检索结果-内蒙古大学图书馆

血小板衍生生长因子受体-β信号促进突变型p53介导MDA-MB-231细胞阿霉素耐药

第三军医大学学报 2016年第13期38卷 1517-1522页

作者：谭娟王成龙曹友德重庆医科大学基础医学院病理学教研室重庆400016

目的探讨血小板衍生生长因子受体-β(platelet-derived growth factor receptor-beta,PDGFR-β)信号与三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞阿霉素耐药的关系及机制。方法采用流式细胞术、MTS法检测PDGF-DD(PDGFR-β特异性配体)对阿霉素所致的细... 详细信息

目的探讨血小板衍生生长因子受体-β(platelet-derived growth factor receptor-beta,PDGFR-β)信号与三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞阿霉素耐药的关系及机制。方法采用流式细胞术、MTS法检测PDGF-DD(PDGFR-β特异性配体)对阿霉素所致的细胞G_2期阻滞、细胞凋亡及死亡情况的影响;qPCR和Western blot检测突变型p53、cdk1、PDGFR-β、p21、bax、hsp90及TopBP1表达水平,以研究PDGF-DD、Wortmannin(PI3K抑制剂)对突变型p53及其功能的影响;利用siRNA干扰技术、qPCR探讨突变型p53、PDGF-DD和耐药相关基因表达的关系。结果 PDGF-DD明显提高阿霉素条件下细胞存活率、降低细胞凋亡率、一定程度改善细胞G_2期阻滞,显著提高突变型p53蛋白水平并改变其下游基因cdk1、PDGFR-β、p21、bax表达,但突变型p53 mRNA变化差异不具统计学意义(P>0.05)。PDGF-DD显著上调hsp90(突变型p53蛋白稳定因子)和TopBP1(突变型p53功能促进蛋白)mRNA和蛋白水平,Wortmannin处理后表达明显下降。PDGF-DD明显提高耐药相关基因FOXC2、twist、snail、nanog、oct4mRNA水平,p53 siRNA处理后mRNA表达显著下降。结论 PDGF-DD/PDGFR-β信号能诱导MDAMB-231细胞发生阿霉素耐药,通过PI3K途径转录水平上调hsp90和TopBP1表达、稳定并促进突变型p53介导细胞耐药是其重要机制之一。

关键词：血小板衍生生长因子受体-β 耐药突变型p53 拓扑异构酶(DNA)Ⅱ结合蛋白1 干性相关基因

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敲低小胶质细胞中过氧还原素6(PRDX6)降低氧糖剥夺再复氧神经元的存活

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第8期32卷 1014-1020页

作者：谭丽赵涌姜蓓蓓杨波张徽重庆医科大学基础医学院病理学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的观察敲低小胶质细胞中过氧还原素6(PRDX6)对氧糖剥夺再复氧(OGD/R)神经元存活的影响。方法小胶质细胞采用PRDX6-siRNA慢病毒感染,同时培养基中加入非Ca2+依赖性磷脂酶A2(i PLA2)活性抑制剂MJ33,24 h后与原代神经元共培养,并进行OGD/... 详细信息

目的观察敲低小胶质细胞中过氧还原素6(PRDX6)对氧糖剥夺再复氧(OGD/R)神经元存活的影响。方法小胶质细胞采用PRDX6-siRNA慢病毒感染,同时培养基中加入非Ca2+依赖性磷脂酶A2(i PLA2)活性抑制剂MJ33,24 h后与原代神经元共培养,并进行OGD/R处理。实验分为正常组、OGD/R组、阴性对照siRNA处理的OGD/R组、PRDX6-siRNA处理的OGD/R组、PRDX6-siRNA联合MJ33处理的OGD/R组。Western blot法检测小胶质细胞PRDX6蛋白的表达,实时定量PCR检测小胶质细胞PRDX6 mRNA的表达。ELISA检测i PLA2活性;MTS、乳酸脱氢酶(LDH)法检测神经元的存活率;采用比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量以反映神经元的氧化应激水平。结果与OGD/R组比较,PRDX6-siRNA处理的神经元存活率降低,MDA增加、SOD降低、氧化应激损伤加重;与PRDX6-siRNA组比较,同时加入i PLA2活性抑制剂MJ33组神经元存活率增加,MDA降低、SOD增加、氧化应激水平下降。结论小胶质细胞PRDX6对神经元氧糖剥夺损伤有保护作用,而i PLA2活性对PRDX6的作用有影响。

关键词：氧糖剥夺小胶质细胞神经元共培养过氧还原素6(PRDX6) 小干涉RNA(siRNA) MJ33

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重庆地区尸食性蝇类侵袭建群时间初步研究及法医学意义

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重庆医科大学学报 2016年第10期41卷 1060-1064页

作者：唐瑞万立华吕宙徐吕子重庆医科大学基础医学院法医学教研室重庆400016

目的:研究重庆主城区嗜尸性蝇类侵袭动物尸体并在其上建立群落的时间规律,探索其在死亡相关案件中的应用价值与意义。方法:在野外引诱丽蝇产卵,连续培养3代,建立封闭群。处死大鼠后放置野外,在距尸体不同距离地点同时释放2个封闭群,并... 详细信息

目的:研究重庆主城区嗜尸性蝇类侵袭动物尸体并在其上建立群落的时间规律,探索其在死亡相关案件中的应用价值与意义。方法:在野外引诱丽蝇产卵,连续培养3代,建立封闭群。处死大鼠后放置野外,在距尸体不同距离地点同时释放2个封闭群,并分别标记。比较不同距离的蝇类原始栖息地、不同季节、不同时刻死亡的动物尸体对蝇类侵袭及建群时间的影响,每组实验重复1次。结果:距离大鼠尸体100 m处释放的蝇类侵袭尸体的时间用M(Q_1,Q_3)表示是152.50(117.50,555.75)min,在尸体上建群的时间用M(Q1,Q3)表示是253.00(186.75,720.50)min,距离大鼠尸体1 000 m处释放的蝇类未对大鼠进行侵袭及建群。在比较不同时刻处死大鼠和不同季节处死大鼠对蝇类侵袭尸体及建群影响时:9时、14时及21时3组的侵袭时间分别是T_(ii9)(100.67±61.59)min、T_(ii1)4(133.00±32.39)min、Tii21(683.83±119.38)min,建群时间分别是Tci(267.50±201.97)min、(198.00±39.41)min、(842.83±163.63)min。不同时刻的蝇类侵袭及建群时间的3组间比较(T_(ii9)vs.T_(ii14) ***21,H=11.942,P=0.003;***21,H=11.380,P=0.003)均存在差异,9时与21时的侵袭及建群时间比较(T_(ii9)vs.T_(ii21),H=8.308,P=0.004,T_(ci9) vs.T_(ci21),H=8.308,P=0.004)均存在差异,14时与21时的侵袭及建群时间比较(T_(ii14)vs.T_(ii21),H=8.308,P=0.004,T_(ii14)***21,H=8.308,P=0.004)均存在差异,21时蝇类对尸体的侵袭及建群时间长于9时与14时的时间。春、夏、秋3组侵袭时间及建群时间分别是(293.83±314.74、289.00±206.30、334.67±365.76,339.83±331.48、489.17±214.07、479.33±444.22)min。不同季节对蝇类侵袭及建群的3组间比较不存在统计学差异(T_(ii春)vs.T_(ii夏)vs.T_(ii秋),H=0.573,P=0.751;T_(ci春)vs.T_(ci夏)vs.T_(ci秋),H=1.556,P=0.459),季节对蝇类的侵袭及建群时间无明显影响。结论:位于尸体不同距离的蝇类对尸体的侵袭及建群时间有影响,较远的距离会延迟蝇类对尸体的侵袭及建群,甚至不发生侵袭;重庆地区季节的变化对蝇类侵袭尸体及建群时间没有明显的影响,主要是白天和黑夜的差异,黑夜会延长蝇类侵袭尸体及建群的时间。本研究结果对命案现场中根据尸体的具体情况准确推断死亡时间有指导意义。

关键词：法医昆虫学死亡时间推断侵袭尸体蝇类建群

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Survivin在MPP-＋诱导的SH-SY5Y细胞凋亡过程中的作用

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临床与实验病理学杂志 2016年第10期32卷 1126-1129页

作者：刘梦朱英熊进成马若翔肖翾胡玉树李剑波重庆医科大学基础医学院法医学教研室重庆400016

目的探讨存活素(Survivin)能否抑制(1-甲基-4-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP^+)诱导的神经元(SH-SY5Y细胞)的凋亡过程。方法运用1 mmol/L MPP^+处理SH-SY5Y细胞,诱导其发生凋亡,建立帕金森病的细胞模型,采用不同浓度的... 详细信息

目的探讨存活素(Survivin)能否抑制(1-甲基-4-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP^+)诱导的神经元(SH-SY5Y细胞)的凋亡过程。方法运用1 mmol/L MPP^+处理SH-SY5Y细胞,诱导其发生凋亡,建立帕金森病的细胞模型,采用不同浓度的Survivin进行预处理,使用倒置显微镜观察细胞形态,采用MTT法、Real-time PCR、Western blot检测相关指标,进而评价Survivin对SH-SY5Y凋亡的作用。结果 1 mmol/L MPP^+作用24 h可诱导SH-SY5Y的凋亡,显著降低细胞存活率(F=13.32,P=0.000)。MPP^+作用前,预先经Survivin处理2 h的SH-SY5Y细胞的存活率显著提高(F=13.32,P=0.000,P=0.000,P=0.000),并呈剂量依赖性关系。Real-time PCR结果显示Survivin能够显著抑制SH-SY5Y细胞中凋亡蛋白Caspase 3和Caspase 9的表达水平(F=61.57,P=0.000,P=0.000,P=0.000;F=54.26,P=0.001,P=0.000,P=0.000);Western blot结果亦显示Survivin能够显著抑制SH-SY5Y细胞中凋亡蛋白Caspase 3和Caspase 9的表达水平。结论 Survivin能够剂量依赖性地抑制MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,其机制可能与阻断Caspase信号通路相关。

关键词：神经元凋亡 MPP+ 生存素 Caspase信号通路

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姜黄素通过调节α-synuclein和MAP2的表达改善AD转基因鼠的认知功能

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重庆医科大学学报 2016年第8期41卷 809-813页

作者：杨军戴颂阳康清梅张雄林晓李昱重庆医科大学基础医学院病理教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院神经科学中心重庆400016

目的:观察姜黄素(curcumin)对APPswe/PS1d E9双转基因小鼠认知功能的影响以及对海马组织中α-突触素(α-synuclein)和微管相关蛋白2(microtubule associated protein-2,MAP2)表达的影响,并探讨其可能的机制。方法:将3月龄APPswe/PS1d E9双转基因小鼠随机分为未处理组、姜黄素低剂量组和姜黄素高剂量组,每组10只,未处理组给予正常饲料,低、高剂量姜黄素组按照160、1 000 mg/kg拌饲喂养,连续喂养6个月,采用Morris水迷宫检测姜黄素对双转基因鼠空间学习记忆能力的影响;采用免疫组化检测姜黄素对双转基因鼠海马中α-synuclein和MAP2表达的影响。结果:Morris水迷宫实验表明姜黄素可以明显改善双转基因鼠学习记忆能力(P<0.05);免疫组化结果显示与未处理组相比,低、高剂量姜黄素处理组小鼠海马内α-synuclein阳性细胞数均减少(P<0.05),呈剂量依赖性;但MAP2阳性表达随着姜黄素浓度的升高而增加(P﹤0.05)。结论:姜黄素可能通过抑制α-synuclein表达并增强MAP2的表达,从而改善AD转基因鼠的认知和记忆功能起到神经保护作用。

关键词：姜黄素阿尔茨海默病 α-synuclein 微管相关蛋白2

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氟西汀通过增加阿尔茨海默病APP/PS1转基因小鼠脑内乙酰胆碱的含量改善其空间学习能力

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中国组织化学与细胞化学杂志 2017年第1期26卷 29-35页

作者：黄维马晶晁凤蕾张蕾唐炜李常琼李桃赵振华张毅周春妮蒋林唐勇重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室干细胞与组织工程学研究室重庆400016

目的探讨胆碱能神经系统是否是抗抑郁药氟西汀(Fluoxetine,FLXT)改善阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)患者大脑空间学习记忆能力的作用靶点。方法随机选取18月龄的雄性APP/PS1双转基因AD小鼠20只分为阳性对照组(APP/PSI组)和F... 详细信息

目的探讨胆碱能神经系统是否是抗抑郁药氟西汀(Fluoxetine,FLXT)改善阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)患者大脑空间学习记忆能力的作用靶点。方法随机选取18月龄的雄性APP/PS1双转基因AD小鼠20只分为阳性对照组(APP/PSI组)和FLXT组,分别给予为期4周的腹腔注射生理盐水和FLXT,并随机选取18月龄同窝生野生型(wild type,WT)小鼠10只作为阴性对照组(WT组),该组不给于药物干预。运用Morris水迷宫实验对三组小鼠的空间学习记忆能力进行检测,采用免疫组织化学染色和紫外分光光度法对三组小鼠大脑内β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)沉积情况和乙醜胆碱(acetylcholine,Ach)的含量、乙酰胆碱脂酶(acetylcholinesterase,AchE)及胆碱乙酰化酶(choline acetyl transferase,ChAT)活性等进行检测。结果水迷宫实验显示,APP/PS1小鼠逃避潜伏期显著长于WT小鼠,FLXT处理可明显缩短APP/PS1小鼠逃避潜伏期;免疫组织化学染色显示,WT小鼠脑内未见明显Aβ沉积,而APP/PSI小鼠海马内可见大量Aβ沉积,FLXT处理可明显减少APP/PS1小鼠海马内Aβ沉积;对Ach含量、AchE和ChAT活性检测显示,APP/PS1小鼠大脑皮质及海马内的Ach含量、AchE活性及皮质内的CHAT活性均较WT小鼠降低,FLXT处理可明显抑制APP/PS1小鼠大脑皮质及海马内Ach含量、AchE活性的降低,但对ChAT活性没明显的作用。结论胆碱能系统可能是FLXT作用于AD大脑的作用靶点之一,即FLXT可能通过增加AD大脑胆碱能神经系统的神经功能活性,进而增加Ach的含量,从而改善AD大脑的空间学习记忆能力。

关键词：阿尔茨海默病氟西汀 APP/PS1 β-淀粉样蛋白沉积乙酰胆碱胆碱乙酰化酶乙酰胆碱酯酶

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冠蛋白1参与分枝菌酸诱导巨噬细胞的泡沫化

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第4期32卷 451-456页

作者：周芳妮陈全周静瑶刘革力张路渝重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心基础医学院免疫学教研室重庆400016

目的研究巨噬细胞冠蛋白1(coronin-1)与分枝菌酸(MA)诱导巨噬细胞泡沫化的相关性及其可能机制。方法根据冠蛋白1表达水平的差异,实验分为***、RAW264.7和***三组。各组细胞经100μg/m L MA包被的聚苯乙烯微球作用24 h后提取总蛋白,用Wes... 详细信息

目的研究巨噬细胞冠蛋白1(coronin-1)与分枝菌酸(MA)诱导巨噬细胞泡沫化的相关性及其可能机制。方法根据冠蛋白1表达水平的差异,实验分为***、RAW264.7和***三组。各组细胞经100μg/m L MA包被的聚苯乙烯微球作用24 h后提取总蛋白,用Western blot法检测细胞冠蛋白1的表达水平。分别用(0、25、50、75、100)μg/m L MA包被聚苯乙烯微球作为吞噬颗粒,在2μmol/L松胞菌素D(cty D)处理前、后,分别吞噬24 h^8 d,用总胆固醇(TC)酶法测定试剂盒、游离胆固醇(FC)酶法测定试剂盒分别检测各组细胞TC、FC,再通过胆固醇酯(CE)和CE/TC比值定量评估巨噬细胞泡沫化水平。将cty D处理细胞(RAW264.7-cty D、RAW264.7-cty D-MA)及其对照组分别用异硫氰酸荧光素标记的鬼笔环肽(FITC-phalloidin)染色,计算纤维型肌动蛋白(F-actin)重排率。结果各组细胞受MA诱导后,其冠蛋白1的表达量显著高于相应对照组,其表达量从高至低依次为***、RAW264.7、***。表达不同水平冠蛋白1的各组细胞的泡沫化水平与MA包被剂量和MA作用时间呈正比;冠蛋白1表达量最高的***细胞泡沫化水平最高,冠蛋白1表达量最低的***细胞泡沫化水平最低;cty D抑制巨噬细胞F-actin显著降低MA诱导的细胞泡沫化水平,但抑制F-actin对冠蛋白1与MA诱导细胞泡沫化的正相关性并无显著影响;经鬼笔环肽染色后,MA诱导组细胞的F-actin重排率显著高于非MA诱导的对照组细胞。结论 MA可诱导巨噬细胞冠蛋白1的表达,其表达水平与MA诱导的细胞泡沫化呈正相关,F-actin参与MA诱导的细胞泡沫化过程,但F-actin并非冠蛋白1调控MA诱导细胞泡沫化的关键和唯一途径。

关键词：巨噬细胞冠蛋白1(coronin-1) 分枝菌酸泡沫细胞纤维型肌动蛋白(F-actin)

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软骨同源蛋白1(CART1)敲低诱导MDA-MB-231乳腺癌细胞S期阻滞并抑制其侵袭和迁移

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第4期32卷 474-478页

作者：管停宏苏琳茜易永芬重庆医科大学基础医学院病理学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的运用外源性RNA干扰技术,敲低MDA-MB-231乳腺癌细胞中软骨同源蛋白1(CART1)基因的表达,研究CART1基因沉默后对MDA-MB-231细胞生物学行为的影响。方法采用人工合成的针对CART1基因的siRNA,用转染试剂RNAi MAX将CART1-siRNA转染MDA-MB-... 详细信息

目的运用外源性RNA干扰技术,敲低MDA-MB-231乳腺癌细胞中软骨同源蛋白1(CART1)基因的表达,研究CART1基因沉默后对MDA-MB-231细胞生物学行为的影响。方法采用人工合成的针对CART1基因的siRNA,用转染试剂RNAi MAX将CART1-siRNA转染MDA-MB-231细胞。实时定量PCR检测转染后CART1 mRNA水平,Western blot法检测转染后CART1蛋白水平,TranswellTM侵袭实验检测MDA-MB-231细胞侵袭、CCK-8法检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞周期的变化。结果 CART1-siRNA能有效沉默CART1在MDA-MB-231细胞中的表达,CART1沉默后MDA-MB-231细胞侵袭和增殖能力明显下降,S期细胞的比率增高而G2/M细胞比率减少。结论下调MDA-MB-231细胞CART1的表达,可降低其侵袭和增殖能力、诱导S期阻滞。

关键词：乳腺癌 CART1 RNA干扰侵袭增殖周期

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β-DG对脑内水通道蛋白4极性表达变化的影响

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重庆医科大学学报 2016年第4期41卷 374-378页

作者：邱国平孙善全卓飞徐进杨美刘辉重庆医科大学基础医学院解剖学教研室重庆400016

目的:观察脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)后大鼠脑组织中β-肌营养不良聚糖(β-dystroglycan,β-DG)的表达变化,以探讨其对水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)极性表达变化的的影响。方法:健康雄性SD大鼠68只,随机分为假手术对照组(s... 详细信息

目的:观察脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)后大鼠脑组织中β-肌营养不良聚糖(β-dystroglycan,β-DG)的表达变化,以探讨其对水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)极性表达变化的的影响。方法:健康雄性SD大鼠68只,随机分为假手术对照组(sham组)、ICH后1、3 d和7 d共4组,采用自体血注入法建立大鼠ICH动物模型,HE染色和透射电镜检测组织结构病理变化,免疫印迹检测血肿周围组织中β-DG蛋白的表达变化,免疫荧光双标记检测AQP4与β-DG的共表达变化。每个时间点用于透射电镜检测、免疫印迹和组织切片的大鼠数量分别为5、6只和6只。结果:ICH后1 d血肿周围组织结构破坏最为明显,可见毛细血管内皮细胞肿胀及血管周围间隙增宽等改变。ICH后1、3、7 d的血肿周围组织中,β-DG蛋白含量分别为(0.251±0.038)、(0.396±0.069)、(0.398±0.086),与sham组(0.610±0.121)比较,均明显降低,且差值均具有统计学意义(P=0.000)。与sham组中AQP4与β-DG严格的共表达不同,ICH后脑组织中,伴随着AQP4极性表达缺失,β-DG的表达明显降低。结论:β-DG表达下调可能促进了ICH后脑组织中AQP4的极性表达缺失。

关键词：水通道蛋白4 极性表达 β-肌营养不良聚糖脑出血

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单侧鼻阻塞口呼吸对幼年SD大鼠上颌骨生长发育的影响

单侧鼻阻塞口呼吸对幼年SD大鼠上颌骨生长发育的影响

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2017年国际正畸大会暨第十六次全国口腔正畸学术会议

作者：曹真胜张硕非王雪叶辉温州医科大学附属口腔医院正畸科温州医科大学基础医学院生化教研室

目的探讨单侧鼻阻塞对幼年大鼠上颌骨生长发育的影响。方法 30只6天龄SD大鼠,分为2组,A组:对照组,B组:单侧鼻阻塞组(张口呼吸组),每组各15只。4周后处死30只大鼠,分离大鼠的上颌骨,使用micro CT进行扫描分析,使用Mimics软件对上颌骨性... 详细信息

目的探讨单侧鼻阻塞对幼年大鼠上颌骨生长发育的影响。方法 30只6天龄SD大鼠,分为2组,A组:对照组,B组:单侧鼻阻塞组(张口呼吸组),每组各15只。4周后处死30只大鼠,分离大鼠的上颌骨,使用micro CT进行扫描分析,使用Mimics软件对上颌骨性结构及内部孔道结构作3D重建。结果 4周后大鼠单侧鼻阻塞组与对照组相比,上颌骨变狭窄及牙槽骨变薄,差异有统计学意义。结论单侧鼻阻塞致口呼吸可能对上颌骨的生长产生不利影响。口呼吸可引起上颌骨的宽度发育不足。

关键词：口呼吸鼻阻塞骨生长发育

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