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CPZ诱导精神分裂症样模型小鼠海马脱髓鞘改变与行为学变化及其相关性的研究

重庆医科大学学报 2014年第2期39卷 129-136页

作者：王芸李永德彭超程国华陈林卢伟孔吉明肖岚唐勇重庆医科大学基础医学院组织与胚胎学教研室、干细胞与组织工程学研究室重庆400016 加拿大曼尼托巴大学人体解剖与细胞生物教研室加拿大R3E 0J9 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆400038

目的:研究双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导C57BL/6小鼠建立的精神分裂症样模型小鼠海马内有髓神经纤维体积改变及其与行为学改变之间的关系。方法:19只雄性6周龄小鼠,随机分为实验组(9只)和对照组(10只),实验组用含0.2%(质量分数... 详细信息

目的:研究双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导C57BL/6小鼠建立的精神分裂症样模型小鼠海马内有髓神经纤维体积改变及其与行为学改变之间的关系。方法:19只雄性6周龄小鼠,随机分为实验组(9只)和对照组(10只),实验组用含0.2%(质量分数百分比,w/w)CPZ的混合鼠饲料饲喂6周,建立精神分裂症样小鼠模型;对照组用标准鼠饲料饲喂6周。运用旷场实验、高架十字迷宫实验、Morris水迷宫实验、转棒实验和探孔实验测试行为学改变;髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)免疫组化染色及透射电镜定性观察髓鞘结构变化;体视学方法测量并计算海马总体积及海马内有髓神经纤维体积;统计学方法分析行为学改变与海马内有髓神经纤维体积改变之间的关系。结果:与对照组相比,实验组小鼠体质量下降,差异具有统计学意义(P<0.05);行为学实验结果表明:实验组小鼠存在异常的焦虑行为(P=0.018)及空间认知能力障碍(P=0.037),但运动能力(P=0.443)、探索习性(P=0.306)及学习记忆能力未见受损(P=0.462);MBP免疫组化染色发现海马区域免疫阳性染色变浅;透射电镜定性观察发现海马内有髓神经纤维存在脱髓鞘改变;体视学定量测定发现,实验组小鼠海马总体积未发生显著性改变(P=0.955),而海马内有髓神经纤维体积减小(P=0.009);统计学相关分析发现,闭臂路程百分比和海马内有髓神经纤维体积呈正相关(r s=0.83,P=0.003),开臂路程百分比和海马内有髓神经纤维体积呈负相关(r s=-0.65,P=0.043)。结论:进一步证实CPZ模型小鼠可以出现类似精神分裂症样症状的行为学改变及海马内有髓神经纤维存在脱髓鞘改变,并且发现海马内有髓神经纤维体积和行为学表现间具有一定的相关性。

关键词：双环己酮草酰二腙精神分裂症行为学实验海马脱髓鞘体视学

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灵芝多糖对D-半乳糖诱导衰老小鼠海马神经元的保护作用

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神经解剖学杂志 2022年第5期38卷 491-498页

作者：吴梦娜胡玲姜蓉赵曦张斌钰李国利陈地龙冉建华重庆医科大学基础医学院神经科学研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学院干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆三峡医药高等专科学校重庆404120 三峡库区道地药材开发利用重庆市重点实验室重庆404100

目的:研究灵芝多糖(GLPs)对D-半乳糖(D-gal)诱导的衰老小鼠海马神经元的保护作用和调控机制。方法:将30只雄性C57BL/6J小鼠随机分为3组:对照组(Control)、衰老模型组(D-gal)、衰老+灵芝多糖给药组(D-gal+GLPs)。连续腹腔注射D-gal建立... 详细信息

目的:研究灵芝多糖(GLPs)对D-半乳糖(D-gal)诱导的衰老小鼠海马神经元的保护作用和调控机制。方法:将30只雄性C57BL/6J小鼠随机分为3组:对照组(Control)、衰老模型组(D-gal)、衰老+灵芝多糖给药组(D-gal+GLPs)。连续腹腔注射D-gal建立衰老小鼠模型,治疗组小鼠在造模两周后给予腹腔注射GLPs。通过Morris水迷宫实验检测各组小鼠空间学习记忆能力;HE染色、尼氏染色及透射电镜观察评估海马神经元病理改变;试剂盒测定海马总抗氧化能力(T-AOC)水平、还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)活性水平;Western Blot检测海马核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap-1)、血红素加氧酶1(HO-1)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)和线粒体裂变相关蛋白1(Drp1)的蛋白表达水平。结果:与模型组相比,D-gal+GLPs组小鼠空间学习记忆能力明显增强(P<0.05);海马区神经元固缩、数量减少及异常分布明显改善,尼氏体增加,神经元及线粒体结构损伤明显改善。GLPs处理后可显著提高衰老小鼠海马总抗氧化能力和GSH/GSSG比值。此外,GLPs治疗后Nrf2、HO-1、Mfn2蛋白表达水平明显增加(P<0.05),而Keap-1、Drp1蛋白表达水平较D-gal组小鼠显著降低(P<0.05)。结论:GLPs能够有效缓解D-gal诱导的衰老小鼠海马神经元损伤并提高小鼠的学习记忆能力,其主要通过Nrf2/HO-1通路提高海马抗氧化能力并维持神经元线粒体正常结构功能来发挥神经保护作用。

关键词：灵芝多糖衰老神经元氧化应激线粒体动力学小鼠

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氟西汀通过增加阿尔茨海默病APP/PS1转基因小鼠脑内乙酰胆碱的含量改善其空间学习能力

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中国组织化学与细胞化学杂志 2017年第1期26卷 29-35页

作者：黄维马晶晁凤蕾张蕾唐炜李常琼李桃赵振华张毅周春妮蒋林唐勇重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程学研究室重庆400016

目的探讨胆碱能神经系统是否是抗抑郁药氟西汀(Fluoxetine,FLXT)改善阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)患者大脑空间学习记忆能力的作用靶点。方法随机选取18月龄的雄性APP/PS1双转基因AD小鼠20只分为阳性对照组(APP/PSI组)和F... 详细信息

目的探讨胆碱能神经系统是否是抗抑郁药氟西汀(Fluoxetine,FLXT)改善阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)患者大脑空间学习记忆能力的作用靶点。方法随机选取18月龄的雄性APP/PS1双转基因AD小鼠20只分为阳性对照组(APP/PSI组)和FLXT组,分别给予为期4周的腹腔注射生理盐水和FLXT,并随机选取18月龄同窝生野生型(wild type,WT)小鼠10只作为阴性对照组(WT组),该组不给于药物干预。运用Morris水迷宫实验对三组小鼠的空间学习记忆能力进行检测,采用免疫组织化学染色和紫外分光光度法对三组小鼠大脑内β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)沉积情况和乙醜胆碱(acetylcholine,Ach)的含量、乙酰胆碱脂酶(acetylcholinesterase,AchE)及胆碱乙酰化酶(choline acetyl transferase,ChAT)活性等进行检测。结果水迷宫实验显示,APP/PS1小鼠逃避潜伏期显著长于WT小鼠,FLXT处理可明显缩短APP/PS1小鼠逃避潜伏期;免疫组织化学染色显示,WT小鼠脑内未见明显Aβ沉积,而APP/PSI小鼠海马内可见大量Aβ沉积,FLXT处理可明显减少APP/PS1小鼠海马内Aβ沉积;对Ach含量、AchE和ChAT活性检测显示,APP/PS1小鼠大脑皮质及海马内的Ach含量、AchE活性及皮质内的CHAT活性均较WT小鼠降低,FLXT处理可明显抑制APP/PS1小鼠大脑皮质及海马内Ach含量、AchE活性的降低,但对ChAT活性没明显的作用。结论胆碱能系统可能是FLXT作用于AD大脑的作用靶点之一,即FLXT可能通过增加AD大脑胆碱能神经系统的神经功能活性,进而增加Ach的含量,从而改善AD大脑的空间学习记忆能力。

关键词：阿尔茨海默病氟西汀 APP/PS1 β-淀粉样蛋白沉积乙酰胆碱胆碱乙酰化酶乙酰胆碱酯酶

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甲酰肽受体在缺氧时对血管平滑肌细胞IL-6和IL-8产生的作用

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免疫学杂志 2018年第4期34卷 301-307页

作者：史诗黄缄官立彬崔宇李晓栩沈宜重庆医科大学基础医学院干细胞与组织工程研究室病理生理学教研室 400016 陆军军医大学高原军事医学系高原生理学与高原生物学教研室全军高原医学重点实验室重庆400038

目的探讨甲酰肽受体(formyl peptide receptor,FPR)在缺氧时对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)炎症因子产生的作用。方法按照缺氧时间将大鼠血管平滑肌细胞随机分为0 h、12 h、24 h组,将各组细胞放入缺氧培养箱(1%O... 详细信息

目的探讨甲酰肽受体(formyl peptide receptor,FPR)在缺氧时对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)炎症因子产生的作用。方法按照缺氧时间将大鼠血管平滑肌细胞随机分为0 h、12 h、24 h组,将各组细胞放入缺氧培养箱(1%O2、5%CO2、99%N2)培养相应时间后,用Western blot检测平滑肌细胞中IL-6、IL-8的蛋白水平,用RT-PCR检测其m RNA水平。同时使用FPR拮抗剂t BOC预处理细胞并缺氧不同时间(0 h、12 h、24 h、)后,检测IL-6、IL-8的表达水平。另外,为了进一步明确FPR与炎症因子表达的关系,用FPR激动剂f MLP直接处理细胞之后,检测IL-6、IL-8的表达水平。然后使用细胞在缺氧条件下培养后的上清液作用于未缺氧的细胞,检测IL-6、IL-8的表达水平变化,并通过观察FPR拮抗剂处理后的变化,明确FPR在其中的作用。用f MLP刺激p38抑制剂预处理过的细胞,检测IL-6、IL-8的表达水平变化,以观察FPR激活后引起炎症因子表达对p38途径的依赖性。结果缺氧后血管平滑肌细胞的IL-6、IL-8 m RNA和蛋白含量均显著高于0 h组;当t BOC处理细胞后显著削弱了这一效应(P<0.05)。而且FPR激动剂能直接显著提高未缺氧的细胞的IL-6、IL-8的表达水平(P<0.05)。使用缺氧细胞的上清作用于常氧细胞后IL-6、IL-8的表达水平显著高于常氧细胞上清的作用效果;FPR拮抗剂处理显著削弱了这一效应(P<0.05)。用p38抑制剂预处理过的细胞加入f MLP与单纯加入f MLP的细胞相比,血管平滑肌细胞IL-6、IL-8表达水平显著低于单纯加入f MLP组(P<0.05)。结论缺氧引起血管平滑肌细胞IL-6、IL-8的表达,FPR在这一过程中发挥了重要的介导作用,而FPR是被缺氧细胞释放出来的激动剂激活。激活后的FPR引起IL-6、IL-8的表达依赖于p38信号途径。

关键词：血管平滑肌细胞缺氧炎症 FPR

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一种新的细胞间的通讯方式：Exosomes

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中华医学教育探索杂志 2011年第5期10卷 638-640页

作者：隆霜（综述）沈宜（审校）重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室／干细胞与组织工程研究室 400016

在多细胞生物中，细胞间的信息传递是由一系列信息分子参与完成的有序的级联反应，为维持机体的稳定状态，以适应各种生命活动是必不可少的。相对于已知的细胞通讯方式，目前一种起源于细胞内吞途径中的多泡体（Multivesicular bodv，MV... 详细信息

在多细胞生物中，细胞间的信息传递是由一系列信息分子参与完成的有序的级联反应，为维持机体的稳定状态，以适应各种生命活动是必不可少的。相对于已知的细胞通讯方式，目前一种起源于细胞内吞途径中的多泡体（Multivesicular bodv，MVB）的膜性小囊泡Exosomes在细胞信息传递中的作用日渐受到重视。

关键词： Exosomes 通讯方式细胞间细胞信息传递多细胞生物级联反应信息分子生命活动

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当归多糖对小鼠衰老造血干细胞细胞周期蛋白的调控

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基础医学与临床 2013年第3期33卷 320-324页

作者：张先平王乾兴陈斌刘俊魏强王建伟王亚平重庆医科大学组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016 遵义医学院遵义医学院细胞生物学教研室贵州遵义563003 山东省枣庄市台儿庄区中医院急诊科山东枣庄277400

目的观察当归多糖(ASP)对小鼠造血干细胞(HSC)细胞周期调控蛋白表达的影响,探讨ASP调控HSC衰老的可能机制。方法 C57BL/6J小鼠随机分为对照组、衰老组、ASP干预对照组和ASP干预衰老组,衰老组采用X线全身均匀照射,建立小鼠HSC衰老模型;AS... 详细信息

目的观察当归多糖(ASP)对小鼠造血干细胞(HSC)细胞周期调控蛋白表达的影响,探讨ASP调控HSC衰老的可能机制。方法 C57BL/6J小鼠随机分为对照组、衰老组、ASP干预对照组和ASP干预衰老组,衰老组采用X线全身均匀照射,建立小鼠HSC衰老模型;ASP干预衰老组在照射期间给予ASP灌胃;对照组和ASP干预对照组分别给予NS和ASP灌胃。免疫磁珠分离HSC,β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色和混合集落培养(CFU-Mix)观察HSC生物学特性变化;流式细胞术分析细胞周期;Western blot检测P16、P21、CDK2、CDK6、CyclinD及CyclinE表达。结果与对照组比较,X线能显著增加衰老对照组HSC SA-β-Gal染色阳性率、G1期比例及P16、P21表达;降低CFU-Mix、S期比例及CDK6、CyclinD和CyclinE表达。与衰老组比较,ASP能显著抑制衰老HSC SA-β-Gal染色阳性率、G1期比例及P16和P21表达的增加;抑制S期比例、CFU-Mix、CDK6、CyclinD及CyclinE表达的减少;而对CDK2表达无影响。结论 ASP可能通过调节P16、P21、CDK6、CyclinD及CyclinE表达延缓小鼠HSC衰老。

关键词：当归多糖细胞衰老造血干细胞细胞周期

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肝X受体激动剂对抑郁模型小鼠海马树突棘数目的影响

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神经解剖学杂志 2023年第2期39卷 149-156页

作者：周梅祝佩林李静罗艳敏唐静梁芯唐勇黄春霞重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的:探讨肝X受体(LXRs)激动剂GW3965对慢性不可预知性应激(CUS)诱导的抑郁症模型小鼠海马结构各亚区CA1、CA3和DG内树突棘数目变化的影响。方法:选取雄性C57BL/6J小鼠,经过适应性喂养和糖水基线调整后,被随机分为对照组(control)、对照... 详细信息

目的:探讨肝X受体(LXRs)激动剂GW3965对慢性不可预知性应激(CUS)诱导的抑郁症模型小鼠海马结构各亚区CA1、CA3和DG内树突棘数目变化的影响。方法:选取雄性C57BL/6J小鼠,经过适应性喂养和糖水基线调整后,被随机分为对照组(control)、对照+GW3965组(GW)、抑郁模型组(CUS)以及抑郁模型+GW3965组(CUS/GW)。CUS组和CUS/GW组小鼠接受连续10周的CUS干预,GW组和CUS/GW组小鼠在CUS干预的第7周开始接受4周的GW3965给药。第10周末进行行为学测试,之后应用免疫组化及现代体视学技术精准定量小鼠海马结构各亚区树突棘密度和总数目改变。结果:持续数周的应激使小鼠的体质量及糖水偏好百分比明显下降,强迫游泳不动时间显著增加。体视学结果显示CUS干预使小鼠CA1、CA3和DG区树突棘密度和数量明显减少。4周GW3965治疗改善了小鼠的抑郁样行为及逆转了DG区树突棘密度和总数目的下降。结论:LXRs激动剂GW3965对CUS模型小鼠DG区树突棘总数目的影响可能是其发挥抗抑郁作用的神经生物学基础之一。

关键词：抑郁症慢性不可预知性应激肝X受体海马树突棘体视学小鼠

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MDA-MB-231源Exosomes对内皮细胞增殖及MAPK/ERK和P13K/Akt信号通路的影响

MDA-MB-231源Exosomes对内皮细胞增殖及MAPK/ERK和P13K/Akt信号通...

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中国病理生理学会第十三届肿瘤、第十四届免疫专业委员会学术会议

作者：隆霜沈宜谢莹珊范维珂姜蓉陈黎重庆医科大学基础医学院病理生理教研室干细胞与组织工程研究室

目的:研究人乳腺癌MDA-MB-23 1细胞源Exosomes对人脐静脉内皮细胞HUVECs的促增殖作用,并初步探讨MAPK/ERK和PI3K/Ak信号转导通路在此过程中的作用。方法:低温超速离心及密度梯度离心法提取乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes;采用MTT法分... 详细信息

目的:研究人乳腺癌MDA-MB-23 1细胞源Exosomes对人脐静脉内皮细胞HUVECs的促增殖作用,并初步探讨MAPK/ERK和PI3K/Ak信号转导通路在此过程中的作用。方法:低温超速离心及密度梯度离心法提取乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes;采用MTT法分别检测50、100、200、400μg/mL Exosomes对HUVECs细胞促增殖作用的影响;采用流式细胞仪测定200μg/mL Exosomes对HUVECs细胞周期的影响;采用Western blot技术检测200μg/mL Exosomes对HUVECs细胞ERK和Akt蛋白的表达水平。结果:乳腺癌MDA-MB-23 1细胞源Exosomes以时间和剂量依赖性的方式促进HUVECs细胞的增殖。细胞周期结果显示200μg/mL Exosomes作用HUVECs细胞24 h后,S期细胞比例增加,G1/S期细胞比例下降。Western blot实验显示,200μg/mL Exosomes分别作用HUVECs细胞24h、48 h、72 h后,磷酸化ERK与Akt蛋白的表达逐渐增加。结论:乳腺癌MDAMB-231细胞源Exosomes能促进人脐静脉内皮细胞HUVECs的增殖,其机制可能与细胞周期改变和MAPK/ERK和P13K/Akt信号通路的持续活化有关。

关键词： Exosomes 胞外信号调节激酶蛋白激酶B 增殖乳腺癌

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宫颈癌HeLa细胞抑癌蛋白FBW7调控机制研究

宫颈癌HeLa细胞抑癌蛋白FBW7调控机制研究

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中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议

作者：孙迪沈宜重庆医科大学基础医学院病理生理教研室干细胞与组织工程研究室

目的:观察MAPK信号通路阻断剂UO-126对人类宫颈癌细胞株HeLa细胞周期素E(cyclin E)及F-盒和含蛋白7的WD重复结构域FBW7表达的影响。方法:采用RT-PCR、Western blotting检测UO-126阻断MAPK信号通路前后cyclin E和FBW7 mRNA及蛋白表达情... 详细信息

目的:观察MAPK信号通路阻断剂UO-126对人类宫颈癌细胞株HeLa细胞周期素E(cyclin E)及F-盒和含蛋白7的WD重复结构域FBW7表达的影响。方法:采用RT-PCR、Western blotting检测UO-126阻断MAPK信号通路前后cyclin E和FBW7 mRNA及蛋白表达情况。结果:RT-PCR及Western blotting显示,UO-126作用后HeLa细胞cyclin E mRNA表达水平无明显变化,cyclin E蛋白表达水平明显下降,FBW7 mRNA及蛋白表达水平较未处理HeLa细胞均明显增高。结论:宫颈癌HeLa细胞中FBW7异常表达与MAPK信号通路激活密切相关。UO-126阻断MAPK信号通路可下调cyclin E表达,上调FBW7表达。

关键词：宫颈癌 cyclinE 抑癌蛋白机制研究

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脂联素受体1调控小胶质细胞参与阿尔兹海默病发病机制的研究进展

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中国体视学与图像分析 2023年第3期28卷 268-278页

作者：李静胡春念蒋林张蕾黎悦祝佩林唐勇周春妮重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室重庆400016 重庆医科大学干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆医科大学实验教学管理中心重庆400016

阿尔茨海默病(Alzheimer Disease, AD)是一种进行性加重的神经系统退行性疾病,是最为常见的痴呆症类型。越来越多的研究表明,小胶质细胞在AD病理生理过程中发挥重要功能,但小胶质细胞参与AD发病的具体机制尚不完全清楚。最近,脂联素(adi... 详细信息

阿尔茨海默病(Alzheimer Disease, AD)是一种进行性加重的神经系统退行性疾病,是最为常见的痴呆症类型。越来越多的研究表明,小胶质细胞在AD病理生理过程中发挥重要功能,但小胶质细胞参与AD发病的具体机制尚不完全清楚。最近,脂联素(adiponectin, APN)/脂联素受体1(adiponectin receptor 1, AdipoR1)信号被证明具有抗炎作用,并与学习和记忆密切相关。研究发现,AdipoR1可表达于小胶质细胞,其可能通过调节小胶质细胞的功能活动来参与AD的发生和发展。因此,本文旨在对APN、AdipoR1和小胶质细胞在AD的发病和治疗中的作用以及AdipoR1参与调节小胶质细胞功能的研究进展进行综述。

关键词：阿尔茨海默病脂联素受体1 小胶质细胞

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