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重组人白血病抑制因子体外诱导HL-60细胞凋亡与bc-l2及p53表达的关系

中国临床药理学与治疗学 2004年第6期9卷 695-697页

作者：杜冰朱道银唐恩洁川北医学院分子生物学研究所组织胚胎学胚教研室重庆医科大学微生物学教研室重庆400016

目的 :探讨重组人白血病抑制因子 (rh LIF)诱导HL 6 0细胞凋亡的作用及其可能机制。方法 :不同剂量 (10～ 4 0 0 0U·ml-1)的rh LIF作用HL 6 0细胞 3d后 ,用流式细胞仪观察分析细胞周期变化并检测细胞凋亡率 ,用TUNEL法检测原位细... 详细信息

目的 :探讨重组人白血病抑制因子 (rh LIF)诱导HL 6 0细胞凋亡的作用及其可能机制。方法 :不同剂量 (10～ 4 0 0 0U·ml-1)的rh LIF作用HL 6 0细胞 3d后 ,用流式细胞仪观察分析细胞周期变化并检测细胞凋亡率 ,用TUNEL法检测原位细胞凋亡情况 ;分别用免疫组化法和原位杂交法检测rh LIF作用 2、4、6d后P5 3蛋白及p5 3mRNA、bcl 2mRNA表达水平的改变。结果 :rh LIF (10～ 4 0 0 0U·ml-1)作用d 3,细胞凋亡率较对照组显著增加 ,其中以10 0 0U·ml-1组的作用最强 ;rh LIF (80 0U·ml-1)作用 2～ 6d ,P5 3蛋白和p5 3mRNA表达也同步增高 ,而bcl 2mRNA表达显著降低 (P <0 .0 1)。结论 :rh LIF能诱导HL 6 0细胞凋亡 ,该作用与P5 3蛋白表达增加和bcl

关键词： rh-LIF 凋亡 HL-60细胞 bel-2 p53

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结核菌H37Ra在小鼠体内诱导的免疫应答及其保护力

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中国免疫学杂志 2009年第7期25卷 610-612,616页

作者：刘来成王淑玲范雄林付瑞玲吴扬卢贤瑜重庆医科大学附属儿童医院检验科重庆400014 重庆市临床检验中心重庆400014 华中科技大学同济医学院微生物学教研室武汉430030 重庆医科大学临床免疫学教研室重庆400016

目的:研究结核菌H37Ra免疫小鼠后产生的特异性免疫应答以及保护效果。方法:BALB/c小鼠随机分为H37Ra组、BCG组和生理盐水(NS)组,免疫8周后处死部分小鼠,取脾淋巴细胞经体外培养、PPD刺激后,MTT法检测淋巴细胞的刺激指数,ELISA法检测培... 详细信息

目的:研究结核菌H37Ra免疫小鼠后产生的特异性免疫应答以及保护效果。方法:BALB/c小鼠随机分为H37Ra组、BCG组和生理盐水(NS)组,免疫8周后处死部分小鼠,取脾淋巴细胞经体外培养、PPD刺激后,MTT法检测淋巴细胞的刺激指数,ELISA法检测培养上清液中IFN-γ和IL-4水平。另一部分免疫小鼠经腹腔感染结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuber-culosis,MTB)毒株H37Rv,4周后处死,测定小鼠脏器重量指数。取稀释的小鼠脾脏和肺脏匀浆接种于改良罗氏培养基,培养21天后计数脏器荷菌量。结果:H37Ra和BCG免疫小鼠脾淋巴细胞刺激指数、IFN-γ和IL-4水平均显著高于NS对照组。感染4周后H37Ra和BCG组小鼠脏器重量指数较NS对照组均显著降低。H37Ra组小鼠脾脏和肺脏荷菌量与NS对照组比较分别下降了1.228log10CFU和0.954log10CFU,差异有显著性(P<0.05),与BCG组之间差异均无显著性。结论:H37Ra免疫小鼠后可以诱导产生Th1型免疫应答,能够抵抗毒株H37Rv的攻击,且免疫效果与BCG相当。

关键词：结核分枝杆菌 H37Ra BCG 免疫应答免疫保护

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人胃源乳杆菌耐受性及抗幽门螺杆菌活性的鉴定

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中国人兽共患病学报 2013年第6期29卷 556-561页

作者：黄微微郭刚宋阳曾本华张卫军解庆华杨致邦重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016 第三军医大学医学检验系临床微生物学及免学疫教研室重庆400038 中国人民解放军总医院微生物科北京100853 第三军医大学基础部实验动物学教研室重庆400038

目的分离自人胃粘膜的乳杆菌抗幽门螺杆菌活性的筛选,为观察乳杆菌与幽门螺杆菌相互作用寻找合适的研究对象。方法从21例胃镜检查者的胃粘膜组织中分离鉴定出6株乳杆菌,检测其在pH 2.5～pH 4.5和含0.05%～0.2%胆盐条件下的耐受性,并结... 详细信息

目的分离自人胃粘膜的乳杆菌抗幽门螺杆菌活性的筛选,为观察乳杆菌与幽门螺杆菌相互作用寻找合适的研究对象。方法从21例胃镜检查者的胃粘膜组织中分离鉴定出6株乳杆菌,检测其在pH 2.5～pH 4.5和含0.05%～0.2%胆盐条件下的耐受性,并结合琼脂扩散牛津杯法检测其抑制幽门螺杆菌生长的能力及通过细胞试验检测其抗幽门螺杆菌粘附人胃上皮细胞的活性。结果 6株乳杆菌分离株中L3产酸量最大,耐酸和高浓度胆盐,其活菌和上清液在血平板中对幽门螺杆菌作用后形成的抑菌环直径均最大,对大肠杆菌的抑菌环大于金黄色葡萄球菌的,处理液相同的两两比较差异有统计学意义(P<0.05),同时能使幽门螺杆菌粘附人胃上皮细胞的粘附率最低。结论人胃粘膜来源的乳杆菌菌株L3具有较好的耐受性和抗幽门螺杆菌活性,研究结果为幽门螺杆菌感染的微生态治疗提供依据。

关键词：幽门螺杆菌乳杆菌胃粘膜耐受性抑制性

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幽门螺杆菌VacA基因型与胃疾病

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重庆医科大学学报 2005年第2期30卷 253-255页

作者：田一玲杨致邦余歌军重庆医科大学基础医学院微生物学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院卫生科重庆400016

目的:探讨幽门螺杆菌(H .pylori)VacA基因型在各种胃肠疾病中的分布及关系。方法:从胃十二指肠疾病患者胃粘膜标本中分离培养H .pylori,PCR测定VacA基因型。结果:10 8株H .pylori菌株,VacAs1a阳性为85株( 79% ) ,VacAs1b阳性2 2株( 2 0 ... 详细信息

目的:探讨幽门螺杆菌(H .pylori)VacA基因型在各种胃肠疾病中的分布及关系。方法:从胃十二指肠疾病患者胃粘膜标本中分离培养H .pylori,PCR测定VacA基因型。结果:10 8株H .pylori菌株,VacAs1a阳性为85株( 79% ) ,VacAs1b阳性2 2株( 2 0 % ) ,VacAm1阳性2 9株( 2 7% ) ,VacAm2阳性77株( 71% ) ,VacAs1a/m2阳性6 6株( 6 1.1% ) ,未发现s2型菌株。其中,慢性胃炎患者VacAs1a阳性率为6 5 .4 % ( 34/ 5 2 ) ,消化性溃疡患者VacAs1a阳性率为90 % ( 36 / 4 0 ) ,胃癌患者VacAs1a阳性率为94 % ( 15 / 16 )。结论:H .pylori菌株VacA基因型绝大多数为s1a/m2型,该型菌株存在于各种胃肠疾病中。

关键词：幽门螺杆菌细胞空泡毒素基因聚合酶链反应胃肠疾病

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糖原测定法诊断女性生殖道沙眼衣原体感染

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重庆医科大学学报 1998年第4期23卷 382-384页

作者：杨春朱道银重庆医科大学基础医学院微生物学教研室

用糖原测定法诊断生殖道沙眼衣原体(Ct)感染。用蒽酮法检测女性生殖道上皮细胞内糖原的含量,并与诊断沙眼衣原体感染的聚合酶链反应(PCR)法作比较。320例宫颈标本的检测结果与 PCR 比较,糖原测定法诊断 Ct感染的敏感性为84.8%,特异性为9... 详细信息

用糖原测定法诊断生殖道沙眼衣原体(Ct)感染。用蒽酮法检测女性生殖道上皮细胞内糖原的含量,并与诊断沙眼衣原体感染的聚合酶链反应(PCR)法作比较。320例宫颈标本的检测结果与 PCR 比较,糖原测定法诊断 Ct感染的敏感性为84.8%,特异性为96.5%.糖原测定法是一种简便、快速的诊断 Ct 感染的方法,适宜基层医疗单位采用。

关键词：糖原聚合酶链反应沙眼衣原体女性生殖系统

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医学微生物学理论课教学方法探讨

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2004年第4期6卷 337-338页

作者：田一玲杨致邦重庆医科大学基础医学院微生物学教研室

医学微生物学是一门重要的医学基础学科.针对学科知识量大,内容繁杂,传统教学中学生学习被动、依赖性强、积极性不高的问题,采用多元化教学方法,通过改变教学方式,激发学生的学习兴趣;利用CAI课件组织教学,强化课堂教学效果;注意知识更... 详细信息

医学微生物学是一门重要的医学基础学科.针对学科知识量大,内容繁杂,传统教学中学生学习被动、依赖性强、积极性不高的问题,采用多元化教学方法,通过改变教学方式,激发学生的学习兴趣;利用CAI课件组织教学,强化课堂教学效果;注意知识更新,加强与临床学科的联系,为培养适应现代化建设的高素质人才打下良好的基础.

关键词：医学微生物学理论课教学教学方法医学教育教学改革

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同种异型抗原激活并套式PCR法克隆人颗粒溶素Mr 15000与Mr 9000活性片段

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重庆医科大学学报 2005年第6期30卷 777-780页

作者：伊正君朱道银杨春何永林刘晔华重庆医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室重庆400016

目的:采用套式PCR克隆经同种异型抗原激活后的人细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表达的颗粒溶素(Granulysin, GLS)Mr 15000与Mr 9000活性片段的编码序列并进行序列测定与分析,为进一步表达纯化该活性片段和研究GLS的免疫杀伤机制奠定基础。办法... 详细信息

目的:采用套式PCR克隆经同种异型抗原激活后的人细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表达的颗粒溶素(Granulysin, GLS)Mr 15000与Mr 9000活性片段的编码序列并进行序列测定与分析,为进一步表达纯化该活性片段和研究GLS的免疫杀伤机制奠定基础。办法:抽提经过培养并激活的健康人CTL淋巴细胞总RNA,经逆转录后以套式PCR方法扩增出GLS的Mr 15000 与Mr 9000活性片段的编码序列,插入pET32a(+)载体,转化大肠杆菌TOP10,阳性克隆经PCR及酶切鉴定后进行测序分析。结果:成功扩增出了包含GLSMr 15000与Mr9000活性片段完整编码序列的cDNA,与预期大小相同,PCR、酶切及测序鉴定证明得到了读码框正确的pET32a-Mr 15000与pET32a-Mr 9000重组子。序列分析表明GLS基因编码产物在第119 位存在氨基酸多态性。结论:人天然颗粒溶素Mr 15000与Mr 9000活性片段编码序列能够通过以上方法获得和克隆并用于后续研究。

关键词：同种异型抗原颗粒溶素细胞毒性T淋巴细胞套式PCR

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加强微生物学与临床学科的教学联系

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2003年第2期5卷 116-118页

作者：杨春朱道银重庆医科大学基础医学院微生物学教研室

对第五版医学微生物学、传染病学、内科学、外科学、儿科学和妇产科学教材作调研,了解微生物学知识点在临床学科的分布,优化微生物学教学内容结构,并对微生物学的教学改革提出了相应对策.

关键词：微生物学临床学科教学医学传染病学内科学外科学改革

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CAI在医学微生物学教学中的应用

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2004年第1期6卷 1-2页

作者：陈全朱道银重庆医科大学基础医学院微生物学教研室

根据医学微生物学教学特点,对运用CAI课件的必要性、CAI课件的主要形式及CAI课件的优越性等方面进行了分析,以达到提高医学微生物学教学质量的目的.

关键词：教学中 CAI课件教学特点教学质量医学微生物学优越性必要性分析目的

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抗单链DNA单克隆抗体的制备及应用

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重庆医科大学学报 2002年第2期27卷 145-147页

作者：赵明才朱道银唐恩洁重庆医科大学基础医学院微生物学教研室重庆400016 川北医学院微生物学教研室南充637000

目的:制备特异性的抗单链单克隆抗体,为建立一种特异、敏感、简便的细胞凋亡检测方法奠定基础。DNA方法:根据烷化剂盐酸氮芥能特异性地修饰小牛胸腺链上的鸟嘌呤而暴露互补链上的胞嘧啶这一特性,将修饰后的DNA(G)(C)小牛胸腺连于甲基化... 详细信息

目的:制备特异性的抗单链单克隆抗体,为建立一种特异、敏感、简便的细胞凋亡检测方法奠定基础。DNA方法:根据烷化剂盐酸氮芥能特异性地修饰小牛胸腺链上的鸟嘌呤而暴露互补链上的胞嘧啶这一特性,将修饰后的DNA(G)(C)小牛胸腺连于甲基化的牛血清白蛋白上制备成完全抗原,免疫小鼠获得特异性的抗单链单克隆抗体,并对DNABALB/cDNA单抗的类别和特异性进行鉴定;用叠氮钠和抗肿瘤药物诱导了细胞的坏死和凋亡,利用所制备的抗单链单克VP-16HL60DNA隆抗体对其进行检测,并与形态学方法、凝胶电泳法和法进行了比较。TUNEL结果:所制备的抗单链单克隆抗体能与羊DNA抗小鼠发生特异性反应,且能与凋亡细胞特异性结合,而不结合坏死细胞。IgM结论:所制备的单抗为型,利用其能特异IgM地结合单链的特性,可用于检测细胞凋亡,简便、有效地区别细胞凋亡和坏死。

关键词：单克隆抗体凋亡单链DNA 氮芥

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