检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物制品学杂志 2010年第8期23卷 821-824,833页

作者：张政彭惠民徐晓明陈涛何晓燕重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学分子医学及肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学实验教学中心重庆400016 重庆医科大学附属第一医院呼吸内科重庆400016

目的探讨在高糖培养条件下,糖尿病肾病相关微小RNA(MicroRNA,miRNA)即miR-21对小鼠肾小球系膜细胞生长、增殖的影响,及miR-21高表达对PTEN/PI3K信号途径的影响。方法采用高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞模拟糖尿病状态,在Lipofectamine200... 详细信息

目的探讨在高糖培养条件下,糖尿病肾病相关微小RNA(MicroRNA,miRNA)即miR-21对小鼠肾小球系膜细胞生长、增殖的影响,及miR-21高表达对PTEN/PI3K信号途径的影响。方法采用高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞模拟糖尿病状态,在Lipofectamine2000介导下经miR-21真核表达质粒pGenesil-miR-21转染,G418筛选获得稳定表达细胞株。采用实时RT-PCR检测转染细胞miR-21的表达水平,MTT法检测细胞增殖,细胞免疫化学法和Western blot法检测PTEN/PI3K信号途径关键分子PTEN、phospho-Ak(tSer473)和PI3Kp85α蛋白的表达水平。结果筛选出的肾小球系膜细胞能稳定高表达miR-21;高表达的miR-21对细胞增殖能力有明显的抑制作用,且可显著下调PTEN的表达水平(P<0.05),同时上调phospho-Akt(Ser473)和PI3Kp85α的表达水平(P<0.05)。结论 miR-21可通过特异性靶向抑制PTEN蛋白的表达,提高phospho-Akt(Ser473)和PI3Kp85α蛋白的表达水平,以减缓肾小球系膜细胞增殖,可能为一个预防和治疗糖尿病肾病新型的潜在靶点。

关键词：糖尿病肾病微RNAs PTEN PI3K

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miR-451对肺癌细胞的增殖抑制及其靶基因的初步鉴定

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第三军医大学学报 2015年第18期37卷 1823-1829页

作者：武天慧彭睿彭惠民罗勇军姚莉孙艳尹频文利张政重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物信息学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院实验教学中心重庆400016 第三军医大学高原军事医学系军事医学地理学教研室重庆400038

目的探讨微小RNA(microRNA,miRNA)对非小细胞肺癌细胞增殖的作用及调控机制。方法 Lipofectamine 2000转染已构建成功的miR-451真核表达载体至非小细胞肺癌细胞A549,通过MTT检测肺癌细胞增殖状况,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况... 详细信息

目的探讨微小RNA(microRNA,miRNA)对非小细胞肺癌细胞增殖的作用及调控机制。方法 Lipofectamine 2000转染已构建成功的miR-451真核表达载体至非小细胞肺癌细胞A549,通过MTT检测肺癌细胞增殖状况,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况,运用生物信息学技术对miR-451预测靶基因进行GO分析和KEGG信号途径分析,对炎症相关的预测靶基因PSMB8进行进一步的验证。构建含有PSMB8 3'UTR野生型和突变型质粒,通过双荧光素酶检测A549细胞PSMB8表达水平,Western blot检测PSMB8和NOS2的表达情况。结果 MTT结果显示过表达miR-451能显著抑制A549细胞增殖。流式细胞术检测发现miR-451组细胞阻滞在G2期,而细胞凋亡未见明显差异。GO分析发现miR-451预测靶基因涉及PSMB8、CAB39、YWHAZ等17个基因,PSMB8主要参与细胞代谢调控,细胞周期与细胞增殖;KEGG信号途径分析结果显示靶基因主要涉及microRNA在细胞周期、PI3KAKT、m TOR等信号通路。17个miR-451预测靶基因进行生物信息学研究发现PSMB8含有miR-451的结合位点,且在多个物种中呈高度保守。荧光素酶活性检测发现,过表达miR-451可抑制PSMB8荧光素酶活性表达。Western blot结果发现过表达miR-451的A549细胞PSMB8呈下调,而低表达miR-451的正常支气管上皮16HEB细胞PSMB8呈上调。Western blot和细胞荧光免疫化学检测发现炎症因子NOS2在肺癌中表达也降低。结论 miR-451可能通过靶向炎症相关基因PSMB8/NOS2调控非小细胞肺癌细胞增殖,并参与肺癌的发生与发展。

关键词：肺癌微小RNA 细胞增殖

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sFRP5抑制Wnt3a对黑素细胞黑素形成作用的初步研究

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第三军医大学学报 2014年第3期36卷 228-231页

作者：汤寅虹杨珂杨恬叶吉星刘鹏连小华郭海英彭惠民重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室重庆400016 第三军医大学基础医学部细胞生物学教研室重庆400038 重庆大学生物工程学院重庆400044 重庆医科大学附属口腔医院放射科重庆400015

目的研究sFRP5抑制Wnt3a对黑素细胞黑素形成的作用。方法以永生化的黑素细胞为模型,利用腺病毒表达载体,设置Control组、Wnt3a处理组、Wnt3a+sFRP5处理组进行以下实验:L-DOPA测定酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)活性;Masson-Fontanas银染色法... 详细信息

目的研究sFRP5抑制Wnt3a对黑素细胞黑素形成的作用。方法以永生化的黑素细胞为模型,利用腺病毒表达载体,设置Control组、Wnt3a处理组、Wnt3a+sFRP5处理组进行以下实验:L-DOPA测定酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)活性;Masson-Fontanas银染色法观察黑素形成情况;RT-PCR检测酪氨酸酶相关蛋白1(tyrosinase-related protein 1,TRP-1)、TYR基因的表达;Western blot检测TRP-1、TYR蛋白的表达水平。结果 L-DOPA测定酪氨酸酶活性结果显示Wnt3a+sFRP5处理组TYR活性低于Wnt3a处理组,差异有统计学意义(P<0.05);Masson-Fontanas银染色法显示Wnt3a+sFRP5处理组形成的黑素明显低于Wnt3a处理组;RT-PCR检测结果显示Wnt3a+sFRP5处理组能下调TRP-1、TYR基因的表达(P<0.05);Western blot检测结果显示Wnt3a+sFRP5处理组能下调TRP-1、TYR蛋白的表达水平(P<0.05)。结论 sFRP5能抑制Wnt3a对黑素细胞黑素生成的作用。

关键词： sFRP5 Wnt3a 黑素细胞

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siRNA沉默整合素连接激酶对人膀胱癌细胞凋亡的影响

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第三军医大学学报 2012年第21期34卷 2154-2157页

作者：高娟康炜陈俊霞朱军潘湘阳西安医学院附属医院检验科西安710077 重庆医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆2400016

目的探讨应用整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)特异性siRNA沉默ILK基因的表达对人膀胱癌细胞凋亡的影响。方法将构建好的针对ILK基因的1个特异性siRNA表达质粒和1个无同源性的阴性对照质粒,在脂质体介导下稳定转染人膀胱癌BI... 详细信息

目的探讨应用整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)特异性siRNA沉默ILK基因的表达对人膀胱癌细胞凋亡的影响。方法将构建好的针对ILK基因的1个特异性siRNA表达质粒和1个无同源性的阴性对照质粒,在脂质体介导下稳定转染人膀胱癌BIU-87细胞,并将实验分为BIU-87 si ILK、BIU-87 vector及BIU-87细胞3组,运用TUNEL凋亡检测试剂盒和流式细胞术检测BIU-87细胞的凋亡,进一步运用Western blot检测siRNA ILK对凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax和Bcl-2的影响。结果 TUNEL检测结果显示,BIU-87 si ILK组出现大量凋亡细胞,而BIU-87细胞组和BIU-87 vector组仅有少量凋亡细胞出现。流式细胞仪检测结果显示,BIU-87 si ILK组细胞大约有(75.70±2.00)%的凋亡细胞,而BIU-87 vector组和BIU-87细胞组仅有(0.88±0.10)%和(1.66±0.90)%的凋亡细胞,Western blot结果显示,在BIU-87 si ILK组中,Bcl-2的表达明显降低(P<0.05),而Bax和Caspase-3的表达明显升高(P<0.01)。结论 siRNA ILK可能通过调节凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及Caspase-3的表达诱导膀胱癌BIU-87细胞凋亡的发生。

关键词：整合素连接激酶膀胱癌凋亡

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miRNA-451表达质粒的构建及其对iNOS基因表达的抑制

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重庆医科大学学报 2009年第12期34卷 1617-1621页

作者：李春蕾何晓燕彭琼乐张政武卫华彭惠民重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学实验教学管理中心重庆400016

目的:探讨miRNA-451对肾小球系膜细胞中诱导型一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)基因表达的影响。方法:依据miRBase数据库中mmu-miR-451序列,设计两条寡核苷酸片段,退火处理后克隆至pGenesil-1质粒,构建pGenesil-1-miRNA-451质粒及阴性对照质粒pGenesil-1-control。将pGenesil-1-miRNA-451及pGenesil-1-control质粒分别转染小鼠肾小球系膜细胞,经G418筛选,建立稳定表达pGenesil-1-miRNA-451及pGenesil-1-control的细胞株。采用MTT比色法检测活细胞数并绘制生长曲线;RT-PCR、Western blot及免疫细胞化学检测iNOS基因表达的差异。结果:经测序证实重组质粒构建成功,与未处理的小鼠肾小球系膜细胞和稳定表达pGenesil-1-control的细胞相比,在稳定表达pGenesil-1-miRNA-451的小鼠肾小球系膜细胞中,细胞增殖受到抑制,iNOS基因的蛋白表达明显受到抑制,而iNOS基因的mRNA水平无明显变化。结论:miRNA-451在翻译水平抑制了iNOS基因的表达,并对小鼠肾小球系膜细胞生长具有显著的抑制作用。

关键词： miRNA-45 1 iNOS基因肾小球系膜细胞基因表达

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柚皮素抑制DN系膜细胞炎症因子表达的分子机制研究

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重庆医科大学学报 2018年第9期43卷 1157-1161页

作者：李红梅姜文豪张亚娟张政重庆市红十字会医院(江北区人民医院)儿科重庆400020 重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016

目的:研究柚皮素(naringenin,NAR)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)小鼠病情影响和肾小球系膜细胞炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)表达的作用。方法:将10只雄性db/db DN小鼠随机分成柚皮素组和DN组,每组各5只;5只雄性db/m正常对照小鼠为正常组进行实验。其中柚皮素组小鼠给予50 mg/(kg×d)柚皮素连续灌胃2周处理,DN组小鼠给予等量生理盐水连续灌胃2周处理,正常组小鼠给予正常饮食。检测体质量、血糖、尿白蛋白排泄率(urinary albumin excretion,UAE)等一般指标;HE染色和电镜检测小鼠肾脏组织肾小球形态学改变。将小鼠肾小球系膜细胞给予不同葡萄糖浓度(5 mmol/L和25 mmol/L)的DMEM培养基培养。其中5 mmol/L葡萄糖浓度培养的细胞为正常组,25 mmol/L葡萄糖浓度培养的细胞为高糖组,25 mmol/L葡萄糖浓度培养基中加入柚皮素400μmol/L培养的细胞为柚皮素组。ELISA法检测炎症因子TNF-α和IL-6表达;Western blot检测细胞质和细胞核的NF-κB p65蛋白表达情况。结果:DN小鼠给予柚皮素后,UAE[(51.48±8.54)μg/24 h]较DN组[(99.3±5.15)μg/24 h]降低(F=254.302,P=0.000);肾小球面积[(2 098±571.84)μm2]较DN组[(4 240±536.66)μm2]减少(F=24.468,P=0.000);电镜下系膜增生抑制。同时,给予柚皮素的肾小球系膜细胞炎症因子TNF-α和IL-6表达水平(1.99±0.29,1.76±0.15)较高糖组(2.82±0.14,2.53±0.32)下降(F=111.303,P=0.000;F=65.127,P=0.000);细胞核NF-κB p65(0.29±0.01)较高糖组(0.81±0.02)降低(F=1579.764,P=0.000)。结论:柚皮素可缓解DN小鼠尿白蛋白和减少系膜增生,其机制可能是在系膜细胞中通过抑制NF-κB介导的炎症因子表达。

关键词：柚皮素糖尿病肾病炎症

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糖尿病肾病候选基因研究进展

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重庆医科大学学报 2006年第Z1期31卷 149-151页

作者：董靖彭惠民重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016

　　糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病患者常见的肾脏微血管并发症,是引起终末期肾病(End Stage Renal Disease,ESRD)的重要原因.有关DN的发病机制尚未完全明确,许多研究证明遗传因素和长期的糖代谢紊乱是引起糖尿病肾病的... 详细信息

　　糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病患者常见的肾脏微血管并发症,是引起终末期肾病(End Stage Renal Disease,ESRD)的重要原因.有关DN的发病机制尚未完全明确,许多研究证明遗传因素和长期的糖代谢紊乱是引起糖尿病肾病的主要原因.……

关键词：糖尿病肾病 Renal Disease 微血管并发症终末期肾病糖尿病患者糖代谢紊乱遗传因素发病机制证明肾脏

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榄香烯乳及莪术油治疗血液系统疾病的研究现状

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重庆医科大学学报 2006年第Z1期31卷 73-75页

作者：孙双凌蒲淑萍重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016

　　榄香烯乳是从中药姜科植物郁金(莪术)中提取的,其主要活性成分为β-榄香烯乳,是我国医药工作者经过近20年研究、自行开发的国家二类非细胞毒性的广谱抗肿瘤药物.医学研究者已研究发现榄香烯乳对喉鳞癌[1]、脑胶质瘤[2]、局部晚期乳... 详细信息

　　榄香烯乳是从中药姜科植物郁金(莪术)中提取的,其主要活性成分为β-榄香烯乳,是我国医药工作者经过近20年研究、自行开发的国家二类非细胞毒性的广谱抗肿瘤药物.医学研究者已研究发现榄香烯乳对喉鳞癌[1]、脑胶质瘤[2]、局部晚期乳腺癌[3]、非小细胞肺癌[4]等实体肿瘤疗效显著,对恶性胸腔积液的局部治疗效果也很明显[5].目前,对于其在血液系统方面的研究和应用也取得了较大进展[12,15].……

关键词：榄香烯乳莪术油治疗效果非小细胞肺癌恶性胸腔积液晚期乳腺癌抗肿瘤药物非细胞毒性医学研究血液系统实体肿瘤脑胶质瘤疗效显著局部姜科植物活性成分喉鳞癌工作者中药郁金

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微RNA与疾病研究进展

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重庆医科大学学报 2006年第Z1期31卷 131-134页

作者：何晓燕彭惠民重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016

　　微RNA(microRNAs,miRNAs)是近几年新发现的一类非编码RNA(ncRNA),被杂志评为2002年世界十大科技突破第一名,现已成为生命科学研究的热点之一.目前,已经拥有了成熟的数据库:miRBase数据库(http://***/)、miRNAMap数据库(http://***/)... 详细信息

　　微RNA(microRNAs,miRNAs)是近几年新发现的一类非编码RNA(ncRNA),被<科学>杂志评为2002年世界十大科技突破第一名,现已成为生命科学研究的热点之一.目前,已经拥有了成熟的数据库:miRBase数据库(http://***/)、miRNAMap数据库(http://***/)、Argonaute数据库(http://***/apps/zmf/argonaute/interface).……

关键词：数据库生命科学研究非编码大科技

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CAPN10基因单核苷酸多态性与西南地区人群2型糖尿病的相关性研究

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重庆医科大学学报 2008年第12期33卷 1475-1478页

作者：董靖彭惠民重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016

目的:探讨calpain10基因单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)与西南地区汉族人群2型糖尿病(Type2diabetes mellitus,T2DM)遗传易感性的关系。方法:采用病例-对照研究设计,对144例T2DM患者和98例正常对照者采用双向等位... 详细信息

目的:探讨calpain10基因单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)与西南地区汉族人群2型糖尿病(Type2diabetes mellitus,T2DM)遗传易感性的关系。方法:采用病例-对照研究设计,对144例T2DM患者和98例正常对照者采用双向等位特异性PCR技术(Bi-PASA),检测calpain10基因SNP43A/G位点、SNP44C/T位点和SNP56A/G位点的基因型,并进行关联分析。结果:与对照组相比,病例组SNP43的G/G等位基因型频率、SNP44的C/T等位基因型频率和SNP56的A/A等位基因型频率显著升高(分别为86.11%,73.5%;36.8%,19.36%;38.0%,9.8%)。SNP43的G等位基因频率、SNP44的C等位基因频率和SNP56的A等位基因频率在西南地区T2DM人群中显著升高(分别为93.06%,86.22;19.1%,9.69%;60.07%,44.96%);单体型ATG、GCA、GTG频率在病例组与对照组的分布具有显著差异。结论:calpain10基因可能为西南地区汉族人群T2DM的易感基因。

关键词： ealpain10 2型糖尿病遗传易感性单核甘酸多态性

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