检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学教育探索杂志 2013年第2期12卷 127-130页

作者：易发平卜友泉刘革力张潞渝王应雄宋方洲重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 400016 重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心 400016

为了加强科研平台研究生的管理，保证培养质量，重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心通过设立虚拟党支部，建立健全日常管理制度、经费管理制度和学术管理制度等措施，在研究生思想道德教育、规范日常作息行为、维护研究生利益和保证培... 详细信息

为了加强科研平台研究生的管理，保证培养质量，重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心通过设立虚拟党支部，建立健全日常管理制度、经费管理制度和学术管理制度等措施，在研究生思想道德教育、规范日常作息行为、维护研究生利益和保证培养质量等方面进行探索，取得较好的成效。

关键词：科研平台研究生管理思想道德教育制度建设

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烯醇化酶ENO1抑制非小细胞肺癌细胞上皮间质转换

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中国肺癌杂志 2013年第5期16卷 221-226页

作者：周鑫张莹韩廼珺郭素萍肖汀程书钧高燕宁张开泰北京协和医学院中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室癌发生及预防分子机理北京市重点实验室北京100021 重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室医学分子肿瘤研究中心重庆400016

背景与目的已有的研究表明:上皮间质转换(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是非小细胞肺癌发展和转移的一个重要过程,受到众多信号通路的精细调节。经典的丝裂原活化激酶(mitogen activatedprotein kinase,MAPK)信号通路是转化... 详细信息

背景与目的已有的研究表明:上皮间质转换(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是非小细胞肺癌发展和转移的一个重要过程,受到众多信号通路的精细调节。经典的丝裂原活化激酶(mitogen activatedprotein kinase,MAPK)信号通路是转化生长因子(transforming growth factor β,TGFβ)诱导EMT发生的必要条件。本研究以非小细胞肺癌细胞系A549为模型,对烯醇化酶(enolase-1,ENO1)影响细胞EMT过程的分子机制进行了初步研究。方法建立稳定过表达ENO1的A549细胞,用划痕实验检测细胞运动能力;用Western blot技术检测EMT过程相关分子标志物的变化;通过TGFβ-1诱导实验检测ENO1过表达对EMT的影响;通过上皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)诱导实验和Western blot检测ENO1过表达引起胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated protein kinase,ERK)磷酸化的改变。结果 ENO1过表达抑制A549细胞侧向迁移能力。ENO1过表达还会引起上皮样标志物E-cad-herin表达上调,同时间质样标志物N-cadherin和Vimentin表达下降;TGFβ-1诱导实验也证实了ENO1对EMT进程的抑制作用。EGF活化实验显示ENO1对ERK磷酸化的抑制作用。结论在非小细胞肺癌细胞中,ENO1具有抑制细胞EMT的作用,且很可能是通过抑制MAPK通路来实现。

关键词： ENO1 肺肿瘤上皮间质转换 ERK1 2

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氯化钴对甲状腺乳头状癌NPA细胞上皮间质转化的影响及其机制

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第三军医大学学报 2012年第2期34卷 150-153页

作者：贾朝莉龙方懿刘智敏杨俊艳刘小花董超然王妮重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的研究氯化钴(CoCl2)诱导的低氧对甲状腺乳头状癌NPA细胞上皮间质转化的影响,初步探讨HIF-1α在其中的机制。方法 MTT检测CoCl2(50、100、150、200、250μmol/L)对细胞活力的影响,倒置显微镜观察低氧(150μmol/L的CoCl2分别作用0、12... 详细信息

目的研究氯化钴(CoCl2)诱导的低氧对甲状腺乳头状癌NPA细胞上皮间质转化的影响,初步探讨HIF-1α在其中的机制。方法 MTT检测CoCl2(50、100、150、200、250μmol/L)对细胞活力的影响,倒置显微镜观察低氧(150μmol/L的CoCl2分别作用0、12、24、48 h)对细胞形态的影响,Western blot检测低氧(150μmol/L的CoCl2分别作用0、3、6、12、24 h)对HIF-1α、E-cadherin和Vimentin表达的影响,Transwell法检测低氧(150μmol/L的CoCl2分别作用0、6 h)对细胞侵袭、转移的影响,用免疫荧光对HIF-1α蛋白进行亚细胞定位。结果低氧模拟剂CoCl2可抑制NPA细胞活力。随着CoCl2低氧处理时间的延长,NPA细胞逐渐获得间质细胞的形态特征,HIF-1α、Vimentin表达在0～6 h逐渐增加,随后开始下降,E-cadherin表达持续降低,低氧0 h与6 h相比各蛋白表达均具有统计学差异(P<0.01)。低氧组侵袭、转移细胞数目较对照组明显增加(P<0.01),同时低氧组细胞HIF-1α发生核转位。结论 CoCl2模拟化学性低氧可促进NPA细胞上皮间质转化及侵袭、转移,其分子机制可能涉及HIF-1α介导的信号通路对E-cadherin、Vimentin基因表达的调控。

关键词：低氧诱导因子-1α 上皮间质转化甲状腺乳头状癌

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中国生物制品学杂志 2012年第12期25卷 1671-1675,1679页

作者：龙方懿杨俊艳刘智敏贾朝莉刘小花董超然王旎重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研究室重庆400016 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的探讨低氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和上皮间质转化(Epithelial-mesenchymaltransition,EMT)相关蛋白在甲状腺滤泡状癌(Follicular thyroid carcinoma,FTC)组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测42份FTC组织中HIF-1α、锌指转录因子(Snail)、波形蛋白(Vimentin)和钙黏蛋白E(E-cadherin)的表达;MTT法检测不同浓度CoCl2对FTC WRO细胞增殖活力的影响;RT-PCR法检测不同浓度CoCl2对WRO细胞HIF-1α基因mRNA转录水平的影响;免疫荧光法观察150μmol/L CoCl2处理24 h的WRO细胞中HIF-1α蛋白的核定位;Western blot检测150μmol/LCoCl2处理不同时间对WRO细胞中HIF-1α、Snail、Vimentin和E-cadherin蛋白表达的影响;Transwell小室试验检测150μmol/LCoCl2处理24 h对WRO细胞中侵袭及迁移能力的影响。结果在42份FTC组织中,HIF-1α、Snail、Vimentin和E-cadherin蛋白的表达与多项临床指标相关,且4者表达显著相关(P<0.05);CoCl2可抑制WRO细胞的增殖活力;随着CoCl2浓度的增高,WRO细胞中HIF-1α基因mRNA的转录水平先增高然后趋于平稳;150μmol/L CoCl2处理24 h的WRO细胞内HIF-1α蛋白发生核转位;CoCl2处理的WRO细胞中随着HIF-1α蛋白表达的增多,Snail和Vimentin蛋白的表达逐渐增多,E-cadherin蛋白的表达逐渐减少(P<0.05);150μmol/L CoCl2处理24 h后,侵袭、迁移细胞数目较对照组明显增加。结论 HIF-1α能够通过上调Snail与Vimentin的表达,下调E-cadherin的表达,进而促进FTC EMT的发生。

关键词：低氧诱导因子-1α 甲状腺滤泡状癌上皮间质转化

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CDCA在C57BL/6小鼠中上调肝脏成纤维细胞生长因子21表达及其效应

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第三军医大学学报 2012年第18期34卷 1831-1834页

作者：刘小花王永超李良鹏彭家和江渝刘智敏重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 第三军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的研究法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR)的激活对C57BL/6小鼠肝脏中纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21,FGF21)基因表达的影响。方法将18只3～4周龄C57BL/6小鼠随机分为3组,分别使用不同浓度鹅脱氧胆酸(chenodeoxy cholic acid,CDCA,0、10 mg/kg和50 mg/kg)给小鼠灌胃7 d,处死后分别提取小鼠肝脏总RNA和总蛋白,采用RT-PCR法和Western blot法检测各组小鼠FGF21RNA和蛋白表达水平的变化;同时用酶法测定检测小鼠血甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)及血糖(GLU)变化。结果 C57BL/6小鼠肝脏中FGF21 RNA和蛋白的表达水平呈CDCA剂量依赖型增高;小鼠血脂及血糖测定结果显示:TG,TC和血糖随CDCA浓度的升高而下降。结论 CDCA可上调C57BL/6小鼠肝脏中FGF21的表达并导致血TG、TC及GLU下降。

关键词：法尼酯X受体成纤维细胞生长因子21 鹅脱氧胆酸血脂血糖

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低氧对分化型甲状腺癌KAT和WRO细胞上皮间质转化的影响

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中国生物制品学杂志 2012年第7期25卷 837-840页

作者：贾朝莉刘智敏曾得康杨俊艳龙方懿刘小花重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重钢总医院老年科重庆400084

目的探讨低氧对分化型甲状腺癌KAT、WRO细胞上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法以氯化钴(CoCl2)模拟细胞低氧微环境,采用MTT法检测细胞的增殖活力,筛选CoCl2的最适作用浓度;倒置显微镜观察低氧下细胞的... 详细信息

目的探讨低氧对分化型甲状腺癌KAT、WRO细胞上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法以氯化钴(CoCl2)模拟细胞低氧微环境,采用MTT法检测细胞的增殖活力,筛选CoCl2的最适作用浓度;倒置显微镜观察低氧下细胞的形态特征;Western blot检测低氧0、3、6、12 h后KAT和WRO细胞中HIF-1a蛋白的表达及低氧6 h后KAT和WRO细胞上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)和间质细胞波形蛋白(Vimentin)的表达。结果 CoCl2最适作用浓度为150μmol/L,低氧使KAT和WRO细胞逐渐获得了间质细胞的形态特征。低氧6 h后,KAT和WRO细胞中HIF-1a蛋白的表达达峰值,与低氧0 h组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。低氧组KAT细胞中E-cadherin蛋白的表达水平明显低于正常组(P<0.01),Vimentin蛋白的表达水平与正常组相比,差异无统计学意义(P>0.05);低氧组WRO细胞中E-cadherin蛋白的表达水平明显低于正常组(P<0.01),Vimentin蛋白的表达水平明显高于正常组(P<0.01)。结论 HIF-1a可能通过下调E-cadherin、上调Vimentin而促进分化型甲状腺癌细胞KAT和WRO发生上皮间质转化,使其获得侵袭、转移潜能。

关键词：甲状腺癌分化型低氧诱导因子上皮间质转化 E-钙黏蛋白波形蛋白

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低氧诱导因子-1α、锌指转录抑制因子Twist和钙黏蛋白E在人乳腺癌组织中的表达及其意义

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中国生物制品学杂志 2012年第7期25卷 884-887页

作者：龙方懿印国兵刘智敏吴婷婷贾朝莉杨俊艳刘小花重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学附属第二医院普外科重庆400016

目的探讨低氧诱导因子-1α(Hgpoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、锌指转录抑制因子Twist和钙黏蛋白E(E-cadherin)在人乳腺癌中的表达及其意义。方法采用免疫组化SP法检测术前未接受过放疗、化疗及激素治疗的69名患者乳腺癌组织标本... 详细信息

目的探讨低氧诱导因子-1α(Hgpoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、锌指转录抑制因子Twist和钙黏蛋白E(E-cadherin)在人乳腺癌中的表达及其意义。方法采用免疫组化SP法检测术前未接受过放疗、化疗及激素治疗的69名患者乳腺癌组织标本中HIF-1α、Twist和E-cadherin的表达,并分析三者表达的相关性。结果在69份乳腺癌组织标本中,HIF-1α、Twist和E-cadherin的阳性表达率分别为71.01%(49/69)、57.97%(40/69)和50.72%(35/69);HIF-1α、Twist和E-cadherin的阳性表达率与TNM分期和腋淋巴结转移有关(P<0.05或P<0.01),与患者年龄、肿瘤大小和病理类型无关(P>0.05)。HIF-1α与Twist的表达呈显著正相关(r=0.286,P<0.05),Twist与E-cadherin的表达呈显著负相关(r=-0.371,P<0.01)。结论 HIF-1α、Twist和E-cadherin在乳腺癌中的表达情况可作为监测乳腺癌发展的指标。

关键词：乳腺癌低氧诱导因子 Twist E-cadherin

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低氧诱导金属硫蛋白对甲状腺乳头状癌上皮间质转化的影响

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第三军医大学学报 2011年第7期33卷 671-674页

作者：贾朝莉吴婷婷龙方懿刘智敏重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的研究低氧诱导金属硫蛋白(metallothioneins,MTs)对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法以人甲状腺乳头状癌NPA细胞为研究模型,将其分为正常氧组(21%O2)、低氧组(5%O2)和MTs-siRNA干扰低氧组,Western blot、RT-PCR方法检测各组细胞MTs、上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)和间质细胞波形蛋白(Vimentin)的表达,Transwell/Matrigel方法检测各组细胞侵袭转移细胞数。结果低氧可诱导NPA细胞表达MTs,并伴随有EMT标志性分子E-cadherin表达的下调和Vimentin表达的升高,侵袭细胞数由正常氧组15.6±2.8增加到40.3±5.1,迁移细胞数由25.1±5.6增加到48.7±7.6,均有统计学差异(P<0.01);MTs靶向干扰可有效抑制低氧诱导的MTs蛋白表达,同时E-cadherin表达回升,Vimentin表达下降,侵袭细胞数仅增加到25.7±4.2,迁移细胞数仅增加到35.5±5.4,与低氧组比较均有统计学差异(P<0.05)。结论低氧所诱导表达的MTs对人PTC细胞发生EMT有促进作用,MTs靶向干扰可使EMT受到部分抑制。

关键词：金属硫蛋白上皮间质转化低氧甲状腺乳头状癌

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小鼠骨髓来源未成熟树突状细胞蛋白表达的分析

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第三军医大学学报 2011年第14期33卷 1437-1440页

作者：易发平焦庆昉符少月卜友泉刘革力宋方洲重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的利用双向电泳和质谱技术对小鼠骨髓来源未成熟树突状细胞(dendritic cells,DC)表达的蛋白质进行分析。方法 IL-4和GM-CSF诱导未成熟DC的分化,提取细胞总蛋白,定量。双向凝胶电泳分离蛋白质组分,胶体银染显色,PDQuest进行图像分析后... 详细信息

目的利用双向电泳和质谱技术对小鼠骨髓来源未成熟树突状细胞(dendritic cells,DC)表达的蛋白质进行分析。方法 IL-4和GM-CSF诱导未成熟DC的分化,提取细胞总蛋白,定量。双向凝胶电泳分离蛋白质组分,胶体银染显色,PDQuest进行图像分析后选取蛋白点,胶内酶解后MALDI-TOF MS进行肽指纹图谱鉴定,MS-Fit分析质谱数据。结果细胞生长情况和表面标志物检测表明获得了高纯度的未成熟DC。图像分析结果显示,DC中检测到了(660±10)个蛋白点,主要分布在相对分子质量28×103～100×103,等电点5.0～9.0之间。鉴定了87个蛋白点,其中与未成熟DC免疫调节功能相关的蛋白质有40个(45.98%);与大分子代谢相关的有37个(42.53%)。结论成功分离到了约660个小鼠骨髓来源未成熟DC表达的蛋白质,鉴定出了其中87个蛋白。

关键词：树突状细胞蛋白质组双向电泳肽指纹质谱

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MicroRNA-29b重组慢病毒表达载体的构建及其抑制胃癌细胞系的迁移和增殖

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基础医学与临床 2011年第6期31卷 609-614页

作者：蒋崇亮汪晓艳龚佳男王芳余佳冯涛重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心生物化学与分子生物学教研室重庆400016 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的构建has-miR-29b重组慢病毒的表达载体,并观察其对胃癌细胞系迁移和增殖能力的影响。方法将PCR扩增的miR-29b前体序列和pMIR载体经双酶切后连接产生pMIR-miR-29b慢病毒表达载体。pMIR-miR-29b、Packaging Plasmid(s)和pVSV-G质粒共... 详细信息

目的构建has-miR-29b重组慢病毒的表达载体,并观察其对胃癌细胞系迁移和增殖能力的影响。方法将PCR扩增的miR-29b前体序列和pMIR载体经双酶切后连接产生pMIR-miR-29b慢病毒表达载体。pMIR-miR-29b、Packaging Plasmid(s)和pVSV-G质粒共转染包装细胞系293TN,包装产生慢病毒。使用收获的慢病毒颗粒感染胃癌细胞系HGC-27,72 h后利用real-time PCR检测miR-29b在HGC-27内的表达水平,Western blot检测其靶基因MCL-1的表达。划痕实验和细胞增殖实验分别观察在HGC-27细胞中过表达miR-29b后细胞迁移能力及增殖能力的变化。结果成功构建了miR-29b重组慢病毒的表达载体,感染胃癌细胞HGC-27后,能够成功过表达miR-29b。在HGC-27细胞中过表达miR-29b,其靶基因MCL-1的表达明显被抑制,并且Lenti-29b组与对照组Untreat组和Lenti-vector组相比,Lenti-29b组的迁移能力显著降低(P<0.01);Lenti-29b组与Lenti-vector组相比,Lenti-29b组在48、72及96 h 3个时间点的增殖能力均显著下降(P<0.01)。结论成功获得过表达miR-29b的重组慢病毒颗粒,miR-29b能够抑制其靶基因MCL-1的表达,并对HGC-27细胞的迁移和增殖有明显的抑制作用。

关键词： miR-29b 胃癌细胞慢病毒细胞迁移细胞增殖

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