少见(阴囊14.0%、肛周20.0%、外阴65.0%)[1-2]。重庆医科大学附属第二医院2024年4月收治1例阴囊Paget病患者,本文期望通过回顾该患者的诊疗过程,为临床此类患者的诊治及减少术后复发提供参考。

关键词：乳腺外Paget病阴囊Paget病皮肤病

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新型手性自组装短肽R-LIFE-1的理化性质及其对外泌体的控释研究

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生物医学工程学杂志 2023年第4期40卷 770-777页

作者：罗欣怡苏迪卢娜万源刘桂岑罗忠礼重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

本研究旨在探究手性自组装短肽R-LIFE-1对外泌体的包裹控释作用。采用原子力显微镜、透射电镜及冷冻扫描电镜等观察短肽R-LIFE-1的成胶能力及形态结构;采用光镜观察及荧光染色探究R-LIFE-1的生物相容性;采用超滤离心法提取外泌体并采用W... 详细信息

本研究旨在探究手性自组装短肽R-LIFE-1对外泌体的包裹控释作用。采用原子力显微镜、透射电镜及冷冻扫描电镜等观察短肽R-LIFE-1的成胶能力及形态结构;采用光镜观察及荧光染色探究R-LIFE-1的生物相容性;采用超滤离心法提取外泌体并采用Western blot、纳米粒径追踪分析(NTA)、透射电镜检测外泌体质量;采用激光共聚焦显微镜及BCA蛋白定量探究短肽水凝胶对外泌体的控释效果。结果显示手性自组装短肽R-LIFE-1能够在离子触发下快速自组装形成稳定的纳米纤维网络膜片状结构,具有良好的生物相容性,能够负载外泌体对它进行包裹控释,提高外泌体的利用效率。本研究证明短肽R-LIFE-1可对外泌体进行控释,是一种理想的组织工程材料。

关键词：手性自组装短肽水凝胶外泌体控释

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单羧酸转运蛋白过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞生物学行为的影响

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上海交通大学学报（医学版） 2013年第9期33卷 1191-1196页

作者：马冬梅麦力吴晓彬汪长东余畅李海玉李韵黄裕兵宋方洲重庆医科大学基础医学院分子肿瘤研究中心重庆400016

目的研究单羧酸转运蛋白(MCT)过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞生物学行为的影响。方法将真核表达质粒pcDNA3.1/MCT(实验组)及空质粒pcDNA3.1(阴性对照组)分别转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,将未处理的细胞作为空白对照组。采用Real-Time PCR... 详细信息

目的研究单羧酸转运蛋白(MCT)过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞生物学行为的影响。方法将真核表达质粒pcDNA3.1/MCT(实验组)及空质粒pcDNA3.1(阴性对照组)分别转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,将未处理的细胞作为空白对照组。采用Real-Time PCR和细胞免疫荧光化学法分别检测转染MCT基因的效率;采用MTS法检测转染MCT基因后对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响,同时用吖啶橙染色法检测细胞形态学的改变;采用流式细胞仪检测过表达MCT基因对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡、坏死和周期的影响;采用Transwell实验检测转染MCT基因后对乳腺癌细胞侵袭和转移能力的影响。结果实验组MCT的基因和蛋白水平明显高于的阴性对照组和空白对照组(P<0.01);MCT基因过表达能抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖,诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞的凋亡和坏死,促使细胞周期S期上升和G2期下降,同时能抑制乳腺癌细胞的侵袭和迁移能力(P<0.01或P<0.05)。结论 MCT基因过表达能促进乳腺癌MDA-MB-231细胞的凋亡和坏死,调控细胞周期,同时能抑制细胞的增殖、侵袭和转移能力。

关键词：单羧酸转运蛋白 MDA—MB-231 增殖凋亡和坏死周期侵袭和转移

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综合生物信息学分析鉴定与胃癌预后相关关键基因

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陆军军医大学学报 2022年第6期44卷 522-532页

作者：唐永曜宋晶缪诗琪蔡璟宋方洲重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物信息教研室重庆400016

目的综合生物信息学方法分析识别与胃癌预后相关关键基因,探讨其能否作为胃癌预后预测的潜在生物标志物。方法从美国高通量基因表达(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库下载胃癌患者基因芯片数据集(GSE79973)并在癌症和肿瘤基因图谱(Th... 详细信息

目的综合生物信息学方法分析识别与胃癌预后相关关键基因,探讨其能否作为胃癌预后预测的潜在生物标志物。方法从美国高通量基因表达(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库下载胃癌患者基因芯片数据集(GSE79973)并在癌症和肿瘤基因图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中获取胃癌转录组数据和相应临床资料。利用R软件中的Limma和WGCNA程序包筛选差异共表达基因。使用ClusterProfler程序包对差异共表达基因进行GO和KEGG富集分析。采用STRING数据库对差异共表达基因进行蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络分析,并用Cytoscape软件筛选关键基因。通过在线工具GEPIA2验证关键基因的转录表达情况,利用Kaplan-Meier单因素生存分析鉴定与胃癌预后相关的关键基因。最后采用RT-qPCR和免疫组化方法验证预后相关关键基因的差异表达。结果共筛选出18个差异共表达基因,通过PPI网络分析,识别出10个关键基因(TNFRSF11B、HOXC10、HOXA10、TEAD4、GKN2、GKN1、SALL4、SGK1、ANGPT2、NKX6-2)。生存分析结果显示HOXA10(P=0.014)和ANGPT2(P=0.002)的高表达可能与胃癌患者预后生存较差有关,RT-qPCR和免疫组化结果显示其在胃癌组织中高表达(P<0.05)。结论HOXA10和ANGPT2是胃癌预后相关关键基因,可作为胃癌临床治疗和预后预测的潜在生物标志物。

关键词：生物信息学胃癌预后加权基因共表达网络分析差异共表达基因

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自组装短肽R2I4R2对皮肤创伤快速修复过程的研究

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中国生物工程杂志 2018年第2期38卷 7-12页

作者：张慧楠李萌萌文静吴书祎兰世建罗忠礼重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心

研究探索自组装短肽R2I4R2在人皮肤成纤维细胞体外三维培养的应用效果与对创伤修复过程的作用。通过圆二色谱仪分析不同时间、温度和离子条件对其二级结构的影响;刚果红染色宏观检测短肽自组装情况;体外培养人皮肤成纤维细胞探索细胞在R... 详细信息

研究探索自组装短肽R2I4R2在人皮肤成纤维细胞体外三维培养的应用效果与对创伤修复过程的作用。通过圆二色谱仪分析不同时间、温度和离子条件对其二级结构的影响;刚果红染色宏观检测短肽自组装情况;体外培养人皮肤成纤维细胞探索细胞在R2I4R2形成的纳米纤维网络中的生长状态及凋亡情况;建立SD大鼠皮肤创伤模型,HE染色与免疫组织化学检测其对皮肤创伤修复的病理变化。结果表明,R2I4R2在不同条件下均可形成较为稳定的二级结构;自组装24h后可形成均一稳定的膜片状结构,为细胞三维培养提供支架;人皮肤成纤维细胞可在R2I4R2形成的纳米纤维网络三维环境中生长且状态良好;动物实验表明,短肽R2I4R2可减少炎症、促进新生血管生成、加速皮肤创伤修复过程。自组装短肽R2I4R2作为新的纳米支架材料,可用于细胞三维培养与皮肤创伤修复。

关键词：自组装短肽皮肤创伤修复细胞三维培养

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siRNA下调EIF4E基因对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和周期的影响

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肿瘤 2011年第3期31卷 197-202页

作者：孙阳阳曹友德叶维霞磨娜重庆医科大学基础医学院病理教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的:应用小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)乳腺癌MDA-MB-231细胞中真核细胞翻译起始因子4E (eukaryotic translation initiation factor 4E, EIF 4E )基因的表达,探讨其对乳腺癌细胞增殖和生长周期的影响。方法:构建针对EIF 4E 基因的siRNA表达质粒,采用脂质体法将表达质粒pGPU6/GFP/Neo-EIF4E转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞;分别采用RT-PCR、Western 印迹法和免疫细胞化学法检测转染EIF4E siRNA后, 对MDA-MB-231细胞中EIF4E及cyclinD1 mRNA和蛋白的表达水平的影响;MTT法、平板克隆形成实验和FCM检测MDA-MB-231细胞增殖活性、克隆形成率及细胞周期。结果:成功构建EIF4E siRNA表达质粒。RT-PCR、Western 印迹法和免疫细胞化学法检测结果显示,MDA-MB-231细胞中EIF4E及cyclinD1 mRNA和蛋白表达均明显下降(P <0.05)。转染EIF4E siRNA组细胞生长缓慢,集落形成数明显减少,与空白对照组和转染空载体组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。FCM检测结果显示,EIF4E siRNA转染组G1期细胞所占百分比为(71.30±0.47)%, 较空白对照组的( 53.10±0.43)%明显增加,而S期细胞所占百分比为(12.53±0.13)%,较空白对照组的(26.47±0.38)%明显减少(P<0.05)。结论:EIF4E siRNA可显著下调EIF4E基因在乳腺癌MDA-MB-231细胞中的表达水平,在一定程度上抑制乳腺癌细胞的增殖,有可能成为临床治疗乳腺癌的靶点之一。

关键词：乳腺肿瘤 RNA,小分子干扰细胞凋亡真核细胞翻译起始因子细胞,MDA-MB-231

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miR-335对MDA-MB-231乳腺癌细胞生物学特性的影响

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第三军医大学学报 2015年第14期37卷 1406-1411页

作者：伍家燕高月曾帆李海玉樊建军李韵张寒韬刘革力宋方洲重庆医科大学基础医学院分子肿瘤研究中心重庆400016

目的检测microRNA-335(miR-335)在乳腺癌细胞系BT474、T47D、MCF-7、SK-BR-3、MDA-MB-231和正常乳腺细胞系MCF-10A中的表达以及在原发性乳腺癌和淋巴结转移性乳腺癌中的表达,进一步研究miR-335对MDA-MB-231细胞增殖、凋亡及迁移能力的... 详细信息

目的检测microRNA-335(miR-335)在乳腺癌细胞系BT474、T47D、MCF-7、SK-BR-3、MDA-MB-231和正常乳腺细胞系MCF-10A中的表达以及在原发性乳腺癌和淋巴结转移性乳腺癌中的表达,进一步研究miR-335对MDA-MB-231细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响。方法采用荧光实时定量PCR检测miR-335在乳腺癌细胞系BT474、T47D、MCF-7、SK-BR-3、MDA-MB-231和正常乳腺细胞系MCF-10A中的表达,以及在原发性乳腺癌和淋巴结转移性乳腺癌中的表达。体外培养MDA-MB-231细胞并将其分3组,分别为miR-335组、阴性对照组和空白对照组。miR-335组转染miR-335模拟物(has-miR-335 mimics),阴性对照组转染阴性对照序列(negative control,NC),空白对照组细胞不行任何转染。通过MTT实验检测过表达miR-335对细胞增殖能力的影响;流式细胞仪检测过表达miR-335对细胞凋亡的影响;Transwell实验检测对细胞迁移能力的影响。Western blot检测MMP-2和MMP-9蛋白的表达。结果各乳腺癌细胞系中miR-335表达水平均低于乳腺正常上皮细胞系MCF-10A,MDA-MB-231细胞中最低(P<0.01)。在随机配对的10例原发性乳腺癌和10例淋巴结转移性乳腺癌标本中,有7例淋巴结转移性乳腺癌中MiR-335的表达低于对应的原发性乳腺癌(P<0.05)。过表达miR-335对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、凋亡无明显影响(P>0.05),但能显著抑制细胞的迁移能力(P<0.05)。Western blot结果显示:miR-335组MMP-2和MMP-9蛋白的表达量均低于阴性对照组和空白对照组。结论 miR-335在高转移性乳腺癌细胞系和淋巴结转移性乳腺癌组织中明显低表达,过表达miR-335对MDA-MB-231细胞的增殖、凋亡无明显影响,但抑制MDA-MB-231细胞的迁移能力。miR-335可能通过下调MMP2和MMP9的表达从而抑制MDA-MB-231细胞迁移。

关键词： miR-335 乳腺肿瘤细胞增殖细胞迁移

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