检索结果-内蒙古大学图书馆

免疫学杂志 2007年第3期23卷 311-315页

作者：汪光蓉张国元杨健胡为民唐恩洁朱道银川北医学院附属医院检验科四川南充637000 川北医学院分子生物研究所四川南充637007 重庆医科大学免疫微生物学教研室重庆400016

目的针对乙型肝炎病毒(HBV)prec/c区构建shRNA表达载体,观察shRNA表达载体对HBV抗原表达的抑制作用,为运用RNA干扰(RNAi)技术治疗乙型肝炎奠定基础。方法运用基因重组技术构建shRNA表达载体,经酶切,测序鉴定确认后,与1.5倍HBV真核表达质... 详细信息

目的针对乙型肝炎病毒(HBV)prec/c区构建shRNA表达载体,观察shRNA表达载体对HBV抗原表达的抑制作用,为运用RNA干扰(RNAi)技术治疗乙型肝炎奠定基础。方法运用基因重组技术构建shRNA表达载体,经酶切,测序鉴定确认后,与1.5倍HBV真核表达质粒pHBV1.5共转染Hela细胞,并于转染后72 h,用微粒子酶免疫实验(MEIA)分别检测细胞上清液和细胞裂解液中HBsAg和HBeAg表达水平;用半定量PCR检测prec/c mRNA的转录情况;分析shRNA表达载体对HBe/HBs抗原表达的抑制情况。结果成功构建了针对HBV prec/c区的shRNA表达载体psiHBV4、psiHBV5、psiHBV6及无关shRNA表达载体psiC;筛选到对HBeAg有明显的抑制作用的psiHBV4载体,同时其对HBsAg的表达有促进作用;psiHBV5和psiHBV6对HBeAg的抑制作用相对较弱,其对HBsAg的表达也有不同程度的促进作用;无关干扰对照psiC对HBV两种抗原的表达均无显著抑制作用。结论成功构建带U6启动子的shRNA表达载体并初步筛选到可显著抑制HBeAg表达的psiHBV4;本研究设计的3个靶向序列中,只有一个序列有大约70%的抑制率,而另外两个序列的抑制率相对较小,说明RNA干扰作用有较强的序列依赖性;无关干扰序列psiC几乎无干扰作用,说明siRNA产生的干扰作用具有高度的特异性。以上结果为应用RNAi治疗乙型肝炎奠定了一定的基础。

关键词：乙型肝炎病毒抗原 shRNA RNA干扰表达载体

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利用DNA免疫技术制备抗登革2型病毒NS2B蛋白多克隆抗体

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第三军医大学学报 2010年第4期32卷 327-330页

作者：刘丽梅陈宗涛高娜田衍平陈炜张俊磊王嘉丽安静第三军医大学西南医院病理学研究所重庆400038 第三军医大学基础医学部微生物学教研室、重庆市微生物工程实验室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室、重庆市神经科学研究所重庆400038 首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

目的构建登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。方法PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染... 详细信息

目的构建登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。方法PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染Vero细胞,检测目标蛋白的表达。用该表达质粒免疫BALB/c小鼠,制备抗NS2B抗血清。结果成功构建真核表达重组质粒pCAGGS-P7/NS2B,该重组质粒具有良好的免疫原性,免疫小鼠后所获的抗血清,抗体效价达1∶3200,Western blot和间接免疫荧光证实抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。结论通过DNA免疫所制备小鼠抗DV2-NS2B抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。

关键词：登革热病毒病毒非结构蛋白质类 NS2B 小鼠近交BALBC

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利用RNA干扰技术干扰HBeAg表达的研究

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现代免疫学 2008年第2期28卷 126-131页

作者：汪光蓉张国元杨健唐中唐恩洁朱道银川北医学院附属医院检验科风湿免疫研究所南充637000 川北医学院分子生物学研究所南充637000 重庆医科大学免疫微生物学教研室重庆400016

构建针对乙肝病毒HBeAg前c/c区(HBV prec/c)的短发夹环RNA(shRNA)质粒(psiHBV),观察其在体内外对HBV复制的抑制作用。构建RNA干扰真核表达载体psiHBV,与1.5倍HBV真核表达质粒pHBV1.5共转染HeLa细胞,用微粒子化学发光分析仪(MEIA)分别检... 详细信息

构建针对乙肝病毒HBeAg前c/c区(HBV prec/c)的短发夹环RNA(shRNA)质粒(psiHBV),观察其在体内外对HBV复制的抑制作用。构建RNA干扰真核表达载体psiHBV,与1.5倍HBV真核表达质粒pHBV1.5共转染HeLa细胞,用微粒子化学发光分析仪(MEIA)分别检测细胞上清和细胞裂解液中HBeAg表达水平;用半定量PCR检测prec/cmRNA的转录情况。随后用水动力学方法,向小鼠尾静脉注射pHBV1.5建立小鼠急性乙型肝炎病毒感染模型。采用此感染模型,将pHBV1.5与在体外实验筛选到有明显抑制作用的shRNA表达载体(psiHBV4)共注射,注射后第6天用同样方法检测其干扰效果。结果显示,成功构建了针对HBV前c/c区的shRNA表达载体psiHBV4、psiHBV5、psiHBV6及无关shRNA表达载体psiC,筛选到在体外对HBeAg有明显的抑制作用的psiHBV4载体;注射pHBV1.5的动物血清高表达HBsAg和HBeAg。而共注射干扰性psiHBV4明显抑制了HBeAg的表达,与单纯感染组相比有显著差异,RT-PCR显示肝内HBV C mRNA水平亦明显降低。上述结果表明,siRNA能特异抑制HBV的复制和表达,对乙型肝炎的治疗有潜在应用前景。

关键词：乙型肝炎 shRNA RNA干扰动物模型

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融合蛋白质在微生物疫苗制备中的研究进展

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国外医学（流行病学．传染病学分册） 2005年第6期32卷 371-373页

作者：邓颖杨致邦重庆医科大学基础医学院微生物学与免疫学实验室 400016

融合蛋白质是利用重组DNA技术将两个或两个以上不同基因的编码序列克隆在一起,表达出一个单一的多肽。这种新型的融合蛋白质在蛋白质工程中,特别是在疫苗的研究和开发上发挥了重要的作用。本文就融合蛋白质在微生物疫苗制备中的研究进... 详细信息

融合蛋白质是利用重组DNA技术将两个或两个以上不同基因的编码序列克隆在一起,表达出一个单一的多肽。这种新型的融合蛋白质在蛋白质工程中,特别是在疫苗的研究和开发上发挥了重要的作用。本文就融合蛋白质在微生物疫苗制备中的研究进展进行综述。

关键词：重组融合蛋白质类疫苗微生物

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用PCR-SSCP检测母婴标本中沙眼衣原体的研究

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中国优生与遗传杂志 1998年第1期6卷 34-35,28页

作者：朱道银简丽夏云杨晓燕重庆医科大学基础医学院微生物学教研室 630040 重庆医科大学第一附属医院产科学教研室 630042

用配对母胎标本探讨沙眼衣原体的垂直传播。材料与方法;用细胞培养、聚合酶链反应(PCR)和单链构象多态性(SSCP)检查配对母胎标本中的沙眼衣原体。结果:30份宫颈标本中8份沙眼衣原体培养和质粒 PCR 均为阳性:9名宫颈标本质粒 PCR 阳性的... 详细信息

用配对母胎标本探讨沙眼衣原体的垂直传播。材料与方法;用细胞培养、聚合酶链反应(PCR)和单链构象多态性(SSCP)检查配对母胎标本中的沙眼衣原体。结果:30份宫颈标本中8份沙眼衣原体培养和质粒 PCR 均为阳性:9名宫颈标本质粒 PCR 阳性的孕妇中有4份羊水标本培养和 PCR均为阳性:1例新生儿睑结膜和配对羊水标本表现相同的 SSCP 图谱。结论:孕妇的沙眼衣原体感染易导致胎儿感染;1例新生儿子宫内和出生后感染的沙眼衣原体为同一菌株。

关键词：沙眼衣原体感染生殖道感染 PCR-SSCP 妊娠

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慢性乙型肝炎患者血清细胞因子检测的临床意义

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大理学院学报（综合版） 2008年第4期7卷 9-10,14页

作者：吴利先王国富罗涛大理学院基础医学院微生物学教研室云南大理671000 重庆医科大学附属第一医院重庆400016

目的:探讨慢性乙型肝炎患者血清转化因子(αTGF-)α和白细胞介素-8(IL-8)水平的变化。方法:应用放免法对44例慢性乙型肝炎患者进行了血清TGF-α和IL-8水平检测,并与34名正常人作比较。结果:慢性乙型肝炎组患者血清TGF-α和IL-8水平均显... 详细信息

目的:探讨慢性乙型肝炎患者血清转化因子(αTGF-)α和白细胞介素-8(IL-8)水平的变化。方法:应用放免法对44例慢性乙型肝炎患者进行了血清TGF-α和IL-8水平检测,并与34名正常人作比较。结果:慢性乙型肝炎组患者血清TGF-α和IL-8水平均显著地高于正常人组(P<0.01)。结论:检测慢性乙型肝炎患者血清TGF-α和IL-8水平对疾病的预后估计具有重要临床意义。

关键词：慢性乙型肝炎细胞因子转化生长因子-α 白细胞介素-8

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2007-2008年北京地区CA16VP1区系统进化分析

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第三军医大学学报 2009年第23期31卷 2342-2346页

作者：王娟罗珍范东瀛高娜朱俊萍安静首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069 首都医科大学附属北京儿童医院皮肤科北京100045 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的了解2007-2008年北京地区柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)流行情况及其种系进化规律和基因分型。方法收集北京地区2007-2008年133例手足口病病例临床标本,从中筛选CA16毒株,扩增部分毒株VP1区并进行序列测定和分析。结... 详细信息

目的了解2007-2008年北京地区柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)流行情况及其种系进化规律和基因分型。方法收集北京地区2007-2008年133例手足口病病例临床标本,从中筛选CA16毒株,扩增部分毒株VP1区并进行序列测定和分析。结果共筛选得到39例45份CA16阳性标本,测定其中16株病毒的VP1区核苷酸序列,其同源性为91.43%～98.65%,氨基酸同源性为97.98%～100%。该16株病毒与GenBank中选取的24株CA16参考株的核苷酸同源性为78.13%～98.65%,氨基酸同源性为89.9%～100%。16株北京分离株中的9株与近年多数中国大陆分离株形成进化树上亲缘关系较近的一群,其余7株与我国台湾及周边国家的一系列分离株亲缘关系较近。结论CA16为北京地区手足口病的主要致病原之一,本地区毒株同源性较高,同GenBank中24株CA16参比毒株序列进行系统进化分析显示其属于B基因群,16株北京分离株在系统进化树上有分别归属于两支的趋势。

关键词：柯萨奇病毒A组16型手足口病系统进化分析

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幽门螺杆菌感染慢性胃炎与红细胞免疫功能相关性研究

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大理学院学报（综合版） 2006年第12期5卷 7-9页

作者：吴利先王国富孙小平大理学院基础医学院微生物学教研室云南大理671000 重庆医科大学附属第一医院重庆400016

目的:探讨幽门螺杆菌感染慢性胃炎患者对红细胞免疫功能的影响。方法:采用红细胞C3b受体花环(RBC-C3bRR)百分率试验和免疫复合物花环(RBC-ICR)百分率试验,检测86例Hp阳性慢性胃炎患者、42例Hp阴性慢性胃炎患者以及38例健康志愿者红细胞... 详细信息

目的:探讨幽门螺杆菌感染慢性胃炎患者对红细胞免疫功能的影响。方法:采用红细胞C3b受体花环(RBC-C3bRR)百分率试验和免疫复合物花环(RBC-ICR)百分率试验,检测86例Hp阳性慢性胃炎患者、42例Hp阴性慢性胃炎患者以及38例健康志愿者红细胞免疫功能情况。结果:慢性胃炎组RBC-C3bRR％低于正常组(P<0．01);RBC-ICR％高于正常对照组(P<0．05);Hp阳性慢性胃炎组RBC-C33bRR明显低于Hp阴性组(P<0．05),RBC-ICR明显高于Hp阴性组(P<0．05)。结论:慢性胃炎患者红细胞免疫功能低下与Hp感染存在相关性。

关键词：幽门螺杆菌感染慢性胃炎红细胞免疫

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重庆地区产妇乳汁分泌型IgA含量的分析

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国际检验医学杂志 2006年第6期27卷 495-496,499页

作者：谢建渝陈瀑陈凤娴刘菊莲杨致邦蒋仁举重庆市妇幼保健院 400013 重庆医科大学附属第一医院 400016 重庆医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室 400016

目的研究不同状态的产妇乳汁中分泌型IgA(SIgA)含量,为预防新生儿感染提供实验依据。方法ELISA(双抗体夹心法)定量检测乳汁中SIgA含量。结果在42例产妇中,初乳中SIgA含量最低值为0.86,最高值为8.01;成熟乳中SIgA含量最低值为0.23,最高值... 详细信息

目的研究不同状态的产妇乳汁中分泌型IgA(SIgA)含量,为预防新生儿感染提供实验依据。方法ELISA(双抗体夹心法)定量检测乳汁中SIgA含量。结果在42例产妇中,初乳中SIgA含量最低值为0.86,最高值为8.01;成熟乳中SIgA含量最低值为0.23,最高值为7.23。初乳和成熟乳中SIgA含量比较差异有统计学意义(P<0.05);33例不同营养状况产妇初乳中SIgA含量差异有统计学意义(P<0.05);42例产妇按农村产妇和城市产妇、高龄产妇和年轻产妇、足月产妇与早产产妇、顺产与剖宫产等分析,初乳中SIgA含量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论新生儿期以母乳喂养为佳,影响初乳中SIgA含量的因素主要是营养状况,与产妇的年龄、妊期、分娩方式无关。

关键词：乳,人免疫球蛋白A,分泌产妇重庆

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从剖宫者产羊水和宫颈标本中检出沙眼衣原体的研究

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重庆医科大学学报 2000年第2期25卷 142-143,161页

作者：杨春邝富国朱道银重庆医科大学基础医学院微生物学教研室 400016 重庆市艾滋病性病防治办公室 400015

目的 :本文通过检查配对母胎标本中的沙眼衣原体 (Ct) ,拟探讨Ct垂直传播的机制。方法 :应用细胞培养 ,聚合酶链反应 (PCR)检查配对母胎标本 (宫颈、羊水、新生儿睑结膜 )中的沙眼衣原体 (Ct)。结果 :10 2例剖宫产配对母胎标本中 ,宫颈... 详细信息

目的 :本文通过检查配对母胎标本中的沙眼衣原体 (Ct) ,拟探讨Ct垂直传播的机制。方法 :应用细胞培养 ,聚合酶链反应 (PCR)检查配对母胎标本 (宫颈、羊水、新生儿睑结膜 )中的沙眼衣原体 (Ct)。结果 :10 2例剖宫产配对母胎标本中 ,宫颈、羊水、新生儿睑结膜均为阳性有 2 4例。宫颈阴性、羊水、新生儿睑结膜阳性共 6例。宫颈阳性、羊水、新生儿睑结膜阴性共4例。宫颈、羊水、新生儿睑结膜均为阴性有 6 8例。孕妇的Ct感染率 2 7.5 % (2 8/ 10 2 ) ,胎儿的Ct感染率为 2 9.4% (30 / 10 2 )。结论 :Ct宫颈感染与羊水细胞感染有非常显著的相关性 (P <0 .0 0 5 )。孕妇的Ct感染可导致胎儿感染。

关键词：沙眼衣原体 PCR 羊水剖腹产宫内感染

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