检索结果-内蒙古大学图书馆

中国免疫学杂志 2015年第5期31卷 613-619页

作者：李黎陈全周芳妮刘革力张路渝重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心基础医学院免疫学教研室重庆400016

目的:研究巨噬细胞Coronin-1与非Mtb源性细胞自噬的相关性及其可能信号通路。方法:分别构建过表达Coronin-1的p EGFP-C1-Coronin-1质粒和干扰Coronin-1表达的p Genesil-1-Coronin-1质粒,通过G418加压筛选其RAW264.7细胞稳定转染株,即Coronin-1高表达细胞株(***)和Coronin-1低表达细胞株(***)。将***组、RAW264.7组和***组细胞分别采取完全培养基(空白处理对照)、饥饿、雷帕霉素、环孢素A等因素处理后,通过RT-PCR法检测Beclin-1的基因转录水平,Western blot法检测Coronin-1、LC3BⅡ/LC3BⅠ及Beclin-1的蛋白表达水平。结果:Coronin-1过表达质粒和siRNA质粒均构建成功,其细胞稳定筛选株具有过表达或抑制表达Coronin-1特性。1空白处理三组细胞,Western blot法检测LC3BⅡ/LC3BⅠ的比值:***组>RAW264.7组>***组;Western blot法检测Beclin-1:***组>RAW264.7组>***组;RTPCR法检测Beclin-1转录水平,趋势同Western blot;2饥饿处理三组细胞,LC3BⅡ/LC3BⅠ的比值:***组

关键词：巨噬细胞 Coronin-1 自噬雷帕霉素环孢素A 结核分枝杆菌

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^(131)I-CD133mAb诱导CD133^+HepG2肝癌干细胞间质-上皮逆转分化

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第三军医大学学报 2015年第11期37卷 1086-1090页

作者：史燕龙李亚军康强强侯妍利刘锐李少林重庆医科大学基础医学院放射医学教研室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院肝胆外科重庆400016

目的研究131I-CD133mA b可诱导CD133+Hep G2肝癌干细胞间质-上皮逆转分化(mesenchymal-epithelial transition,MET)及可能分子机制。方法 1用免疫磁珠分选法分选Hep G2人肝癌细胞,采用流式细胞术检测分选前后CD133的表达率,体外成球和... 详细信息

目的研究131I-CD133mA b可诱导CD133+Hep G2肝癌干细胞间质-上皮逆转分化(mesenchymal-epithelial transition,MET)及可能分子机制。方法 1用免疫磁珠分选法分选Hep G2人肝癌细胞,采用流式细胞术检测分选前后CD133的表达率,体外成球和体内成瘤实验鉴定其干细胞特性。2氯胺T法制备131I标记CD133mA b并用γ免疫计数器检测标记率、放化纯度。用不同剂量(0、2.4、4.8、9.6 MBq)的131I-CD133mA b作用CD133+Hep G2细胞,用Transwell侵袭实验检测侵袭能力,Western blot检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的蛋白表达水平。结果流式细胞术显示分选前后CD133表达率分别为(7.21±0.05)%和(95.26±0.05)%。CD133+细胞体外成球和体内成瘤能力强于CD133-细胞。γ免疫计数器检测131I-CD133抗体标记率为86.97%,放化纯度为98.84%。Transwell侵袭实验示131I-CD133mA b各处理组(2.4、4.8、9.6 MBq)24 h细胞穿过Matrigel胶的细胞分别为(107.7±3.2)、(76.3±2.5)、(44.0±3.0)/视野,显著少于对照组(0 MBq,P<0.01)。Western blot结果显示,与对照组(0 MBq)相比,131I-CD133mA b(2.4、4.8、9.6 MBq)处理组N-cadherin和Vimentin的蛋白表达量降低(P<0.01),E-cadherin的蛋白表达量增加(P<0.01)。结论在体外131I-CD133mA b作用于人肝癌CD133+Hep G2细胞可诱导间质-上皮逆转分化。

关键词： CD133+HepG2 间质-上皮逆转分化 ^131 I-CD133mAb

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Tg2576转基因AD小鼠大脑白质内毛细血管的体视学研究

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中国组织化学与细胞化学杂志 2015年第1期23卷 15-22页

作者：张毅张蕾卢伟周春妮蒋林陈林木谭川雪王飞飞晁凤蕾唐勇重庆医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院干细胞与组织工程教研室重庆400016

目的定量研究Tg2576转基因AD小鼠大脑白质内毛细血管的改变。方法随机选取10月龄雄性Tg2576小鼠和同窝生相同月龄雄性野生型小鼠(Wild-type)各11只。应用Morris水迷宫检测其空间学习和记忆能力。行为学测试后在每组小鼠内各随机选取7只... 详细信息

目的定量研究Tg2576转基因AD小鼠大脑白质内毛细血管的改变。方法随机选取10月龄雄性Tg2576小鼠和同窝生相同月龄雄性野生型小鼠(Wild-type)各11只。应用Morris水迷宫检测其空间学习和记忆能力。行为学测试后在每组小鼠内各随机选取7只,应用冰冻切片技术、免疫组织化学技术及体视学方法定量研究大脑白质体积以及白质内毛细血管的总长度、总体积和总表面积。结果 10月龄Tg2576转基因AD小鼠的定位航行测试显示其逃避潜伏期显著长于同月龄野生型小鼠(P<0.05),而空间探索试验结果无显著差异。10月龄Tg2576转基因AD小鼠大脑白质内毛细血管的总长度、总体积和总表面积(6.90±0.82m,0.0648±0.0167mm3,61.77±13.80mm2)均较同月龄野生型小鼠(12.44±2.64m,0.0891±0.0145mm3,106.81±20.17mm2)显著降低(P<0.01,P<005,P<0.01),而两组小鼠的大脑白质体积无显著性差异。结论出现行为学改变的10月龄Tg2576转基因AD小鼠大脑白质内存在显著性毛细血管改变,这可能是造成白质损伤和早期学习记忆能力减退的重要原因,而白质内毛细血管可能作为早期预防和治疗AD的靶点。

关键词：转基因AD小鼠 Tg2576 大脑白质毛细血管体视学

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丙戊酸钠对APP/PS1双转基因小鼠脑内星形胶质细胞和神经营养因子的影响

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重庆医科大学学报 2015年第5期40卷 662-665页

作者：龙志敏赵蕾贺桂琼重庆医科大学神经科学中心重庆医科大学基础医学院人体解剖学教研室重庆400016

目的:观察丙戊酸钠(valproic acid sodium salt,VPA)对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠脑内星形胶质细胞、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)的影响。方法:取3月龄的APP/PS1双转基因小鼠AD模型小鼠24只,按随机数字表法平均分为治疗组和对照组。VPA治疗组小鼠腹腔注射VPA 30 mg/(kg·d),对照组小鼠腹腔注射等量生理盐水,采用免疫组化学法观察2组小鼠皮质和海马区星形胶质细胞数量的变化,Western blot检测2组小鼠皮质和海马BDNF和GDNF的表达水平。结果:与对照组比较,VPA治疗组小鼠皮质和海马区星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的阳性细胞数量均明显减少(t=5.476、8.793,P均=0.000),BDNF和GDNF表达水平均明显升高(t=4.303,P=0.001;t=2.376,P=0.032)。结论:VPA可抑制星形胶质细胞增生,提高神经营养因子的表达水平。

关键词：阿尔茨海默病丙戊酸钠星形胶质细胞神经营养因子

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MicroRNA-193b对K562细胞bcr/abl表达的影响

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第三军医大学学报 2015年第19期37卷 1955-1959页

作者：舒燕齐杰玉王灿蔚于淑静陶崑重庆医科大学基础医学院免疫学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的用Ad-pre-miRNA-193b重组腺病毒感染K562细胞,探讨miR-193b在细胞中过表达对bcr/abl表达的影响。方法将前期构建的Ad-pre-miRNA-193b重组腺病毒感染K562细胞后,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-193b的表达;qRT-PCR检测bcr/abl融合基因的表达;Western blot检测BCR/ABL融合蛋白的表达;CCK-8检测K562细胞的增殖情况,流式细胞术(FCM)检测K562细胞凋亡率。结果与对照比较,K562细胞感染Ad-pre-miRNA-193b重组腺病毒后,miR-193b表达明显升高;bcr/abl融合基因及BCR/ABL融合蛋白表达明显下调;K562细胞增殖能力明显降低(P<0.05),凋亡水平明显升高(P<0.05)。结论 miR-193b可下调bcr/abl表达,抑制K562细胞的生物学效应,过表达miR-193b能作为治疗CML的有效手段。

关键词： miR-193b K562细胞 bcr/abl

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抑制GM130表达对胃癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响

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第三军医大学学报 2015年第12期37卷 1217-1221页

作者：冯阳阳陈婕牟玲苏琳茜易永芬重庆医科大学基础医学院病理学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的分析GM130在不同分化人胃癌细胞系的差异表达,利用小干扰RNA技术来沉默GM130基因,研究其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法体外培养3株不同分化程度胃癌细胞系(高分化MKN-28、中分化SGC-7901、低分化MKN-45),Western blot和RT-PCR... 详细信息

目的分析GM130在不同分化人胃癌细胞系的差异表达,利用小干扰RNA技术来沉默GM130基因,研究其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法体外培养3株不同分化程度胃癌细胞系(高分化MKN-28、中分化SGC-7901、低分化MKN-45),Western blot和RT-PCR筛选出高表达的GM130细胞株MKN-45、SGC-7901,设计并化学合成、转染、筛选出针对GM130的小干扰RNA片段。通过MTT、Transwell、Matrigel侵袭实验,观测下调GM130后对胃癌细胞株的生物学行为影响,Western blot检测细胞中MMP-2、MMP-9蛋白的变化。结果 Western blot和RT-PCR检测结果显示,在MKN-45、SGC-7901细胞中GM130蛋白和mRNA水平呈现高表达水平。Western blot和qRT-PCR结果显示在低分化胃癌MKN-45细胞中,GM130-siRNA-519转染组GM130基因的表达水平显著抑制(P<0.05)。与对照组相比,抑制转染组细胞的增殖、迁移能力明显下降,穿膜细胞数明显减少,MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论抑制GM130基因的表达下调可显著降低胃癌细胞的增殖和体外侵袭转移能力。

关键词： GM130 RNA干扰胃肿瘤增殖侵袭迁移

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原花青素在对乙酰氨基酚诱导的急性肝损伤中的保护作用及机制

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重庆医科大学学报 2015年第3期40卷 358-361页

作者：陈欢马磊黄茹郭继光陈裕浩陈倩竹姜蓉张力王亚平李龙江重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆医科大学干细胞与组织工程研究室重庆400016 重庆医科大学临床学院重庆400016 重庆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室重庆医科大学干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的:研究原花青素在对乙酰氨基酚诱导的急性肝损伤中的保护作用及机制。方法:将昆明种小鼠随机分为6组,每组8只。分别为PBS正常对照组、对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)模型组、原花青素(100 mg/kg)药物对照组和原花青素药物预处理组... 详细信息

目的:研究原花青素在对乙酰氨基酚诱导的急性肝损伤中的保护作用及机制。方法:将昆明种小鼠随机分为6组,每组8只。分别为PBS正常对照组、对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)模型组、原花青素(100 mg/kg)药物对照组和原花青素药物预处理组(低剂量[10 mg/kg],中剂量[50 mg/kg]和高剂量组[100 mg/kg])。检测各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)和肝匀浆中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的变化,并采用HE染色观察各组病理形态的改变,Western blot法测定各组SOD蛋白的表达。结果:原花青素中、高剂量药物预处理组与APAP模型组比较,ALT(F=555.20,P=0.000)、AST(F=168.51,P=0.000)、MDA(F=155.15,P=0.000)明显降低,SOD(F=291.84,P=0.000)明显升高。病理观察发现,APAP模型组肝组织结构破坏,肝细胞水样变性,中央静脉淤血。原花青素中、高剂量药物预处理组则肝小叶结构清晰,细胞变性轻微,无明显淤血。Western blot结果发现,APAP模型组中SOD蛋白表达被抑制,而原花青素中、高剂量药物预处理组则表达增加。结论:原花青素在对乙酰氨基酚诱导的急性肝损伤中有保护作用,其机制与药物抗氧化应激作用有关。

关键词：原花青素对乙酰氨基酚药物性肝损伤

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盐霉素对低分化鼻咽癌干细胞放疗敏感性的影响

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中国老年学杂志 2015年第10期35卷 2601-2603页

作者：甘生敏罗超李娟刘双李亚军李少林彭志平重庆医科大学基础医学院放射医学与肿瘤学教研室重庆400016

目的探讨盐霉素对低分化鼻咽癌干细胞放疗敏感性的影响。方法将鼻咽癌干细胞悬液放入标有1~24的孔板中培养,其中1~12为对照组,13~24为实验组,其中向对照组加入200μl的PBS缓冲液,向实验组加入200μl终浓度为2μmol/L的盐霉素,适宜环境... 详细信息

目的探讨盐霉素对低分化鼻咽癌干细胞放疗敏感性的影响。方法将鼻咽癌干细胞悬液放入标有1~24的孔板中培养,其中1~12为对照组,13~24为实验组,其中向对照组加入200μl的PBS缓冲液,向实验组加入200μl终浓度为2μmol/L的盐霉素,适宜环境中培养12 h后,两组细胞均给予6 Gy单次照射,放疗结束后,接种至培养皿中常规培养2 w,GIEMSA染色,计算细胞存活分数(SF),采用RT-PCR及Western印迹法检测选取培养24 h后人鼻咽癌干细胞中Rad51、Ku70、Ku80基因及蛋白表达水平。结果实验组培养皿中细胞SF明显低于对照组(P<0.05)。实验组培养皿鼻咽癌干细胞Rad51、Ku70和Ku80 mRNA表达水平低于对照组(P<0.05)。实验组培养皿鼻咽癌干细胞Rad51、Ku70和Ku80蛋白表达水平明显低于对照组(P<0.05)。结论盐霉素能够明显抑制人低分化鼻咽癌干细胞中Rad51、Ku70和Ku80表达,降低细胞存活分数,提高放疗敏感性和临床疗效。

关键词：盐霉素鼻咽癌放疗敏感性

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miR-451对肺癌细胞的增殖抑制及其靶基因的初步鉴定

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第三军医大学学报 2015年第18期37卷 1823-1829页

作者：武天慧彭睿彭惠民罗勇军姚莉孙艳尹频文利张政重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物信息学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院实验教学中心重庆400016 第三军医大学高原军事医学系军事医学地理学教研室重庆400038

目的探讨微小RNA(microRNA,miRNA)对非小细胞肺癌细胞增殖的作用及调控机制。方法 Lipofectamine 2000转染已构建成功的miR-451真核表达载体至非小细胞肺癌细胞A549,通过MTT检测肺癌细胞增殖状况,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况... 详细信息

目的探讨微小RNA(microRNA,miRNA)对非小细胞肺癌细胞增殖的作用及调控机制。方法 Lipofectamine 2000转染已构建成功的miR-451真核表达载体至非小细胞肺癌细胞A549,通过MTT检测肺癌细胞增殖状况,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况,运用生物信息学技术对miR-451预测靶基因进行GO分析和KEGG信号途径分析,对炎症相关的预测靶基因PSMB8进行进一步的验证。构建含有PSMB8 3'UTR野生型和突变型质粒,通过双荧光素酶检测A549细胞PSMB8表达水平,Western blot检测PSMB8和NOS2的表达情况。结果 MTT结果显示过表达miR-451能显著抑制A549细胞增殖。流式细胞术检测发现miR-451组细胞阻滞在G2期,而细胞凋亡未见明显差异。GO分析发现miR-451预测靶基因涉及PSMB8、CAB39、YWHAZ等17个基因,PSMB8主要参与细胞代谢调控,细胞周期与细胞增殖;KEGG信号途径分析结果显示靶基因主要涉及microRNA在细胞周期、PI3KAKT、m TOR等信号通路。17个miR-451预测靶基因进行生物信息学研究发现PSMB8含有miR-451的结合位点,且在多个物种中呈高度保守。荧光素酶活性检测发现,过表达miR-451可抑制PSMB8荧光素酶活性表达。Western blot结果发现过表达miR-451的A549细胞PSMB8呈下调,而低表达miR-451的正常支气管上皮16HEB细胞PSMB8呈上调。Western blot和细胞荧光免疫化学检测发现炎症因子NOS2在肺癌中表达也降低。结论 miR-451可能通过靶向炎症相关基因PSMB8/NOS2调控非小细胞肺癌细胞增殖,并参与肺癌的发生与发展。

关键词：肺癌微小RNA 细胞增殖

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椎动脉发育异常合并胚胎型大脑后动脉与后循环缺血的相关性

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中国医学影像技术 2015年第3期31卷 331-335页

作者：陈莉吕发金罗天友蔡昌平李琦姚开情刘筱霜川北医学院基础医学院解剖教研室四川南充637000 重庆医科大学附属第一医院放射科重庆400016

目的探讨椎动脉发育异常伴胚胎型大脑后动脉(FTP)与后循环缺血(PCI)之间的关系。方法回顾性分析接受头颅容积CT数字减影血管成像(VCTDSA)检查的218例PCI患者(PCI组)和110名无前后循环缺血临床表现的健康志愿者(对照组)。于VR图上观察有... 详细信息

目的探讨椎动脉发育异常伴胚胎型大脑后动脉(FTP)与后循环缺血(PCI)之间的关系。方法回顾性分析接受头颅容积CT数字减影血管成像(VCTDSA)检查的218例PCI患者(PCI组)和110名无前后循环缺血临床表现的健康志愿者(对照组)。于VR图上观察有无孤立性椎动脉(IVH)、椎动脉发育不良(HVA)及FTP,并测量双侧椎动脉颅内段起始处管径。对椎动脉发育异常合并FTP与PCI进行相关性分析。结果 1对照组中,IVH占1.82%(2/110),HVA占17.27%(19/110),FTP占7.27%(8/110);其中椎动脉发育异常伴FTP占0.91%(1/110);2PCI组中,IVH占10.55%(23/218),HVA占49.08%(107/218);FTP占28.90%(63/218);椎动脉发育异常伴FTP占25.23%(55/218);3对照组与PCI组间椎动脉发育异常伴FTP的检出率差异有统计学意义(2χ=35.56,P<0.001);4椎动脉发育异常伴FTP与PCI具有相关性(r=0.31,P<0.001)。结论椎动脉发育异常伴FTP可能引起PCI。

关键词：后循环缺血椎动脉发育不良孤立性椎动脉胚胎型大脑后动脉体层摄影术 X线计算机

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