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第三军医大学学报 2016年第14期38卷 1609-1614页

作者：向仕权谭小玲冯岚陈婷杨诚忠杨戎重庆医科大学基础医学院干细胞与组织工程研究室重庆400016 第三军医大学高原军事医学系高原生理学与高原生物学教研室重庆400038

目的研究丁酸钠对缺氧血管内皮细胞通透性改变的影响及其机制。方法人脐静脉内皮细胞(Human umbelical vein endothelial cells,HUVECs)分为常氧组(21%O2)、缺氧组(1%O2)及缺氧+丁酸钠组(n=3),缺氧+丁酸钠组分为0、0.3、1、3 mmol/L 4... 详细信息

目的研究丁酸钠对缺氧血管内皮细胞通透性改变的影响及其机制。方法人脐静脉内皮细胞(Human umbelical vein endothelial cells,HUVECs)分为常氧组(21%O2)、缺氧组(1%O2)及缺氧+丁酸钠组(n=3),缺氧+丁酸钠组分为0、0.3、1、3 mmol/L 4个剂量组(n=3)。利用三气培养箱模拟缺氧环境,将缺氧组及缺氧+丁酸钠组置于箱内培养,常氧组置于普通培养箱中培养;利用Transwell小室检测HUVECs单层通透性;Western blot检测黏附连接相关蛋白p120、β-catenin蛋白表达;免疫荧光检测技术观察p120、β-catenin的表达和分布。结果缺氧组HUVECs单层通透性较常氧组增加,差异具有统计学意义(16%vs 10%,P<0.05);在丁酸钠(1 mmol/L)作用下,缺氧所致的单层通透性增加被抑制,与缺氧组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。与常氧组比较,缺氧组培养12 h,内皮细胞p120蛋白表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05),而缺氧对β-catenin蛋白表达没有明显影响;缺氧+丁酸钠(1 mmol/L)组与缺氧组比较,p120蛋白水平增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。另外,免疫荧光数据显示:缺氧导致p120荧光强度降低,而复合1 mmol/L丁酸钠,p120蛋白荧光强度增高。结论在缺氧引起的血管内皮细胞高通透性的模型中,丁酸钠可能通过升高p120蛋白表达,抑制内皮细胞间黏附连接的破坏,从而维持缺氧血管内皮完整,抑制缺氧血管内皮通透性的增加。

关键词：丁酸钠血管内皮细胞缺氧通透性 p120

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构建糖氧剥夺模型大鼠少突胶质细胞体外培养与分离纯化

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神经解剖学杂志 2016年第5期32卷 601-606页

作者：孟赞唐勇彭彦乐山职业技术学院人体解剖学与组织胚胎学教研室重庆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的:对原有少突胶质细胞祖细胞培养与分离纯化方法进行改进,以简单、高效获得少突胶质细胞并建立少突胶质细胞糖氧剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)模型。方法:取SD乳鼠脑皮质,采用两种不同的细胞增殖法和两种不同的分离纯化法分... 详细信息

目的:对原有少突胶质细胞祖细胞培养与分离纯化方法进行改进,以简单、高效获得少突胶质细胞并建立少突胶质细胞糖氧剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)模型。方法:取SD乳鼠脑皮质,采用两种不同的细胞增殖法和两种不同的分离纯化法分四组培养,分别为细胞因子增殖联合摇床震荡分离纯化法组,B104CM增殖联合摇床震荡分离纯化法组,细胞因子增殖联合EDTA消化机械吹打分离纯化法组,B104CM增殖联合EDTA消化机械吹打分离纯化法组。倒置显微镜下观察神经细胞形态学变化并进行细胞计数。A2B5和髓鞘碱性蛋白鉴定少突胶质细胞并分析其纯度。纯化后的少突胶质细胞祖细胞分化培养3 d后分四组培养,正常组正常培养,低氧组分三组,换无糖DMEM培养基,OGD 1、2、3 h。然后采用MTT比色法检测细胞活力;流式细胞术分析细胞的凋亡率。结果:(1)B104CM增殖联合EDTA消化机械吹打分离纯化法较其他3种培养方法收获的少突胶质细胞祖细胞数量多(P<0.05)。(2)A2B5和MBP特异性标记,细胞纯度可达到95%。(3)MTT结果显示:OGD 1 h少突胶质细胞的细胞活力即降低(P<0.05),随着缺氧时间延长细胞活力呈降低的趋势更加明显(P<0.05)。(4)流式细胞测细胞凋亡的结果显示:OGD 1 h、2 h、3 h,细胞的凋亡率分别为14.43%±0.20%,21.99%±0.42%和44.71%±0.20%,均高于正常对照组(6.86%±0.05%,P<0.05)。结论:(1)B104CM增殖联合EDTA消化机械吹打分离纯化培养法与其他三种方法比较实验操作简单,收获的少突胶质细胞祖细胞数量最多,可用于少突胶质细胞的培养。(2)OGD可致少突胶质细胞损伤,且与OGD持续时间密切相关,实验成功的建立OGD损伤模型。

关键词：少突胶质细胞原代培养细胞增殖细胞纯化 B104CM EDTA 糖氧剥夺模型

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胃黏膜组织中恶臭假单胞菌临床意义的探讨

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中国人兽共患病学报 2016年第12期32卷 1102-1107,1113页

作者：印琳刘芳郭长城王琼杨杰潘科潘晨熊妍陈颖婷方文陈峥宏贵州医科大学医学检验学院临床生化教研室贵阳550004 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵阳550025 贵州医科大学附属医院消化内科贵阳550004 黔南布依族苗族自治州人民医院消化内科都匀558000 贵阳市儿童医院消化内科贵阳550000

目的探索恶臭假单胞菌在幽门螺杆菌感染相关胃肠疾病中的意义。方法采集14 C尿素呼气试验阳性患者病变胃黏膜354例,进行细菌的分离培养。根据菌落形态、革兰染色、尿素酶试验及幽门螺杆菌特异性16SrRNA基因片段的PCR进行幽门螺杆菌的鉴... 详细信息

目的探索恶臭假单胞菌在幽门螺杆菌感染相关胃肠疾病中的意义。方法采集14 C尿素呼气试验阳性患者病变胃黏膜354例,进行细菌的分离培养。根据菌落形态、革兰染色、尿素酶试验及幽门螺杆菌特异性16SrRNA基因片段的PCR进行幽门螺杆菌的鉴定,同时提取胃黏膜组织DNA,通过幽门螺杆菌特异性PCR进行快速诊断。将非幽门螺杆菌转种于营养琼脂培养基,进行快速尿素酶试验。尿素酶阳性的非幽门螺杆菌染色体DNA利用细菌16SrRNA基因通用引物进行PCR扩增、测序及序列比对。使用全自动细菌鉴定仪对经测序比对为恶臭假单胞菌的菌株进行鉴定。采用K-B纸片扩散法进行药物敏感性试验。结果从354例样本中分离出革兰阴性、尿素酶阳性的恶臭假单胞菌10株,经16SrRNA基因测序和序列比对,与GenBank中恶臭假单胞菌的相似性≥98%。10株恶臭假单胞菌的胃黏膜标本中,6例标本幽门螺杆菌特异性PCR为阳性,4例为阴性。传代存活的7株恶臭假单胞菌的K-B法药物敏感试验显示对左氧氟沙星均敏感,1株对四环素敏感,5株对阿莫西林耐药,6株对克拉霉素耐药,7株对甲硝唑、氨苄青霉素均耐药。7株菌经全自动细菌生化鉴定仪鉴定结果均为恶臭假单胞菌。结论病变胃黏膜中分离出尿素酶阳性且对治疗幽门螺杆菌感染的多种抗生素耐药;可能造成临床上14 C-尿素呼气试验假阳性,并继发感染影响胃肠疾病的进展。

关键词：恶臭假单胞菌培养尿素酶 16SrRNA 耐药性

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昆虫学证据在死亡时间推断中的应用

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刑事技术 2016年第5期41卷 352-356页

作者：吕宙万立华西南政法大学刑事侦查学院法化教研室重庆401120 重庆医科大学基础医学院法医学教研室重庆400016

法医昆虫学是一门既古老又新兴的交叉学科,死亡时间(PMI)推断是法医昆虫学最主要的实践应用之一。为阐明昆虫学证据在PMI推断中的应用以及未来该领域研究的热点和难点,本文在阐述昆虫个体发育、昆虫群落演替、昆虫代谢物质以及时序基因... 详细信息

法医昆虫学是一门既古老又新兴的交叉学科,死亡时间(PMI)推断是法医昆虫学最主要的实践应用之一。为阐明昆虫学证据在PMI推断中的应用以及未来该领域研究的热点和难点,本文在阐述昆虫个体发育、昆虫群落演替、昆虫代谢物质以及时序基因等相关概念的基础上,对近年来国内外在利用法医昆虫学进行PMI推断领域的研究进展进行了综述。此外,本文还总结了实践中需要注意的问题如各种推断方法的适用范围、常见的误区以及在现场中昆虫学证据的采集技巧等,以期提高基层法医工作者的昆虫学证据采集有效性。

关键词：法医昆虫学死亡时间推断昆虫个体发育昆虫群落演替昆虫代谢物质时序基因

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AG490抑制甲状腺髓样癌TT细胞增殖并提高其放射敏感性

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第6期31卷 753-757页

作者：李娟甘生敏罗超刘双彭志平重庆医科大学基础医学院放射医学教研室重庆400016

目的研究AG490对体外培养甲状腺髓样癌TT细胞增殖、凋亡及放射敏感性的影响。方法采用(0、25、50、100)μmol/L AG490处理甲状腺髓样癌TT细胞,MTT法和流式细胞术进行细胞增殖和凋亡检测,克隆形成实验检测其放射敏感性、Western blot法... 详细信息

目的研究AG490对体外培养甲状腺髓样癌TT细胞增殖、凋亡及放射敏感性的影响。方法采用(0、25、50、100)μmol/L AG490处理甲状腺髓样癌TT细胞,MTT法和流式细胞术进行细胞增殖和凋亡检测,克隆形成实验检测其放射敏感性、Western blot法检测各组细胞Janus激酶2(JAK2)、磷酸化的信号转导子与转录激活子3(p-STAT3)、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与对照组相比,(25、50、100)μmol/L AG490组的抑制作用增强,呈浓度和时间依赖性;随着AG490药物浓度的增加凋亡率逐渐增加;与对照组相比,50μmol/L组细胞存活率显著降低,放射生物学参数:射线为2Gy时的存活分数(SF2)、平均致死剂量(D0)、准阈剂量(Dq)和外推数(N)降低;D0时放射增敏比(SER D0)、Dq时放射增敏比(SERDq)则增加。Western blot结果显示JAK2、p-STAT3和Bcl-2的蛋白表达量随着药物浓度的升高而逐渐降低,Bax蛋白表达量随着药物浓度的升高而逐渐增加。结论 AG490可抑制甲状腺髓样癌TT细胞增殖、增加细胞凋亡、提高放射敏感性。

关键词： AG490 甲状腺髓样癌放射敏感性

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微课在医学生物化学教学中的应用探讨

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医学理论与实践 2016年第3期29卷 414-415,420页

作者：雷云龙张莹张春冬朱慧芳李轶卜友泉重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆市400016 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心

微课作为一种典型的泛在式网络学习资源形式,以其短而精的授课方式,受到越来越多的人喜爱和关注。而多年以来医学生物化学受其交叉学科知识点繁多、逻辑联系差、理论和临床实践操作脱节等学科特点所影响,学生的学习积极性和成绩一直难... 详细信息

微课作为一种典型的泛在式网络学习资源形式,以其短而精的授课方式,受到越来越多的人喜爱和关注。而多年以来医学生物化学受其交叉学科知识点繁多、逻辑联系差、理论和临床实践操作脱节等学科特点所影响,学生的学习积极性和成绩一直难以有效提高,而微课改变了传统医学生物化学的自主学习形式,为医学生物化学的教学改革带来了新的契机。

关键词：微课医学生物化学翻转课堂教学改革

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医科高校生化与分子生物学教学中的内在逻辑与隐结构

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2016年第10期 152-153页

作者：陈静华徐州医科大学基础医学院生化分子生物学教研室江苏徐州221004

本文指出,医科大学生物化学与分子生物学教学中一个极其重要的环节,就是使学生理解和掌握这门课程教学的内在逻辑与隐结构。所谓“内在逻辑”,是指贯穿于理论讲授和实验操作中的、指导性的思想逻辑程序;所谓“隐结构”,是指隐藏在本门... 详细信息

本文指出,医科大学生物化学与分子生物学教学中一个极其重要的环节,就是使学生理解和掌握这门课程教学的内在逻辑与隐结构。所谓“内在逻辑”,是指贯穿于理论讲授和实验操作中的、指导性的思想逻辑程序;所谓“隐结构”,是指隐藏在本门课程“知识结构”背后的、更深一层次的——探索新知识的“能力结构”;或者是指与可言明的知识结构(显结构)相对应的“言外之意”——理解知识体系精神实质的钥匙。

关键词：生化与分子生物学内在逻辑隐结构

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人体解剖学教学中因材施教探讨

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基础医学教育 2016年第8期18卷 614-616页

作者：龙志敏贺桂琼孙善全重庆医科大学基础医学院人体解剖学教研室人体大体形态学实验室重庆400016

人体解剖学是医学领域一门重要的基础课程。作为青年教师,应当结合学生的专业性质,因材施教。对于临床专业的学生,可适当进行临床思维能力训练,开展拓展性学习和基于专题的自主学习;对于护理专业的学生,可以增加与护理操作有关的护理应... 详细信息

人体解剖学是医学领域一门重要的基础课程。作为青年教师,应当结合学生的专业性质,因材施教。对于临床专业的学生,可适当进行临床思维能力训练,开展拓展性学习和基于专题的自主学习;对于护理专业的学生,可以增加与护理操作有关的护理应用解剖学内容;对于其他非临床专业的学生,以提高学生学习兴趣为首要,结合多种手段丰富课堂教学。根据学生专业不同量体裁衣,可以提高教学效果,使不同层次的学生在人体解剖学学习中受益。

关键词：人体解剖学教学改革因材施教

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TGF-β与CTGF在大鼠低压缺氧时右心室心肌纤维化中的作用

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第三军医大学学报 2016年第9期38卷 927-931页

作者：梁潇黄缄官立彬崔宇李晓栩宓保梅沈宜重庆医科大学基础医学院干细胞与组织工程研究室病理生理学教研室重庆400016 第三军医大学高原军事医学系高原生理学与高原生物学教研室、高原医学教育部重点实验室、全军高原医学重点实验室重庆400038

目的探讨转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在低压缺氧条件下发生右心室心肌纤维化与肥大中的作用。方法将50只8周龄雄性SD大鼠[体质量(188.6±19.3)g... 详细信息

目的探讨转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在低压缺氧条件下发生右心室心肌纤维化与肥大中的作用。方法将50只8周龄雄性SD大鼠[体质量(188.6±19.3)g]随机分为常氧喂养对照组与低压缺氧喂养3、7、14和28 d实验组(n=10),低压缺氧大鼠置于模拟海拔6 000 m的低压舱内饲养。分离右心室,称量法计算右心室肥厚指数。采用荧光定量PCR与免疫印迹法分别检测右心室心肌组织中Ⅰ型胶原、TGF-β和CTGF的mRNA与蛋白表达水平,并分析低压缺氧相同天数TGF-β和CTGF与Ⅰ型胶原表达水平、右心室肥厚指数的相关性。结果与常氧组相比,右心室心肌组织中低压缺氧各组右心室肥厚指数均升高,其中低压缺氧7、14、28 d组右心室肥厚指数显著升高(P<0.05)。与常氧组相比,右心室心肌组织中低压缺氧各组Ⅰ型胶原水平均升高,其中低压缺氧7、14、28 d组水平显著升高(P<0.05)。与常氧组相比,低压缺氧3 d组右心室心肌组织中TGF-β(3.68±0.17)、CTGF(8.73±0.96)蛋白表达量均显著升高(P<0.05),低压缺氧28 d组右心室心肌组织中TGF-β(0.93±0.15)、CTGF(12.62±0.14)蛋白水平均显著升高(P<0.05),而低压缺氧7、14 d组两细胞因子表达量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。随低压缺氧时间增加,右心室心肌组织中两生长因子mRNA表达水平与右心室肥厚指数呈显著正相关(P<0.05),与Ⅰ型胶原的mRNA水平也呈显著正相关(P<0.05,低压缺氧28 d组除外);随低压缺氧时间增加,TGF-β的mRNA水平与CTGF的mRNA水平呈显著正相关(P<0.05)。结论随低压缺氧时间增加,右心室心肌组织中TGF-β、CTGF先增加后降低再增加的表达变化,参与了低压缺氧时右心室心肌纤维化、心肌肥大的过程。

关键词：低压缺氧右心室心肌纤维化心肌肥大转化生长因子β 结缔组织生长因子

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Kir 4.1基因沉默对U-251细胞周期的影响

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重庆医科大学学报 2015年第1期40卷 18-22页

作者：朱淑娟甘胜伟汪克建冉建华徐进骆世芳孙善全重庆医科大学基础医学院人体解剖教研室重庆400016

目的:针对人内向整流性钾离子通道(inwardly rectifying potassium channel protein,Kir)4.1基因构建si RNA干扰载体,探讨其对U-251细胞增殖、生长的影响,为临床治疗及开发新的抗肿瘤药物提供实验依据。方法:采用细胞培养、质粒转染、... 详细信息

目的:针对人内向整流性钾离子通道(inwardly rectifying potassium channel protein,Kir)4.1基因构建si RNA干扰载体,探讨其对U-251细胞增殖、生长的影响,为临床治疗及开发新的抗肿瘤药物提供实验依据。方法:采用细胞培养、质粒转染、流式分选、RT-PCR、Western blot及流式细胞仪对构建的质粒进行鉴定并观察对照组和干扰组细胞周期的变化。结果:对DH5α中抽提的重组载体测序验证结果和插入序列一致;成功筛选出一个有效质粒;质粒转染U-251细胞后,细胞周期中的G2期细胞数量由19.39%降至1.5%,明显减少(P=0.018),S期细胞数量由36.32%升至51.22%,明显增多(P=0.027)。结论:成功构建针对人Kir 4.1基因的si RNA干扰载体;Kir 4.1干扰载体可能是通过抑制U-251细胞周期中的G2期,使U-251细胞的生长停滞在S期,从而达到干扰U-251细胞的增殖能力。

关键词： Kir 4.1 基因沉默细胞周期

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