检索结果-内蒙古大学图书馆

重庆医科大学学报 2015年第4期40卷 560-563页

作者：王徐刘剑波刘明博赵敏珠张鹏朱英李剑波重庆医科大学基础医学院法医学教研室重庆400016

目的：明确亚硝酸钠溶液与高铁血红蛋白生成率间的量效关系,研制人血高铁血红蛋白浓度检测卡,为法医检案、侦查及临床医务工作者提供一种快速、安全且经济的检测方法。方法：建立亚硝酸钠溶液与高铁血红蛋白生成率间的量效方程,获取制备... 详细信息

目的：明确亚硝酸钠溶液与高铁血红蛋白生成率间的量效关系,研制人血高铁血红蛋白浓度检测卡,为法医检案、侦查及临床医务工作者提供一种快速、安全且经济的检测方法。方法：建立亚硝酸钠溶液与高铁血红蛋白生成率间的量效方程,获取制备10%~80%（间隔10%）高铁血红蛋白血样所需的亚硝酸钠溶液浓度。将健康人与10%~80%高铁血红蛋白血样分别滴于血样采集卡,扫描获取红绿蓝（red,green,blue,RGB）值,生成色块后,制成检测卡。结果：不同浓度的亚硝酸钠溶液与高铁血红蛋白生成率呈直线正相关。随着高铁血红蛋白血样浓度增高,其颜色在血样采集卡上逐渐变深。结论：该检测卡为人血高铁血红蛋白的检测提供了快速、安全且经济的方法,值得推广。

关键词：高铁血红蛋白快速红绿蓝值检测卡法医学

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NPTX2基因甲基化与年龄推断的相关性研究

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重庆医科大学学报 2015年第4期40卷 594-598页

作者：邢扬幸宇李倩楠甘丽邓世雄重庆医科大学基础医学院法医学教研室重庆400016

目的:探讨神经元正五聚蛋白2(neuronal pentraxinⅡ,NPTX2)基因启动子区Cp G位点甲基化与年龄的关系。方法:提取170例活体外周血样本的基因组DNA,经甲基化修饰试剂盒修饰后,利用甲基化特异性-PCR(methylation specific-PCR,MSP)检测其NP... 详细信息

目的:探讨神经元正五聚蛋白2(neuronal pentraxinⅡ,NPTX2)基因启动子区Cp G位点甲基化与年龄的关系。方法:提取170例活体外周血样本的基因组DNA,经甲基化修饰试剂盒修饰后,利用甲基化特异性-PCR(methylation specific-PCR,MSP)检测其NPTX2基因启动子区甲基化情况,并分析其与性别、年龄的关系。结果:以每个样本年龄、性别为自变量,是否甲基化为因变量,用二分类的logistic回归分析显示,是否甲基化与性别因素不具有统计学意义(P=0.843),表明性别因素对NPTX2基因甲基化影响不明显;而是否甲基化与年龄因素则具有统计学意义(P=0.000),表明年龄因素显著影响该基因的甲基化。以五岁为一个年龄段,对其定性情况进行线性回归分析显示男性(P=0.001)、女性(P=0.000)、总体(P=0.000)均存在线性关系,表明甲基化率是随年龄段的增加而呈线性增长的。结论:NPTX2基因启动子区甲基化程度随年龄的增加而增加。可进一步研究建立回归模型,进行年龄推断。

关键词：神经元正五聚蛋白2 年龄推断甲基化甲基化特异性-PCR

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含miR-193b前体基因的重组腺病毒感染K562细胞可抑制其增殖

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第4期31卷 452-455页

作者：舒燕齐杰玉王灿蔚于淑静陶崑重庆医科大学基础医学院免疫学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的构建小RNA193前体(pre-miR-193b)重组腺病毒,观察miR-193b对慢性髓系白血病K562细胞增殖的影响。方法化学合成miR-193b cDNA序列,克隆进入pAdTrack-CMV穿梭质粒;重组穿梭质粒经PmeⅠ酶切线性化后,转入含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1... 详细信息

目的构建小RNA193前体(pre-miR-193b)重组腺病毒,观察miR-193b对慢性髓系白血病K562细胞增殖的影响。方法化学合成miR-193b cDNA序列,克隆进入pAdTrack-CMV穿梭质粒;重组穿梭质粒经PmeⅠ酶切线性化后,转入含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞中进行同源重组,获得pAd-miR-193b重组腺病毒质粒,经PacI线性化后转入HEK293细胞包装、扩增。倍比稀释法测定病毒滴度。实时荧光定量PCR检测K562细胞中miR-193b表达水平,MTT法检测K562细胞增殖能力。结果pAd-miR-193b重组腺病毒质粒,经限制性内切酶鉴定和测序分析显示构建成功,并能够高效转染K562细胞;与对照组相比,荧光定量PCR检测显示重组腺病毒载体感染K562细胞后,miR-193b基因表达明显增加;同时高表达miR-193b基因的K562细胞增殖水平低于对照组。结论K562细胞高效表达的miR-193b可抑制K562细胞的增殖。

关键词：腺病毒微小RNA193前体 K562细胞

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脑出血脑组织中水通道蛋白4的极性表达缺失

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重庆医科大学学报 2015年第5期40卷 666-670页

作者：邱国平孙善全卓飞徐进刘辉杨美重庆医科大学基础医学院解剖学教研室重庆400016

目的:观察脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)大鼠脑组织中水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)的极性表达变化情况,以初步探讨其在出血性脑水肿中的作用。方法:SD大鼠随机分为sham组和ICH组,采用自体血注入法建立大鼠ICH动物模型,应用核... 详细信息

目的:观察脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)大鼠脑组织中水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)的极性表达变化情况,以初步探讨其在出血性脑水肿中的作用。方法:SD大鼠随机分为sham组和ICH组,采用自体血注入法建立大鼠ICH动物模型,应用核磁共振成像检测血肿产生及发展情况,干湿重法检测脑水含量变化以及免疫荧光检测AQP4的极性表达变化情况。结果:ICH后1 d,血肿体积最大,脑水含量达到峰值,高达(79.769±0.710)%,差值具有统计学意义(P=0.000);血肿周围组织中AQP4极性表达缺失,AQP4表达在星胶细胞胞体和突起上,而sham组中AQP4则极性表达在星胶细胞终足膜上。结论:ICH后血肿周围组织中AQP4极性表达缺失,后者可能促进了出血性脑水肿的发生。

关键词：水通道蛋白脑出血脑水肿极性表达

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锌依赖的金属蛋白酶1促进巨噬细胞凋亡

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第12期31卷 1585-1587,1592页

作者：李鹏何永林张继明方陈城重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的构建锌依赖的金属蛋白酶1(zmp1)基因的真核表达质粒,探讨其对巨噬细胞凋亡的影响。方法以卡介苗(BCG)基因组DNA为模板,采用PCR法扩增zmp1基因;克隆到真核表达质粒p EGFP-N1的多克隆位点中,构建真核表达质粒p EGFP-N1-zmp1并转染RAW2... 详细信息

目的构建锌依赖的金属蛋白酶1(zmp1)基因的真核表达质粒,探讨其对巨噬细胞凋亡的影响。方法以卡介苗(BCG)基因组DNA为模板,采用PCR法扩增zmp1基因;克隆到真核表达质粒p EGFP-N1的多克隆位点中,构建真核表达质粒p EGFP-N1-zmp1并转染RAW264.7细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达,实时定量PCR(qRT-PCR)检测zmp1 mRNA的水平;藻红蛋白标记的膜联素Ⅴ/7-氨基放线菌素D(annexinⅤ-PE/7-AAD)双染色结合流式细胞术检测Zmp1蛋白对细胞凋亡影响。结果扩增出zmp1基因;真核表达质粒经过XhoⅠ和Bam HⅠ双酶切及基因测序鉴定构建成功;转染细胞24 h后,经荧光倒置显微镜观察到绿色荧光;qRT-PCR结果显示转染p EGFP-N1-zmp1的RAW264.7细胞zmp1 mRNA的表达显著升高;转染后48 h,细胞早期凋亡率有所增加。结论在RAW264.7细胞中成功表达了Zmp1并能促进巨噬细胞凋亡。

关键词：卡介苗锌依赖的金属蛋白酶1(Zmp1) 真核表达 RAW264.7细胞细胞凋亡

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金黄色葡萄球菌重组表皮剥脱毒素A的原核表达

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重庆医科大学学报 2015年第3期40卷 436-440页

作者：王毅肖异珠杨致邦欧阳莹李咏梅罗晓燕重庆医科大学基础医学院免疫学教研室重庆400016 重庆医科大学附属儿童医院皮肤科重庆400014 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016

目的:通过基因工程技术获取重组表皮剥脱毒素A(recombine exfoliative toxin A,r ETA),为深入研究表皮剥脱毒素的致病机制提供实验材料。方法:根据Gen Bank公布的ETA基因序列设计引物,从金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,***)基因... 详细信息

目的:通过基因工程技术获取重组表皮剥脱毒素A(recombine exfoliative toxin A,r ETA),为深入研究表皮剥脱毒素的致病机制提供实验材料。方法:根据Gen Bank公布的ETA基因序列设计引物,从金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,***)基因组中扩增ETA基因,插入原核表达载体p QE30,构建重组质粒p QE30-ETA。将p QE30-ETA转化表达菌*** M15,优化诱导表达条件,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达,Western blot鉴定。重组蛋白经Ni2+-NTA树脂纯化后,注入BALB/C小鼠皮下,观察皮肤病理改变,鉴定重组蛋白的生物学活性。结果:重组质粒p QE30-ETA序列分析显示插入的基因片段全长927 bp,与基因文库中的ETA序列完全吻合。SDS-PAGE分析显示表达产物相对分子量约为27 k D,在IPTG终浓度0.1 mmol/L,诱导时间4 h,可得到最大表达量的可溶性蛋白,约为20%。Western blot显示与***产生的ETA蛋白在同一位置,重组蛋白经Ni2+-NTA树脂纯化后蛋白纯度达90%以上,注射重组蛋白的小鼠表皮内出现水疱和裂隙。结论:成功构建了重组质粒p QE30-ETA,表达了具有生物学活性的重组***表皮剥脱毒素A。

关键词：金黄色葡萄球菌葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征表皮剥脱毒素A 原核表达

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上调核糖核酸酶抑制因子对小鼠黑色素瘤B16细胞生长和凋亡的影响

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第三军医大学学报 2015年第13期37卷 1331-1337页

作者：潘湘阳彭源陈俊霞重庆医科大学基础医学院:细胞生物学与遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院第一临床学院重庆400016

目的研究核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)基因表达对小鼠黑色素瘤B16细胞生长和凋亡的影响。方法构建RI真核表达质粒p IRES2-EGFP-RI稳定转染B16细胞,未转染和空质粒作对照组(p IRES2-EGFP组),经G418筛选出阳性克隆。RT-... 详细信息

目的研究核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)基因表达对小鼠黑色素瘤B16细胞生长和凋亡的影响。方法构建RI真核表达质粒p IRES2-EGFP-RI稳定转染B16细胞,未转染和空质粒作对照组(p IRES2-EGFP组),经G418筛选出阳性克隆。RT-PCR、免疫印迹和免疫荧光检测RI的表达;MTT检测细胞的增殖;流式细胞术、TUNEL及Hochest33342检测细胞周期及凋亡;Western blot检测凋亡相关的蛋白及ILK/PI3K/AKT信号通路关键分子的表达;分别注射各组B16细胞到C57/BL小鼠建立移植瘤模型,观察肿瘤的生长及肿瘤微血管的变化,进一步分析ILK/PI3K/AKT信号通路蛋白在肿瘤组织中的表达。结果转染RI细胞组的RI mRNA和蛋白表达水平显著升高;MTT结果显示B16-RI细胞较对照组增殖能力明显降低,流式细胞结果显示B16-RI细胞的S期明显增加,表明RI表达上调后细胞生长停滞于S期(P<0.05);Hochest 33342、TUNEL及Annexin V和PI双染色流式法细胞凋亡检测结果证实,B16-RI细胞与对照组相比出现大量凋亡细胞(P<0.01)及典型凋亡形态特征:染色质凝集,核碎裂和明亮的蓝色荧光等;Western blot结果显示,与对照组相比,B16-RI细胞中ILK、p-Akt、p-GSK3β、Bcl-2及β-catenin的表达明显降低,而活化的Caspase-3和Bax蛋白的表达显著增加(P<0.01);动物的移植瘤实验结果显示,转RI组的小鼠的瘤重显著降低(P<0.01),瘤组织中的血管密度明显减少,同时ILK、p-Akt、p-GSK3β、β-catenin在瘤组织中表达减少。TUNEL肿瘤组织凋亡检测结果与体外细胞一致。结论过表达RI可能通过调节ILK/PI3K/AKT信号通路显著抑制了小鼠黑色素瘤B16细胞的生长并诱导了B16细胞的凋亡。

关键词：核糖核酸酶抑制因子 B16细胞增殖凋亡 ILK/PI3K/AKT信号通路

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我国出生缺陷影响因素的Meta分析

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重庆医学 2015年第14期44卷 1939-1941页

作者：万素馨罗亚玲周天津重庆医科大学基础医学院数学教研室 400016

目的探讨影响我国出生缺陷发生的主要危险因素,为制定最佳预防控制决策、实行有效的干预措施提供科学依据。方法利用Meta分析方法综合分析国内关于出生缺陷发病危险因素的研究文献21篇,累计病例6 112例,对照15 741例。据纳入与排除标准... 详细信息

目的探讨影响我国出生缺陷发生的主要危险因素,为制定最佳预防控制决策、实行有效的干预措施提供科学依据。方法利用Meta分析方法综合分析国内关于出生缺陷发病危险因素的研究文献21篇,累计病例6 112例,对照15 741例。据纳入与排除标准进行筛选,由异质性检验结果决定采用固定或随机效应模型,并对合并结果进行χ2检验。结果单因素分析的主要合并结果 OR值为:先天畸形家族史36.22,孕早期患感染性疾病5.62,孕早期接触化学制剂4.19,父亲吸烟3.89,孕期接触镇静药3.19,妊娠并发症2.94,孕期多食高蛋白食物0.37;多因素分析的主要合并结果OR值为:孕早期感染病毒7.65,孕期精神状态差5.44,孕早期发热4.70,妊娠早期接触化学毒物3.90,流产史3.59,孕期补充复合维生素0.45。结论影响我国出生缺陷发生的主要危险因素为先天畸形家族史、孕早期患感染性疾病、孕早期接触化学制剂、父亲吸烟、妊娠并发症;出生缺陷的保护因素为孕期多食高蛋白食物、孕期补充复合维生素和服用叶酸。

关键词：先天畸形 Meta分析比值比

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MLCK通过MAPK/ERK途径调控IL-8诱导的血管平滑肌细胞增殖与迁移

MLCK通过MAPK/ERK途径调控IL-8诱导的血管平滑肌细胞增殖与迁移

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第六届中国细胞生物学学会HIPPO年会暨大连医科大学2016年生命科学学术交流会

作者：崔颖宁立华方彦高颖大连医科大学基础医学院生化教研室辽宁省医学细胞分子生物学重点实验室

动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是心脑血管疾病发生的重要病理基础,是导致心脑血管疾病死亡的主要原因。因此,关于动脉粥样硬化发病机制的研究一直是心脑血管疾病领域的研究热点。动脉粥样硬化的形成以异常的血管平滑肌细胞(Vascular... 详细信息

动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是心脑血管疾病发生的重要病理基础,是导致心脑血管疾病死亡的主要原因。因此,关于动脉粥样硬化发病机制的研究一直是心脑血管疾病领域的研究热点。动脉粥样硬化的形成以异常的血管平滑肌细胞(Vascular Smooth Muscle Cells, VSMCs)增殖、迁移和炎症为病理特点。肌球蛋白轻链激酶(Myosin light-chain kinase,MLCK)是调节平滑肌收缩的关键酶,在血管平滑肌细胞的增殖和迁移过程中起着关键作用。然而,MLCK在VSMC异常增殖和迁移中的潜在调控机制仍不清楚。在本项研究中,我们使用20ng/ml白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)诱导MLCK缺乏的豚鼠脑基底动脉平滑肌细胞(MLCK/Gba)增殖和迁移,探讨MLCK在IL-8诱导的血管平滑肌细胞增殖、迁移中的作用机制。

关键词：血管平滑肌细胞肌球蛋白轻链激酶白介素-8 细胞增殖与迁移

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TMEM98在IL-8诱导的平滑肌细胞增殖、迁移中的影响及其机制的研究

TMEM98在IL-8诱导的平滑肌细胞增殖、迁移中的影响及其机制的研究

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第六届中国细胞生物学学会HIPPO年会暨大连医科大学2016年生命科学学术交流会

作者：吕广鑫朱红梅赵莹魏晓晴高颖大连医科大学基础医学院生化教研室辽宁省医学细胞分子生物学重点实验室

动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是严重危害人类健康的常见病和多发病,是心脑血管疾病的主要诱因,以大中动脉血管病变为主的慢性炎症反应疾病。血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)由中膜迁移到内皮下间隙并异常增生是A... 详细信息

动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是严重危害人类健康的常见病和多发病,是心脑血管疾病的主要诱因,以大中动脉血管病变为主的慢性炎症反应疾病。血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)由中膜迁移到内皮下间隙并异常增生是AS发生、发展的重要环节之一。多种致炎因子如白介素-8 (interleukin-8,IL-8)可促进VSMC的增殖和迁移,促进AS的形成。随着2006年基因组计划完成,诞生了大批新基因。而人跨膜蛋白98 (Transmembrane protein 98,TMEM98)就是其中新基因之一。目前研究发现TMEM98与炎症的发生、发展密切相关,但在心血管方面未见任何报道。本研究发现AS小鼠血清中TMEM98高表达。所以采用IL-8诱导VSMC的炎症模型,来探讨TMEM98在炎症过程中是否参与对VSMC增殖和迁移的过程及其影响的机制。

关键词：动脉粥样硬化 TMEM98 IL-8 血管平滑肌细胞细胞增殖与迁移

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