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异氟醚预处理通过抑制caspase-11相关的非经典细胞焦亡途径减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤

南方医科大学学报 2020年第5期40卷 670-675页

作者：王小莹刘作金申丽娟昆明医科大学基础医学院病理学教研室云南昆明650500 重庆医科大学附属第二医院肝胆外科重庆400010

目的研究异氟醚预处理通过抑制用随机数字表法肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)过程中细胞焦亡非经典途径而对HIRI产生保护作用。方法建立肝脏缺血再灌注损伤小鼠模型,将30只C57BL/6小鼠分成假手术组(n=10)、异氟醚组(n=10)和手术组(n=10),其... 详细信息

目的研究异氟醚预处理通过抑制用随机数字表法肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)过程中细胞焦亡非经典途径而对HIRI产生保护作用。方法建立肝脏缺血再灌注损伤小鼠模型,将30只C57BL/6小鼠分成假手术组(n=10)、异氟醚组(n=10)和手术组(n=10),其中异氟醚组经1.4%异氟醚预处理30 min后行肝脏缺血再灌注手术。用组织HE染色切片观察及病理评分和检测血清中ALT/AST水平的方法评估异氟醚预处理对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。用ELISA法检测血清中IL-1β和IL-18,用Western Blot法检测肝脏组织中GSDMD的蛋白表达,以评价异氟醚预处理对细胞焦亡的抑制作用。用Western Blot法和免疫荧光法检测肝脏组织中caspase-11的蛋白表达,评价异氟醚预处理对细胞焦亡非经典途径的抑制作用。结果HE染色切片的Suzuki's评分结果显示手术组分数较假手术组显著增高(P<0.05),而异氟醚组的分数较手术组显著降低(P<0.05);ALT/AST检测结果显示假手术组血清中ALT/AST显著增高(P<0.05),而异氟醚组的检测结果较手术组显著降低(P<0.05);ELISA结果提示血清中IL-1β与IL-18在手术组中表达明显高于假手术组(P<0.05),异氟醚组中IL-1β与IL-18均明显低于手术组(P<0.05)。Western blot检测肝组织中手术组GSDMD的表达明显高于假手术组,而异氟醚组的表达较手术组明显降低(P<0.05);Western blot和免疫荧光结果均提示I/R组小鼠肝脏组织中caspase-11表达显著高于假手术组(P<0.05),而异氟醚组小鼠肝脏组织中的caspase-11表达较手术组明显降低(P<0.05)。结论异氟醚预处理对肝脏缺血再灌注损伤有保护作用,而这种作用与其对细胞焦亡非经典途径的抑制相关。

关键词：肝脏缺血再灌注损伤异氟醚预处理细胞焦亡细胞焦亡非经典途径

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机械敏感性离子通道蛋白Piezo1在感染相关疾病中的研究进展

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中华实验和临床感染病杂志（电子版） 2024年第5期18卷 263-269页

作者：刘欢邢皓常正奇张记山东第二医科大学临床医学院山东第二医科大学潍坊市261031 中国人民解放军联勤保障部队第九六〇医院骨病科济南市250031 陆军军医大学基础医学院免疫学教研室重庆400038

Piezo1是一种新颖的机械敏感性离子通道蛋白(MSCP),于2010年在小鼠神经母细胞瘤细胞系Neuro2A中发现其由Fam38a基因编码。Piezo1广泛表达于多种脏器及细胞如肺、皮肤、膀胱、肾脏、内皮细胞和红细胞,其被机械刺激时激活,通过调控细胞内... 详细信息

Piezo1是一种新颖的机械敏感性离子通道蛋白(MSCP),于2010年在小鼠神经母细胞瘤细胞系Neuro2A中发现其由Fam38a基因编码。Piezo1广泛表达于多种脏器及细胞如肺、皮肤、膀胱、肾脏、内皮细胞和红细胞,其被机械刺激时激活,通过调控细胞内外Ca^(2+)浓度进而调节下游胞内信号通路。近年来研究表明,Piezo1在感染性疾病的发生和发展中起着重要作用。本文主要从Piezo1的基本生理功能及调控机制、Piezo1在免疫细胞中的功能及Piezo1与感染相关疾病的关系方面进行综述,旨在为临床预防和治疗感染相关疾病提供新的诊疗思路。

关键词： Piezol 机械敏感性离子通道蛋白免疫细胞感染相关疾病

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MBBS留学生“病原生物学实验”在线课程调研——以重庆医科大学为例

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西部素质教育 2022年第22期8卷 10-13页

作者：徐蕾杨春涂增郭亚楠张静武卫华刘佳张光媛邓西川何永林重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016 重庆医科大学实验教学管理中心病原生物学与免疫学实验室重庆400016

文章以重庆医科大学2018级MBBS留学生班级为研究对象,通过问卷对留学生“病原生物学实验”在线课程质量进行调查分析,并根据调查结果提出了相应建议,包括在线实验课尽量结合线下实验室操作,设计多样化的在线课程活动并促进学生互动,采... 详细信息

文章以重庆医科大学2018级MBBS留学生班级为研究对象,通过问卷对留学生“病原生物学实验”在线课程质量进行调查分析,并根据调查结果提出了相应建议,包括在线实验课尽量结合线下实验室操作,设计多样化的在线课程活动并促进学生互动,采用循序渐进、多维度的在线课程测评方式,等等。

关键词： “病原生物学实验”在线课程 MBBS留学生留学生教育

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细粒棘球绦虫蛋白激酶A的生物信息学特征及免疫反应性

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2020年第6期38卷 682-687页

作者：范俊杰韩秀敏 Nur Fazleen Binti Idris 李锴谭青青曹纹侨李想廖鹏叶彬重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 青海省人民医院西宁810007

目的研究细粒棘球绦虫cAMP依赖性蛋白激酶A(EgPKA)基因的生物信息学特征,分析其重组蛋白的免疫反应性。方法利用细粒棘球绦虫全基因组测序数据设计特异性引物扩增EgPKA基因的编码区序列,并通过生物信息学方法综合分析EgPKA蛋白的理化性... 详细信息

目的研究细粒棘球绦虫cAMP依赖性蛋白激酶A(EgPKA)基因的生物信息学特征,分析其重组蛋白的免疫反应性。方法利用细粒棘球绦虫全基因组测序数据设计特异性引物扩增EgPKA基因的编码区序列,并通过生物信息学方法综合分析EgPKA蛋白的理化性质、亚细胞定位、三维结构。构建GS115/EgPKA-pPIC9K重组酵母工程菌并用甲醇诱导表达,抗His标签镍柱亲和层析柱纯化EgPKA重组蛋白,用细粒棘球蚴病患者血清、细粒棘球蚴感染的BALB/c小鼠血清作为一抗,蛋白质免疫印迹(Western blotting)分析纯化的EgPKA重组蛋白的免疫反应性。结果EgPKA基因编码区全长1053 bp,编码350个氨基酸残基,发生了48 bp的缺失突变(417~464 bp),突变后EgPKA编码区碱基A415、G416和T465重新结合形成新的氨基酸Ser154。生物信息学分析结果显示,EgPKA理论等电点为8.63,不稳定性系数为29.04,脂肪系数为82.49,总平均亲水性为-0.374,不含信号肽,无跨膜区。Cell-Ploc 2.0软件分析结果显示,EgPKA蛋白可能定位于细胞膜、细胞质、线粒体和细胞核。Western blotting分析结果显示,1%甲醇诱导表达72 h时EgPKA重组蛋白的产量最高,纯化的EgPKA重组蛋白能与细粒棘球蚴病患者血清,细粒棘球蚴感染后4、8、12和16个月的小鼠血清发生特异性反应,出现两条分别为Mr 40000和35000蛋白条带,而与健康小鼠及健康人血清无特异性反应,无条带出现。结论EgPKA编码区序列存在基因缺失突变,EgPKA重组蛋白具有较好的免疫反应性,有望作为细粒棘球蚴病的早期诊断抗原。

关键词：细粒棘球绦虫蛋白激酶A 生物信息学分析真核表达

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Perilipin 2在小鼠肝脏CGI-58特异性敲除所致肝脏微泡型脂肪变性中的作用

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陆军军医大学学报 2024年第15期46卷 1701-1712页

作者：张艺馨李杰万小勤蒋孝清陈江慧邓芳李旻典张倩包鑫余张志辉陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院心血管内科代谢生物钟与心血管疾病中心重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院老年心脑血管疾病教育部重点实验室重庆400038 重庆医科大学基础医学院重庆400016 陆军军医大学(第三军医大学)高原军事医学系病理生理学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院全科医学科重庆400038

目的探究Perilipin 2(Plin2)在肝脏CGI-58特异性敲除所致脂肪肝的作用,并比较Plin2和Plin3在脂滴生成和脂质蓄积的作用效能。方法将20只7周龄CGI-58^(Flox/Flox)小鼠(雄鼠10只,雌鼠10只)根据性别采用完全随机分组法分为对照组(NC组,n=5... 详细信息

目的探究Perilipin 2(Plin2)在肝脏CGI-58特异性敲除所致脂肪肝的作用,并比较Plin2和Plin3在脂滴生成和脂质蓄积的作用效能。方法将20只7周龄CGI-58^(Flox/Flox)小鼠(雄鼠10只,雌鼠10只)根据性别采用完全随机分组法分为对照组(NC组,n=5,注射靶向肝脏实现过表达Cre蛋白及对照Micro-RNA的腺相关病毒)和实验组(Mi-KD组,n=5,注射靶向肝脏实现过表达Cre蛋白及靶向Plin2的Micro-RNA的腺相关病毒),记录小鼠体质量变化,检测小鼠代谢相关表型和肝脏病理学的差异,RT-qPCR检测小鼠肝脏脂质代谢和胆固醇代谢相关基因的改变;以AML-12小鼠肝细胞作为细胞模型,构建SiRNA实现AML-12细胞Plin2/Plin3敲低,Bodipy染色和酶比色法检测对比正常培养和OA诱导下Plin2/Plin3敲低后AML-12细胞脂滴生成和脂质蓄积。结果Mi-KD小鼠肝脏中的PLIN2蛋白水平降低了99%以上;Mi-KD缓解了CGI-58特异性敲除雌鼠的肝肿大(P=0.0195)和肝细胞损伤(P=0.0004),降低了组织学NAS评分(P=0.0002)和肝脏甘油三酯含量(P=0.0166),显著改善了肝脏CGI-58特异性敲除所致的肝脏微泡型脂肪变性;敲低Plin2使AML-12细胞内甘油三酯含量呈下降趋势,敲低Plin3显著降低AML-12细胞内甘油三酯含量(P=0.0014);在OA诱导下,Plin2/Plin3敲低均显著降低OA诱导的AML-12细胞内甘油三酯的蓄积(P<0.05)。结论肝脏Plin2在CGI-58敲除所致的微泡型脂肪变性的发展过程中至关重要,Plin2和Plin3均参与肝细胞脂滴生成与脂质蓄积,且Plin3的作用强于Plin2。

关键词：肝脏微泡型脂肪变性围脂滴包被蛋白2 比较鉴定基因-58 钱林-多尔夫曼综合征脂滴

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UHRF1调控雌激素受体表达对甲状腺乳头状癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

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四川大学学报（医学版） 2020年第3期51卷 325-330页

作者：许琳婉张潞渝苟茜邱伊波刘智敏重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的观察泛素样含PDH和环指域1(UHRF1)对雌激素受体(ER)α和ERβ表达比率的影响,探讨UHRF1影响甲状腺乳头状癌BCPAP细胞增殖、侵袭和迁移的机制。方法应用Western blot、实时荧光定量(qRT)-PCR检测正常甲状腺细胞Nthy-ori3-1和甲状腺乳... 详细信息

目的观察泛素样含PDH和环指域1(UHRF1)对雌激素受体(ER)α和ERβ表达比率的影响,探讨UHRF1影响甲状腺乳头状癌BCPAP细胞增殖、侵袭和迁移的机制。方法应用Western blot、实时荧光定量(qRT)-PCR检测正常甲状腺细胞Nthy-ori3-1和甲状腺乳头状癌细胞BCPAP中UHRF1、ERα和ERβ的蛋白及mRNA表达。分别用Scrambled siRNA、UHRF1 siRNA处理BCPAP细胞,qRT-PCR检测各组细胞中ERα和ERβ的mRNA表达;MTT、Transwell分别检测各组细胞增殖、侵袭和迁移。结果与Nthy-ori3-1细胞相比,BCPAP细胞中UHRF1和ERα蛋白及mRNA表达水平上调(P<0.05),而ERβ蛋白和mRNA表达水平下调(P<0.05)。与空白对照组和Scrambled siRNA组相比,转染UHRF1 siRNA的BCPAP细胞中ERαmRNA表达降低(P<0.05),ERβmRNA表达升高(P<0.05);转染UHRF1 siRNA的BCPAP细胞增殖、侵袭和迁移降低(P<0.05)。结论UHRF1可上调ERα/ERβ的表达比率,促进甲状腺乳头状癌BCPAP细胞增殖、侵袭和迁移。

关键词： UHRF1 ERα ERβ 甲状腺乳头状癌

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留学生解剖学课程试题库建设的探索与实践

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中国继续医学教育 2021年第23期13卷 98-101页

作者：余维华刘辉徐进冉建华贺桂琼杨美重庆医科大学基础医学院人体解剖学教研室重庆400016

随着我国经济高速发展和国际影响力的不断提升以及医学高等教育的国际化,来华留学生的人数逐渐增多,如何提升留学生的教学质量已成为各大医学院校思考的重点。对留学生学习效果进行准确和客观评价是提升教学质量的重要手段之一。教考分... 详细信息

随着我国经济高速发展和国际影响力的不断提升以及医学高等教育的国际化,来华留学生的人数逐渐增多,如何提升留学生的教学质量已成为各大医学院校思考的重点。对留学生学习效果进行准确和客观评价是提升教学质量的重要手段之一。教考分离是促进教学质量提高的主要措施之一,而建立试题库则是做好教考分离工作的重要基础。建立留学生考试题库是医学院校的考试管理走向现代化、规范化、科学化的必然途径。文章从试题指标体系、学生认识能力各层次的分布、教学要求不同程度的比例、题型的比例、得分值,答题时间和试题难度分级及比例等介绍本校留学生解剖学试题库建设的体会。

关键词：系统解剖学局部解剖学试题库留学生考试英文教学

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小鼠嗅球中水通道蛋白4表达缺失对抑郁发生的影响

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神经解剖学杂志 2020年第2期36卷 182-188页

作者：袁德智田宽胡玲胡洁赵秋叶曹萱李晋芳冉建华重庆医科大学基础医学院解制学教研室重庆400010 重庆医科大学第二附属医院神经内科重庆400010

目的:观察水通道蛋白4(AQP4)在小鼠嗅球中的表达情况,探讨AQP4表达缺失对小鼠抑郁发生的影响。方法:应用免疫荧光技术观察小鼠嗅上皮和嗅球中AQP4的表达,采用嗅觉电位(E0G)测定比较小鼠的嗅觉差异,悬尾试验(TST)和喷溅试验(ST)检测AQP4... 详细信息

目的:观察水通道蛋白4(AQP4)在小鼠嗅球中的表达情况,探讨AQP4表达缺失对小鼠抑郁发生的影响。方法:应用免疫荧光技术观察小鼠嗅上皮和嗅球中AQP4的表达,采用嗅觉电位(E0G)测定比较小鼠的嗅觉差异,悬尾试验(TST)和喷溅试验(ST)检测AQP4基因敲除(AQP4^-/-)小鼠与野生型(WT)小鼠的抑郁样行为,并分析抑郁行为与嗅觉电位的相关性。结果:免疫荧光检测发现AQP4在嗅上皮和嗅球神经纤维层和突触小球层均有不同程度表达;AQP4^-/-与WT小鼠相比,食物性嗅觉电位诱发实验的电位更低(P<0.01);抑郁行为学发现AQP4^-/-小鼠悬尾实验的不动时间较长、第一次梳理背部毛发潜伏时间较长以及梳理时间较短(P<0.01);AQP4^-/-小鼠嗅觉电位与悬尾不动时间、梳理潜伏时间呈负相关(P<0.05),与梳理背部毛发时间呈正相关性(P<0.05)。结论:AQP4表达在小鼠嗅鞘细胞膜上,其表达对于维持嗅觉信号的传递具有重要意义,AQP4基因敲除引起小鼠嗅觉的减退或缺失可能与抑郁的发生有关。

关键词：水通道蛋白4 基因敲除嗅球抑郁小鼠

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基于三维立体结构的断面与影像解剖学教学实践

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基础医学教育 2021年第2期23卷 126-128页

作者：卓飞盛华均龚霞徐进余维华朱淑娟刘源劼重庆医科大学基础医学院人体解剖学教研室重庆400016

由于大量的影像图片融入现今的断面与影像解剖学的教学内容中,对学生和教师都提出了更高的要求。学生在学习过程中由于学习方法不科学、基础不扎实等原因,导致学习效率低下,效果较差。从2015年始,通过重新规划教学思路、重构教学过程、... 详细信息

由于大量的影像图片融入现今的断面与影像解剖学的教学内容中,对学生和教师都提出了更高的要求。学生在学习过程中由于学习方法不科学、基础不扎实等原因,导致学习效率低下,效果较差。从2015年始,通过重新规划教学思路、重构教学过程、创新教学活动设计以及改革考核评价体系等手段,在该课程的教学改革中积累了一些经验。希望通过分享这些经验,为国内其他医学院校断面与影像解剖学的建设提供参考依据。

关键词：断面与影像解剖学教学改革教学方法

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rhPGRN通过MAPK/PI3K通路调控自噬和内质网应激并促进细胞增殖

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中国病理生理杂志 2020年第6期36卷 1071-1081页

作者：罗瑞秦启忠刘敏尹丹旸郭风劲重庆医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室发育生物学与模式动物平台重庆400016

目的:探讨重组人颗粒体蛋白前体(rhPGRN)对人软骨细胞C28I2和小鼠巨噬细胞RAW264. 7增殖、自噬和内质网应激(ERS)的影响及作用机制。方法:采用Ni-NTA琼脂糖树脂对组氨酸标签蛋白进行特异性亲和纯化,通过考马斯亮蓝染色、BCA法和Western ... 详细信息

目的:探讨重组人颗粒体蛋白前体(rhPGRN)对人软骨细胞C28I2和小鼠巨噬细胞RAW264. 7增殖、自噬和内质网应激(ERS)的影响及作用机制。方法:采用Ni-NTA琼脂糖树脂对组氨酸标签蛋白进行特异性亲和纯化,通过考马斯亮蓝染色、BCA法和Western blot验证目的蛋白的浓度和纯度。将细胞随机分为对照组、rhPGRN组、U0126组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、rhPGRN+U0126、rhPGRN+3-MA、rhPGRN+巴弗洛霉素A1(Baf-A1)和rhPGRN+4-苯基丁酸(4-PBA)组,采用细胞计数法、Western blot和RT-qPCR检测rhPGRN对C28I2和RAW264. 7两种不同类型细胞增殖、自噬和ERS的影响。结果:(1)在含有His标签的PGRN稳转细胞株中成功提取高纯度、具有生物活性的人源重组蛋白rhPGRN。(2)rhPGRN能促进C28I2和RAW264. 7细胞的增殖,促进细胞周期相关分子(PCNA、cyclin B1和cyclin D1)的mRNA表达(P<0. 05),上调细胞周期调控蛋白Ki67表达,并提高增殖相关信号分子ERK和Akt蛋白的磷酸化水平(P<0. 05)。(3)ERK通路抑制剂U0126抑制了rhPGRN诱导的细胞增殖、自噬和ERS(P<0. 05);使用3-MA抑制PI3K/Akt通路后,rhPGRN诱导的细胞自噬被显著抑制(P<0. 05);自噬抑制剂Baf-A1和ERS抑制剂4-PBA显著下调了rhPGRN诱导的Ki67蛋白表达(P<0. 05)。结论:rhPGRN通过MAPK和PI3K/Akt通路调控自噬和ERS,从而促进C28I2和RAW264. 7细胞增殖。

关键词：重组人颗粒体蛋白前体真核表达细胞增殖自噬内质网应激

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